岛津紫外-可见分光光度计UV-2550
004岛津UV-2550型紫外分光光度计校验SOP
1. 目的（Objectives）本规程规范了岛津UV-2550型紫外分光光度计校验的方法，确保在法定计量部门校验后的有效期内岛津UV-2450型紫外分光光度计使用的有效性，保证检验结果的准确可靠。
2. 范围（Scope）本规程适用于检验部及各车间中间体化验室的岛津UV-2550型紫外分光光度计的定期校验。
3. 定义（Definition）无4. 职责（Responsibilities）4.1. 质量控制部负责本规程的起草、修订、审核、培训和执行。
4.2. 质量保证部、工程部负责本规程的审核。
4.3. 质量负责人负责对本规程的批准。
5. 引用标准（Reference Standards）5.1. 《中国药典》（2010年版）5.2. 中国药品检验标准操作规范2010年版5.3. JJG 178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程6. 材料（Resource）6.1. 质量分数为0.060/1000重铬酸钾的0.001mol/L的高氯酸标准溶液。
6.2. 10%高氯酸溶液。
6.3. 4%高氯酸钬溶液。
6.4. 碘化钠标准溶液：浓度为10.0g/L。
6.5. 亚硝酸钠标准溶液：浓度为50.0g/L。
7. 流程图（Flow Chart）无8. 内容（Contents）8.1. 校验项目及可接受标准8.2. 校验前准备8.2.1. 操作室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性物质，无强烈的机械振动和电磁干扰，无强光直射，排风良好。
8.2.2. 温度在15℃~35℃；相对湿度为45%~80%（假如室温大于30℃，相对湿度不得大于70%）。
8.2.3. 仪器应有名称、型号、编号、制造厂名、出厂日期、工作电源电压、频率及检定签标识等8.2.4. 检查吸收池，不得有裂纹，透光面应清洁，无划痕和斑点。
8.3. 校验方法8.3.1. 基线平直度8.3.1.1.8.3.1.2. 操作：按8.3.1.1设定方法，基线扫描3次，记录图谱和数据。
岛津紫外可见近红外分光光度计新人培训资料
光栅是利用光的衍射与干涉作用制成的，它可用于紫 外、可见及红外光域，而且在整个波长区具有良好的、 几乎均匀一致的分辨能力。它具有色散波长范围宽、分 辨本领高、成本低、便于保存和易于制备等优点。缺点 是各级光谱会重叠而产生干扰。
入射、出射狭缝，透镜及准光镜等光学元件中狭缝在 决定单色器性能上起重要作用。狭缝的大小直接影响单 色光纯度，但过小的狭缝又会减弱光强。
• 普及型： UV mini 1240, UV-1650, UV-1700
• 高档： UV-2450／2550
(日本和苏州均生产）
• 物理测试用途：UV-3600/SolidSpec-3700
• 特殊用途：MPS-2400、MULTI-1500、 Biospec-1600 BioSpec-mini
最新产品：UV-3600
双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。 由于两束光同时分别通过参比池和样品池，还能自动消 除光源强度变化所引起的误差。
3，比例双光束分光光度计
由同一单色器发出的光被分成两束，一束直接到达 检测器，另一束通过样品后到达另一个检测器。这种仪 器的优点是可以监测光源变化带来的误差，但是并不能 消除参比造成的影响
5.0 % 1.0
0
2.5
5.0
7.5
10.0
Concentration, M * 103
Diagram was taken from : Douglas A. Skoog and James J. Leary, Principles of Instrumental Analysis, 4th ed., Saunders College Publishing, 1992, page 131.
经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液 和样品溶液，以进行吸光度的测定。这种简易型分光光 度计结构简单，操作方便，维修容易，适用于常规分析。 2，双光束分光光度计
岛津UV-2550紫外可见分光光度计操作规程
岛津UV-2550紫外可见分光光度计操作规程岛津UV—2550紫外可见分光光度计操作规程一、仪器主要指标及结构波长范围（nm）:190～900，双光束二、操作规程1、开机及仪器自检打开紫外光度计的电源，开启电脑，点击“UV Probe”图标，点击页面下端的“连接”，等待仪器自检（全部指标变绿）。
2、扫描光谱⑴．点击“光谱模块”图标而选定光谱模块。
⑵．点击“基线校正”进行基线校正。
⑶．点击“编辑”烦人“方法”选项，或点击“方法图标”显示光谱方法的对话框。
⑷．设置波长范围。
开始：X X Xnm 结束：X X X240nm扫描速度：中采样间隔：1.0nm⑸．点击“仪器常数”标准，在测试目录中选“吸收”，然后点击“确定”。
⑹．点击“开始”仪器开始扫描光谱，然后点击“确定”。
⑺．点击“峰值检测”图标，显示峰值数据。
⑻．点击“数据打印”图标，显示各波长吸收度。
（记下每隔10nm的数据。
）3、吸光度测定⑴．选定光度测定模块：点击“光度测定”图标。
⑵．选定常数：点击“编辑”的“方法”选项，波长设“X X X nm”，单机“加入”。
点击“校准”选项，设定类型为“多点”，WL1选择“X X X”，然后点击“关闭”。
⑶．输入样品信息：点击“标准表”，输入标准样品“ID,浓度”后按“回车键”，点击“读取Std”，就显示出测定结果的吸光度。
重复以上步骤至标准曲线绘制完成。
点击“样品表”，输入样品“ID”后按“回车键”，点击“读取UNK”，就显示出测定结果烦人吸光度。
⑷．点击“保存”，输入“X X X X”文件名保存。
岛津紫外-可见分光光度计uv-2550
岛津UV-2550 仪器说明书一、仪器简介岛津UV-2550是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计，性能卓越且操作简单方便，与功能强大的操作软件UVProbe结合，可以具备强大的功能。
小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。
1）高水平的超低杂散光UV-2550采用优异的DDM（双闪耀衍射光栅、双单色器）技术实现了超低杂散光（％以下）和高光通量。
低的杂散光可以对高浓度的样品不进行稀释而直接测定。
2）通用型的软件UVProbeUV-2550通过新一代的中英文双语操作软件UVProbe控制，包含光谱测定、光度测定、动力学测定和报告处理四大模块，从基本的测定到研究解析都可以通过它实现。
UVProbe实现了真正的QA/QC功能，完全支持GLP、GMP。
另外还可以加载膜厚测定、色彩分析等软件。
3）丰富的附件选择和广泛的应用领域生命科学领域：可对从生命体内得到的微量样品进行测试。
积分球测试：可以对浑浊样品和粉末状的样品进行测试。
反射附件：可以对光学材料进行相对反射和绝对反射的测定。
二、主要技术指标三、操作流程1、开机预热1.1先打开电脑显示器和主机，再打开仪器的电源（仪器左侧），双击桌面上的图标UVProbe ,出现“运行身份”对话框，选中“当前用户”，把“保护我的计算机”前的“√”去掉，否则进不去程序，点“确定”，进入软件；1.2点击屏幕下方的“连接”，出现“UV-2550PC 系列– (FD 00)”对话框，仪器开始初始化，所有项目前显示绿灯，则初始化通过，点击“确定”，仪器连接成功；1.3初始化结束后，仪器需预热15min。
预热结束，即可往下操作。
2、基线校正2.1点击菜单栏中的“窗口”，在下拉菜单中，点击“光度测定”，打开光度模块；2.2点击屏幕下方光度计按键栏的“基线”，弹出“基线参数”对话框，输入波长范围（实验所需的波长范围），点击“确定”，启动基线校准操作，在基线扫描过程中，注意波长的变化范围，读数变化≤3nm可接受。
分光光度计操作规程汇总
分光光度计标准操作规程(SOP)关键词：分光光度计使用目的：熟悉分光光度计使用标准操作规程，以保证检测的准确度和精密度及仪器的良好保养维护。
主体内容：1．使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。
以及各个操作旋钮之功能。
在未接通电源前，应该对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。
通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源开关。
仪器在使用前先检查一下，放大器暗盒的硅胶干燥筒（在仪器的左侧），如受潮变色，应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶，烘干后再用。
2．将灵敏度旋钮调置“1”档（放大倍率最小）。
3．开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至测试用波长。
仪器预热20分钟。
4．打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上试样室盖，将比色皿架置与蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“100.0”。
5．如果显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能置低倍率档使用，这样仪器将有更高的稳定性。
但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。
6．预热后，按(4)连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作。
7．吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100%”，将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“.000”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
8．浓度C的测量：选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值。
9．如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻，（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“0”和“100%”即可工作。
10．每台仪器所配套的比色皿，不能与其它仪器上的比色皿单个调换。
UV2550仪器操作要点
操作——标准曲线
操作——标准曲线
• 生成报告
操作——标准曲线
操作——测试未知样品
• 测试完毕后，保存数据文档 。关闭软件，再关仪器电源
石英窗
参比池
样品池
长程支架
UV2550维护
• 注意使用条件 使用时室温应保持15-35 ℃，相对湿度45-80%，防震防电 磁干扰，防止腐蚀性气体存在。测量具挥发性溶液样品时，吸 收池应加盖。 • 清洗样品室 清洗样品室底部溅出的液体样品，防止其蒸发和腐蚀样品 室，或由于腐蚀而得到错误结果。 • 保持石英窗的清洁 拆卸吸收池架，取下石英窗，用酒精擦洗。 • 检查波长精确度 以一定波长范围内的光扫描绘制光谱，以“峰挑选”相应 波长的通道，观察谱图的峰波长落入的范围。
特点介绍
• 低杂散光 由于光源发出的光经过单色器时有可能从单色器舱内及其它光学元件 表面发生反射，从光学元件表面以及大气中的灰尘也可以发生散射，这些 都会产生杂散光。杂散光的存在会对比尔定律产生偏移。 • 狭缝可选 具有0.1nm、0.2nm、0.5nm、1nm、2nm、5nm 共6档光谱带宽选择， 通过带宽调节找到最优的测试条件。 连续光经单色器分光，为了要有足够光强,入射光狭缝必须有一定的 宽度，因此由出射光狭缝投射到被测溶液的光束，并不是理论要求的严格 单色光，而是由一小段波长范围的复合光，由分子吸收光谱是一种带状光 谱，吸光物质对不同波长光的吸收能力不同，在峰值位置，吸收能力最强， ε 最大, 其他波长处ε 都变小，因此当吸光物质吸收复合光时，表现吸光 度要比理论吸光度偏低，因此导致比耳定律的负偏离。
仪器空载下点击“基线”，弹出对话框后在开始波长和结束波 长中分别输入 700和 300。 完成扫描后，查看列出的基线调零信息。
紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点
紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点一、本文概述紫外可见分光光度法是一种基于物质对紫外和可见光的吸收特性进行定量分析的方法。
在生物化学和药物分析中，这种方法被广泛应用于测定各类化合物的含量，其中包括黄酮类化合物。
黄酮类化合物，也称为黄酮或黄碱素，是一类具有广泛生物活性的天然产物，它们广泛存在于植物中，并具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，对黄酮类化合物进行准确、快速的定量分析具有重要意义。
本文旨在探讨紫外可见分光光度法在测定总黄酮含量中的应用，并对其方法学进行考察。
我们将详细介绍紫外可见分光光度法的基本原理、实验操作步骤，以及影响测定结果的各种因素。
我们还将讨论该方法的优点和局限性，以及在实际应用中可能遇到的问题和解决方案。
通过对这些内容的全面探讨，我们希望能够为相关领域的研究人员和技术人员提供有益的参考和指导，推动紫外可见分光光度法在黄酮类化合物分析中的应用和发展。
二、紫外可见分光光度法的基本原理紫外可见分光光度法（UV-Vis spectrophotometry）是一种基于物质对紫外和可见光区域内特定波长光的吸收特性进行定量分析的方法。
该方法基于朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law），即溶液对光的吸收与溶液的浓度成正比，与光通过溶液的路径长度也成正比。
在紫外可见分光光度法中，当一束单色光通过被测溶液时，部分光能会被溶液中的吸光物质吸收，导致光强减弱。
吸光度（A）与吸光物质的浓度（c）和光程长度（l）之间的关系可以表示为 A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数，它表示单位浓度、单位光程长度下的吸光度。
对于总黄酮含量的测定，黄酮类化合物在紫外可见光区域内有特定的吸收峰，通过测量这些吸收峰处的吸光度，并结合标准品的工作曲线，可以实现对总黄酮含量的定量分析。
紫外可见分光光度法还具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此在黄酮类化合物含量测定中得到了广泛应用。
需要注意的是，紫外可见分光光度法只能测定那些具有吸光特性的物质，且受到溶液的颜色、浊度以及其它共存物质的影响。
实验10 紫外可见吸收光谱测试
实验10紫外可见吸收光谱测试140604班 C组胡晓玲 3214001700【实验目的】本实验的目的是利用紫外光区和可见光区的光学特性的检测方法测试甲基橙的光学特性，同时培养分析和运用材料紫外光区和可见光区光谱特性的能力。
【仪器用具】UV-2550岛津紫外可见分光光度计【实验原理】研究甲基橙在紫外-可见光区的分子吸收光谱的。
其中所利用的紫外-可见分光光度法是利用某些物质的分子吸收200~900 nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法，这种方法广泛用于无机和有机物质的定性和定量测定。
当光作用在物质上时，一部分被表面反射，一部分被物质吸收。
改变入射光的波长时，不同物质对每种波长的光都有对应的吸收程度（A）或透过程度（T），可以做出这种物质在实验波长范围内的吸收光谱曲线或透过光谱曲线。
用紫外-可见分光光度计可以作出材料在紫外光区和可见光区的对紫外光和可见光的吸收光谱曲线或透过光谱曲线。
利用的是朗伯-比尔定律：（10-1）A abcA为吸光度，a为吸光系数，b为光路长度，c为物质浓度。
通过吸收光谱曲线或透过光谱曲线可以判断材料在紫外光区和可见光区的光学特性，为材料的应用作指导。
例如，具有较高的紫外光吸收性能，可作为保温吸热等材料；如具有较高的紫外光反射特性，则可作为好的抗老化材料。
除此以外，紫外-可见吸收光谱还可用于物质的定量分析、定性分析、纯度鉴定和结构分析等。
【实验步骤与结果分析】1.实验步骤①以去离子水为测试参比溶液进行基线校正。
②以去离子水为参比液，不同浓度的甲基蓝溶液为测试样品，测试不同浓度的溶液的紫外可见吸收光谱图。
2.实验结果分析①掌握紫外可见吸收光谱分析的基本原理；②掌握利用紫外可见分光光度计测试液体溶液吸光度的方法，并绘制溶液的紫外可见吸收光谱图如下由图可知：其他条件一定的情况下，在紫外可见吸收区中，甲基橙的浓度越大，其吸收强度越明显。
【注意事项】1. 在光谱基线校正过程中光度计状态窗口的读书变化。
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5.1期间核查的频率
正常情况下为两次检定之间，即每年进行一次，遇到有仪器设备维修、对 仪器设备有怀疑或有特殊需要的情况下，应临时进行期间核查。
5.2外观检查
5.2.1样品室应密封良好，无漏光现象。干燥剂的位置摆放合理，无阻挡光 路情况。
5.2.2吸收池的透光面应光洁，无划痕和斑点，任一面不得有裂纹。
3、光度测定
3.1首先选择测定方式，即编方法。
在菜单栏的 “编辑”下拉菜单中，选择 “方法”，弹出“光度测定方法向导-［波 长］”对话框，在波长类型中，可设定测定的波长范围（点或范围）。
如果选择波长类型为 “点”，则输入目标波长，点击 “加入”，即出现在 “条目 中；若选择波长类型为 “范围 ”，则输入波长范围，点击 “加入 ”。完成后，点击 “下一步 ”；设置类型及定量法等；点击 “下一步”，设置标准样品重复次数，点击 “下一步 ”，设置未知样品重复次数；点击 “下一步”，设置方法的保存位置，点击 “完成 ”，方法即保存。
xxUV-2550
一、仪器简介
岛津UV-2550是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计，性能卓 越且操作简单方便，与功能强大的操作软件UVProbe结合，可以具备强大的功 能。小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。
1）xx的超低杂散光
UV-2550采用优异的DDM（双闪耀衍射光栅、双单色器）技术实现了超低 杂散光（0.0003％以下）和高光通量。低的杂散光可以对高浓度的样品不进行稀 释而直接测定。
生命科学领域：
可对从生命体内得到的微量样品进行测试。
积分球测试：
可以对浑浊样品和粉末状的样品进行测试。
反射附件：
可以对光学材料进行相对反射和绝对反射的测定。
二、主要技术指标
波长范围
谱带范围
杂散光190〜900nm
0.1~5nm,6xx转换
0.0003%以下分辨率
光束
检测器0.1nm
xx方式
光电倍增管
3.2标准曲线的绘制。
在标准表中，输入标准品信息。
点击光度计按键栏的 “读取Std.”开,始测定。测定时，可以自动测定（把样 品全部放入样品盒，一次可放6个，点击方法中的附件，选择 “六联池”软,件自 动测定各标准溶液的吸光度，并自动绘制标准曲线。所配标准溶液的吸光度在
0.15〜1.0范围内，吸收测定的精密5-5度约为0.5%（注：
用动力学分光光度法在500nm扫描，漂移范围：
士0.004Abs/h电源启动2h后）。
四、注意事项
不要用手触摸样品室中透光窗面，若不小心接触过，要用无水乙醇擦拭。 假如在石英窗上发现有染色剂，应清洗干净以防影响测定。要小心保护比色皿 的透光面，只能用镜头纸或脱脂棉轻轻擦拭，避免硬的物品把透光面划伤。至 少每季度清洁样品室一次，擦洗样品室底部以清洗溅出的液体样品，防止其蒸 发和腐蚀样品室，或由于腐蚀而得到错误结果。
1.3初始化结束后，仪器需预热15min。预热结束，即可往下操作。
2、基线校正
2.1点击菜单栏中的 “窗口”，在下拉菜单中，点击 “光度测定”，打开光度模 块；2.2点击屏幕下方光度计按键栏的 “基线”，弹出“基线参数”对话框，输入波 长范围（实验所需的波长范围），点击 “确定”，启动基线校准操作，在基线扫 描过程中，注意波长的变化范围，读数变化 <3nm可接受。扫描结束后，点击输 出窗口的 “仪器履历 ”，查看基线扫描结果。
3.3样品的测定
在样品表中，输入样品信息。测定方法同标准品的测定。
3.4储存
测量完毕后，单击 “文件 ”下拉菜单的 “保存”，储存到指定的位置。
3.5关机
将比色皿从样品池中取出，先关闭软件UVProbe2.21,再关闭仪器电源开 关。
3.6清洁
测定结束后，小心将仪器内部及台面被污染的地方清洁干净。比色皿放回 原位。
5.2.3仪器与计算机的接口处ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ触良好，光源工作正常，无灯丝熔断问题。
5.3波长准确度的校正
利用氘灯的两个特征波长峰486.0nm和656.1 nm来检查波长的精确度。波 长的漂移范围：±0.3nm。
5.4基线平直度
扫描200〜1000nm的基线，吸光度的漂移范围：
士0.001Ab以内。
5.5时间扫描
2）通用型的软件UVProbe
UV-2550通过新一代的中英文双语操作软件UVProbe控制，包含光谱测 定、光度测定、动力学测定和报告处理四大模块，从基本的测定到研究解析都 可以通过它实现。UVProbe实现了真正的QA/QC功能，完全支持GLP GMP。另外还可以加载膜厚测定、色彩分析等软件。
3）丰富的附件选择和广泛的应用领域
当摩尔吸收系数为10L/mol.cm、石英皿的光程为1cm、浓度在1x1〜-6
1.5x10mol/范围时，即可得到0.15〜1.0范围的吸光度）。标准测定完 毕，工作曲线自动显示。接下去测定未知样品的浓度。），也可手动测定（把 单个样品放入光路，点击方法中的附件，选择 “无”），但是自动测定可能会在 光路转换过程中产生误差。测定结束，点击菜单栏的 “图像”，在下拉菜单中 “标 准曲线统计 ”，可查看标准曲线的相关信息。
三、操作流程
1、开机预热
1.1先打开电脑显示器和主机，再打开仪器的电源（仪器左侧），双击桌面 上的图标UVProbe
2.33,出现“运行身份”对话框，选中“当前用户”，把“保护我的计算机 ”前的“A去掉，否则进不去程序，点 确定”进入软件；
1.2点击屏幕下方的 连接”出现“U2550PC系列-Rev.A（FD0（对话框， 仪器开始初始化，所有项目前显示绿灯，则初始化通过，点击 “确定”，仪器连 接成功；