流式细胞仪小结
【流式细胞仪】流式细胞仪四个常见问题
【流式细胞仪】流式细胞仪四个常见问题1.流式细胞仪日常使用规范流式细胞仪是一种对细胞进行自动分析和分选的装置，依据参数测量原理工作。
流式细胞仪紧要由流动室和液流系统、激光源和光学系统、光电管和检测系统、计算机和分析系统4部分构成，目前在生物医疗领域有广泛运用，紧要用于分析细胞表面标志、分析细胞受体、分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量、分析免疫细胞的功能。
由于流式细胞仪比较昂贵且精密，为了确保不由于使用不当就很简单使液流部位出问题。
1.一般来说，需要使用的所用溶液都应当进行过滤处理，此外样本在上机前也要过滤，这么做事为了避开设备长时间使用时显现沉淀物而堵塞喷嘴；2. 开机后检测样本前，要用prime机检查喷嘴的畅通情形；3. 每日关机前移开托臂，用3～4管10%次氯酸钠反复冲洗，不要让有堵塞的喷嘴带病运行，使用经过滤处理的H2O或PBS冲洗后才关机；4. 每天要倒空废液瓶内的废液，再注入少量的次氯酸钠或消佳净溶液，以防细菌生长；5. 鞘液瓶内的液体加至4/5容量并放置一夜，防止新加入的液体有气泡产生而影响检测结果。
2.巴玖讲解流式细胞仪的基本结构流式细胞计的基本结构流式细胞计紧要由四部分构成。
它们是：流动室和液流系统；激光源和光学系统；光电管和检测系统；计算机和分析系统。
（1）流动室和液流系统：流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等构成，常用光学玻璃、石英等透亮、稳定的材料制作。
设计和制作均很精细，是液流系统的心脏。
样品管贮放样品，单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出；鞘液由鞘液管从四周流向喷孔，包围在样品外周后从喷嘴射出。
为了保证液流是稳液，一般限制液流速度10m/s。
由于鞘液的作用，被检测细胞被限制在液流的轴线上。
流动室上装有压电晶体，受到振荡信号可发生振动。
（2）激光源和光学系统：经特异荧光染色的细胞需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。
常用的光源有弧光灯和激光；激光器又以氩离子激光器为普遍，也有配和氪离子激光器或染料激光器。
流式细胞仪实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除流式细胞仪实验报告篇一：流式细胞术实验报告流式细胞术实验目的掌握流式细胞仪的工作原理掌握用流式细胞仪测量细胞群体DnA含量分布的方法了解流式细胞术在细胞生物学研究中的应用实验原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。
在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。
通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测，得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其体积、内部结构、Dn(:流式细胞仪实验报告)A、RnA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。
细胞内的DnA含量随细胞周期进程发生周期性变化，如g0/g1期的DnA含量为2c，而g2期的DnA含量是4c。
利用pI标记的方法，通过流式细胞仪对细胞内DnA的相对含量进行测定，可分析细胞周期各时相的百分比。
仪器、材料与试剂仪器：流式细胞仪、离心机。
材料：hela细胞样品、试管、离心管、封口膜、微量移液器、Tip头、eppendorf管。
试剂：70％乙醇（保存于4℃），Rnase（-20℃保存），pI染液（避光保存于-20℃），pbs(ph7.4，保存于4℃)实验步骤样品细胞由老师于课前收集并置于70%(预冷)乙醇中4℃下固定过夜。
2000rpm15min收集固定细胞，pbs洗2次。
用100μLpbs重悬细胞并转至试管中轻轻吹打（防止细胞破碎）。
加pI染液50μL和Rnase约2μL室温放置15min。
上机检测。
样品测定并使用modFitLT软件分析结果。
实验结果与讨论:所测样品中各周期时相的百分比：g1期68.48%g2/m期16.63%s期14.89%g2：g1=1:1.77cV12.16提示结果可能不可靠或存在多倍体细胞。
流式细胞术是一种对悬液中细胞、微生物或细胞器等进行单个快速识别、分析和分离的技术。
用以分析细胞大小、细胞周期、DnA含量、细胞表面分子以及进行细胞分选等。
这种技术具有以下特点1.测量速度快；2.可进行多参数测量；3.是一门综合性的高科技方法（Fcm综合了光学，电子学，流体力学，细胞化学，免疫学，激光和计算机等多门学科和技术）；4.既是细胞分析技术，又是精确的分选技术。
流式细胞仪结果分析
流式流式细胞仪仪
流式细胞仪 流式细胞仪 流式细胞仪
流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞
分析仪，是在单个细胞分析和分选基础上发展起来
的对细胞的物理或化学性质（如大小、内部结构、
DNA、RNA、蛋白质、抗原等）进行快速测量并可分
类收集的高技术。
流式细胞仪可以做什么？
根据门的形状又分为了线性门、矩形门、圆 形门、多边形门、任意形状门和十字门。
A 淋巴细胞 B 单核细胞 C 中性粒细胞
A、B、C均 为任意门
线性门
•Region设置:
区阈（region, R）与门(gate, G ) 是两个相关的概念，区阈可 与门对应，但是也可以包含于门。
如十字门分析时，起 就可以由四个区域构 成，即 G=D1+D2+D3+D4。
单参数直方图
（二）双参数直方图
• 双参数直方图：纵轴和横轴分别代表被测量细胞的两个测量参数， 根据这两个参数就可以确定细胞在图上的表达位置。
• 双参数信号通常采用对数信号，最常用的是点密图，在图中，每 个点代表一个细胞，点图利用颗粒密度反映同样散射光或荧光强 度的颗粒数量的多少。
1.双参数直方图点图
• 单参数直方图 • 双参数直方图:点图
二维等高图 假三维等高图 • 三参数直方图 • 多参数分析
设门分析:REGION和GATE设置
（一）单参数直方图
由一维参数(散射光或荧光)与颗粒计数(COUNT)构成，反映 同样散射光或荧光强度的颗粒数量的多少。
细 胞 相 对 数 量
信道 (channel )
激发 波长 488
568
488
流式细胞仪及流式细胞术
流式细胞仪及流式细胞术流式细胞仪技术流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。
它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置)，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数字化后而成整数，然后进行电子存储，以后数据可以调出显示和进行分析。
其优点如下：1、具有操作简便，只要将染色的单个细胞推入仪器中，就会得出数据。
2、具有较高的灵敏度及测定速度，而且每次可测出许多数据，一般情况下，每秒可测5000个细胞，能迅速分析和记数大量细胞，并能准确统计群体中荧光标记细胞的比例。
3、应用广泛，即可用于测定细胞活力、繁殖周期和细胞定型分析，也可区别死亡细胞、分裂细胞和静止细胞群，既可测定DNA和RNA、测凋亡峰，又可测蛋白含量，特别是胞浆蛋白。
基本流程原理：1、将待测细胞染色后制成单细胞悬液，用一定压力将待测样品压入流动室，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管入口方向与待测样品流成一定的角度，这样，鞘液就能够包绕着样品高速流动，组成一个圆形的流束，待测细胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过检测区域。
2、流式细胞仪通常以激光作为发光源。
经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。
这两种信号同时被前向光电二极管和90度方向的光电倍增管接收。
散射光不依赖任何细胞样品的制备技术，被称为细胞的物理参数或固有参数，散射光有包括前向角散射和侧向叫散射，前向角散射与被测细胞直径的平方密切相关，侧向角散射光对细胞膜、胞质、核膜的折射率更敏感，可提供有关细胞内精细结构和颗粒性质的信号。
荧光信号也有两种，一种是细胞自身在激光照射下发出的微弱荧光信号，另一种是经过特异荧光素标记后的细胞受激发照射后得到的荧光信号。
流式细胞仪结果分析
流式细胞术的特点
流式细胞术最大的特点是能在保持细胞及 细胞器或微粒的结构及功能不被破坏的状态下， 通过荧光探针的协助，从分子水平上获取多种 信号对细胞进行定量分析或纯化分选。
细胞不被破坏，测量快速、大量、准确、灵敏、定量
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第一节 概述
流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光 强度的细胞分析仪，是在单个细胞分析 和分选基础上发展起来的对细胞的物理 或化学性质（如大小、内部结构、DNA 、RNA、蛋白质、抗原等）进行快速测 量并可分类收集的高技术。
此为血细胞分类的 基本原理，但不能分 析表面分子。
单核细胞
中性粒细胞
淋巴细胞
光散射测量最有效用途：从非均一群体中鉴别出某些亚群
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三、荧光测量
• 荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激 发后产生，发射的荧光波长与激发光波长不同。
• 每种荧光染料会产生特定波长的荧光和颜色，通过 波长选择通透性滤片，可将不同波长的散射光和荧 光信号区分开，送入不同的光电倍增管。
FL1, FL2, FL3, FL4（荧光）
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光学系统示意图
Flow Tip
SS and FL Detector
FS Detector
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Laser
（3）数据处理系统
主要由计算机及其软件组成
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基本工作原理
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已标记的单细 硅化管 胞悬液和鞘液
流式细胞仪结果分析
第一节 概述 一、工作原理 二、散射光的测定 三、荧光测量 四、细胞分选原理
第二节 数据的显示与分析 一、参数 二、数据显示方式 三、设门分析技术
流式细胞仪结果分析
流式细胞仪结果分析一、获取数据在进行流式细胞仪结果分析之前，首先需要获取实验数据。
流式细胞仪会输出每个样本细胞的荧光强度、散射性质等参数。
这些参数可以代表细胞的表型特征或者亚细胞结构。
根据实验的需要，可以选择一种或多种指标进行数据分析。
二、数据清洗和预处理由于实验过程中可能会受到一些随机因素的干扰，比如机器灵敏度、噪声等，得到的数据可能存在一些异常值。
因此，在进行数据分析之前，首先需要对数据进行清洗和预处理，以减少这些异常值的干扰。
数据清洗可以通过以下几种方法进行：1.去除非细胞事件：流式细胞仪在采集数据时可能会采集到一些非细胞事件，比如细胞碎片、空白颗粒等，可以通过设置或者后续数据处理来去除这些非细胞事件。
2.去除离群值：根据实验的需要和数据的分布情况，可以使用统计学方法或者软件工具来判断和去除离群值。
3.数据归一化：如果实验中使用了多个荧光探针，不同探针之间的信号强度可能有差异。
可以通过归一化处理来消除这种差异，以确保数据的可比性。
三、统计分析数据清洗和预处理之后，可以进行统计分析来描述和解析数据。
流式细胞仪的数据通常是多维的，可以使用多种统计分析方法来从不同角度揭示数据的特点和规律。
1.基本统计分析：包括均值、标准差、中位数等指标，可以帮助了解数据的集中趋势和离散程度。
2.相关性分析：通过计算各个参数之间的相关系数，可以研究不同指标之间的关系。
例如，可以使用皮尔逊相关系数来衡量两个参数之间的线性相关性。
3.差异分析：比较不同样本或不同组的数据之间的差异。
常用的差异分析方法有t检验、方差分析等。
四、数据可视化为了更好地理解和传达数据的结果，可以使用数据可视化技术将数据以图表、图像等形式展示出来。
常用的数据可视化方法包括散点图、条形图、箱线图等。
通过数据可视化，可以帮助研究者直观地观察数据的分布情况、群体几何形状和特征变化趋势等。
五、结果解读在进行流式细胞仪结果分析时，需要根据实验目的和样本特性进行结果的解读。
自己总结：流式细胞仪的原理和用途（五篇）
自己总结：流式细胞仪的原理和用途（五篇）第一篇：自己总结：流式细胞仪的原理和用途流式细胞仪（Flow Cytometry）流式细胞仪的概念及其发展历史1．1 流式细胞仪的基本概念流式细胞仪（flow cytonletry，FCM）是对高速直线流动的细胞或生物微粒进行快速定量测定和分析的仪器，主要包括样品的液流技术、细胞的计数和分选技术，计算机对数据的采集和分析技术等。
流式细胞仪以流式细胞术为理论基础，是流体力学、激光技术、电子工程学、分子免疫学、细胞荧光化学和计算机等学科知识综合运用的结晶。
流式细胞术是一种自动分析和分选细胞或亚细胞的技术。
其特点是：测量速度快、被测群体大、可进行多参数测量，即对同一个细胞做有关物理、生物化学特性的多参数测量，且在统计学上有效。
1．2 流式细胞仪的发展简史最早的流式细胞仪雏形诞生于1934年，Moldavan提出使悬浮的单个血红细胞流过玻璃毛细管，在亮视野下用显微镜进行计数，并用光电记录装置测量的设想。
1953年Crosland-Taylor根据牛顿流体在圆形管中流动规律设计了流动室。
其后又经过Coulter、Parker & Horst、Kamentsky、Gohde、Fulwyler、Herzenberg等人的不断改进，设计了光电检测设备和细胞分选装置、完成了计算机与流式细胞仪的物理连接及多参数数据的记录和分析、开创了细胞的免疫荧光染色及检测技术、推广流式细胞仪在临床上的应用。
近20年来，随着流式细胞仪及其检测技术的日臻完善，人们越来越致力于样品制备、细胞标记、软件开发等方面的工作，以扩大FCM的应用领域和使用效果。
宋平根的《流式细胞术的原理和应用》是迄今为止对流式细胞仪及其技术阐述的最为详尽和透彻的中文著作。
这本书非常详细地介绍了流式细胞术的历史、结构、原理、技术指标等，例举了其在医学和生物工程中的应用，非常适合从事此方面专业研究的人。
由于这本书是13年前出版的，所以基本上没有涉及植物流式细胞仪检测技术。
流式细胞术实验报告
一、实验目的本实验旨在通过流式细胞术技术，对细胞群体进行快速、精确的分析和定量测定，研究细胞的物理与化学性质，并对细胞进行分类和分选。
通过本次实验，掌握流式细胞仪的工作原理，了解其在细胞生物学研究中的应用。
二、实验原理流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒逐个进行快速定量分析和分选的技术。
其基本原理是将经过荧光标记的细胞或微粒，在流动系统中以高速通过，同时利用激光束照射细胞，通过光散射和荧光信号来获取细胞的大小、形态、表面标记物等信息。
最后，通过数据分析和可视化展示，对细胞进行计数、分类和分析。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 细胞样本：小鼠脾细胞、Jurkat细胞- 荧光标记抗体：CD45-FITC、CD3-PE、CD4-APC- 溶液：磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）、荧光染料（如PI）2. 实验仪器：- 流式细胞仪（如BD FACS Calibur）- 离心机- 恒温培养箱- 移液器四、实验步骤1. 细胞制备：- 收集小鼠脾细胞或Jurkat细胞，用PBS洗涤后，调整细胞浓度为1×10^6个/mL。
- 加入荧光标记抗体，室温下孵育30分钟。
- 用PBS洗涤细胞两次，去除未结合的抗体。
2. 流式细胞术分析：- 将处理好的细胞加入流式细胞仪，设置合适的参数进行检测。
- 收集数据，进行细胞分类和分析。
3. 数据分析：- 利用流式细胞术分析软件（如CellQuest、FlowJo）对数据进行分析，包括细胞计数、分类、DNA含量分析等。
五、实验结果与分析1. 细胞分类：- 通过流式细胞术，成功将小鼠脾细胞和Jurkat细胞分为不同的亚群，如T细胞、B细胞等。
2. DNA含量分析：- 通过PI染色，检测细胞的DNA含量，发现小鼠脾细胞和Jurkat细胞均处于G0/G1期。
3. 表面标记物分析：- 通过CD45-FITC、CD3-PE、CD4-APC抗体检测，发现Jurkat细胞为T细胞，小鼠脾细胞中含有B细胞和T细胞。
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流式细胞仪技术及专利研究新进展(高金湖无锡荣兴科技有限公司生物化学部)流式细胞术（Flow Cytometer, FCM）是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，与传统的荧光镜检查相比，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代最先进的细胞定量分析技术。
流式细胞仪主要由细胞流动室、激光聚焦区、检测系统、数据处理系统等4 部分组成，其工作原理是将被检测对象如细胞等制备成一定浓度的分散的细胞悬液，经特异性荧光染料染色后放入流式细胞仪的样品管中，细胞在气体的压力下进入流动室、流动室由样品管和鞘液管组成，在鞘液的约束下，细胞排列成单列从流动室的喷嘴高速喷出成为细胞液粒，经特异性荧光染色后的细胞经过激光检测区时受激光激发，产生散射光和荧光信号，通过一些波长选择通透性滤光片，可以将不同波长的散射光和荧光信号区分开来，散射光是从细胞表面或细胞内颗粒散射出来的原激光光谱，其信号比较强，用光敏二级管即可检测。
荧光信号较弱，需用光电倍增管接收并放大，散射光和荧光信号接收后经转换成电信号，这些信号经过加工处理储存于计算机中，用专门的计算机软件对其储存的数据进行图像处理，可在计算机上直观地统计出各种染上荧光染料的细胞的百分率，选择不同的单克隆抗体及荧光染料，可同时测定一个细胞上的多种不同的特征如细胞大小、DNA 含量、细胞表面抗源表达、癌基因蛋白等等。
市场上销售的流式细胞仪产品种类很多，主要生产厂家有：BD、Beckman-Coulter、Partec、Accuri Cytometers、Guava、Union Biometrica、Amnis等，比较熟悉的还是BD和Beckman Coulter。
各个公司仪器的用法会有所不同，但原理是完全一致的。
BD公司生产的流式细胞仪都冠以FACs(fluorescence activated cell sorter)，即荧光激活细胞分选器。
其型号种类比较齐全，如早期的FAC．Sort、FACS Canto、FACScan。
现在市场上供应的型号有五种：FACSCount(小型流式细胞仪)、FACSCalibur(流式细胞仪)、FACSAria(流式细胞分选仪)、FACSVantage SE(多色分析和高速分选流式细胞仪)、LSRII(数字化分析型流式细胞仪)。
Beckman公司的流式细胞仪的型号有：EPICS XL/XL-MCL，FC500, CyAn ADP等。
下面主要简单介绍下BD公司的流式细胞仪1．FACSCalibur.BD FACSCalibur 流式细胞仪是第一台全自动四色流式系统兼具分析和分选双相功能的台式机，偏重于临床，其整体设计帮助临床医生快速实现常规免疫表型、CD4T细胞计数、DNA、网织红细胞、血小板等临床分析，兼具分选功能。
配备有二根激光管，可同时检测4个荧光参数。
可识别粘联细胞。
开机无需等待，预热5分钟即可上机检测。
2．FACSAriaBD FACSAria流式细胞分选仪为台式高速细胞分选仪，获取速度达70,000细胞/s，分析速度达50,000细胞/s。
使用石英杯流动检测池固定光路校准技术。
使用三种激光，多色分析，分析参数可达15色。
两管或四管分选，可以使用多种规格的收集管。
液流监测系统白动监测液流断点，检查堵塞，实现了细胞分选的无人操作。
配件BDACDU装置，可以在微孔板或载波片上定量分选细胞。
3．FACSCantoBD FACSCanto 流式细胞仪是第一台六色分析的台式流式细胞仪，系统兼具流式细胞分析仪BD TM LSRⅡ和流式细胞分选仪BD FACSAria TM上首次使用的许多高新技术；液流控制车的设计节省了时间，提高了效率。
BD FACSCanto流式细胞仪适用于各种科研应用，尤其适用于对含量极少的细胞进行高速分析，而且样本间的交叉污染却极小。
4．FACSVantageFACSVantage具有最佳分析灵活性和高速度分选功能，可通过Autosort进行自动化分选。
除常规应用外，还可进行高分辨率的染色体分析。
5．FACSVantage SETMFACSVantage SETM是在FACSVantage的细胞分选功能基础上推出的分选增强型流式细胞仪。
六色荧光分析系统，点对点分选，配置FACS Diva数字化系统，提供全面的配套试剂。
速度和功能优于FACSVantage。
6．FACSAria IIIBD公司近日宣布推出新一代的流式细胞仪——BD FACSAria III细胞分选系统，它能够利用6根激光运行复杂的多色实验。
自2003年首次推出BD FACSAria以来，这一系列仪器开创了细胞分选的复杂世界，让受众更多，应用范围更广。
如今新上市的BD FACSAria III 系统更加强大、可靠，且更易用。
BD FACSAria III细胞分选系统的创新包括：(1) 为了获得更高的灵敏度，BD FACSAria III使用了新一代的石英杯流动检测池。
它的专利设计确保激光精确集中在样品束上，这样能产生最大的信号，并收集到最大量的发射光。
固定光路校准技术让启动时间最短，无需每日调整光路，仪器随开随用，改善了实验之间的重复性。
更重要的是，它还改善了收集效率，并优化了多色应用所需的分辨率，即使是在高速分选设置下。
(2) 光学系统的创新让信号检测最大化，并大大提高了多色分析中每种颜色的灵敏度与分辨率。
灵敏度与分辨率提高意味着即使模糊的细胞群也能轻松鉴定并分选。
光学系统允许对多色分析进行优化，以获得更佳的结果。
激发和收集光学系统的创新设计减少了激发损失，并显著改善了收集效率，从每个样品中得到更佳的信息。
(3) 对于很多用户而言，细胞分选器的性能是根据其灵活性来界定的，而灵活性又与可同时检测的参数量有关。
BD FACSAria III采用新的可扩展结构，支持6种激光波长：633 nm、561 nm、488 nm、445 nm、405 nm和375 nm，以及最多20个探测器位置，能同时测定18种颜色。
(4) 向后兼容的结构让用户能升级现有的仪器到最新的BD FACSAria III平台。
通过现场升级，拥有BD FACSAria或BD FACSAria II系统的实验室也能享用BD FACSAria III的最新性能。
(5) BD FACSAria软件有效控制了BD FACSAria III工作站的设置以及数据的获取和分析。
BD FACSAria软件是多个BD 细胞分析仪和细胞分选仪共用的。
研究人员享受到应用灵活性，因为很容易将分析设计和优化从一个平台移到另一个平台，比如从分析到分选。
以下是BD和Beckman Coulter产品性能的比较：近年来，流式细胞仪技术迅速发展，应用日趋广泛，其主要技术趋势有：1．多激光，多色分析在临床上，流式细胞仪的发展经由了最早的双色荧光分析，到三色荧光分析，到现在的四色荧光分析流式细胞仪。
目前临床上广泛使用的是单激光三色或双激光四色分析流式细胞仪。
近年，为了使样本一次检测更多结果，满足临床多色分析诊断的需要，一些厂家为临床应用专门设计了六色分析流式细胞仪，如BD公司的FACSCanto，这一新型流式细胞仪安装固定校准的双激光，可同时作六荧光分析。
为了增加检测参数而不影响检测灵敏度，仪器采用了新型光路信号收集检测技术，利用光反射大于光透射的原理，被接收的荧光信号经过一系列双色性反射镜，几种不同波长的荧光信号经过几次反射，被分离开来，光路信号收集系统收集检测反射光信号，而被检测的信号透过反射镜，由相应荧光检测器接收。
这样，在增加荧光检测器的同时，大大提高了信号检测灵敏度。
BD推出Canto型后发现有一些小毛病，随后又推出Canto II型，2007年开始上市的最新型号，号称世界上检测精度最高。
另外，经典的Calibur使用的是苹果系统软件，不熟悉的人很难快速上手，而Canto II型使用的是Windows系统软件，可能会符合更多人的操作习惯。
测量过后软件编辑功能远大于Canlibur。
2．新荧光染料的开发由于多色分析的需要，人们发现了更多的不同激光激发的不同波长的荧光染料。
如紫外光激发的Pacific Blue，Alexa Fluora 405；蓝光激发的Alexa Fluora 488；红光激发的Alexa Fluora 647等。
另外，为了使用一个激光器，同时检测更长波长的荧光信号，还使用荧光耦连物，如PE-Cy5，Cy5为吲哚双羰花青衍生物，最大吸收峰为640nm，单独使用时可被红光激发，在安装488nm激光的流式细胞以上，PE被激发光激发，其发射的红光能量被传递给Cy5，仪器上检测到的信号是Cy5发射的红光。
这类荧光染料还有PE-Cy7，APC-Cy7，PerCP-Cy5.5等。
2．电子系统数字化近两年，流式细胞仪开始由模拟信号系统向数字化信号系统转变，如BD公司的FACSAria、FACSCanto、LSRII等都是数字化系统。
在检测中，数字化电子系统连续取样，将信号以数字形式直接保存在存储器内，再将数字转换为相应参数值。
这样一来，就使得检测速度更快，信号采集速度可达每个脉冲10,000,000次/秒。
有了数字化电子系统，就可以测定任意信号的脉冲高度、宽度和面积，荧光间补偿的调整也更加简单，可以自由进行激光内和激光间的荧光补偿，并可以脱机补偿。
以下是BD公司以及国内近年来申请的专利情况1. High throughput flow cytometer operation with data quality assessment and control (高通量流式细胞仪数据质量评估及控制操作US2009043752)The invention provides a flow system and method for reliable multiparameter data acquisition and particle sorting. In accordance with the invention, a flow system assesses changes in the pattern of data collected in successive time intervals and actuates one or more corrective actions whenever the changes exceed predetermined limits. The present invention overcomes problems associated with collecting data and sorting and enumerating particles in flow cytometrysystems that operate for prolonged periods or that must accommodate samples that vary widely in quality .本发明提供了可靠的多参数数据采集和粒子排序的流式系统和方法。