白酒中氰化物测定方法的探讨
白酒中微量氰化物的测定方法的改进
液枪 分别 吸取其溶液 ０ ｍＩ 、 ０ ． ５ ｍＩ 、 １ ． Ｏ ｍＩ 、 １ ． ５ ｍＩ 、 ２ ． Ｏ ｍｌ 于 １ ０ ｍｌ 的 比色管 中 ， 然后 加 ２ ｇ ／ Ｉ 的氢 氧 化钠 溶 液至 ５ ｍｌ ， 充
分 混合均 匀。
样 品 国标法 本法 加入量 测得总值 回收率 （ ％）
２． ０ ３ ３ ０ ． ３ ７ ２
９ ９． ７ １ Ｏ ０ ． １
９ ９． ６ ９ ２ ． ９
Ｏ ． ５ Ｏ ５ １ ． ０ ２ ８ ０ ０ ． ３ ０
Ｏ． ５ ０ ６ １ ． ２ ９ ８ ０ ． ０１ ０． ７ ０ １ ． ０ Ｏ
１ ｏ ． ５ ５ ２ ０ ０ ． ５ ０
１ ． ０ ０ ２ ２ ． ５ １ Ｏ ０． ０ ７ １ ． ５ ０
０． ４ ９
０ ． ９ ７ ９ １ ． ５ ９ ８ ８
９ ８ Ｏ
９ ７ ． ９ １ ０ １ ． ８
２ ． ４ ． ２ 样 品的处理。 取 １ ｍＩ 的 白酒酒样于 １ Ｏ ｍｌ 的具 塞
比色管中加氢氧化钠溶液（ ２ ｇ ／ Ｉ ） 到５ ｍＩ ， 放置碱解 １ ０ ｍｉ ｎ 。 ２ ． ４ ． ３溶液的 Ｐ Ｈ值 的调 节 。在 标准 样 管和 白酒 样 品 管 中依 次加 入两 滴 酚 酞指 示 剂 ， 然后加 入 乙酸 （ １ ＋ ６） 直 至 红 色褪 去 ， 用２ ０ ｇ ／ ｌ 的氢氧 化钠 溶液调 至 微红 色啕 。 ２ 。 ４ ． ４ 显色和测定。对中依次加入磷酸盐缓冲溶液 ２ ｍＩ （ 如 果 室温低 于 ２ Ｏ ℃， 需将 标准 样 管和 白酒 样 品 管放 入 恒 温水 浴 锅 中 ， 在温度 ２ ７ ℃水浴 １ ０ ｍｉ ｎ） ， 然 后 用 移 液 枪 （ ２ ０ — ２ ０ ０ ｕ １ ） ￣ Ｉ 入 氯胺 Ｔ溶 液 （ １ Ｏ ｇ ／ ｉ ） ０ ． ２ ｍｆ ， 充 分 混 匀 后 静 置３ ｍｉ ｎ ， 再加 入 异烟酸 一 吡唑啉 酮 溶液 ２ ． ０ ｍｌ ， 加 水稀 释
酒中氰化物的测定
酒中氰化物的测定
1.检测意义：酒中的氰化物来源于异常酿酒原材料的混入或污染以及投毒等。
2.适用范围：本方法适用于蒸馏酒或配制酒中氰化物的快速检测。
检出限0.1mg/L。
3.操作方法：取酒样1ml加入到装有固体试剂的大试管中，振摇使试剂溶解，将小试管中的试剂倒入到大试管中，振摇使试剂溶解，1～3分钟内观察试管溶液颜色变化（时间长了红色会逐渐变为蓝色）并与对照色卡比对，找到相同或相近的色阶，读取
色阶上标示的氰化物的含量mg/L。
4.结果计算：酒中氰化物的限量标准是以百分百乙醇（酒精）计，当读取了色阶上标示的数值后，依据样品乙醇浓度，换算出氰化物含量。
比如酒样的乙醇浓度（酒精度）为40%，读取的色阶上标示的氰化物的含量为4mg/L，换算：4mg/L÷40%=10mg/L （氰化物浓度超出了国家标准限量≤8mg/L）。
5.说明
5.1 固体试剂为饱和量，样品加入后不会全部溶解。
5.2 当显色在4mg/L以上时，应将酒样用纯净水对倍稀释后再行测试，所得结果乘以2或实际稀释倍数。
5.3 本方法为现场快速检测方法，精确定量应以国标方法为准。
5.4包装规格：装有固体试剂的1.5ml大试管和0.5ml的小试管各20只/包。
对照色卡一片。
说明书一份。
5.5试剂保存：阴凉干燥处保存，有效期见包装标示。
三种白酒中微量氰化物检测方法的比较
三种白酒中微量氰化物的检测方法的比较摘要：研究和分析了分光光度法、离子色谱法、自动顶空-气相色谱法三种测定白酒中微量氰化物的方法，比较了三种方法测定的线性相关性、方法稳定性和加标回收率。
经过实验研究表明，所建立的自动顶空-气相色谱法方法较稳定，线性相关性较好，操作简单，结果精准，适用于白酒企业大量样品中微量氰化物的日常检测。
氰化物是指带有氰离子（CN-）或氰基（-CN）的化合物，通常为人所了解的氰化物都是无机氰化物，速称山奈或山埃。
白酒中的氰化物是由含有氰糖苷的原料在发酵过程中水解产生的，其中氢氰酸（HCN）的毒性较强，最低致死量为0.05g。
目前，白酒中氰化物的检测方法较多，主要有滴定法、分光光度法、原子吸收法、荧光法、离子色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法等。
对于蒸馏酒中氰化物的测定，国家标准分析方法为GB/T 5009.48中的异烟酸-吡唑酮分光光度法，但是，在实际样品测定中出现了较多问题：在加入显色剂后，很多样品出现浑浊现象，甚至某些样品显黄绿色、黄色，引起测定结果不准确或者是无法测定，针对上述情况，我们研究了分光光度法测定白酒中氰化物的改进方法，采用强碱固定白酒中的氰化物，以异烟酸-巴比妥酸为显色剂对白酒中的氰化物进行测定。
在采用离子色谱仪测定白酒中氰化物时，发现直接对白酒稀释过滤后进样分析不可行，稀释10倍样品中目标物峰面积与稀释20倍样品中目标物峰面积不成倍数关系，针对离子色谱法中存在的问题，我们研究了碱固定法和硫酸回流法对白酒样品进行前处理。
针对白酒中微量氰化物的测定，我们还研究了自动顶空-气相色谱法，并对比分析了所建立的分光光度法、离子色谱法和自动顶空-气相色谱法，通过测定相同白酒样品中的氰化物来考察这些方法的稳定性、准确性、实用性，以为白酒中微量氰化物的测定提供参考。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂1.1.1仪器水浴锅；CARY300紫外分光光度计；戴安3000离子色谱仪；安捷伦7890气相色谱仪（带自动顶空进样器）；水浴锅；全玻蒸馏器；电炉1.1.2 标准溶液氰化物标准溶液（50mg/L，1mg/L，500μg/L）1.1.3 试剂氢氧化钠溶液（2g/L，12g/L，20g/L）；磷酸二氢钾缓冲溶液（136g/L）；氯胺T（10g/L）；磷酸溶液（v/v=1:5）异烟酸-巴比妥酸溶液：称取2.0g异烟酸、1.0g巴比妥酸，溶于100mL 12g/L 的氢氧化钠溶液中，避光低温（4℃）条件下可存放一个月。
三种白酒中微量氰化物检测方法的比较
三种白酒中微量氰化物的检测方法的比较摘要：研究和分析了分光光度法、离子色谱法、自动顶空-气相色谱法三种测定白酒中微量氰化物的方法，比较了三种方法测定的线性相关性、方法稳定性和加标回收率。
经过实验研究表明，所建立的自动顶空-气相色谱法方法较稳定，线性相关性较好，操作简单，结果精准，适用于白酒企业大量样品中微量氰化物的日常检测。
氰化物是指带有氰离子（CN-）或氰基（-CN）的化合物，通常为人所了解的氰化物都是无机氰化物，速称山奈或山埃。
白酒中的氰化物是由含有氰糖苷的原料在发酵过程中水解产生的，其中氢氰酸（HCN）的毒性较强，最低致死量为0.05g。
目前，白酒中氰化物的检测方法较多，主要有滴定法、分光光度法、原子吸收法、荧光法、离子色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法等。
对于蒸馏酒中氰化物的测定，国家标准分析方法为GB/T 5009.48中的异烟酸-吡唑酮分光光度法，但是，在实际样品测定中出现了较多问题：在加入显色剂后，很多样品出现浑浊现象，甚至某些样品显黄绿色、黄色，引起测定结果不准确或者是无法测定，针对上述情况，我们研究了分光光度法测定白酒中氰化物的改进方法，采用强碱固定白酒中的氰化物，以异烟酸-巴比妥酸为显色剂对白酒中的氰化物进行测定。
在采用离子色谱仪测定白酒中氰化物时，发现直接对白酒稀释过滤后进样分析不可行，稀释10倍样品中目标物峰面积与稀释20倍样品中目标物峰面积不成倍数关系，针对离子色谱法中存在的问题，我们研究了碱固定法和硫酸回流法对白酒样品进行前处理。
针对白酒中微量氰化物的测定，我们还研究了自动顶空-气相色谱法，并对比分析了所建立的分光光度法、离子色谱法和自动顶空-气相色谱法，通过测定相同白酒样品中的氰化物来考察这些方法的稳定性、准确性、实用性，以为白酒中微量氰化物的测定提供参考。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂1.1.1仪器水浴锅；CARY300紫外分光光度计；戴安3000离子色谱仪；安捷伦7890气相色谱仪（带自动顶空进样器）；水浴锅；全玻蒸馏器；电炉1.1.2 标准溶液氰化物标准溶液（50mg/L，1mg/L，500μg/L）1.1.3 试剂氢氧化钠溶液（2g/L，12g/L，20g/L）；磷酸二氢钾缓冲溶液（136g/L）；氯胺T（10g/L）；磷酸溶液（v/v=1:5）异烟酸-巴比妥酸溶液：称取2.0g异烟酸、1.0g巴比妥酸，溶于100mL 12g/L 的氢氧化钠溶液中，避光低温（4℃）条件下可存放一个月。
白酒中氰化物国标检验方法的验证与探讨
理论THEORY白酒中氰化物国标检验方法的验证与探讨氰化物是剧毒物质，进入机体会使细胞色素氧化酶失活，导致人体缺氧窒息。
白酒中的氰化物主要由植物原料中的氰甙类配糖体在制酒过程中经水解产生，GB2757-2012中规定其限量为8.0mg/L，饮用氰化物超标的白酒会严重危害饮酒者的生命健康。
目前，GB5009.36-2016中规定了分光光度法、气相色谱法两种氰化物定量检测方法，对于基层实验室而言，前者设备成本较低、操作简便快速。
因此，本研究对白酒中氰化物测定的分光光度法进行了验证，并探讨了实验环节中的关键点。
1. 材料与方法1.1 材料、试剂及仪器白酒（购自某超市）；氰化物标准溶液（GBW(E)080115，50μg/mL）。
氢氧化钠；酚酞指示剂；乙酸；异烟酸；吡唑啉酮；氯胺T；去离子水等。
721G可见分光光度计（上海仪电公司）；电热板；恒温水浴锅。
1.2 实验方法1.2.1 标准系列配制准确吸取1.0m L氰化物标准溶液，用氢氧化钠溶液（2g/L）定容至50mL，制得1μg/mL的标准中间液。
分别吸取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mL 上述中间液于10mL比色管中，加入氢氧化钠溶液至5mL，待处理。
1.2.2 白酒试样制备准确吸取1.0mL酒样至50mL烧杯中，加5mL氢氧化钠溶液（2g/L），放标回收率；将上述白酒试样平行测定6次，考察精密度，经计算得本方法的加标回收率在90.00%-101.33%之间，相对标准偏差RSD=1.2%。
2.3 实验室间比对试验为验证本实验方法的有效性，确保出具的数据准确可靠，本实验室与河南华测检测技术有限公司实验室进行比对试验，某批次的古月牌清香型白酒两家实验室测得氰化物含量均为0.29mg/L，比对结果满意。
2.4 实验操作关键点探讨分光光度法测定白酒中的氰化物需要将氰化物转化为氯化氰，而该过程必须在体系pH=7.0条件下进行，实验中需要两次调节pH，然而酸碱用量须少于0.8mL才能确保最后定容准确。
原子吸收石墨炉法测定白酒中的氰化物
《酿酒科技》2015年第3期127-129页原子吸收石墨炉法测定白酒中的氰化物向双全1，2张志刚1，21.甘肃省固态发酵工程技术研究中心甘肃徽县742308；2.金徽酒股份有限公司甘肃徽县742308摘要：本文通过对白酒样品进行前处理后，利用氰化物能与铜离子、CTAB生成稳定的Cu2+一CN-—CTAB三元络合物，再用正戊醇将络合物萃入有机相，用石墨炉原子吸收法测定络合物中铜的含量，间接求得氰的含量。
同时对增敏剂加入量和介质酸度的影响，以及基体和共存离子的干扰情况等进行了研究，结果显示该法检出限为0.24µg/L，样品加标准的回收率为96.4% ～103.1/%。
关键词：白酒；氰化物；络合物；石墨炉原子吸收法由于白酒中的氰化物主要来自原料，以木薯、野生植物酿制的酒，氰化物含量较高，而一般谷物原料酿制的酒，氰化物含量极微。
因原料中含有的氰苷类物质在酿制生产过程中会水解生成氢氰酸，大部分氢氰酸会在蒸煮时挥发，但任有少部分氢氰酸会馏入酒中。
氰化物为剧毒物质，对食品安全构成严重威胁，国标GB2757-2012[1]中规定了氰化物在白酒中的最大限量为8mg/L（以HCN计，按100%vol折算）。
按照GB2757-2012中氰化物测定的推荐方法GB/T 5009.48-2003[2]，实验中经过蒸馏处理后的样品任然会出现白色沉淀物质干扰氰化物的测定[1]。
白酒中氰化物测定方法有化学分析法[3]、分光光度法[4]、冷原子吸收法[5]、荧光法[6]、色谱法[7]、离子选择电极法[8]、化学发光分析法[9]、间隔流动分析法[10]。
利用石墨炉原子吸收法测定白酒中氰化物含量的报道尚未有。
石墨炉测定铜元素具有极高的准确度和灵敏的[11]，本文利用氰离子能与多种金属离子形成稳定络合物的原理，经处理后的样品与铜离子络合，再将络合物萃取到有机溶剂中，用石墨炉原子吸收法测定有机相中络合物的金属铜离子含量，间接求出氰化物的含量，该法操作简单，灵敏度高，稳定性好，选择性高，干扰小，其检出限为0.24µg/L，样品加标准的回收率为96.4% ～103.1/%，用于实际样品的分析，获得满意结果。
分光光度法测定白酒中氰化物方法的探索
氰化物属于剧毒化合物，多数为人工制造，但仍有部分存在于天然物质中，如苦杏仁、桃仁、木薯等。
固态法酿造白酒中氰化物的主要来源是原辅料中微量氰苷水解产生的HCN [2]虽然大部分氢氰酸在原料蒸煮过程中可挥发，但有少量部分残留在白酒中。
国家卫生部在GB2757-2012《食品安全国家标准蒸馏酒及其配制酒》中规定了蒸馏酒中氰化物的含量≤8.0mg/L （氰化物含量按100%vol 酒精度折算）。
测定白酒中氰化物含量的一般方法有分光光度法、顶空气相色谱法、电化学法和定性法等。
电化学法由于其他元素的影响导致准确度不高；顶空气象色谱法灵敏度较低；定性法不能用于定量检测。
鉴于此，分光光度法检测白酒中的氰化物是较好的选择。
实验利用分光光度法测定白酒中的氰化物，用氯胺T 将氰化物转化为氯化氰，再与异烟酸-吡唑啉酮作用，生成蓝色络合物。
基于紫外可见-分光光度法建立利用其吸光度值与CN -浓度之间的线性关系来测定氰化物的含量。
实验对前处理过程、氯胺T 用量、异烟酸-吡唑啉酮用量、反应时间等条件进行了探索，在最佳实验条件下，氰化物含量与吸光度值呈现良好的线性关系，方法成本低，操作简单。
1实验部分1.1试剂配制1.1.1氢氧化钠溶液（2g/L ）：称取0.1g 氢氧化钠，溶于水中，并稀释至100mL1.1.2乙酸溶液（1+24）：将乙酸和水按1∶24的体积比混匀1.1.3酚酞-乙醇指示剂（10g/L ）：称取1g 酚酞试剂，用无水乙醇溶解，并定容至100mL 1.1.4磷酸盐缓冲溶液[（0.5mol/L ）pH=7.0]：称取34g 无水磷酸二氢钾和35.5g 无水磷酸氢二钠，溶于水并稀释至1000mL1.1.5异烟酸-吡唑啉酮溶液：称取1.5g 异烟酸溶于24mL 氢氧化钠溶液（20g/L ）中，加水至100mL ，另称分光光度法测定白酒中氰化物方法的探索牛力，孙彤，杨嫄（陕西西凤酒股份有限公司，陕西凤翔721406）摘要:探索了分光光度法测定白酒中氰化物的方法。
白酒中氰化物和铅的测定
主要试剂
NaOH溶液： 2g/L；浓度不宜过高 饱和酒石酸溶液：约1.25g/mL（25℃） 酚酞-乙醇指示液：10g/L 磷酸盐缓冲溶液：0.5mol/L，pH=7.0，配制见GB/T 5009.36-2003 氯胺T溶液：配制见GB/T 5009.36-2003 现用相配 异烟酸-吡唑酮溶液：配制见GB/T 5009.36-2003 乙酸溶液：1+6 浓度不宜过低 氰化钾标准溶液：100mg/L，建议从国家标物中心购 买。
所有使用的玻璃器皿必须用20%的硝酸溶液浸泡过夜， 然后分别用自来水、蒸馏水、超纯水冲洗干净。 实验过程中，所有操作不能对试样造成污染。 环境、消解、转移定容 火焰光度计使用过程中注意排废管充分水封，防止回 火。乙炔为危险气体，使用过程中注意安全。 空压机的水分离器里是否有积水。 检查灯能量、光路系统是否正常。
X
(c1 c0 ) V 1000 m 1000
上机测定
将标准系列和样品处理液 依次上机进行测定，用标 准回归曲线定量。 计算公式：
(c1 c0 ) V 1000 X m 1000
加标回收率在97-102%。 检出限：0.1mg/kg。
注意事项
分光光度计使用的注意事项
仪器使用前必须将波长调到测定需要波长后进行预热 30min，否则仪器不稳定。 分光光度计使用中，若不进行测量打开样品池盖，让 光路关闭，延长光电倍增管的寿命。 比色皿中试液装入量应超过比色皿容量的2/3，但不宜 太满，否则溶液可能洒出污染比色池。 比色皿一定先用吸水纸吸干外壁的液体，再用擦镜纸 将透光面擦拭干净。 比色皿放入比色池，应该让光面对着光路。 比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不 能用毛刷清洗。
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白酒中氰化物测定方法的探讨
随着今年出现的白酒中氰化物超标的事件的出现，白酒中氰化物的检测成为各大酒厂和主管部门的当务之急。
本文中主要介绍了利用紫外可见分光光度计检测白酒中氰化物的方法的改进和探讨。
在本方法的实验中相关性系数=0.9998，回收率93%-110%。
标签：白酒氰化物紫外可见分光光度计
1 概述
食品安全是国家和公众近年来普遍关注的问题，氰化物是严重危害食品安全剧毒化合物。
因此氰化物是酒类的一项重要食品安全检测指标。
由于白酒中的氰化物主要来自原料，以木薯和木薯类粮食酿造的酒，因它们含有氰苷类在生产过程中会水解生产氢氰酸。
虽然大部分氢氰酸在原料蒸煮时可挥发，但有少量部分残留在酒中。
因为氰化物剧毒，所以我国在相应的国标GB2757-1981[1]中规定了白酒中的限量。
我国规定了以木薯为原料的酒中氰化物的含量≤5mg/l，以代用品为原料的酒中氰化物的含量2mg/l。
国标GB5009.48-2003[2]规定了蒸馏酒与配制酒卫生标准的检测方法，但是该方法中由于对化学试剂的用量和浓度有明确的限制，在调节溶液的PH值只有0.8ml的量，这样在做实验的会很容易超出10ml。
同时在实验中样品中加入异烟酸-吡唑啉酮溶液时会出现白色浑浊现象，干扰测定样品中氰化物的浓度。
经过查找相关的资料知道干扰物质是醛、高级醇等物质。
2 实验部分
2.1 仪器和试剂
2.2 實验方法
2.2.1 样品的前处理
如果白酒样品浑浊或有色按照文献[2]进行脱色，取2ml的滤出液于10ml的具塞比色管中，加氢氧化钠（2g/l）至5ml，然后放置10分钟。
正常的白酒样品直接吸取1ml于10ml的具塞比色管中，加氢氧化钠（2g/l）至5ml，然后放置10分钟。
2.2.2 氰化物标准样管的制作
用移液枪吸取1.0ml于50ml的容量瓶中，加2g/l的氢氧化钠溶液至100ml，充分混匀。
然后分别用移液枪吸取其溶液0ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml 于10ml的比色管中，然后加2g/l的氢氧化钠溶液至5ml，充分混匀。
2.2.3 溶液的PH值的调节
于样品管和标准管中分别加入2滴酚酞指示剂，然后加入乙酸（1+6）调至红色褪去，后用氢氧化钠溶液（20g/l）调至进红色。
2.2.4 显色和测定
然后加入2 ml磷酸盐缓冲溶液（如果室温低于20℃即放入25℃-30℃水浴中10min），再用移液枪加入0.2ml氯胺T溶液（10g/l），摇匀放置3min，加入2.0ml异烟酸-吡唑啉酮溶液，加水稀释至刻度，摇匀，在25℃-30℃放置30min，取出（如果样品出现白色的浑浊现象，就利用5ml的一次性针筒注射器和直径13mm孔径0.22μm的一次性针筒过滤器对氰化物的标样和样品全部过滤）后用1cm石英比色皿以空白标准试样调节零点，后于波长638nm处测5中不同浓度的标准溶液与空白溶液的绝对吸光度。
仪器将自动绘制标准曲线。
最后测量样品
中氰化物的含量。
3 实验的结果
3.1 标准样品标准曲线
在本实验中，标准曲线图的吸光度和浓度的关系式为Abs=K1*（C）+K0 其中K0=0.00022 K1= 0.23293
相关性系数r=0.9998
通过实验可以看出，相关性系数r= 0.9998，这说明标准曲线有很好的准确性。
3.2 加标回收实验
为了检验标准曲线的准确性，对样品做了加标回收实验。
从市场随机购买酒样，取0.9ml置于10ml具塞比色管中（氰化物的含量为0.210微克），利用移液枪加入氰化物的标准样0.1ml（氰化物的含量为0.1微克）。
从加标回收实验中可以看出，回收率在93%-110%之间，实验的有很好的回收率，这说明标准曲线有很好的准确性。
4 讨论
4.1 溶液的PH值调节
国标GB5009.48-2003中规定了用乙酸（1+6）调至红色褪去，后用氢氧化钠溶液（2g/l）调至进红色，由于氢氧化钠的浓度比较低，在现实的实验中调节PH 值中不容易控制，时常出现最终溶液不能控制在10ml以内，无法比较的现象。
本方法中用氢氧化钠溶液（20ml/l）这样最终溶液的体积很容易控制在10ml以内。
4.2 样品白色浑浊的处理
在实验中样品中加入异烟酸-吡唑啉酮溶液时会出现白色浑浊现象，对于这种现象，实际是白酒中醛、高级醇等物质与异烟酸-吡唑啉酮溶液反应出现白色的浑浊物质。
在本文中我们利用5ml的一次性针筒注射器和直径13mm孔径0.22μm的一次性针筒过滤器对氰化物的标样和样品全部过滤，从而达到对白色浑浊的处理的作用。
参考文献：
[1]GB2757-81.蒸馏酒及配制酒的卫生标准[S].1982.
[2]GB5009.48-2003蒸馏酒与配制酒卫生标准的分析方法[S].2004.
穆道莉（1963-），女，安徽阜阳人，从事白酒检测20多年。
魏云（1982-），男，安徽阜阳人，从事多年白酒检验。