实验三 坐骨神经腓肠肌标本制备
坐骨神经—腓肠肌标本的制备
实验名称：坐骨神经—腓肠肌标本的制备一、实验目的学习坐骨神经—腓肠肌标本的制备方法，掌握基本操作技术。
二、实验原理1、牛蛙作为实验动物的优势容易饲养，产量丰富价格便宜，性价比高。
蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与哺乳动物相似，如神经的生物电活动、肌肉收缩等。
牛蛙是哺乳动物的理想替代品。
牛蛙的离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握。
在任氏液的浸润下神经肌肉标本可较长时间保持生理活性。
2、使用锌铜弓检验标本活性的原理锌铜弓是把一根锌棒和一根铜棒一端焊在一起，另一端分开。
锌的金属电势比铜低，形成一定的电势差（就相当于有电压）。
细胞的静息膜电位为外正内负，电刺激可改变可兴奋细胞的膜电位差。
膜电位减小时，细胞去极化。
细胞兴奋，膜电位增大时，细胞超极化，细胞兴奋性被抑制。
当用锌铜弓接触标本时，可产生沿锌片—活组织—铜片流向的电流对细胞产生刺激效应。
引起标本局部去极化，引发动作电位，肌肉收缩。
三、实验器材1、实验动物：牛蛙。
2、实验器材：任氏液，蛙类手术器械一套，大头针，锌铜弓。
四、实验流程和步骤1、实验流程洗干净实验动物→毁髓→剥制后肢→分离两后肢→分离坐骨神经→游离腓肠肌→分离股骨头→标本检验2、实验方法与步骤（1）毁髓：一只手握住牛蛙，使其背部向上。
用拇指压住牛蛙背部，食指压其头部前端，另一只手持毁髓。
用解剖针从蛙的枕骨大孔（把头抬起来时凹陷的部位或者脊柱与头骨的中心点）插入向前搅动后再向后搅动，直至毁髓成功（蛙的四肢自然下垂，瘫软无力）。
（2）剥制后肢标本：轻提双毁髓蛙，自背面耻骨联合上方约 1 公分处用粗剪刀横向剪断脊柱。
轻轻托起后肢，看清坐骨神经位置。
沿脊柱两侧横向切口剪断体壁、去除断口以上肢体和内脏放入污物缸。
剥去后肢皮肤后放入任氏液中备用。
（3）分离两后肢：用粗剪刀纵向剪开脊柱，并剪断两后肢相连的肌肉。
一只用于剥制标本，另一只放入任氏液中保存。
（4）分离坐骨神经、将后肢二标本脊柱端腹面向上、趾端向外侧用蛙钉将标本固定在蛙板上。
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论一、实验目的二、实验原理三、实验步骤四、实验结果五、实验结论一、实验目的本次实验的主要目的是通过坐骨神经腓肠肌标本制备，了解人体肌肉组织的结构和特点。
同时，通过对标本制备过程中各个步骤的操作，掌握标本制备技能和方法。
二、实验原理1. 坐骨神经腓肠肌标本制备原理坐骨神经腓肠肌标本制备是指将动物或人体组织切割成薄片并进行染色处理，使其能够在显微镜下观察。
在这个过程中，需要进行以下几个步骤：（1）取样：从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
（2）固定：将组织样品放入固定液中进行固定处理。
（3）包埋：将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理。
（4）切片：将包埋后的组织样品切成薄片。
（5）染色：将切片进行染色处理，使其能够在显微镜下观察。
2. 坐骨神经腓肠肌结构原理坐骨神经腓肠肌是人体下肢的一部分，由坐骨神经支配。
它主要由三个部分组成：大腿后侧的半膜状肌、半腱状肌和小腿后侧的胫长伸肌。
这三个部分都是由肌纤维束组成的，每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
三、实验步骤1. 取样：从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
2. 固定：将组织样品放入10%福尔马林液中进行固定处理，固定时间为24小时。
3. 包埋：将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理，包埋时间为48小时。
4. 切片：将包埋后的组织样品切成厚度为5微米左右的薄片。
5. 染色：将切片进行染色处理，常用染色方法有HE染色法和Masson染色法等。
本次实验采用HE染色法进行染色处理。
6. 封片：将染好色的切片放入玻璃片上，加上封片胶，用玻璃片盖住，使其能够在显微镜下观察。
四、实验结果经过以上步骤的操作，制备出了坐骨神经腓肠肌标本。
在显微镜下观察到了肌纤维束组成的三个部分：半膜状肌、半腱状肌和胫长伸肌。
每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
五、实验结论通过本次实验，我们了解到了坐骨神经腓肠肌标本制备的基本步骤和操作方法，并且通过观察标本结构，掌握了人体肌肉组织的结构和特点。
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
本实验旨在通过制备坐骨神经腓肠肌标本的过程，掌握基础的组织学实验技能，同时加深对神经肌肉解剖结构的理解。
材料与方法：
材料：成年大鼠标本、无水乙醇、石蜡、光学显微镜、麻醉手套、组织取样器、组织取样盒、理化试管架等。
1.准备标本
用麻醉手套将成年大鼠净化神经集中于坐骨神经下1-2厘米范围内，然后将腓肠肌标本从骨骼中取出。
2.固定标本
将取出的腓肠肌标本置于10%的无水乙醇中固定24小时；
3.去水
从10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%到80%的无水乙醇渐次去除，每步时间为1小时；
4.透明
将固定去水的腓肠肌标本分别置于50%敌敌畏-乙醇溶液、70% 敌敌畏-乙醇溶液和100% 敌敌畏透明液溶液中，每步时间为2小时，至标本彻底透明。
5.包埋
取出已透明的腓肠肌标本，置于石蜡组织取样盒中，根据实验需求，选择合适的包埋方向。
6.取薄片
将石蜡包埋的腓肠肌标本取出，用微型切片机切制厚度为5微米的切片，将切片拉直后在干净的水晶片上展开。
7.染色与制成玻片
用哈里斯血液染色将切片染色，脱色后洗净水片后，在水晶片上滴几滴覆盖剂，然后用平凡玻片将组织接口反过来盖住薄片，压紧即可。
实验成果：
经过制备和染色后，我们取得了成年大鼠坐骨神经腓肠肌的标本，通过光学显微镜的观察与检测，我们发现该标本包含完整的腓肠肌结构及肌纤维分离范围。
切片上清晰可见腓肠肌内有明显的核团和细胞质呈透明状，同时染色后肌纤维呈现出红色，血管呈现出蓝色，系统性地展示了腓肠肌肌纤维和血管位置的分布情况。
结论与意义：。
坐骨神经-腓肠肌标本的制备
8、检验标本
01.
用经任氏液蘸湿的锌铜弓的两极，接触 神经，观察腓肠肌是否收缩！
02.
此标本用于神经干兴奋传导、神经-肌肉 接点的传递以及骨骼肌收缩等实验研究
பைடு நூலகம்意：
1. 保护标本——神经和肌肉：不用赃的皮肤碰标 本，不用自来水冲洗标本，不用金属接触神经以 及损伤肌肉。
2. 注意标本的完整，尤其注意保存股骨头一定的长 度
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坐骨神经——腓 肠肌标本的制备
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• • 方法
目的要求： 学习蛙类动物毁髓的方法 学习掌握蛙类腓肠肌及坐骨神经——腓肠肌标本的制备
步骤：
双毁髓
剥离后肢标本
分离两后肢
分离坐骨神经
分离股骨头
游离腓肠肌
检验标本
完整的神经肌肉标本应包括以下几个部分
1、首先准备手术所需的用品
动物瘫软如泥。
3、剥离后肢标本
动物腹面向上放置于蜡盘，手术镊轻轻提 起耻骨联合上方，剪开皮肤，再剪开体壁 肌肉，然后轻轻提起内脏，自耻骨部剪断 （勿伤脊神经），把内脏拨向头端，剪断 脊柱。然后一手捏住脊柱后端，另一手向 后撕剥皮肤，并除去头端肢体和内脏
4、分离两后肢
把去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上， 于耻骨联合处按压刀刃，切开耻骨联合。 然后用金冠剪剪开两后肢相连的肌肉， 并纵向剪开脊柱。
5、分离坐骨神经
将一侧后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外 侧翻转，使其足底向上，用固定针将标本 固定在玻璃板下面的蛙板上。用玻璃分针 分离坐骨神经。股部的坐骨神经在股二头 肌与半膜肌之间。
6、分离股骨头或胫腓骨头
动物小，留股骨头 1cm
动物大，留胫腓骨 头1cm
7、游离腓肠肌
生理实验：实验三 蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本制备及骨骼肌收缩性质观察
实验材料
1、实验动物（laboratory animal) • 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，Zhuoshan Toad）
2、药品(drug) • 任氏液
• 任氏液由无机盐和蒸馏水配置而成，每 升溶液含NaCl 6.5g、KCl 0.14g、CaCl2 0.12g,、NaHCO3 0.20g、NaH2PO4 0.01g。 任氏液的理化特性与蛙的组织液近似。 可用于蛙的组织、器官润湿和营养。
动作电位以局部电流的形式传导
实验原理
-动作电位传导速度的测定
刺激器
输入通道
+－
R1- Rr1+ R2- R2+
S
Δt
传导速度测定 υ= SAC
Δt
实验步骤
1、制备坐骨神经干
1
• 蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上，剪去
尾椎；
• 标本腹面向上，用玻璃分针分离脊柱
两侧神经丛，用线在近脊柱处结扎，
剪断神经；
• 将神经干从腹面移向背面。标本背面
刺激神经使神经细胞产生兴奋兴奋延神经纤维传到通过神经肌接头的化学传递使肌肉终板膜上产生终板电位终板电位可引起肌肉产生兴奋即动作电位传遍整个肌纤维再通过兴奋收缩偶联使肌纤维中粗细肌丝产生相对滑动宏观上表现为肌肉收缩
实验三 蟾蜍坐骨神经-腓 肠肌标本制备及骨骼肌收
缩性质观察
实验目的
• 掌握制备具有正常收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠 肌标本的基本操作技术。掌握蛙类手术器械的使 用方法，制备完好的坐骨神经-腓肠肌标本。
向上固定，从大腿至跟腱分离坐骨神 经。坐骨神经标本置任氏液中备用。
2
3
实验步骤
2、仪器连接和参数
• 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、 2通道。 开机，选择实验-肌肉神经-神经干兴奋传导速度测 定。仪器参数：1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3KHz、 灵敏度5mV，采样频率：100KHz，扫描速度：0.2ms/div。 单刺激激方式，刺激幅度1.0V，刺激波宽0.1ms，延迟1ms， 同步触发。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
使用轮转式切片机将组织切成薄片，调整切片厚度以满足实验要求。
染色
染色液选择
根据实验需要选择适当的染色液，如苏木素-伊红染色液 （H&E）、Masson三色染色液等。
染色过程
将切片放入染色液中，按照染色液的要求进行染色处理，以 便更好地观察组织结构和细胞形态。
03 结果观察
显微镜观察
观察神经纤维的排列和结构
结果对比
结果解释
02
03
Байду номын сангаас
结果应用
将实验结果与预期结果进行了对 比，分析了实验误差产生的原因。
对实验结果进行了详细的解释， 阐明了实验现象背后的原理和机 制。
探讨了实验结果在现实生活和生 产中的应用前景，为后续研究和 应用提供了参考。
实验改进与优化
实验方法优化
针对实验过程中存在的问题和不足，提出了 改进措施和方法，以提高实验效率和准确性 。
实验设备升级
针对实验设备的局限性和不足，提出了设备升级和 改进的建议，以提高设备的性能和稳定性。
实验流程完善
针对实验流程的缺陷和不足，提出了完善和 优化的建议，以使实验流程更加合理和高效 。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
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02 实验步骤
取材
取材前准备
01
确保实验环境清洁，准备好所需器材和试剂，如手术刀、镊子、
固定液、脱水剂、包埋剂等。
选取适宜的坐骨神经-腓肠肌标本
02
选择健康、新鲜的动物，如小白鼠或大白鼠，并确保所选标本
无病变或损伤。
剥离组织
03
使用手术刀和镊子仔细剥离坐骨神经和腓肠肌周围的脂肪和结
生理学实验——坐骨神经-腓肠肌标本制备
4、分离坐骨神经：
将一侧后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外侧翻转，使其足底向上，用固 定针将标本固定在蛙板上。用玻璃分针在半膜肌和股二头肌之间分离出坐骨 神经。注意分离时要仔细用剪刀剪断坐骨神经的分支，勿伤神经干，前面分 离至脊柱坐骨神经丛基部，向下分离至腘窝。保留与坐骨神经相连的一小块 脊柱，将分离出来的坐骨神经搭于腓肠肌上，或放于蛙板上。
注意事项
1.破坏脑、脊髓要完全，以蟾蜍四肢松弛、无自发运动为准。 2.制作标本过程中，应经常用任氏液湿润标本，以防标本干 燥，丧失活性。 3.分离神经须用玻璃分针，不可用金属器械，操作过程中应 避免过度牵拉及损伤神经。 4.股骨保留不可过短，否则标本不易固定。
思考题
神经上的兴奋如何传递给骨骼肌的？试述其过程及特点。
基本要求
实验准备：穿隔离衣、戴手套、携带实验指导和实验报 告纸 实验分组：按分组名单分组并确定组长 实验报告：认真书写，按时完成，下次实验上课上交 卫生打扫：清洗器械及实验台，打扫实验室卫生、
垃圾分类处理
实验报3.实验原理 4.实验步骤 5.实验结果：按实验项目逐一描述，利用图表展示具体数据 6.结果分析：就实验结果进行分析与讨论 7.思考题
5、分离股骨头：
去除膝关节周围以上的全部大腿肌肉，用剪刀刮净股骨上附着的肌肉， 保留约1cm的股骨。
6、游离腓肠肌：在腓肠肌的跟腱处穿线结扎，在结扎处远端剪断并
游离腓肠肌至膝关节处，最后在膝关节处剪断。完成坐骨神经支配的腓肠肌 标本。
7、检验标本活性：用经任氏液蘸湿的锌铜弓的两极，接触神经，观
察腓肠肌是否收缩。
2、剪除躯干上部及内脏：
在骶髂关节上约1cm处用粗剪刀剪断脊柱，将头、前肢和内脏一并弃 去，仅保存一段脊柱和后肢。脊柱的两旁可见坐骨神经丛。
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论【知乎文章格式】坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论1. 引言坐骨神经腓肠肌标本制备是生物学研究中常用的重要实验之一。
通过掌握该实验的结果和结论，我们可以更好地理解腓肠肌的结构与功能，以及与坐骨神经的关系。
本文将对坐骨神经腓肠肌标本制备实验的结论进行深入探讨，并分享我对该实验的观点和理解。
2. 实验方法回顾在进行坐骨神经腓肠肌标本制备实验前，我们需要准备一具成年小鼠标本。
将小鼠安乐死并取出下肢部分。
根据实验设计的要求，切割开腓肠肌，暴露坐骨神经。
接下来，将坐骨神经和腓肠肌分离，并制备成适当大小的标本。
可选地对标本进行染色或其他后续处理。
3. 实验结论通过坐骨神经腓肠肌标本制备实验，我们可以得出以下结论：3.1. 标本制备的合理性在进行标本制备实验时，需要确保充分保留腓肠肌和坐骨神经的完整性。
只有在标本保持完整的前提下，才能准确观察和研究腓肠肌的结构和功能。
在实验中应尽量避免对标本进行过多的切割和处理。
3.2. 标本观察结果标本制备实验的观察结果显示，腓肠肌呈细长的形态，由多束肌纤维组成。
坐骨神经与腓肠肌相连接，通过神经末梢向肌纤维传递信号。
腓肠肌标本的形态和结构对进一步研究其功能提供了必要的基础。
3.3. 实验注意事项在进行坐骨神经腓肠肌标本制备实验过程中，有几个重要的注意事项需要考虑。
实验操作应细致谨慎，以免对标本造成破坏。
在标本制备过程中，应避免应力过大或过度牵拉，以免影响标本的完整性。
在实验时还需要注意保持实验环境的卫生和洁净，以减少污染对实验结果的干扰。
4. 我的观点和理解在我看来，坐骨神经腓肠肌标本制备实验是一项重要且有意义的研究方法。
通过观察和研究标本，我们可以更全面地了解腓肠肌的结构特点和功能特性，为进一步深入研究提供必要的基础。
我认为在进行标本制备实验时，我们应注重细节和准确性。
只有确保标本的完整性和质量，才能得到可靠的实验结果。
注意实验操作中的细致和规范，可以减少人为因素对实验结果的影响。
实验三 蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制备
用蛙针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，再向前伸入颅腔，捣毁脑；
向44、、后有 有插时时入标标椎住本本管兴兴，断奋奋3捣性性、端毁过过脊去边高高髓，，皮。缘可可放放：皮置置先２２肤００剪，mmiinn去向待待其其肛下稳 稳门定定剥后后周掉再再 围全皮部肤后，肢然皮后肤用。左标手本捏放住入脊盛柱有断林端格，液右的手小捏烧 两2、栖剪类除手躯术杯干器上械中部，及，培内养将脏皿：，手在任腋及氏部液用用，铁棉过剪刀的剪断器脊械柱，、将头蛙、板前肢洗和内净脏，一并以弃去免，皮仅保肤存一分段泌脊柱物和后污肢染。 神经-肌肉 标本。 5、游离坐骨神经：用玻璃分针在半膜肌和股二头肌之间分离出坐骨神经。 熟神悉经并 干掌，握又蟾要蜍避4坐免、骨金神属分经器离－械腓对标肠神肌经本标的为本不的必两制要备触部碰分。 ：沿脊柱正中线将标本均匀地分成左右两半， 神肉经，干 防，止又干分要燥避。别免作金属进器械一对步神经剥的不制必。要触碰。 322、、、避 游 游免离离蟾神神神蜍经经皮时时经肤，，5分切切、。泌勿勿游注物用用和玻玻离意血璃璃液分分坐分等针针骨污逆逆离染向向神时标剥剥本离离经要，，，：也以以仔不防防用细能损损用伤伤玻用璃剪分刀针剪在断半坐膜骨肌神和经股的二分头支肌，之勿间伤分神离经出干坐，骨前 4蛙、类有一时些标基面本本兴生分奋命性离活过动至高和，生脊可理放柱功置能２坐与０恒骨m温in神动待物其经相稳似定丛，后基其再离部体组，织向器官下所需分的离生活至条件膝比关较简节单，。并保且易留于控与制坐和掌骨握，神因经此在相生理试
线，玻璃分针，解剖盘，剪刀
2或、把剪铁除剪躯刀干插上入部6口及、裂内，分脏沿：离两在眼腋腓后部缘肠用剪铁肌去剪头刀：，剪再在断以脊跟蛙柱针，腱捣将毁上头脊、扎髓前。肢牢和一内脏线一并，弃提去，起仅保结存线一段，脊柱剪和断后肢结。 扎线外的跟 1、破坏脑腱脊髓，：左游手离持蛙腓，用肠食指肌下至压吻膝端，关拇节指按处压背，部将，使膝蛙头关前节俯；以下小腿其余部分全部剪去。至 此，标本制成。 3、去皮：先剪去肛门周围皮肤，然后用左手捏住脊柱断端，右手捏住断端边缘皮肤，向下剥掉全部后肢皮肤。
坐骨神经腓肠肌标本制备实验原理
坐骨神经腓肠肌标本制备实验原理下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
三、动物与器材
蟾蜍、常用手术器械、蜡盘、蛙板、玻 璃针、固定针、锌铜弓或电刺激器、培 养皿、滴管、纱布、粗棉线、任氏液
四、方法与步骤
［方法与步骤］ 1、双毁髓的方法 2、剥制后肢标本 3、分离两后肢 4、分离坐骨神经 5、分离股骨头 6、游离腓肠肌 7、检验标本
毁髓1 坐骨神经——腓肠肌标本2 坐骨神经——腓肠肌标本3 坐骨神经——腓肠肌标本4 坐骨神经——腓肠肌标本5
实验三坐骨神经—腓肠机标本的制 备）
一、目的要求
1.学习破坏蟾蜍脑和脊髓的方法. 2.熟悉并掌握蟾坐骨神经－腓肠肌标 本的制备
二、基本原理
腓肠肌由许多肌纤维组成，当刺激支配腓肠肌 的坐骨神经时，不同的刺激强度会引起肌肉的 不同反应，当使用阈下刺激时，不引起肌肉发 生收缩反应，而阈刺激可引起少数肌纤维发生 反应，顶刺激引起所有肌纤维发生反应，一次 单收缩可分为潜伏期，缩短期和舒张期三个时 期。当同等强度的连续阈上刺激作用时，出现 多个收缩反应的融合，称为强直收缩。
五、注意事项
1.标本不能用自来水冲洗，也不能用金 属器械碰压 2.连续刺激时间不宜过长 3.标本固定不要过度牵拉
六、作业和思考
1．如何保持标本在实验中机能正常 2．何为标本的最适刺激强度 3．实验结果说明骨骼肌有哪些生理特性 4．分析讨论肌肉发生收缩总和的条件和 机制 5．分析讨论不完全强直收缩和完全强直 收缩的条件和机制