呼吸道标本采集
痰和呼吸道分泌物标本采集规范
痰和呼吸道分泌物标本采集规范一、微生物学【概述】痰标本采集方便，无创伤性，临床应用广泛，对病原学诊断具有重要价值。
痰标本的正确采集、处理是临床细菌检验成功的关键，标本采集与处理的规范化是准确、及时向临床提供重要的感染信息的基础。
目前咳痰标本仍是最常用、最简单的采样方法，必须指导或辅助患者深咳痰，及时送检，并通过镜检筛选合格标本。
损伤性采样技术仅在选择病例(抗生素治疗反应不佳；可疑特殊病原体感染，如寄生虫、痰菌阴性肺结核、混合感染或二重感染等)使用。
【操作方法】1、咳痰标本采集要求患者在清晨用药前留取，因为晨痰量多，且含菌量也多。
留取前刷牙，用清水漱口3次，以除去口腔内大部分杂菌，之后用力咳痰。
咳痰较困难者可用3％～5％氯化钠溶液雾化蒸气吸入进行导痰；对咳嗽乏力或昏迷患者，可用普通吸痰管经鼻腔或口腔吸引下呼吸道分泌物；对不能咳痰的婴幼儿或病重患者，如须采集痰标本做结核杆菌培养，可插胃管抽吸胃液标本送检，也可留取12～24h痰液，经漂浮浓集后检查，以提高结核杆菌检出率。
若做细菌或真菌培养，痰液必须盛于无菌容器内送检。
观察痰量应留取24h痰液，必要时在容器内加入少许防腐剂。
2、咽拭子采样上呼吸道感染可通过咽拭子获取标本。
标本采集前数小时内不得用消毒药物漱口或涂抹病灶局部。
用咽拭子采集标本时应小心、认真、准确，避免触及舌、口腔黏膜和唾液，以防污染。
如咽拭子标本发现致病菌，如肺炎链球菌、流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等，且数量较多时，提示有该菌所致感染存在。
3、纤维支气管镜抽吸采样以利多卡因做咽喉部局部麻醉后，插入纤维支气管镜(纤支镜)，达到肺炎病灶引流支气管内，纤支镜吸引口依次连接标本采集瓶或试管及负压吸引装置，用负压将下呼吸道分泌物经纤支镜吸人标本采集瓶内送检。
气管切开或气管插管患者也可用普通无菌吸痰管直接经人工气道插至大约叶支气管水平，接负压装置将痰液经吸痰管吸入标本采集瓶内。
纤支镜直视下可准确采集病灶部位的分泌物，但插入时纤支镜顶端和内孔常受咽喉部正常菌群污染，所以纤支镜吸引物常规培养结果不能完全代表肺部感染的病原体。
呼吸道标本采集和结果解读
病毒种 流感病毒 呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、副流感病 毒、人类偏肺病毒
风疹病毒 鼻病毒、柯萨奇病毒和埃可病毒的部分型别 腺病毒 人类冠状病毒、SARS冠状病毒 单纯疱疹病毒、带状疱疹、EB和CMV 人类博卡病毒 呼肠孤病毒（1，2，3，4型）
真菌涂片或其他真 支气管抽吸物 菌染色方法
无菌杯或管，室温，2h
真菌培养
支气管肺泡灌洗液；
PSB
半 乳 甘 露 聚 糖 血清
（GM）
支气管肺泡灌洗液
1-3 β-D 葡 聚 糖
（G）
促凝管，室温，立即送检 无菌杯或管，室温，2h
20
老年CAP患者的病原学诊断方法
老年CAP患者的病原学诊断
血培养
染色法
芽窄食单胞菌、金黄色葡萄球 革兰染色
痰 ； 支 气 管 抽 吸 物 ；无菌杯或管，室温，2h
菌和MRSA、流感嗜血杆菌 定量或半定量需氧 支气管肺泡灌洗液；
和厌氧细菌培养 PSB；肺组织
肺炎链球菌 混合厌氧菌（吸入）
曲霉菌属
同上
革兰染色 培养
尿液
PSB标本 肺组织
无菌容器，室温，2h
无菌管；无菌容器放组织； 室温，2h
咽拭子的采集方法
用拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁（3-5次）
9
上呼吸道感染标本的采集
咽拭子的采集
正确拿咽拭子的方法
错误拿咽拭子的方法
上呼吸道感染标本的采集
鼻 拭 子 标 本 的 采 集
请患者头部保持不动，将拭子轻轻转动缓缓插入患者鼻腔，不要用力， 当遇到阻力后即到达后鼻咽，停留数秒吸取分泌物，轻轻旋转取出拭子
呼吸道标本谁采集
呼吸道标本谁采集摘要：在检验科工作了十几年，关于标本采集这块是相当混乱。
最近这些年，年轻的检验人员开始变得不抽血了，还会有人问抽血不是护士抽吗？我为什么要学呢？抽血到底是谁的责任？那么检验科的医生们到底有没有这个资格来抽血，成了现如今的争议。
我查了许多资料，都没有明确指明，只是说抽血需要经过培训的医护人员，也就是说不管你什么专业培训一下就可以了吗？这种说法似乎相当不负责。
那么如果从另外一个角度，就是静脉采血是一种侵入性医疗操作，那么不具备医师资格证的师傅们是不是应该放下手，不要再做这么危险的事了。
再比如呼吸道标本采集之争，那么呼吸道标本采集是否是临床的责任呢还是检验人员的责任？关键词：呼吸道标本采集虽然我没有找到非常确切具体的资料，不过也可以看看一些间接证据：1.北京友谊医院发热门诊采集流感样病例的咽拭子流行性感冒(流感)的流行是世界范围内广泛关注的公毒进行分型。
实时PCR 操作使用 AgPath-IDTM 一步法实共卫生问题,不仅有世界范围的大流行,且还有不同程度的。
时PCR 试剂盒及 ABI Prism 7500 Tagmsn 仪器(美国地区流行,轻者影响学习和工作,重者导致患者死亡。
甲型 Applied Biosvstems Internationa1公司)。
PCR 条件:反转录直感 H1N1pdm09自2009年4月在墨西哥和美国出现后，已50℃30min;95℃10min，95℃15，55℃455，循环在全球范围内流行,而且受到毒力变化病毒株 H1N1pdm09 45 次[1]。
的影响,不同区域，不同时间流感流行的特点均不相同[]。
引物及探针序列:FluA(H1N1)正义.5-AACATGTTA本研究对北京友谊医院发热门诊就诊患者的流行病学资料CCCAGGGCATTTCGC-3':FluA(H1N1)反义,5'-GTGGT-进行回顾性分析,以期对临床工作有一定的指导作用。
下呼吸道分泌物标本采集规程
新型冠状病毒感染的肺炎患者下呼吸道标本采集操作规程
下呼吸道标本分为三种：痰液、支气管细胞灌洗液、支气管分泌物，主要以痰液为主。
采集方法包括：自行咳痰法、吸引器经口鼻吸痰法、支气管镜下留取标本法。
一、目的：
取患者下呼吸道分泌物做病毒分离，以帮助诊断。
二、评估：
1、评估患者：
（1）双人核对医嘱，打印标签，准备无菌痰杯或一次性痰液收集器。
（2）核对患者，了解患者病情、咳嗽咳痰情况。
（3）向患者解释，取得配合。
2、评估环境：
安静整洁、宽敞明亮、室温适宜、光线充足。
三、操作前准备：
（1）人员准备：防护级别：三级防护（医用防护口罩、一次性帽子、防护服、护目镜、防护面屏、乳胶手套2双、防护靴套）。
（2）物品准备：治疗车上层：无菌痰杯或一次性痰液收集器、温开水、漱口杯、负压吸引装置一套（检查处于备用状态）、一次性吸引器连接管、密封袋2个、75%酒精、纱布数块、快速手消液、必要时备口咽通气道。
呼吸道标本的处理
选择性培养基（如表1） 5%羊血琼脂 含抗生素的Thayer Martin 琼脂（GC+）和无抗生素的<GCO>(仅用于淋病奈瑟菌病例) 巧克力琼脂（仅用于会厌炎和喉气管炎病例）
质量控制 培养基使用之前，QC由培养基组负责。
上呼吸道标本处理程序
即使符合标准，也要结合临床和放射检查结果判断。 慢阻肺、或支气管插管病人即使没有肺实质感染的症状，也有持续性脓痰且可连续分离出占
第七部分 临床细菌室报告制度的规范
细菌实验室应对不同的细菌检验报告时间和内容应有相应的规定，并告诉临床各科，依此
可防止不明原因的报告延迟
应分两种报告形式：
1.
危重感染报告：
2.
常规报告：
涂片报告
1、革兰染色：危重报告30分钟报告。报告内容应包括染色反应、是细菌或真菌、细菌形态。有 无细胞内吞嗜现象，有无菌丝。
4. 有条件的单位可开展真菌药敏试验（应用稀释法报告MIC结果），真菌耐药监测为临床用 药提供参考。
第五部分 药物敏感试验规范
基层细菌室应开展K-B纸片扩散法药敏试验，应用WHONET软件开展本单位的耐药监测为临床 用药提供参考
药敏标准
1.
用CLSI指南推荐的K-B药敏标准进行常规药敏试验判断
构。如革兰染色见到革兰阳性球菌，是葡萄状排列；又如革兰染色见到真菌小分生孢子及菌 丝。 2、抗酸染色：抗酸染色报告应显示找到或未找到或可疑抗酸杆菌三种结果，报告中应加号 体现标本中抗酸杆菌的存在量。如找到抗酸杆菌++；见到染色不典型抗酸杆菌+，建议再送 标本。
趋向性鉴定试验
革兰阳性球菌：触酶试验、凝固酶试验 革兰阴性杆菌：氧化酶试验
呼吸道标本细菌学检验
呼吸道标本细菌学检验标准操作程序1.检验目的规范呼吸道标本细菌学检验操作规程，确保检验结果准确可靠。
2.适用范围呼吸道标本培养和涂片检查。
3.标本采集与运送3.1 采集时间以晨痰为好。
3.2 采集方法3.2.1 自然咳痰法用清水反复漱口后从气管深部咳出痰，吐入无菌容器内。
3.2.2 气管镜下采集法在病灶附近用导管吸或用支气管刷直接取得标本。
3.2.3 气管穿刺法在环甲膜下穿刺抽取痰液，收集标本，适用于厌氧菌培养。
3.2.4 呼吸机采集法使用呼吸机的病人，可利用呼吸机吸取深部痰入专用采集器内送检。
3.2.5 为了明确扁桃体炎、会厌炎、鼻咽部化脓性感染的病原体，可以采集拭子送检。
首先拭子用无菌生理盐水沾湿，然后用力在感染部位擦拭，采集标本与无菌管送检。
3.3 标本运送3.3.1 采集标本后立即送到实验室，放置时间不应超过2h。
3.3.2 延迟送检或待处理标本应置于4℃冰箱保存（疑为肺炎双球菌、流感嗜血杆菌等苛氧菌感染除外），以免杂菌生长，但必须在24h内处理。
3.3.3 对可疑烈性呼吸道传染病的患者检验标本，在采集、运送及保存过程中必须注意生物安全防护。
4.检验步骤4.1接种：用无菌拭子蘸取脓性部分，接种于血平板和巧克力平板第一区，再用一次性接种环分区划线接种。
4.2 涂片在接种的同时进行涂片。
用铅笔在磨砂部位编号，每片只涂一份标本。
4.3 培养：血平板、巧克力平板置35℃二氧化碳培养箱培养18-48h。
4.4 涂片染色镜检：涂片革兰染色，自然干燥后镜检。
先用低倍镜浏览整片，计数平均每个低倍视野WBC、上皮细胞的数量。
标本合格与否参考表1，合格标本再用油镜观察，主要观察片中主要细菌类型、WBC内吞噬什么细菌等，以作为看板时决定什么细菌要做的依据。
表1 痰液标本分级4.5 培养结果观察4.5.1 口咽部正常寄生的需氧菌主要是腐生的奈瑟菌、草绿色链球菌，4.5.2 有明确意义的病原菌： A群溶血性链球菌(咽炎)、流感嗜血杆菌（b型5y以下儿童急性会厌炎、急性支气管炎）、肺炎链球菌（急性支气管炎常继发于病毒感染、大叶性肺炎）、百日咳鲍特菌（咳嗽、支气管扩张）、金黄色葡萄球菌（肺炎）、军团菌（肺炎）、白喉棒状杆菌。
呼吸道标本的采集与送检要求
呼吸道标本的采集与送检要求1.采集标本的选择：常用的呼吸道标本有咽拭子、喉拭子、鼻拭子、支气管肺泡灌洗液、痰液等。
对于喷嚏液或唾液等非特异性标本的采集，不推荐用于病原体的检测。
2.采集时间：最佳的标本采集时间是在症状出现后24小时内采集，对于特定病原体如流感病毒等，应在症状出现48小时内采集。
3.采集方法：采用无菌的采集器具，如棉签、拭子等。
采集咽拭子时，应当将拭子的头部置于扁桃体和咽后壁的分泌物位置，不应担心引起患者咳嗽反射。
鼻拭子的采集方法是将拭子插入鼻腔内，盘旋擦拭鼻腔黏膜。
4.采集指导：采集者应经过专业培训并熟悉标本采集的技术要领。
采集过程中需要保持呼吸道的湿润，确保采集到的标本质量。
5.标本保存与运输：采集得到的标本应立即置于透明的标本袋中，封口完好。
若运输时间不长，可将标本放入4℃冰箱保存，不得冷冻。
如果运输时间较长，应采用冷冻方式运输（-20℃）。
运输过程中应尽量避免震动或损坏。
6.标本的处理：采集得到标本后，应尽快送往实验室进行处理。
痰液在送往实验室前应保持在4℃存放。
对于支气管肺泡灌洗液等标本，需要在接收实验室前制备样本。
7.实验室检测：送往实验室后，应当及时进行病原体的检测。
常用的检测方法包括细菌培养、病毒核酸检测（如PCR）、真菌培养等。
根据病情需要，还可以进行药敏试验、抗体检测等。
8.结果解读与报告：实验室所得结果需要专业人员进行解读，并及时生成报告。
报告应如实反映标本的检测结果，并提供相应的临床意义和建议。
在进行呼吸道标本的采集与送检时，需要确保采集者具备必要的知识与技能，并严格按照采集与送检要求进行操作，以保证最终的结果准确可靠，为诊治提供有力的支持。
上呼吸道标本采集考核评分标准
体，拭子越过舌根，在两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3 体拭子采集方法正 10 3;4;3
次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次。
确,标本符合要求
4、取样完毕，轻轻退出拭子，将拭子头放入含病毒保存液的收
集管中，拭子折断点置于管口处，稍用力折断使拭子头落入采
集管的液体中，弃去折断后的拭子杆，旋紧管盖，将采集管置 拭标本信息正确、
2 1；1 2 1；1 4 1；1；2
3、了解进餐情况（餐后2h内不宜进行口咽拭子采样） 4、向患者及家属讲解目的及注意事项。 核对被采样人信息
查看口鼻腔
讲解目的和注意事 项
2 1；1 2 1；1
登录核酸检测APP，扫描试管码，将拭管码贴于管身（避免酒精 信息正确洗手正确 喷洒），扫描被采样人的信康码或二维码，核对姓名、手机号 、身份证号码；进行手卫生。
5 3；2
采集鼻咽拭子
体位正确，口罩遮
1、操作者站于患者右侧，被采集者取坐位或半坐位；正确摘除 掩口部
口罩，手上备纸巾。
3 2；1
2、检查鼻拭子质量并打开包装；将拭子放入无菌生理盐水中湿 润。（口述：必要时---鼻腔干燥的情况下）。
检查鼻拭子质量并 打开包装。口述拭 子生理盐水中湿润
4 2；2
3、取出鼻拭子，测量鼻孔到耳根的距离并以手指做标记。
于稳定的置物架上，然后将标本采集管放入大小合适的生物安 符合要求,消毒处理 全袋内密封，每袋装一份标本。75%酒精喷洒消毒；再次核查信 正确有效
10
3；2； 2；3
息正确将标本放入密封罐，旋紧盒盖，75%酒精喷洒消毒；放入
转运箱，用75%酒精对表面喷洒消毒。
5、将转运箱码贴于转运箱上，封箱后，操作者按要求联系标本 转运人员（根据风险程度选择防护装备），转运至生物实验室 核对交接,双方签字 （标本接收人员的个人防护按采样人员防护装备执行），双方 记录；及时送检 签字记录。
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在无菌的带螺旋塑料管分装2-3ml VTM。最好储存在:–20℃,4℃可放 48–96h,室温1–2天。
个人防护设备（PPE）
口罩 (N-95 or N/P/R-100) 手套 帽子 鞋套 防护服 (gown or apron)
如何采集样本
1.咽拭子
容易操作
请病人尽量把嘴张开
当拭子触及咽后壁时病人不要往后躲， 应该抵住
病毒采样盒
咽拭子
标本采集方法—咽拭子
干采 用2根聚丙烯纤维头的塑
料杆拭子同时擦拭双 侧咽扁桃体及咽后壁， 将拭子头浸入含3ml 采样液的螺口管中， 尾部弃去，旋紧管盖。
correct
例子
wrong
标本采集方法—鼻拭子
将1根聚丙烯纤维头的塑 料杆拭子轻轻插入鼻 道内鼻腭处，停留片 刻后缓慢转动退出。 取另一根聚丙烯纤维 头的塑料杆拭子以同 样的方法采集另一侧 鼻孔。上述两根拭子 浸入同一含3ml采样 液的管中，尾部弃去， 旋紧管盖。
3. 鼻咽吸取液的收集
1. 将吸液管与真空泵相连 2. 将软管与上腭平行插入鼻孔 3. 使用真空泵 4. 缓慢的移出同时轻轻旋转 5. 使用同一个管子采集另一鼻孔的液体 6. 收集的液体用3ml VTM 冲洗出，放入
避免反复冻融 冰上一周也比冻融一次要好
标本的包装和运输
疑似人感染甲型H1N1流感感染病例列为A类， 用UN2814包装运输
—《甲型H1N1流感监测方案》附录3 《甲型H1N1流感病毒实验室检测技术方案》 2009年5月11日
IATA对感染性物质的运输分类
A类指人感染后发病的可能性大，传染性强，对 人群危害性大的烈性感染性物质。高度怀疑 具有严重危害性的感染性物质也属于A类。A 类感染性物质感染性物质[联合国编号UN2814 和UN2900(只导致动物致病)]采用PI602包装 要求。
内层容器，防止碰 撞破碎
中层包装
包含 裹有软垫的内层
容器 吸水性材料
防漏防渗
放入中层容器 内容物名细单 封箱
外层包装
标识
Category A
INFECTIOUS SUBSTANCE
In case of damage or leakage Immediately notify Public Health authority
呼吸道标本采集、运送及保存
标本采集
采集时间----何时采 采集种类----采什么 采集方法----怎么采
标本的种类
首选标本 上呼吸道标本 咽后壁拭子 鼻咽拭子
下呼吸道标本:本的采集时限
症状出现后尽早采集 尽量在抗病毒药物使用前采集 即使症状出现1周后也要采集 可能的情况下多天多次采集
标本的采集方法
1. 准备采集物品包 2. 如何采集标本
采集物品包
装好VTM的样品采集管 聚酯纤维拭子 痰或粘液吸取管 压舌板 采样杯或平皿 吸管
▪ 其它样品管 ▪ 冰袋 ▪ PPE ▪ 防水的Marker笔,
用于标本的标记
病毒运输液 (VTM)
用于咽拭和鼻拭的VTM:
MEM、EMEM、DMEM PH 7.4-7.6 Hank’s
A类之外，仅具有一般危险性，引起感染的机会 较少的感染性物质为B类(联合国编号UN3373), 采用PI650包装要求。
感染性物质运输的包装系统
三层包装系统： 内层容器， 中层包装 外层包装。
基本包装
内层容器(装有样 本)
中层包装(含吸水 性材料)
外层包装
内层容器
标记 合适的材料 封口 防漏防渗 裹以软垫或分隔多个
流感样品的运输
采集的标本若不能在24小时内送达，则 应尽快在－70℃以下保存。无－70℃ 条件的需在－20℃冰箱短时间暂存， 并尽快联系递送标本。标本需由专人 运送，不得邮寄，最好使用专 车。
谢谢!
采样管中
标记样品
被采样者的信息 样品采集的日期 样品采集的部位 样本编号 采集单位
如何保存样品
VTM中保存的样品
尽快运到实验室
48小时内可以检测的可以保存在4℃，超过48小时70℃冻存。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定， 故长期保存应在-70℃温度以下，不要冻存于20℃，会降低流感病毒的检出率。