迈瑞BriCyteE6流式细胞仪介绍

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流式细胞仪在临床检验中的应用 PPT

流式细胞仪在临床检验中的应用 PPT
健康人(左)和强直性脊柱炎患者(右)的HLA-B27的检测结果 (上:同型对照,下:测试样本)
1
流式细胞术的基本原理
2 流式的临床应用
目 录
3 迈瑞流式介绍
4
专家对迈瑞流式的评价
迈瑞流式细胞仪及配套试剂
BriCyte E6流式细胞仪及配套试剂
人性化设计—降低临床操作难度
临床常规项目全自动软件 双向LIS连接 全中文操作界面
诊断与鉴别诊断 疾病临床分期 治疗效果评估 指导临床用药 。。。
TBNK淋巴细胞检测在临床科室中的应用
流式在肿瘤的应用 流式在感染科的应用 流式在风湿免疫科的应用 流式在健康体检的应用 流式在血液科的应用 流式在移植中心的应用 流式在心血管内科的应用 流式在其他科室的应用
胃癌及其不同临床分期淋巴细胞亚群的变化
四川省人民医院 中心实验室主任
张剑波
THANKS!
谢谢
HLA-B27检测与AS辅助诊断
1984年修订的纽约标准 ;
1991年欧洲脊柱关节病 研究组(ESSG)标准;
2009年国际脊柱关节病 评估工作组(ASAS) SpA诊断标准标准—增 加HLA-B27作为重要的 诊断指标
Rudwaleit M. Curr Opin Rheumatol. 2010,22:375-380)
食品工业
临床诊断、 研究
血液,肿瘤, 药理,免 疫…
农业畜牧业
选种,育种…
环境研究
湖泊、海洋生态 研究…
制药工业
药物筛选,疫苗 研究…
总结
flow cytometry flow cytometry + Autoimmune diseases
flow cytometry+leukemia

不同流式细胞分析仪检测淋巴细胞亚群的比较研究解析

不同流式细胞分析仪检测淋巴细胞亚群的比较研究解析

Flow cytometry;
DOI:10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2016.05.008
作者单位:200092上海交通大学医学院附属新华医院检验科 通信作者:沈立松,电子信箱:lisongshen@hotmail.com
淋巴细胞大致可分为T细胞、NK细胞和B细 胞3个亚群。此外,根据是否表达CD4和CD8,T细
行业标准,以CD45设门分析。
Express
1.标本来源:2015年7月连续5 d随机收集在 上海交通大学医学院附属新华医院检验科随机采集 的新鲜外周全血标本73份,其中来自男性40例,女 性33例,年龄1~81岁,平均年龄20岁。所有标本
收集于含肝素抗凝的真空采血管中,收集后置于室 温(18~25℃),并在4 h内完成标本前处理,处理 后的标本2 h内完成检测。
of MediciM,Shanghai
Correspo凡ding author:Shen Lisong,Email:fisongshen@hotmaiL com
【Abstract】0bjective To evaluate the consistency and accuracy among 3 brands of flow eytometers (BriCyte E6,BD FACSCantoⅡand Beckman Coulter FC 500)in the detection of lymphocyte subsets. Methotis According to the methodology,the BriCyte E6 was compared with 2 flow cytometers commonly
主坐焦墅医堂苤查!!!!生!旦筮!!鲞筮!塑鱼!i!』!些塑旦:丛型!Q!!:!!!:!!:堕!:!

艾拉莫德治疗大鼠诱导性关节炎的机理研究

艾拉莫德治疗大鼠诱导性关节炎的机理研究

艾拉莫德治疗大鼠诱导性关节炎的机理研究高鹏;吴延龙;崔轶霞【摘要】目的探究艾拉莫德(T-614)治疗大鼠诱导性关节炎(CIA)的机理.方法选取60只6周龄清洁级雌性大鼠,其中40只用于建立CIA模型,随机均分为模型对照组与艾拉莫德组;其余20只为空白对照组.模型对照组及空白对照组使用生理盐水灌胃,艾拉莫德组使用艾拉莫德灌胃治疗,干预时间均为4w.干预结束后,使用酶联免疫吸附法(ELISA)测量各组血清白细胞介素-1 (IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和B 细胞活化因子(IL-6、IL-21)水平及脾脏淋巴细胞中B细胞总数,以及模型对照组与艾拉莫德组干预前后大鼠诱导关节肿胀率.结果 (1)干预前,模型对照组及艾拉莫德组血清IL-1、TNF-α、IL-6及IL-21水平明显高于空白对照组(P<0.05);干预后IL-1、TNF-α、IL-6及IL-21水平,模型对照组>艾拉莫德组>空白对照组(P<0.05).(2)干预前,艾拉莫德组及模型对照组总B细胞数量高于空白对照组(P<0.05);干预后,艾拉莫德组总B细胞数量下降,且低于模型对照组(P<0.05).(3)干预后,艾拉莫德组关节肿胀率低于模型对照组(P<0.05).结论艾拉莫德能够显著改善诱导性关节炎大鼠关节肿胀症状,其机理与降低炎性因子水平和B细胞分泌功能有关.【期刊名称】《西南国防医药》【年(卷),期】2019(029)004【总页数】4页(P422-425)【关键词】艾拉莫德;大鼠;关节炎;B细胞;分泌功能【作者】高鹏;吴延龙;崔轶霞【作者单位】716000陕西延安,延安大学附属医院免疫风湿科;716000陕西延安,延安大学附属医院免疫风湿科;716000陕西延安,延安大学附属医院免疫风湿科【正文语种】中文【中图分类】R593.22类风湿性关节炎(RA)又名类风湿,是一种以滑膜炎性改变为主,可累及全身多个器官的自身免疫性疾病。

该病在我国的发病率约为0.3%~0.4%,并存在较为明显的性别差异和年龄差异,女性患病率约为男性的2~3倍,25~50岁中青年人为该病的高发群体[1]。

HIV-1病毒载量试剂1技术参数

HIV-1病毒载量试剂1技术参数

HIV-1病毒载量试剂1技术参数1.名称:人类免疫缺陷病毒(1型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光法)。

2.用途:用于定量检测人血浆中人类免疫缺陷病毒(1型)。

3.原理:应用实时荧光定量聚合酶链式反应原理。

4.检测项目:HIV-1RNA定量检测。

5.检测亚型:HIV-1M、O组。

6.检测方法:全自动核酸分离纯化,全自动核酸扩增和实时荧光PCR方法。

7.适用样品种类:非肝素抗凝血浆。

8.定量方式:内部标准品定量。

9.质控品:提供阴性、弱阳性、强阳性对照质控品。

10.技术要求:a.检测灵敏度:≤20copies/ml,置信度≥95%。

b.检测范围:20-1×107copies/ml。

c.检测特异性:100%。

d.重复性:CV值≤0.3log。

e.规格:48T/盒。

f.即开即用型液体试剂。

11.试剂储存条件:2-8℃保存。

12.试剂组份:包括核酸提取、纯化、扩增和检测的全部试剂。

13.抗污染方案:采用UNG酶防止PCR产物污染。

14.样品处理能力:可以同时进行检测1-72个样品15.备件:含完整实验过程中所需的相关耗材及洗液。

16.适用设备:适用于CobasAmpliprepCobasTaqman全自动病毒载量检测系统。

17.认证文件:中国医疗器械进口注册证等文件。

18.供货计划:按用户要求数量准时分批供货,试剂到货时有效期大于10个月。

HIV-1病毒载量试剂2技术参数1.名称:人类免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸(RNA)提取及检测试剂盒2.用途:用于定量检测人血浆中人类免疫缺陷病毒(1型)。

3.检测方法:应用RT-PCR和Real-time实时荧光定量检测技术HIV-1型各组病毒载量。

4.检测项目:HIV-1RNA定量检测。

5.检测亚型:HIV-1型M组(A-H)、O组、N组。

6.适用设备:m2000sp自动核酸提取仪,m2000rt实时荧光定量PCR仪; 7.定量方式:外部标准品定量8.技术要求8.1检测灵敏度:≤40copies/mL(0.6mL、1.0mL样本体系)8.2特异性:100%(95%CI99.28-100%)8.3检测范围:40-107copies/mL8.4适用样本种类:血浆(ACD-A或EDTA抗凝)8.5检测样本体积:可选0.2mL、0.5mL、0.6mL和1.0mL8.6检测方式:96孔PCR反应板8.7检测批量:一次检测批量可选24,48,72和968.8内测标准差(SD):≤0.25log copies/mL8.9内参要求:与样本一起提取和扩增,质控整个实验过程;9.认证文件:中国医疗器械进口注册证等文件。

流式细胞术基础知识

流式细胞术基础知识
流式细胞术基础知识
讲者:***
目录
1、流式细胞术基本定义 2、流式细胞仪介绍 3、荧光染料介绍 4、不同型号流式细胞仪简介 5、流式细胞仪应用
流式细胞术定义
流式细胞术(Flow Cytometry, 简称FCM)是一种可以快速、 准确、客观,并且同时检测单个微粒(通常是细胞)的多 项特性(多参数)的技术,同时可以对特定群体加以分选
淋巴细胞亚群分析可以了解机体在不同条件下的免疫功能 状态,主要包括细胞免疫功能和体液免疫功能。在临床上,主要用 于对免疫系统造成明显干扰的相关疾病的辅助诊断,分析疾病的发 病机理,监控疾病的病程进展,观测疗效及监测预后等等。
流式细胞仪临床应用
临床意义 CD3+ CD3+ CD4+ CD3+ CD8+ CD4+ / CD8+ B细胞 NK细胞
FITC, PE,ECD,PC5 or PECy5.5,PE-Cy7
APC, APC-Cy7
国食药监械(进)字 2014第2403463号
FITC, PE,ECD,PC5 or PC5.5,PC7
红光:638nm 紫光:405nm
APC,APC-Cy5 or APCAlexa Fluor 700, APC-Cy7 or APCAlexa Fluor
谢谢!
部分演示内容来源于网络,如有侵权,请联系删除!谢谢!
APC, APC-Cy7
浙械注准 20192220121
流式细胞仪应用
临床研究
血液,肿瘤, 药理,免疫…
环境研究
湖泊,海洋 生态研究…
生物学研究
遗传,生殖, 微生物,细胞 生物,毒理, 分子生物…
食品制药工业
食品检测、药物筛 选,疫苗研究…

BriCyte E6流式细胞仪标准操作程序(V1.0)

BriCyte E6流式细胞仪标准操作程序(V1.0)

BriCyte E6流式细胞仪标准操作程序1 目的规范标准的BriCyte E6流式细胞仪操作程序,保证仪器设备的正常使用,使得测量数据和检测结果具有良好的溯源性、准确性和可靠性。

2 范围仅适用于BriCyte E6流式细胞仪。

3 仪器检测原理BriCyte E6流式细胞仪采用多路激发、荧光染色的流式细胞技术进行细胞分类和特征分析,并结合流量测定技术实现绝对计数。

4 仪器设备试剂BriCyte E6流式细胞仪专用试剂:见“淋巴细胞亚群检测”、“HLA-B27检测”试剂内容。

所有试剂应参照试剂的使用说明进行保存。

变质、超过效期的所有试剂不能使用。

5 仪器设备标本原始样品采集、制备、处理、检验和存放见检验科相关规范。

6 仪器设备环境要求,使用安全措施6.1 仪器设备环境要求6.1.1 空间安装要求仪器应安装在稳固工作台上。

在仪器两侧各保留至少0.5米的空间,以方便维护和保养。

仪器后部分别至少要有0.25米的空间,以防止阻碍热气的排放并保证主机后的液路管道不受挤压。

将BriCyte E6流式细胞仪安放在通风良好、灰尘少的地方。

避免在过热或过冷以及日光直射的环境中使用BriCyte E6流式细胞仪。

保证操作台面有足够的空间放置试剂托架及鞘液桶、废液桶。

6.1.2 运行条件环境温度要求:15℃~32℃。

环境相对湿度要求:20%~85%。

电源电压要求:主机:100~240V,50Hz/60Hz,500V A。

仪器设备周围应尽可能无尘、无机械振动、无污染、无大噪音源和电源干扰;远离强电磁场干扰源;不要靠近电刷型电机、闪烁荧光灯和经常开关的电接触性设备;建议在运行设备之前对实验室的电磁环境进行评估;避免强光直接照射;避免置于热源及风源前;选择一个通风良好的位置;具有良好的接地环境;不要将主机放置在斜面上;室内使用。

6.2 仪器安全在仪器设备上面和周围不要使用可燃性危险品,避免引起火灾和爆炸。

在电源打开状态下,禁止打开仪器前面、侧面及背面面板,以免损害线路板;禁止触摸BriCyte E6流式细胞仪外壳里面的电子元件,尤其避免湿手触摸,以免造成电击。

流式细胞仪在临床检验中的应用

流式细胞仪在临床检验中的应用

移植病人免疫抑制剂治疗指导
A移植前1-2天;B移植后1-2天;C移植后4-5天;D移植后6-8天;E移植后12-16天 69例(50例没有排斥,19例发生排斥) CD4在移植后有一个缓慢的下降过程 CD4如果升高,预示发生排斥反应,需要调整免疫抑制药的治疗方案
22
老年人身体状况评估
( Neuroimmunomodulation. 2014, 214:206-12.)
可以预计未来流式细胞仪在临床上的应用一定会有更大的发展!
9
目 录
10
1
流式细胞术的基本原理
2 流式的临床应用
3 迈瑞流式介绍
4
专家对迈瑞流式的评价
流式细胞术在临床检验中的应用
∞ 淋巴细胞亚群分析
∞ HLA-B27检测
∞ 白血病免疫分型和MRD
急性白血病、
慢性淋巴增生性疾病(CLD)
淋巴瘤
∞ 造血干细胞分析
流式细胞术+抗原抗体反 应
百分比或绝对计数 (如 %、**个/uL); 物质的量或定性判定 (L、UI/L、 阴性、阳 pmol/m性)
测量宏观对象(细胞)上 的微观物质(抗原、看不 见、摸不到)
血球仪
生化分析仪
细胞(测量设置全部固定化) 血清
物理或化学性质(如细胞 大小、内部复杂程度、DNA 含量)
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TBNK淋巴细胞亚群检测
CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC CD3-FITC/CD16+56-PE/CD45-PerCP/CD19-APC
27
HLA-B27检测与脊柱关节病
脊柱关节病(Spondyloarthritis, SpA)
疾病 强直性脊椎炎 Reiter’s综合症 银屑病性关节炎 急性前葡萄膜炎 溃疡性结肠炎伴关节病

迈瑞BriCyte E6 流式细胞仪介绍

迈瑞BriCyte E6 流式细胞仪介绍
为了能够在存在荧光泄露的情况下,得到真实的多色荧光发射信号,在流 式细胞仪中采用了称之为颜色补偿的方法,通过测得信号经修正得到真实信号 加以使用。
FITC 530/30 PE 585/40
真实 实测 FITC通道信号
=
+
真实 实测 PE通道信号 =
+
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• 当CD4+ / CD8+比值持续升高且大于1.2时应当考虑排斥 发生;当CD4+ / CD8+比值持续降低表明移植后出现感
染;若CD4+ / CD8+比值小于0.2时,应立即停用免疫抑
制剂;
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2019/2/19
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常见疾病的淋巴细胞亚群变化
测试原理 计量
抗原抗体反应 物质的量或定性判定 (L、UI/L、 阴性、阳 pmol/m性)
宏观和微观
测定宏观对象(细胞)上的宏 测量微观物质(可溶性成 观物质(物理、复杂度、含量, 分和一些小分子物质,看 看得见、摸得到) 不见、摸不到)
测量微观物质(小分子 物质,看不见、摸不到)
输出
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研究对象:生物颗粒;
检测信号:光信号(散射光,荧光);
分析特点:快速,特异,准确,客观,多参数;
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2019/2/19
4
流式细胞仪基本构造
液流系统 光学系统 电子系统 数据分析系统


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散射光双参数散点图
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2020/7/22
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荧光双参数散点图
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2020/7/22
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流式细胞仪与几种检验仪器的比较
项目
测试对象
流式细胞仪
细胞
血球仪
细胞(测量设置全部固定化)
生化分析仪
∞ 许多研究证据表明人群中HLA-B27的表达频率与AS的发病率高度相关; ∞ AS患者中HLA-B27的阳性率显著高于普通人群,高达90%以上,而普通
人群HLA-B27的阳性率低于10%,HLA-B27阴性的普通人群未患AS的几 率为99.9%; ∞ HLA-B27检测阳性可显著增加正确诊断AS的几率,阴性则为排除AS的诊 断提供了有力的证据;
2020/7/22
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荧光素的选择
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2020/7/22
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荧光补偿
由于每一种荧光素分子都发射某一特定波长范围内的光,然而这些荧光的 发射光谱会发生部分重叠,有时这种重叠现象非常显著。
为了能够在存在荧光泄露的情况下,得到真实的多色荧光发射信号,在流 式细胞仪中采用了称之为颜色补偿的方法,通过测得信号经修正得到真实信号 加以使用。
血清
免疫分析仪
血清
测试目标 测试原理
物理或化学性质(如细胞大 物理或化学性质(如细胞大小、 化学成分和一些小分子物 小、内部复杂程度、DNA含 内部复杂程度、DNA含量) 质(如钾、钠、钙、酶) 量);
小分子物质(如抗原,抗体)
流式细胞术+抗原抗体反应 流式细胞术
化学比色法
小分子物质(如抗原、 抗体、激素)
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流式细胞仪分析流程
1 单个细胞悬液制备 2 样本细胞荧光标记 3 流式细胞仪检测 4 数据分析处理
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流式细胞仪工作原理
SSC FL2 FL5
FL6
v v
v
t
FL3
FL5
FL1
v t
v t
FL1 (FITC)
11, 4% 3, 1%
26, 10%
64, 24%
112, 41%
检验科 中心实验室 血液科 血液病研究所 肿瘤科 分子生物中心 病理科 感染科 肾病实验室 肝病研究所 肺病研究所 肾病研究所 免疫中心 内科 外科 放射科 皮肤科 其他
国内三甲医院中流式细胞仪分布图(2012年)
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HLA-B27检测与强直性脊柱炎诊断
• 强直性脊柱炎(AS)定义:
一种慢性、进行性和炎性疾病,主要累计骶髂关节、脊柱、脊柱软组 织及四肢关节,表现为椎间盘纤维环和纤维环结缔组织的骨化,椎间动关节 和四肢关节滑膜的炎症和增生,严重者可失去劳动能力。
• 淋巴细胞HLA-B27检测在AS中的诊断价值:
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迈瑞流式细胞仪Bricyte E6介绍
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BriCyte E6 产品特点


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淋巴细胞亚群分析在风湿免疫科中的应用
临床意义 CD3+ CD3+ CD4+ CD3+ CD8+
CD4+ / CD8+
SLE


类风湿性 关节炎
自身免疫 性溶血性
贫血
重症肌无 力







免疫缺陷 病




B细胞 NK细胞
常见疾病
T系淋巴细胞白血病、SLE、重症肌无力、慢性活动性肝炎;
恶性肿瘤晚期、B系细胞白血病、多发性骨髓瘤,传染性单核细胞 增多症、免疫缺陷病;
类风湿(活动期)、自身溶血性贫血;
AIDS、肿瘤晚期、巨细胞病毒感染、麻风、血小板减少;
病毒感染(HBV、EB)、肿瘤、传染性单核细胞增多症;
类风湿、重症肌无力、免疫缺陷病、肿瘤放射治疗;
血小板计数、血小板免疫表型分析
∞ 细胞周期与DNA倍体分析
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淋巴细胞亚群分析
淋巴细胞根据功能分类
淋巴细胞种类
特异性分子标记
T淋巴细胞
CD3+
B淋巴细胞
CD3-CD19+
NK淋巴细胞
CD3-CD16+CD56+
T淋巴细胞根据表面分子分类
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HLA-B27检测双色试剂
• 有效排除HLA-B7和非特异性吸 附带来的假阳性并且准确识别 HLA-B27/HLA-B7双阳性样本— —HLA-B27/HLA-B7双抗原与同 型对照双管分析设计;
• 无需仪器设置,信号采集、分 析与报告一键式解决方案—— 全自动HLA-B27检测双色试剂 配套分析软件;
观物质(物理、复杂度、含量, 分和一些小分子物质,看
看得见、摸得到)
不见、摸不到)
物质的量或定性判定 (L、UI/L、 阴性、阳 pmol/m性)
测量微观物质(小分子 物质,看不见、摸不到)
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研究对象:生物颗粒; 检测信号:光信号(散射光,荧光); 分析特点:快速,特异,准确,客观,多参数;
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流式细胞仪基本构造
➢ 液流系统 ➢ 光学系统 ➢ 电子系统 ➢ 数据分析系统
① ③
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检测表达较高的抗原上 • PerCP-Cy5.5(叶绿素蛋白偶联物) • PE-Cy7(藻红蛋白偶联物) • PE-Cy5(藻红蛋白偶联物) • PE-Texas Red(藻红蛋白-德州红偶联物)
638nm激光激发:
• APC(别藻青蛋白) • APC-Cy7(别藻青蛋白偶联物)
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流式细胞仪的临床应用
• 主要科室:
检验科、中心实验室、血液科、肿瘤科、病理科、肾病研究、免疫中心、…
2,
2, 1%
1% 3, 1%
3, 1% 3, 1% 2, 1%
4, 1%
4, 1%
9, 3%
3, 1% 2, 1% 2, 1% 15, 6%
淋巴细胞种类
特异性分子标记
T辅助/诱导淋巴细胞
CD3 + CD4 +
T抑制/细胞毒淋巴细胞 CD3 + CD8 +
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淋巴细胞亚群分析的临床应用
淋巴细胞亚群分析可以了解机体在不同条件下的免疫 功能状态,主要包括细胞免疫功能和体液免疫功能。在临床 上,主要用于对免疫系统造成明显干扰的相关疾病的辅助诊 断,分析疾病的发病机理,监控疾病的病程进展,观测疗效 及监测预后等等。
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TBNK四色试剂盒
• 简单准确的淋巴细胞亚群的分型方 案——双管四色;
• 无需仪器设置,信号采集、分析与 报告一键式解决方案——全自动 TBNK四色试剂盒配套分析软件;
• 检测结果准确可靠,阳性细胞峰荧 光强度高,阴阳性细胞群分离度 好——试剂分析性能优于同类主流 产品;
类风湿、重症肌无力、SLE、自身溶血性贫血;
AIDS、传染性单核细胞增多症、病毒感染、肿瘤;
MM、巨球蛋白血症、淋巴瘤、AIDS;
先天性免疫缺陷病、恶性肿瘤;
病毒感染早期、骨髓移植术后、习惯性流产;
恶性肿瘤、部分病毒\细菌和真菌感染;
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抗原抗体反应
计量
宏观和微观 输出
百分比或绝对计数 (如 %、**个/uL); 物质的量或定性判定 (L、UI/L、 阴性、阳 pmol/m性)
测量宏观对象(细胞)上的 微观物质(抗原、看不见、 摸不到)
百分比和绝对计数 (如 %、**个/L)
物质的量 (mol/L)
测定宏观对象(细胞)上的宏 测量微观物质(可溶性成
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BriCyte E6流式细胞仪
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目录
流式细胞仪基础知识 流式细胞术应用 迈瑞流式细胞仪BriCyte E6介绍
竞争产品介绍
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流式细胞术应用
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