单基因遗传病的研究方法与技术-2013
单基因遗传病的基因诊断及其应用研究
三、单基因遗传病基因诊断的未 来发展方向
随着科技的不断进步，单基因遗传病基因诊断将迎来更多的发展机遇。未来， 基因诊断技术将更加灵敏、快速和低成本，使得更多人能够享受到基因诊断带 来的福利。同时，随着大数据和人工智能等技术的融合应用，基因诊断将在疾 病预测、个体化治疗等方面发挥更大的作用。
然而，单基因遗传病基因诊断也面临着一些挑战，如技术人才短缺、伦理道德 问题等。因此，未来需要加强技术培训和伦理规范，确保基因诊断技术的合理 应用和发展。
目前，单基因遗传病的基因诊断主要涉及以下几个方面：
1、基因序列分析：通过直接测序或间接检测技术，如变性梯度凝胶电泳 （DGGE）、异源双链测序（HDSS）等，检测导致遗传性疾病的基因序列变异。
2、基因表达谱分析：利用RNA测序等技术在转录水平检测基因的表达变化，揭 示疾病发生过程中基因表达的调控机制。
一、单基因遗传病的基因诊断
基因诊断是通过检测个体基因序列的变异，对单基因遗传病进行确诊和分型。 其基本原理是采用分子生物学技术，包括基因测序、基因克隆、DNA甲基化等， 针对特定基因进行检测。这些技术可对基因序列的突变、表达水平、基因组印 记等方面的变化进行分析，以揭示疾病的发生机制和遗传规律。
1、基因检测技术概述
基因检测是通过直接或间接地检测基因组DNA序列，发现基因变异和异常表达， 从而确定个体是否具有某种遗传性疾病的易感性的方法。目前，用于罕见遗传 病诊断的基因检测技术主要包括：聚合酶链反应（PCR）、变性梯度凝胶电泳 （DGGE）、单基因测序（Sanger测序）和下一代测序（NGS）等。
四、结论
单基因遗传病的基因诊断为疾病的预防、诊断和治疗提供了重要的理论基础和 技术支持，具有重大的研究意义。未来，随着科技的不断进步和应用领域的拓 展，单基因遗传病基因诊断将发挥更加重要的作用。因此，建议加强技术研发 和推广应用，同时重视技术人才培训和伦理规范建设，以确保单基因遗传病基 因诊断技术的可持续发展和应用。
单基因遗传病
单基因遗传病摘要遗传病是指由遗传物质发生改变而引起的或者是由致病基因所控制的疾病。
由于遗传物质的改变，包括染色体畸变以及在染色体水平上看不见的基因突变而导致的疾病，统称为遗传病。
遗传病可分为单基因病和多基因病。
其中，单基因病是遗传病中最主要的一个类型。
单基因遗传病是指一对同源染色体上单个基因或一对等位基因发生突变所引起的遗传病，又称孟德尔式遗传病。
目前已知的很多疾病都属于单基因病。
如：血友病、色盲、多指、并指、苯丙酮尿症、抗维生素D性佝偻病、假性肥大型肌营养不良等【1】。
关键字：遗传病单基因遗传病诊断预防与治疗1.单基因遗传病的种类及特点【2】根据决定某一性状或疾病的基因在常染色体上还是在性染色体上；是受显性基因决定，还是隐性基因决定【3】。
可将人类单基因遗传病分为五类：1.1常染色体显性遗传病及其常见病症致病基因显性并且位于常染色体上，等位基因之一突变，杂合状态下即可发病。
致病基因可以是生殖细胞发生突变而新产生，也可以是由双亲任何一方遗传而来的。
此种患者的子女发病的概率相同，均为1∕2。
此种患者的异常性状表达程度可不尽相同。
常见常染色体显性遗传病：多指（趾）、并指（趾）、珠蛋白生成障碍性贫血、多发性家族性结肠息肉、多囊肾、先天性软骨发育不全、多发性成骨发育不全、视网膜母细胞瘤。
1．2 常染色体隐性遗传病致病基因为隐性并且位于常染色体上，基因性状是隐性的，即只有纯合子时才显示病状。
此种遗传病父母双方均为致病基因携带者，故多见于近亲婚配者的子女。
1.3 X连锁性遗传病X连锁显性遗传病病种较少，有抗维生素D性佝偻病等。
这类病女性发病率高，这是由于女性有两条X染色体，获得这一显性致病基因的概率高之故，但病情较男性轻。
男性患者病情重，他们全部女儿都将患病。
常见X伴性显性遗传病：抗维生素D佝偻病、家族性遗传性肾炎。
1.4 X 连锁隐性遗传病致病基因在X染色体上，性状是隐性的，女性只是携带者，这类女性携带者与正常男性婚配，子代中的男性有1/2是概率患病，女性不发病，但有1/2的概率是携带者。
遗传病学的研究方法与技术
遗传病学的研究方法与技术遗传病学是研究基因与遗传因素在人类疾病中的作用和机制的一门学科，其研究方法和技术的发展为解决遗传疾病的预防和治疗提供了重要的科学支持。
本文将介绍遗传病学的研究方法与技术。
1. 基因检测技术基因检测技术是遗传病学的基础，其通过检测人体内的基因序列来分析人体遗传信息。
目前常见的检测技术包括PCR技术、Sanger测序技术、二代测序技术和高通量测序技术等。
其中PCR技术是一种高度敏感的技术，可用于检测各类疾病和基因突变，被广泛应用于遗传病学研究和临床检测中。
2. 遗传分析技术遗传分析技术包括家系分析、联合分析、基因型-表型关联分析、关联分析、基因芯片分析等。
其中家系分析是一种通过家族调查来确定家系中遗传性状的遗传模式的方法。
联合分析是一种多因素疾病遗传模式分析的方法，其通过同步考虑基因和环境因素来确定遗传性疾病的遗传因素。
基因型-表型关联分析是一种确定单个基因变异与表型差异之间关系的方法，被广泛应用于遗传病学研究中。
关联分析则是一种通过对多个位点的遗传变异与疾病之间的关联进行分析，来确定疾病遗传因素的方法。
基因芯片分析是一种通过高通量技术测定多个位点的遗传变异的方法，可同时检测多个基因和多个变异体。
3. 功能研究技术功能研究技术是通过分子生物学和细胞生物学技术来研究基因的生物学功能和分子机理的方法。
常见的功能研究技术包括基因敲除技术、基因转染技术、基因表达技术、蛋白质相互作用技术等。
其中基因敲除技术是一种通过RNA干扰或CRISPR/Cas9等技术来实现基因靶向敲除的方法，可用于研究单个基因的生物学功能。
基因转染技术则是一种把外源基因导入细胞内的技术，可用于研究基因调控网络和功能基因组学。
基因表达技术可用于研究基因表达调控机制和基因表达谱，是遗传病学研究的重要手段之一。
蛋白质相互作用技术则是一种通过分析蛋白质之间的相互作用来研究基因调控网络和蛋白质功能的方法，如蛋白质互作网络分析等。
遗传病学研究的方法和技术
遗传病学研究的方法和技术遗传病学是生物医学领域中极为重要的一个分支，主要研究基因及其表达对人类健康和疾病的影响机制，以及预防、治疗遗传病的方法和技术。
在遗传病学研究中，常用的方法和技术包括以下几种：1. 人类基因组计划人类基因组计划是一个涉及全球范围内的科学合作项目，目的是解析人类基因组，建立人类基因图谱，并阐明基因与疾病之间的关系。
该计划的开始可以追溯到1984年，至今已经取得了丰富的研究成果。
其对于遗传病学领域的发展起到了推动作用。
2. 基因测序技术基因测序技术是遗传病学研究的一项重要技术。
通过对基因组的快速高通量测序，可以获得海量的遗传信息，从而对人类遗传病的发生、发展、治疗等方面提供有力支持。
目前最常用的基因测序技术包括Sanger测序、Illumina测序、Pacific Biosciences测序等。
3. 克隆技术克隆技术是一种通过人工方式从体细胞中复制某一特定基因、DNA片段或整个基因组的方法。
这种技术可以用于研究基因的结构与功能，以及基因与疾病之间的关系。
其中最早的克隆技术就是利用质粒向细胞中导入外源DNA的重组DNA技术。
此外，还有目标基因克隆、PCR技术等。
4. 基因编辑技术随着基因编辑技术的不断发展，人类已经可以对基因进行定点修饰甚至切除，从而达到治疗遗传病的目的。
其中最为常见的基因编辑技术包括CRISPR/Cas9技术、TALEN技术、ZFN技术等。
5. 遗传变异筛查技术遗传变异筛查技术是一种通过对人类基因组进行筛查，发现基因突变和多态性等变异，从而诊断或预测一个人是否有遗传疾病倾向的技术。
如基于微阵列芯片、基于下一代测序技术的单基因或全外显子筛查技术等等。
总之，遗传病学研究的方法和技术一直在不断地发展和创新，这些技术的应用有助于预防、治疗与控制遗传病，使这一领域的发展更上一层楼。
但也需要特别重视伦理问题和隐私保护，确保科技发展与社会伦理的平衡。
第十六章单基因遗传病ppt课件
(二)外显率和表现度
1、外显率(penetrance) 是指一群具有某种致病基因的人中， 出现相应病理表现型的人数百分率。
例如:单纯性尺侧多指(趾)畸形(AD)，共调 查了115个家庭，子代中均有此种多指(趾) 畸形，理论上115家中亲代应有115个患者， 但实际上这115个家庭中，91对的婚配类型 为受累者x正常；24对为正常x正常，他(她) 们是不外显者，占20.87%。其外显率为 91/115=0.79或79%。
（3）XhX x XhY 女性(携) 男性患者
正常亲代(携带者) XhX
子代基因: XhX
患者亲代 XhY
Xh
XhY
XhXhY
Xh X XhXh XhX
XXhYY XY
表现型:女性(携) 男性患者 女性患者 正常男性
概率: 1/4
1/4
1/4
1/4
概率比: 1 : 1 : 1 : 1
每胎出生患者的机会是1/2,男、女机会均等。
返回
1、典型婚配类型
患者亲代
（1）Dd x dd
Dd
患者 正常
Dd
正常亲代 dd
d
Dd
dd
d Dd dd
子代基因型：Dd dd
表现型：患者 正常
概率： 1/2 1/2
概率比： 1 ： 1
返回
概率与概率比之间的关系：
可以相互转换，分母相同时，分 子之比即为概率比；分母不相同 时，则通分后的分子之比则为概 率比
139
2
0
2023
suspected
mendelian basis
Total
18443 1112
59
63
19677
单基因遗传病的诊断和治疗方法
单基因遗传病的诊断和治疗方法随着现代医学的发展，人们对基因的研究越来越深入，但是单基因遗传病仍然是困扰着许多家庭的问题。
针对单基因遗传病，早期的诊断和治疗至关重要。
在本文中，我们将探讨单基因遗传病的诊断和治疗方法。
一、诊断单基因遗传病1. 生育前筛查生育前筛查是指在怀孕之前对双方进行检查，以确定是否存在遗传基因缺陷，从而避免因基因缺陷而导致的胚胎缺陷和遗传病的出现。
常见的生育前筛查包括基因检测和遗传咨询。
2. 基因检测基因检测是采集DNA样本进行检测，以确定是否携带某个基因突变。
基因检测可通过羊水或绒毛取样进行，但是这种方式会对胎儿造成风险。
值得注意的是，基因检测只能对部分单基因遗传病进行诊断，而且检测成本较高。
3. 新生儿筛查新生儿筛查是指在宝宝出生之后进行基因诊断，以尽早发现潜在的遗传病。
新生儿筛查包含了对生血病、苯丙酮尿症、先天性甲状腺功能减退症等常见病症的筛查。
二、治疗单基因遗传病针对单基因遗传病，主要的治疗方式包括以下几个方面：1. 基因治疗基因治疗利用基因工程技术将正常基因导入患者体内，以达到治疗目的。
基因治疗的主要优势是避免了传统治疗中对身体的伤害，从而提高了治疗效果。
但是，基因治疗目前仍处于研究阶段，其长期效果有待观察。
2. 停药治疗一些单基因遗传病可以采用停药治疗的方式进行治疗。
例如，对于苯丙酮尿症患者来说，只要禁食含蛋白质的食物，就能有效控制病情。
3. 植入基因剪切体基因剪切体是一种分子生物学工具，它能够对基因进行编辑，从而去除基因中的问题所在。
近年来，植入基因剪切体的技术得到了极大的拓展，已经成功治疗了一些遗传疾病。
4. 替代治疗替代治疗是通过替代缺失的蛋白质或补充缺失的维生素来进行治疗。
例如，对于地中海贫血患者来说，进行红细胞输血和铁螯合剂治疗就能达到一定的治疗效果。
总之，单基因遗传病的诊断和治疗需要多方面的技术支持，早期诊断和治疗对于疾病的控制和治疗效果至关重要。
未来，我们相信在基因工程技术和生物科技的支持下，单基因遗传病的治疗效果一定会越来越好，让受到遗传病困扰的家庭得到更好的治疗和关怀。
单基因遗传病的研究方法与技术
单基因遗传病的研究方法与技术单基因遗传病是由单个基因的突变所引起的疾病，在人类疾病中约有6000多种属于单基因遗传病。
随着科技的不断进步，现代分子生物学技术开发出了许多研究单基因遗传病的方法和技术，本文将简要介绍单基因遗传病的研究方法和技术。
1.基因编辑技术基因编辑技术常用于对基因组进行定点修改，这个技术的主要意义在于，它可以使得人类能够针对某些单基因遗传病所造成的突变，进行有针对性地修改和治疗。
基因编辑技术的主要方法有：CRISPR/Cas9基因编辑技术：这是一种目前最常用的基因编辑技术，它是通过CRISPR/Cas9规律下的酶来切割某个基因型上的目标位点，并在此基础上引入一种新的DNA 片段或修改、删除旧有的片段，以达到更改基因信息和影响其表达的目的。
这种技术已经被应用于治疗及疾病预防的研究中，特别是在单基因病治疗中有着广泛的应用。
ZFN基因编辑技术：这种技术是以锌指蛋白结构为基础，通过特异性的DNA结合功能寻找到某一个基因点位进行切割，然后通过不同的方法修复、改变此基因片段，达到基因治疗的目的。
TALEN基因编辑技术：这种技术的基础是结构相似的转录激活因子靶向末端的限制性内切酶（TALENs），通过将TALENs导入细胞内，根据不同需要定向切割某一个基因片段，并对它进行修复、改变。
基因测序技术指的是通过测序方法对基因的序列进行分析，以便发现相关的变异、突变和基因点等。
基因测序技术已经被广泛用于单基因遗传病的诊断和研究中，包括单基因病致病基因的鉴定、新的单基因病的发现等方面。
常用的基因测序技术包括：Sanger测序技术：Sanger测序技术是一种标准的基因测序方法，它通过链终止的原理，以核酸为模板合成一系列不同长度的片段，并通过电泳分离这些片段，以确定其序列信息。
Next-generation sequencing（NGS）：这是一种高通量、高通量测序技术，它的优势在于，可以同时揭示大量的序列信息，并且需要比传统测序方法更短的时间和更低的成本。
医学遗传学-第五章-单基因遗传病-2
3
第三页，编辑于星期六：点 三十七分。
Medical Genetics (一) X连锁隐性遗传病
一些性状或疾病的基因位于X染色体上，该基因的
XAXa XAY XaXa XaY
男患后代女儿都发病，儿子都正常。 女患后代儿、女均有1/2的机会接受来自母亲带有突变等
位基因的X染色体而发病。
25
第二十五页，编辑于星期六：点 三十七分。
Medical Genetics
抗维生素D佝偻病
临床表现：低血磷酸盐性、佝偻病
26
第二十六页，编辑于星期六：点 三十七分。
第十八页，编辑于星期六：点 三十七分。
甲 型 血 友 病 Medical Genetics
遗传方式：XR 凝血因子Ⅷ基因遗传性缺陷 基因定位：Xq28 基因全长186kb，含26个外显子 基因缺陷包括:
缺失、点突变、插入、重复、倒位
临床表现： 出血不止
19
第十九页，编辑于星期六：点 三十七分。
Gower综合征 Medical Genetics
21
第二十一页，编辑于星期六：点 三十七分。
Medical Genetics
(二) X连锁显性遗传病
一些性状或疾病的基因位于X染色体上，其基因的 性质又是显性的，这种遗传方式称为X连锁显性遗传（ X-linked dominant inheritance, XD）。
Medical Genetics
第五章 单基因遗传病
Monogenic disease
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
3’ 5’ 3’ 5’ 3’
5’
第二个循环 4个拷贝
3’
3’ 3’ 3’ 3’
3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 3’
5’
3’
3’ 3’
第三个循环 8个拷贝
3’
第n个循环 2n个拷贝
PCR反应体系
参与PCR反应的主要成份:
模板、引物、 dNTP 、 Taq DNA 聚合
各种类型病理性突变的比例
无义突变和移码突变：
稀有的错义突变：
60％
微小突变
20％
DNA大片段缺失或重复: 20％
基因突变分析所用实验材料
临床样本取材：
实验应用材料：
外周血 组织 毛囊 颊粘膜脱落细胞 羊水细胞 绒毛
DNA RNA Protein
RNA 的优点与缺点
2 3 4 5
1
5. 成人型多囊肾
是一种最常见的单基因遗传 性肾病，发病率约为1/1000 其主要特征在双肾形成进行 性增长的多个液性囊肿，最 终可引起肾衰竭 具有遗传异质性，存在两个 主要的致病基因PKD1和PKD2
46
ADPKD分子遗传基础
Gene PKD1 PKD2 PKD3 ?
Chromosomal locus
CMT是一类周围神经系统遗传病 ,其遗传方式 可为常染色体显性遗传(AD ,占绝大多数) 、常 染色体隐性遗传(AR)及 X连锁显性遗传(XD) 依据病理和电生理特点分为两型:脱髓鞘型 (CMT1 型) 和轴突型 (CMT2型). CMT1型约占 CMT总数的70%，70%以上CMT1由PMP22基 因重复引起 其中X连锁显性遗传CMT致病基因为CX32，含 有2个外显子
PCR反应的特点
特异性强 引物与模板结合的特异性及聚合酶的忠实性 灵敏度高 指数增长，从pg (10-12)可扩增至 mg (10-6)水平 简便、快速 2～4 小时完成扩增 对标本的纯度要求低 DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板
PCR反应原理和反应过程
DNA的体外复制包括3个步骤： 变性（denaturation）:94 C ~95 C 退火（annealing）: 40 C ~70 C 延伸（extension）:72 C
若X染色体在Xq27.3处呈现细丝样结构， 且连接的末端形似随体，这条染色体就 被称为脆性X染色体。 主要临床症状：智力低下、语言障碍、 性格孤僻、伴有特殊面容——长脸、方 额、大耳朵、嘴大唇厚，青春期后可见 明显大于正常的睾丸。 通贯掌、三叉点C缺如。
Xq27.3
前突变和全突变
正常 CGG <6-54
新致病基因的研究方法 和技术
研究对象不同，策略方法不同
家系连锁分析来定位: 适于分析较大的遗传病家系，不适于 散发病例和小家系病例 二代测序技术： 适于散发病例和小家系病例
连锁分析与二代测序相结合加快新基因的发现
定位克隆
Met A A Met Val
Ser
Leu Gln Pro
T G G T C T C A C T G C A A C C G
酶和缓冲液等。
引物(Primers)
引物决定PCR扩增产物的特异性和长度 化学合成的寡核苷酸 能与模板特异地结合 引物决定产物的特异性和长度 引物设计时必须遵循一些原则
设计引物的原则：
二条引物分别位于被扩增片段的两端，与模板正负 链序列互补 长度为18 ~ 25个核苷酸 二条引物之间避免形成引物二聚体 引物的碱基组成应平衡 引物的5`端可被修饰（引入酶切位点、引入突变位 点、生物素等标记）
应用PCR技术分析一遗传性脊髓小脑性共 济失调（SCA)3型家系
NC:正常对照 PC:阳性对照 F:家系成员 M:Marker 结果： 家系成员1、3、 4有SCA3致病基 因突变; 家系成员2、5 未检测到突变
NC
1 2
3 4
5
F1
F2
F3
F4
F5
PC
M
2. 脊肌萎缩症
脊肌萎缩症( Spinal Muscular Atrophy , SMA)系指一类由于下运动神 经元变性导致的进行性骨骼肌无力和萎 缩的一组疾病 ,是儿童和少年常见的致 死性常染色体隐性遗传病之一 ,其隐性 致病基因携带率在人群中为 1/ 40～1/ 50 ,发病率为1/6000～1/10000.
Cห้องสมุดไป่ตู้ CA CA CA
CA
CA CA CA CA CA
Primer 2
CA CA
CA CA CA
CA
毛细管电泳分析PCR片段大小
分析
D4S1534 I-1 II-1 II-2 II-3 II-4 II-5 114,124 114,120 114,124 114,122 114,124 114,124
优点:
– 不包含内含子 – RT-PCR 能够检测异常的剪切体
缺点:
– 不易获得 – 要求操作特别小心且快速以免降解 –目的基因可能不在获得的材料组织中表达 –导致RNA不稳定的突变不能被检测
基因突变分析常用技术
分子杂交 聚合酶链式反应
Southern 印迹杂交
例如：脆X综合征
应用PCR相关技术进行基因突变 分析的策略与方法
策略与方法
直接分析法： PCR片段大小分析：片段大小有明显差异 PCR-RFLP：有酶切位点 PCR-测序：确定突变点碱基改变 多重连接探针扩增（MLPA）：片段缺失与重复 RT-PCR: 基因大，可取到新鲜材料，且基因在其中有表达
DNA聚合酶
Taq DNA聚合酶复制的保真性：
Taq DNA聚合酶无3’ → 5’外切酶活性， 因而无校正功能，在复制新链的过程中 会发生碱基错配。 Taq DNA聚合酶在每次循环中产生的移 码突变率为1/30000，碱基替换率为 1/8000。
扩增失败
试剂错加或漏加 实验中如发现对照样本也扩增失败，可用原试剂 重复一次，以确定试剂是否错加或漏加。 试剂失效 变性温度偏低 有些 DNA 所含 G 、 C 碱基对丰富，当变性温度偏低 时，双链DNA不能完全解链。 退火温度偏高
MLPA 技术简介
MLPA
Multiplex ligation-dependent probe amplification 链接依赖型多探针扩增技术 最早由荷兰人Schouten JP (Schouten JP et al, 2002) 在原有PCR技术上发展出来
MLPA
技 术 原 理
MLPA方法检测DMD
间接分析法： PCR-STR连锁分析：基因大；在已知致病基因编码区未检测 到突变的家系
1. 脊髓小脑性共济失调
脊髓小脑性共济失调是遗传性共济失调的主要 类型，包括SCA1－27。成年期发病、常染色体 显性遗传及共济失调等是本病的共同特征，并 表现在连续数代中发病年龄提前和病情加重（ 遗传早现）。 SCA3是我国最常见的脊髓小脑性共济失调亚型 ，基因位于14q24..3－32，含4个外显子。CAG 突变位于4号外显子，患者扩增拷贝数为61－ 89，正常人为12－41。
直接基因突变分析： 适于散发病例和小家系病例。具有结 果判读的不确定性 连锁分析: 适于分析在已知致病基因编码区未检 测到突变的较大家系，不适于散发病例 和小家系病例
49
PCR-测序分析
在PKD1外显子编码序列上发现无义突变，使 突变碱基所在密码子由CGA变为终止密码子 TGA。
连 锁 分 析 结 果
应用PCR-RFLP技术分析脊肌萎缩症（SMA） 致病基因SMN
PCR扩增SMN基因 exon7,DraI酶切 PCR产物. 酶切N：正常人 PCR产物被酶切为 两条带 酶切P：阳性对照 PCR产物被酶切为 一条短带
病人1：结果显示 SMN基因有突变
病人2和3：结果 显示未有突变
3. 腓骨肌萎缩症(CMT)
T G G Val T C T Ser C A C Leu T G T Stop A A C C G
连锁分析
利用被定位的基因与在同一染色体
上另一遗传座位相连锁的特点，将该基
因定位在某一染色体或染色体某一区带
上。
常见遗传标记
DNA STR SNP
PCR-STR连锁分析
Primer 1
CA CA
3个步骤作为PCR的一个循环，每当完成一个循 环，一个分子的模板被复制为二个，产物量以 指数形式增长。
3’ 5’
5’ 3’
d.NTPs
引物
耐热DNA聚合酶
添加反应混合液 及样本
加入试管中
变性
退火
3’
5’
5’
3’
延伸
3’
Taq Taq
5’
5’
3’
继续延伸
3’
Taq 5’ Taq
3’
循环
3’ 3’ 3’ 3’
前突变
CGG 55-200 全突变 CGG >200
Southern杂交法诊断Fragile X
F: Fully expanded and methylated NM: Methylated X do not cut with EclXI P: Unmethylated premutation N: X in normal male and active normal female
聚合酶链式反应（PCR）
Mullis F
"for his invention of the polymerase chain reaction (PCR) method"