维普资讯 httpwwwcqvipcom 酸乳菌种分离纯化方法 伍时华,黄
乳酸菌的分离纯化
乳酸菌的分离纯化乳酸菌的分离与纯化1.实验目的2.实验材料2.1试验设备天平、牛角匙、电炉、pH试纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻璃棒、试管、棉塞、培养基、吸管、牛皮纸、线绳、标签、500mL锥形瓶两个、250mL锥形瓶两个、试管20只、500mL烧杯两个、250mL烧杯两个、100mL 烧杯两个、酒精灯、石棉网、接种针（环）。
2.2实验仪器50L的高压蒸汽灭菌锅、恒压干热灭菌箱、超镜台、光学显微镜、75%酒精棉、冰箱。
2.3实验药品新鲜酸奶、脱脂奶粉或全脂奶粉、蔗糖、1.6%溴甲酚绿乙醇溶液、酵母膏、琼脂、结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%乙醇、诗坛酸复红染液。
3.试验方法及操作过程3.1BCG牛乳培养基配方及灭菌（A）液：脱脂奶粉10克，水50ml，加入1.6%溴甲酚绿乙醇溶液1ml，80℃灭菌20min。
（B）液：酵母膏1克，水50克，琼脂2克，pH6.8，121℃灭菌2.min。
按照配方正确称取所需药品放于烧杯中，在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解，用1N NaOH或1N HCl调pH，用pH试纸对照，加琼脂溶化，加热过程要不断搅拌，可适当补水。
琼脂完全溶解后倒入250mL的锥形瓶中，用纱布包扎好（注意不要污染纱布）再用牛皮纸包扎，贴上标签（必须用铅笔写），注明何种培养基。
在高压锅中，在1kg/cm2压力下维持30min。
3.2倒BCG培养基平板的方法将灭好菌的A液和B液趁热充分混合，点燃酒精灯对周围的空气进行灭菌，并在酒精灯的附近用左手握着平板用拇指和小拇指打开一个小缝，趁热将培养液倒如平板内，倒入的量能使培养基刚要覆盖平板底部，倒好后把平板平放到实验台，轻轻晃动是培养基形成一个平面，等培养基冷却凝固后倒放并贴上标签。
（注意：整个实验要在酒精灯附近做，以保证培养基不染菌）3.3脱脂乳试管的配制与灭菌直接选用脱脂乳液或按脱脂奶粉10克与蔗糖5克，水95克（蔗糖与水的比例在1：10的范围内）的比例配制，装量以试管的1/3为宜，115℃灭菌15min。
酸乳菌种分离纯化方法
弃上清夜，加少量蒸馏水与沉淀的菌体漩涡混合，定 容至所需容量，用 ７５４ －紫外分光光度计在 ５００ｎｍ 波长 条件下测定吸光度。以培养时间为横坐标，相应的吸 光度为纵坐标，绘制菌体生长曲线。
２ 结果与讨论
酸乳（ｙｏｇｈｕｒｔ）是指乳与乳制品（杀菌乳或浓缩乳）在保 加利亚乳杆菌（ 已更名为：德氏乳杆菌保加利亚亚种）和 嗜热链球菌（ 已更名为：唾液链球菌嗜热亚种）等酸乳发 酵菌种的作用下，经乳酸发酵得到的凝固乳制品，可 任意添加乳粉、脱脂乳粉、乳清粉等，在最终产品中 必须大量存在这些微生物［１，２］。１９００ 年诺贝尔生理学和医 学奖获得者俄国科学家梅契尼柯夫指出酸奶有利于长 寿，促进了酸奶的普及［ ３ ］。
酸乳发酵菌种的功能主要是产酸、产风味物质、 稳定质构，它的质量和品种在酸乳生产中起着关键性的 作用。工厂使用的菌种一般均培养在脱脂牛奶中代代相 传。由于传代次数多常导致菌种的退化或变异，在生 产中出现产酸变慢、风味变差、产品尖酸的现象，不 得不更换菌种［ ４ ］ 。因此，进行酸乳菌种的分离及纯化方
法研究，对保持产品质量，开发新产品或者筛选更优 菌株等方面具有一定的现实意义。
１ ０ －３ 稀释，采用倾注平板法分别在改良 Ｍ Ｒ Ｓ 、乳糖琼 脂、Ｙ 、改良 Ｍ Ｃ 、Ｂ Ｃ Ｇ 和改良 Ｉ Ｒ Ｉ Ｅ 、Ｔ Ｙ Ｃ 、Ｊ 、Ｂ Ｃ Ｇ 、 改良 ＭＣ 的平板上进行分离，置于 ４３℃烛缸法厌氧培养 ４ ８ ｈ ，根据菌体在各培养基中生长情况选择合适的培养 基；比较平板划线分离法、倾注平板分离法的分离效 果；研究在大气环境、真空袋、烛缸厌氧等培养条件 的分离效果。
Ｔｈｅ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｙｏｇｈｕｒｔ Ｂａｃｔｅｒｉａ
酸奶中乳酸菌的分离与纯化
酸奶中乳酸菌的分离与纯化一、实验目的1.掌握分离乳酸菌的基本原理和操作技术；2.学习并掌握稀释法和微生物纯培养操作。
二、实验设备及材料培养基材料：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、番茄汁、葡萄糖、吐温、溴甲酚绿、琼脂。
实验材料：无菌水、培养皿、电热套、高压蒸汽灭菌锅、电子分析天平、涂布棒、酒精灯、无菌试管、移液枪、无菌吸管。
三、实验原理乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。
大多数不运动，少数以周毛运动。
菌体常排列成链。
根据细胞形态分为球状或杆状，可分为两大类，即乳酸链球菌和乳酸杆菌。
在乳酸菌培养基平板上，乳酸菌菌落大约1～3mm，圆形隆起，表面光滑，呈乳白色、灰白色或暗黄色；在产酸周围还能产生CaCO3溶解圈。
乳酸菌革兰氏染色后呈蓝色，为革兰氏阳性菌。
四、实验步骤1.乳酸菌培养基的制作配方蛋白胨 2.0g酵母膏 2.0g番茄汁40g葡萄糖 2.0g吐温0.10mL碳酸钙 3.4g溴甲酚绿0.02g琼脂2～4g水200mL①称量：按照培养基配方依次称取药品放入烧杯中。
②熔化：在烧杯中加入略少于200mL水，加热至沸腾。
依次加入药品，用玻璃棒不断搅拌，待其完全溶解后，加入琼脂，搅拌至完全熔化，最后补足所损失的水分。
③分装：将配置的乳酸菌培养基装入三角瓶中。
④加棉塞、包扎⑤灭菌：将乳酸菌培养基在压力0.11MPa，温度121℃条件下灭菌20min。
⑥无菌检查2.倒平板将乳酸菌培养基熔化，待冷却至55～60℃时，倒平板，倒好后，在室温下培养2～3d，或37℃培养24h，检查无菌落及皿盖无冷凝水后再使用。
3.制备稀释液量取酸奶10mL，放入盛有90 mL无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，震摇约20min，使酸奶与无菌水充分混合，将酸奶分散。
用一只1 mL无菌吸管从中吸取1 mL酸奶悬浊液注入盛有9 mL无菌水的试管中，吹吸三次，使充分混匀。
然后再用一支1 mL无菌吸管从此试管中吸取1 mL注入另一盛有9 mL无菌水的试管中，以此类推，制成10−3、10−4、10−5各种稀释度的酸奶稀释液。
酸奶中乳酸菌的分离检测及纯化ppt课件
【实验材料、仪器与试剂】
实验材料：市售乳酸饮料或酸奶。 实验仪器：保温箱、高压蒸汽灭菌锅、水浴锅、 培养皿、试管、涂布器、酒精灯等。 实验试剂：脱脂乳试管、脱脂奶粉、5%蔗糖水、 1.6%溴甲酚紫、95%乙醇溶液、酵母膏、 琼脂、无菌水
【实验步骤】
1、1.6%溴钾酚紫牛乳培养基的制备
2、脱脂乳试管的制备
3、酸奶中乳酸菌的分离 4、乳酸菌的检测、纯化培养
（1）、1.6%溴甲酚紫牛乳培养基的制备
配料： （A）液：脱脂奶粉100g，水500ml，加入1.6%溴甲酚紫、乙醇溶液1ml， 80℃灭菌20min。 （B）液：酵母膏10g，水500ml，琼脂20g ，pH6.8， 121℃湿热灭菌20min。 操作： （1）、按照配方正确称取所需药品放于烧杯中，在搪瓷杯中加入所需水 量，玻棒搅匀，加热溶解，用1N NaOH或1N HCl调pH，加琼脂溶化，加 热过程要不断搅拌，可适当补水。琼脂完全溶解后 倒入250mL的锥形 瓶中，贴上标签，在高压锅中灭菌20min。 （2）、灭好菌的A液和B液趁热充分混合，并在酒精灯的附近趁热倒平板 。
10ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml
10-1
花园酸奶 90ml无菌水 9ml无菌水 9ml无菌水 9ml无菌水 9ml无菌水 9ml无菌水 9ml无菌水
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-7
另留一管不稀释留作对照（CK）
（2）、分离方法
A．平板划线 接种环挑取10-1菌液，按无菌操作对标有”10-1”的3个平板进 行划操作；划线完毕后，盖上皿盖，倒置放在40℃恒温培养箱中培 养48小时。
B．平板涂布
蒙古戈壁地区自然发酵乳中乳酸菌的分离鉴定
４ ２
微 生物 学 杂 志 ２０ ５ ０７年 月第 ２ ７卷第 ３ 期
Ｊ Ｕ Ｎ ＬＯ ＩＲ ＢＯ Ｏ ＹＭ ｙ ０７Ｖ１ ７Ｎ ． Ｏ Ｒ Ａ ＦＭＣ Ｏ ＩＬ Ｇ ａ ２０ ｏ ２ ｏ３ ．
蒙 古 戈 壁地 区 自然 发 酵 乳 中乳 酸 菌 的分 离鉴 定
Ｉ ｏ ａ ｉ ｎ ａ ｄ Ｉ ｅ ｉ ｃ ｔｏ ｆ Ｌａ ｔ ． ｃ ｅ ｉ ｒ ｍ ｔ ｒ ｌｙ ｓ ｌ ｔｏ ｎ ｄ ｎｔｆ ａ ｉ ｎ ｏ ｃ ｏ Ｂａ ｔ ｒａ ｆ ｏ Ｎａ ｕ ａ ｌ ｉ Ｆｅ ｍ ｅ ｔ ｄ Ｍ ｉ ｎ Ｍ ｏ ｏ ｉ ｎ Ｇ ｏ ｉＲｅ ｉ ｎ ｒ ｎ ｅ ｌ ｉ ｋ ｎｇ ｌａ ｂ ｇ ｏ
刘 红 霞 ，徐 杰 ，云 月英 ，张 文 怿 ，吉 日木 图 ， 张和 平
（ 蒙 古农 业 大 学 乳 品生 物 技 术 与 工 程 教 育 部 重点 实 验 室 ， 蒙 古 呼和 浩 特 内 内 ００ １） １０ ８
摘 要 从 采 集 自蒙 古 国戈壁 地 区 的 ６份 自然 发 酵 乳 中分 离到 ｌ ４株 乳 酸 茵 ， 过 形 态 特 征 ， 理 生 化 特 性 ， 经 生 糖 发 酵 试 验 和 乳 酸 旋 光性 的测 定 ， 定 结 果 ： 酸 球 菌 ５株 ， 鉴 乳 包括 Ｌ ｃ ｃｃｕ ｃ ｓｓ ｂｐ ｒｍ ｒ ａ ｔ ｏｃｓｌ ｔ ｕ ｓ ．ｃ ｏｉ ｌ株 ， ｅ ｉ ｏ ａｉ ｅ ｓ Ｐ ｄｏ — ＣＣＵ． 后 缩 写 为 Ｐ ｄ ） ｕｉａ ｅｕ ３株 ， ｅ ｉｃｃｕ． ｅ ｔ ａ ｅｓ ｌ株 ； 杆 菌 ９株 ， Ｏ ＣＳ （ ｅ ． ． ｒ ｅｑ ｉ ｎ Ｐ ｄｏｏｃ ｓｐ ｎ ｓｃｕ ｏ 乳 包括 Ｌ ｃ ｂ ｃ ｌ ． 后 缩 写 ａｔ ａｉｕ （ ｏ ｌｓ 为 ￡ ） ｅ ｅ ｃｓ ８株 ， ａ ｔ ａ ｉｕ． ｅ ｒｅｋｉ ｕ ｓ．ｂ ｌ ｒ ｕ ． ｈ ｌ ｔ ｕ ｖｉ Ｌ ｃ ｂ ｃ ｓ ｄ ｌ ｕ ｃｉ ｏ Ｕ ｂ ．ｓ ｂ ｐ ｕｇ ｉ ｓ ｌ株 。 蒙 古 国戈 壁 地 区 自然 发 酵 乳 中 的优 势 茵 ａｃ
酸乳菌种分离纯化方法
酸乳菌种分离纯化方法
伍时华;黄翠姬;石媛靖;邱月葵
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2004(025)010
【摘要】本文研究了在脱脂乳中保藏的发酵酸乳菌种的分离纯化方法.确定了德氏乳杆菌保加利亚亚种的分离纯化培养基为改良MRS,以10-2稀释度划线分离法在烛缸中厌氧培养可以达到很好的分离效果,添加2%的玉米浆后有利于纯菌株的生长;采用涂布分离法和真空袋培养,在链球菌基础培养基上可很好地分离出唾液链球菌嗜热亚种的纯菌株.经鉴定所分离出菌株为纯种后,采用斜面保藏在不含乳基质的培养基上,在15d内可以保持其活力.
【总页数】5页(P162-166)
【作者】伍时华;黄翠姬;石媛靖;邱月葵
【作者单位】广西工学院生物与化学工程系,广西,柳州,545006;广西工学院生物与化学工程系,广西,柳州,545006;广西工学院生物与化学工程系,广西,柳州,545006;广西工学院生物与化学工程系,广西,柳州,545006
【正文语种】中文
【中图分类】TS252.54
【相关文献】
1.嗜酸乳杆菌胆盐水解酶的分离纯化及酶学性质 [J], 赵瑞香;李刚;牛生洋;杨大光;路四海;段改丽;李银娜
2.嗜酸乳杆菌产细菌素的分离纯化研究 [J], 陈静;何连芳;张玉苍
3.提高嗜酸乳杆菌菌种质量的方法 [J], 宋冠姬
4.嗜酸乳杆菌细菌素的分离纯化及表面活性剂对其活性的影响1) [J], 张帅;王金凤;马永强
5.白牦牛肠道嗜酸乳杆菌的分离纯化及安全性试验研究 [J], 祝艳华;王喜梅;郑红星;张进隆;贾志江;祁珊珊;尹凤琴;张忠
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酸奶中乳酸菌的分离、鉴定及性能研究
1.1 材料与试剂 实验样品为一款来自手工制作的酸奶。 3% 过氧化氢溶液、500 mL 新鲜脱脂乳、0.1 moL
NaOH 溶液、1.6% 溴甲酚紫、氯化钠、2% 酚酞试剂、 莫匹罗星锂盐、半胱氨酸盐酸盐和石蜡油，以上试剂均 为国产分析纯；MRS 琼脂培养基、MRS 肉汤培养基、
作者简介：黄耀雄（1989 －），男，本科，助理工程师；研究方向为食品安全与检验。
分析检测 Analysis and Testing
doi:10.16736/41-1434/ts.2021.03.064
酸奶中乳酸菌的分离、鉴定及性能研究
Study on Isolation, Identification and Performance of Lactic Acid Bacteria in Yogurt
JE1002 型电子天平（上海蒲春计量仪器有限公 司）、BXM-50KB 型立式压力蒸汽灭菌器（上海申安 医疗器械厂）、LRH-250F 型生化培养箱（上海一恒 科学仪器有限公司）、3WLED 型光学显微镜（重庆 奥特光学仪器有限公司）、HR50- Ⅱ A2 型生物安全 柜（青岛海尔生物医疗股份有限公司）、2720 型 PCR 仪（美国 Applied Biosystems 公司）、PowerpacTM 基 础型电泳仪（美国 BIO-RAD 公司）、AlphaImager EP 通用型凝胶成像系统（美国 Alpha Innotech 公司）及 Z216 MK 型离心机（德国 HERMLE 公司）。 1.3 酸奶中乳酸菌的分离、纯化及鉴定
Keywords：yogurt; lactic acid bacteria; identification; performance
中图分类号：TS252.54
《广西工学院学报》2006年总目次
基 于支 持 向量机 和遗 传算法 的特征 选择 … …… …… … …… …… …… … …… ……… …… 韦振 中 ， 黄廷磊 Ｌ ８ １）
基 于参 考数 据选取 的改进 Ｒ 法 … … ……… … …… … ……… … …… …… ……… … ……… … 李 弘宇 （２ Ｉ Ｐ算 ２）
敏， 陈 维， 李利 明 （ ７ ４）
银杏 种 核涂 膜保鲜 的研究 … …… … …… ． …… …… …… …… …… …… … …・许 金 蓉 ， １ ． … 何 从 面 向对象 到面 向 Ａｇ ｎ 的本质 思考 … ……… … …… … ……… … …… …… … 唐培 和 ， ｅｔ 刘
仁， 农继 平 （ ３ ５） 浩， 杨新 伦 （ ６ ５）
一
种基 于 Ｈｉ ｅｔ ｌ ｒ 扫描 的 医疗 图像无 损压 缩算 法 … …… … ……… … …… …… ……… … ……… … 孙 自广 （ １ ｂ ８）
基 于线 性需 求和容 量 限制 的一 类库 存 问题研 究 …… … …… …… …… …… …… …… …… 朱 彦利 ， 云龙 （５ 程 ８） 浅析城 市道 路交通 废 气污染 危 害及 控 制措施 … …… … …… …… …… …… …… …… …… 覃 运梅 ， 吴彤 峰 （９ ８） 五件式 港 口机械钢 圈焊接工 艺 研究 及应 用 …… …… … …… …… …… …… … ……… …… 周 到 ， 康
栀子 黄 色素 浸 出工 艺 改进 的研 究 … …… ……… … …… … ……… … …… …… … 凌
嶝 （４ ３）
脂肪 酶催 化合 成蔗 糖 一 ６ 一月桂 酸单 酯 的研究 …… … …… ……… … …… …… ……… … 李 军生 ， 谭贤 勇 （３ ４）
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础培养摹 、Ｂｃ 卞 乳营 养琼 脂 培养 基 、 卞乳琼 脂 培养 Ｇ
作者简介 ：伍 时 （ ９ ３ ） １ ６ 一 ，男 ，剐 教授 ，系主 任 ，博十 ，研究方 向为发酵工 。
维普资讯
Ａｂ ｔａ ｔ ｓｒ ｃ ：Ｔｈ ｓ ａ ｅ ｔｄｅ ｉｌ ｎ ｔｅｉｏ ａ ｏ ｎ ｕ ｆｃ ｔ ｎｍｅ ｏ ｆ ｏ ｈ ｒｂ ｃｅ ａ ｗｈ ｃ ｅ ｐｉ ｅ ｒａ ｅｍｉ ｉ ｐ ｒ ｕ ｉｄ ｍａｎｙｏ ｌｔ ｎａ ｄｐ ｒｉ ａ ｏ ｔ ｄｏ ｇ ｕ ｔ ａ ｔｒ ， ｉｈｋ ｅ ｄ ｇ ｅ ｓ ｌ ｐ ｓ ｈ ｓ ｉ ｉ ｉ ｈ ｙ ｉ ｎ ｋ．
※工
良 品雨
２ ４Ｖ．５Ｎ．０ ６ ０ ，ｏ ２ ｏ１ ０ １ ， １３
基 、菌 种鉴 定培养 基 以及各 种优化 培养基 ，按文 献【 ～ ５
１ １ 述 方法 配制 。 ４所 １ 实验 方法 － ２ １． ．１ ２ 原菌 种的活 化
将分 离纯化后 的 Ｓｔ ．纯菌在 改 良 Ｉ Ｉ 、Ｔ Ｃ、链球 ＲＥ Ｙ 菌 基础 培养 基 、牛乳 琼脂 固体 培养基 和在 添加 ２ 玉米 ％ 浆 的改 良 Ｉ Ｉ ２ Ｙ ２ Ｒ Ｅ 、Ｔ Ｃ 、链 球菌基础 培养基 ２中划线培 养 ，４ ｈ后观 察 菌 体 生 长情 况 。 ８
中图分 类 号：Ｔ ２２５ Ｓ ５． ４
文献 标识 码 ：Ａ
文 章编 号：１０—６０２ ０）００ ６ —５ ０ ２６３ （０４ １—１２０
酸－ （ｏ ｈ ｒ 是指乳与乳制 品（ ￣ ｙ ｇ ｕｔ Ｌ ） 杀菌乳或浓缩乳） 在保 加 利 乳杆 菌（ 已史 名为 ：德 氏乳 卡 菌保 加利 业 种 ） Ｔ 和 嗜 热链球 菌 （ 已更名 为 ：唾 液链球 茼 嗜热 种 ） 酸乳 发 等 酵 菌 种 的 作 用 下 ，经 乳 酸 发 酵 得 到 的凝 固乳 制 品 ， 可 任 意 添 加 乳 粉 、 脱脂 乳 粉 、乳 清 粉 等 ，在 最 终 产 品 中
产 中 …现 产 酸变 慢 、风 味 变 差 、产 品尖 酸 的 现 象 ， ／ ｆ
Ｓｔ ．表示） 广两 某乳业有 限公司 。
１１ 培养摹 实验 中用到 的培养摹 有改 良ＭＲ 、乳 ．２ ． Ｓ
糖琼 脂 、Ｙ、改 良Ｉ Ｅ、ＴＹＣ、 改 良 Ｍ Ｃ、链 球 菌基 ＲＩ
得 ／ 史换 菌 种［。 此 ，进 行 酸乳 菌种 的分 离及纯 化 方 ｆ ４ １
摘 要 ：本 文研 究 ｒ 脱脂 乳 －保 藏 的发酵 酸乳 菌种 的分 离纯 化办 法 。 确 定 了德 氏乳 杆 菌保加 利亚 亚 种 的分 离纯 化 在 ｛ 】 培养 基 为改 良 ＭＲ ， 以 １一 释 度划 线分 离法 在烛 缸 中厌氧 培养 可 以达 剑很 好 的分离 效 果， 添 加 ２ 的玉 米浆后 有 Ｓ ０稀 ： ％ 利于 纯 菌株 的生 长 ；采用 涂布 分 离法 和真 空袋 培养 ，在 链球 菌基 础培 养摹 卜 可很 好地 分离 出唾 液链 球 菌嗜热 业种 的 纯 菌株 。经 鉴 定 所 分 离 出菌 株 为 纯 种后 ， 采 用斜 面 保 藏 在 含乳 基 质 的培 养基 上 ， 在 １ ｄ内可 以保 持 其 活 力 。 ５
ｉｏ ｕａ ｏ ｆ ｎａ ａ ａ ｔ ｏ ｓｒ ｅｉ ｄｕ ｗｈｃ ｏ ｎ ａ ｉ ｇ ｌ ｏ ｒｅ ｃ ｕ ｄｋ ｅ ｅ ｖｔｌ ５ｄ ｙ ． ｎ ｃ ｌｔ ｎ ｏ ｇ ｓ ｎ ｅ ｖ ｍｅ ｉｍ ｉｈｎ ｔ ｏ ｔ ｎ ｎ ｋｓ ｕ ｃ ， ｏ ｌ ｅ ｐｔ ｍ ｉ ｉ ｉ １ ａ ｓ ｉ ａ ｒ ｌ ｃ ｎ ｎ ｃ ｉ ｍｉ ｈ ａｔ ｎ ｙ
关键词 ：德 氏乳杆 菌保 加利 、 业种 ；唾液链球 菌嗜热 、 巾 Ｉ Ｉ ；酸乳 ；分 离纯 化 啊
Ｔｈ Ｉｏａｉ ｎａ ｄＰ ｒ ｃ ｔ ｎｏ ｇ ｕ ｔ ｃｅｉ ｅ ｓ ｌｔ ｏ ｎ ｕ ｉ ａｉ ｉ ｆ ｏ ｆＹｏ ｈ ｒ Ｂａ ｔｒａ
Ｗ Ｕ Ｓ ｉ ｕ ，ＨＵＡＮＧ Ｃ ｉｉ ＨＩ ａ －ｎ ，ＱＩ Ｙｕ —ｕ ｈ— ａ ｈ ｕ— ，Ｓ ｎｊ ｇ ｊ Ｙｕ ｉ Ｕ ｅｋ ｉ
ｂ ｌ ａ ｉ “ ，以下 用 Ｌ． 示） 唾液 链球 菌嗜 热 亚种 ｕｇ ｒｃ Ｓ ｂ表 和
ｆｔｅ ｔｃ ｃ ｕ ａｉａ ｉｓｓ ｂｐ ｔｅｍｏ ｈｌｓ 以下 用 Ｓｒｐｏ ｏ ｃ ｓｓ ｌ ｒ ｕ ｓ ． ｒ ｐ ｉ ， ｖ ｕ ｈ ｕ
稳 定质 构 ，它 的质 最和 种在 酸乳生 产 中起 着关 键性 的 作 用 。工厂使 用 的菌种一 股均 培 养在 脱脂 牛奶 中代代相 传。 于 传 代 次 数 多常 导 致 菌种 的退 化 或 变 异 ， 在 生
表 １ 原菌种活化正交实验因素水平
对分 离得到 的酸乳菌株 用定期移 植保存 法保藏 。采 用斜 面与 穿刺培 养 ４ ｈ后 置 于冰 箱 中冷 藏 。 ８ １． ．８ 生 长 曲线 的测 定 ２ 每 ２ 取待测菌液稀释 １ 倍 ，以８ ０ ｒ ｎ ｈ ０ ０ ０／ 离心 ２ ｎ ｍｉ ｍｉ，
必须大量存在这 些微生物 ＿１ ９ ０年诺 贝尔生理学和 医 】 。１０ ． ２
法研 究 ，对 保 持 产 品质 量 ，开 发 新产 品或 者 筛选 更优 菌株 等 方 面具 有 一定 的现 实意 义 。
１ 材料 与方法
１ 材 料 ． １
学 奖获 得 者 俄 国科 学 家 梅 契 尼 柯 大指 出酸 奶 有 利 于 长
弃 匕 夜 ， 加少 量 蒸 馏 水 与沉 淀 的菌 体 漩 涡 混合 ， 定 清
容至 所需容量 ，用 ７ ４～紫外分光 光度计在 ５ ０ ｍ波长 ５ ０ｎ
条 件 下 测 定 吸光 度 。 以培 养 时 间 为横 坐 标 ，相 应 的吸 光 度 为 纵 坐 标 ，绘 制 菌 体 生 长 曲线 。 ２ 结 果与讨论 ２１ 原 菌种 的活化 ． 在牛乳 中保存 的菌种活 力不旺盛 ，处于维持 生命 的
１． ．７ 菌 种保 藏 ２
对 活 化 的 条件 ， 即活 化 的 培养 基 成 分 ，培养 基 的 灭菌 条件 ，接 种 量 ，培养 温 度 等 ４因 素 ， 以石蕊 牛 乳 培养 基 被 还 原 为 乳 白色 的 时 间 为指 标 进 行 正 交活 化 试 验 ， 以找 出最 佳 的 活 化 条 件 。 因 素 水平 表 见 表 １ 。
Ｔ ｅ ｓｌｔ ｎａ ｄｐ ｒ ｃ ｔ ｎｍｅ ｉｍ ｒ ｄ ｌｒｅｋｉｕ ｓ ． ｕ ｎ ｕ ｒ ｅ ｎ ｄ ｓｍｐｏ ｉｇ ｈ ｏａ ｏ ｕｉ ａ ｏ ｄ ｕ ｆ ｅｂｕ ｃ ｉ ￣ｐ ｂ ￣ａ ｃｓ ｅ ｆ ｅ ｒｖｎ ｉ ｉ ｎ ｉ ｆ ｉ ｏ Ｌ ｓ ｗｅ ｄ ｉ ａ ｉ ＭＲＳ ａｔ ｒａｉｇｐａｅ ． ｆ ｒ ｔ ｋｎ ｌｔ ｅ ｓｅ
（ ｐ ｒ ｎ ｆ ｉｌｇｃ ｌ ｎ ｈ ｍｉ ｒ ｎ ｉｅ ｒ ｇ Ｇｕ ｎ ｘ ｉｅｓ ｙｏ ｅ ｈ ｏｏ ｙ Ｄｅ ａｔ ｔ ｏｏ ｉａ ｄＣ ｅ ｓ ｙＥ ｇｎ ｅｉ ， ａ ｇ ｉ ｖ ｒｉ ｆ ｃ ｎ ｌｇ ， ｍｅ ｏ Ｂ ａ ｔ ｎ Ｕｎ ｔ Ｔ Ｌｕ ｈ ｕ ｉｚ ｏ ５ ５ ０ ， ｈｎ ） ４ ０ ６ Ｃ ｉａ
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１２ ０ ， １ ５Ｎ．０ ６ ２０ Ｖ ． ， ｏ１ ４ ｏ２
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酸乳菌种分离纯化方法
伍 时华 ，黄翠姬 ， 媛 靖 ，邱 月 葵 （ 西 『 院生物与化 学工程系 ，广西 柳州 ５ ５ ０ ） 广 ： 学 ４ ０ ６
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１＿ ．２ 增殖 培养 ２ 将在石蕊牛乳培养基活化 后的 Ｌｂ 以 ２ ．菌 ％接种量接
休 眠状 态 。因而 在使 用前 要进 行活化 。Ｌ． ｂ原菌种 活化 交 实验 方 案及 结 果 见表 ２，其 极 差 分析 结 果见 表 ３ 。
表 ２ Ｌｂ ．原菌种 活 化正 交 实验方 案及 结 果 Ｌ＃ ｌ４ （）
Ｋｅ ｒ ： Ｌａ ｔｂ ｉｌｓ ｄ ｌ ｒ ｅ ｋ ｉｓ ｂ ｐ． ｌａｒｃ ｓ Ｓ ｒｐｔ ｃ ｃ ｕ ａｌ ａ ｉ ｓｓ ｂ ｐ． ｈ ｒ ｐｈ ｌ ｓ ｙ ｇ ｕ ｔ ｙ ｗｏ ｄｓ ｃｏ ａｃｌｕ ｅｂ ｕ ｃ ｉ ｕ ｓ ｂｕｇ ｉｕ ； ｔｅ ｏ ｏ ｃ ｓｓ ｉ ｒｕ ｕ ｓ ｔ ｅ ｍｏ ｉｕ ； ｏ ｈ ｒ； ｖ ｉｏ ａ ｏ ｄｐ ｒｆｃ ｔｏ ｓ ｌｔ ｎａ ｉ ｎ ｕ ｉ ａ ｎ ｉ ｉ