药学实用仪器分析整理
药学专业实验室仪器设备使用与管理分析
药学专业实验室仪器设备使用与管理分析摘要：药学专业是一门培养具备药学学科基本理论和实验技能人才的学科，要求学生能够具备药物制备、质量控制评价和指导合理用药的能力，实验教学和技能训练是药学专业的重要部分，因此药学专业实验室的建设和使用至关重要。
本文指出了目前药学专业实验室在仪器设备使用与管理上存在的问题，并对药学专业实验室仪器设备的使用与管理策略进行了分析，希望能够进一步优化实验室仪器设备的使用和管理，充分利用药学实验室的资源，提高实验教学的质量。
关键词：药学专业；实验室；仪器设备；使用管理药学是一门实践性较强的学科，药学专业的学生要具备使用各种大型仪器设备的能力，还要掌握正确的生产工艺、科学的进行投料配料、控制生产各个环节，分析和解决生产过程中出现的问题，因此在学生的培养方面，离不开药学实验。
在药学专业实验室中，仪器设备直接影响着学生实践能力、创新能力和综合素质的培养，因此必须要对实验室的仪器设备进行科学的管理，提高仪器设备的使用效率。
一、药学专业实验室仪器设备使用与管理现状（一）缺乏完善的管理制度随着社会的不断发展，各地高校的办学条件都得到了一定的改善，在实验教学仪器方面的投入有所增加，实验室仪器设备的数量和质量有了很大程度的提高。
但是目前在很多高校的药学专业实验室，缺乏完善的仪器设备管理制度，有些实验室虽然建立了管理制度，但是却没有明确的责任划分，因此在仪器设备的实际管理过程中比较混乱。
（二）大型仪器设备使用频率不高由于受到多种因素的影响，在药学专业实验室的很多仪器设备，尤其是一些大型精密的仪器设备开放程度不高，因此未能实现资源共享，也就没有发挥出学术交流和科学研究的作用。
很多仪器设备都仅仅在某一实验教学环节中使用，其他时间都处于闲置状态，这种情况不但影响了仪器设备的利用率，也不利于仪器设备的保养[1]。
（三）仪器设备维修保养不到位很多高校在对药学专业实验室的建设上，都普遍存在着重视对仪器设备的购置、忽视对仪器设备的管理现象，在资金的投入上不平衡，在仪器设备的维修和保养方面投入甚少、甚至是没有投入，尤其是对于一些大型的精密仪器设备，如果相应的维护保养工作不到位，不仅会影响仪器设备的使用，还会影响教学和科研的进度。
药学常用仪器分析报告
药学常用仪器分析报告药学常用仪器分析报告一、仪器概述药学常用仪器有很多种类，包括色谱仪、质谱仪、红外光谱仪、紫外可见分光光度计、气相色谱仪等。
这些仪器主要用于药物质量控制、成分分析、纯度检测等方面。
本报告将重点介绍其中一种常用仪器-高效液相色谱仪（HPLC）。
二、仪器原理高效液相色谱仪（HPLC）是一种基于分离、定量和分析化学原理的仪器。
其原理是将样品通过高压泵送入色谱柱，样品中的成分在色谱柱中根据其吸附性质在流动相中产生差异分离，然后使用检测器检测各组分的相对浓度，最后将得到的数据进行分析和处理。
三、实验步骤1. 准备工作：根据实验方案选择合适的柱子、流动相等试剂。
2. 试剂溶液的制备：根据样品特性和需求，选择合适的溶剂和试剂，制备溶液。
3. 设置色谱仪条件：根据样品性质和需要，设置合适的流速、柱温和检测波长等参数。
4. 样品的准备：将待测样品按照要求进行提取、纯化等处理。
5. 样品的注射：将处理后的样品注射到色谱柱中。
6. 数据处理：使用色谱仪软件对样品的色谱图进行分析和处理，得到相应的峰面积和峰高等数据。
7. 结果记录：将分析结果记录下来并进行分析和解释。
四、应用领域高效液相色谱仪广泛应用于药物分析、药代动力学研究、天然药物分析、病毒检测等领域。
在药物质量控制方面，高效液相色谱仪可用于对药品的成分和纯度进行定性和定量分析；在药代动力学研究方面，可用于药物在体内的代谢和排泄研究等；在天然药物分析方面，可应用于中药有效成分的分离和鉴定；在病毒检测方面，可用于检测病毒中的DNA、RNA等。
五、结论高效液相色谱仪是一种非常重要和常用的药学分析仪器。
它具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点，在药学领域有着广泛的应用。
通过本次实验的研究，我们对高效液相色谱仪有了更深入的了解，为今后在药学研究中更好地应用这一仪器打下了基础。
建议今后在使用高效液相色谱仪时，应根据样品性质和需求，合理设置色谱仪条件，并注意样品的准备和实验数据的处理。
药学仪器分析及策略透析
药学仪器分析及策略透析实验教学无疑是理论课教学的有力补充,通过实验教学可以将相关的理论知识具体化,同时使学生学会分析仪器的基本操作和问题解决方法;但是,部分学生在实验课上习惯照方抓药、不假思索,导致他们感觉深奥的理论知识与具体的分析仪器之间尚存在不小的距离,有%的学生认为实验教学与理论内容脱节,%的学生则反映对仪器感觉陌生,仅%的学生认为示教实验能达到预期效果。
其他反馈我们在调查中还请学生各抒己见,谈谈他们学习本课程的体会。
大部分学生都畅所欲言,有的认为理论课知识太抽象,而面对仪器又感觉太难,有的希望了解所学知识在具体应用中的方法与思路,有的同学建议仪器构造与使用方法最好在实验课上讲,有的学生希望老师提供仪器的说明书。
上述反馈说明学生希望能综合掌握理论知识与分析实验技术的要求,也为我们进一步改进教学效果提供了很好的思路。
在开课之初,学生对本课程抱有较高的兴趣和热情。
随着内容的深入,有些学生可能感觉越来越难而降低了学习积极性。
为此,教师应从多学科的背景知识中,择取合适的切入点,然后自然地引出对理论知识和仪器技术的介绍。
我们在教学实践中,就从日常生活现象、科学发展史等内容中寻找切入点。
比如,在介绍质谱法一章时,我们首先提问“同学们是怎样吃核桃的”,学生回答“用锤子砸开”,我们再问“砸开后发生什么现象”,学生很快回答“核桃裂成了碎片”。
基于这样一个日常生活中的常见例子,我们再引出质谱法的原理:分子(核桃)在外力(锤子)作用下裂成分子碎片,再由分子碎片(核桃碎片)获得质谱图,进而反推出分子结构,而在介绍质谱仪的构造时又可以将“锤子”、“砸”等与“离子源”、“离子化”等术语相呼应。
通过设计生动有趣的切入点来介绍相对枯燥抽象的理论知识和仪器构造,更易于学生理解和掌握。
采取多种教学方式,促进教与学的互动鉴于仪器分析理论课内容比较枯燥,学生在课堂上难以建立对分析仪器的感性认识。
因此,教师在教学过程中更应注重教学方式的多样化,以及促进教、学双方的互动。
上海市考研药学复习资料药物分析常用仪器原理讲解
上海市考研药学复习资料药物分析常用仪器原理讲解在药学领域，药物分析是一个重要的研究方向，它涉及到药物的质量控制、药效评价以及药物的安全性等问题。
而在药物分析的过程中，常常需要使用到各种仪器设备来进行样品的检测和分析。
本文将针对上海市考研药学复习资料，对药物分析中常用的仪器原理进行讲解。
一、紫外-可见分光光度计紫外-可见分光光度计是药学领域常用的一种仪器设备，它可以用来测定药物溶液中的吸光度，从而判断药物的浓度。
其原理是利用药物在紫外或可见光波长范围内的吸收特性，通过检测溶液的吸光度来进行分析。
二、液相色谱仪液相色谱仪是药物分析中常用的一种分离和检测仪器。
它通过将待分析的药物混合物注入到色谱柱中，利用样品中不同成分在固定相材料上的分配系数不同而实现分离。
然后，通过检测样品在柱后流出时的吸光度或荧光强度来定量分析。
三、气相色谱仪气相色谱仪也是药物分析中常用的一种仪器，它主要用于对样品中的挥发性成分进行分析。
其原理是将待测样品蒸发进入气相色谱柱，并通过携带气体的载气将样品中的成分分离开来。
然后，通过检测样品在柱后流出时的信号峰来进行定量分析。
四、质谱仪质谱仪是一种用于测定物质化学组成和结构的仪器。
在药物分析中，质谱仪常用于对药物的分子量、结构和分子碎片等进行研究。
其原理是将样品分子通过离子化得到带电粒子，并将之分离按照质量比例放置在质谱仪中进行检测。
五、核磁共振仪核磁共振仪是一种基于核磁共振原理的仪器，它可以用来对样品中的核磁共振现象进行检测。
在药物分析中，核磁共振仪常用于对药物的分子结构进行研究。
通过观察样品在外加磁场下核磁共振信号的变化，可以得到药物的分子结构信息。
六、动态光散射仪动态光散射仪是一种用于测定样品中颗粒粒径的仪器。
在药物分析中，它常用于检测药物微粒的大小和分布状态。
其原理是将悬浮液中的颗粒暴露在激光束中，通过测量颗粒对光的散射强度来获得颗粒的粒径信息。
总结：以上介绍了上海市考研药学复习资料中药物分析常用的仪器原理。
药学实验仪器汇总.xlsx
药学实验仪器汇总.xlsx设备类型图片垂直流超净工作台和水平流超净工作台；超净工作台从操作人员数上分：分为单人工作台和双人工作台；超净工作台从结构上分：分为常规型和新型推拉以及自循环型（仅限垂直流）。
生化培养箱、电热式和隔水式培养箱，CO2培养箱。
如Thermo FORMA 370/371或380/382型CO2培养箱。
根据显微原理分为电子显微镜和光学显微镜。
倒置显微镜又分生物倒置显微镜，金相倒置显微镜，偏光倒置显微镜，荧光倒置显微镜。
如：LEICA DM4000M分离因素Fr值分：常速离心机Fr≤3500，高速离心机Fr=3500~50000，超高速离心机Fr>50000。
如Allegra 64R台式高速冷冻离心机。
数显恒温水浴锅、恒温水浴、恒温油浴、低温水槽、电动搅拌玻璃恒温水浴锅4℃、－20℃、－80℃如三洋MDF-U3386S.储存罐、运输罐如 YDS-30产品血球计数板，血球计数仪如五分类血球计数仪。
可分为一级、二级和三级三大类以满足不同的生物研究和防疫要求如格兰仕微波炉如Cyflow?PloidyAnalyser CytoFLEX 主要为塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。
塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用的，可以用于植物材料的培养。
如Kenker无菌微生物培养皿。
细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔等；根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。
塑料离心管，玻璃离心管，钢制离心管如美国BD Falcon离心管、15ml离心管、50ml离心管、锥形离心管。
分为电子移液器、瓶口移液器、电子滴定器，普通型适合细胞和组织的悬浮培养；标准型具有良好的细胞贴壁性能，适用于细胞的贴壁生长，专用型表面含有含mL氮官能团，能促进某些特殊细胞(如肿瘤细胞)的贴壁、生长和分化。
药物分析中常用仪器分析技术
气相色谱在检查中的应用
（4）不加校正因子和主成分自身对照法： 当没有杂质对照品时，可采用不加校正因子的 主成分自身对照法，按照（3）中方法配制对照溶液 并调节仪器灵敏度后，取供试品溶液和对照溶液适 量，分别进样，测量供试品溶液色谱图上各杂质的 峰面积，并与对照溶液主成分的峰面积比较，计算 杂质含量。
旋光度的测定方法
将测定管用供试液体或固体物质的溶液 冲洗数次，缓缓注入供试液体或溶液适量， 置于旋光计内检测读数，既得供试溶液的旋 光度。用同法读取旋光度3次，取3次的平均 数，既得测定的旋光度值。
比旋度的应用
1、比旋度的测定 2、在杂质检查中的应用 3、在含量测定中的应用
第二节 紫外-可见分光光度法 -
塔板理论
塔板理论是把色谱柱看作一个分馏塔，在每个 塔板内，样品在气液两相中达到分配平衡，经过多 次的分配平衡后，分配系数小的组分先到达塔顶。 由于色谱柱的塔板相当多，因此分配系数有微小的 差别即可实现分离。 塔板理论的假设实际上是把组分在两相间的连 续性转移过程，分解为间歇的在单个塔板中的分配 平衡过程，也就是用分离过程的分解动作来说明色 谱过程。
折光率一般使用阿贝折光仪测定。 阿贝折光仪使用日光作为光源，镜筒中 安装的消色棱镜可使不同波长的折射光均集 中于钠光D线的位置而达到目镜。 折光仪在使用前应用校正用棱镜或水进 行校正 。
比旋光度
基本原理
平面偏振光通过某些光学活性物质的液 体或者溶液时，偏振光的振动平面向左或向 右旋转，这种现象叫旋光现象。 偏振光旋转的角度称为旋光度。
气相色谱在检查中的应用
（5）面积归一化法： 测定各杂质峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外 的总色谱峰面积，计算各杂质峰面积占总峰面积的 百分率，应符合规定。由于峰面积归一化法误差较 大，因此，通常只能用于粗略考察供试品中的杂质 含量。
药学实验仪器汇总.xlsx
列32列4设备类型图片垂直流超净工作台和水平流超净工作台；超净工作台从操作人员数上分：分为单人工作台和双人工作台；超净工作台从结构上分：分为常规型和新型推拉以及自循环型（仅限垂直流）。
生化培养箱、电热式和隔水式培养箱，CO2培养箱。
如Thermo FORMA 370/371或380/382型CO2培养箱。
根据显微原理分为电子显微镜和光学显微镜。
倒置显微镜又分生物倒置显微镜，金相倒置显微镜，偏光倒置显微镜，荧光倒置显微镜。
如：LEICA DM4000M分离因素Fr值分：常速离心机Fr≤3500，高速离心机Fr=3500~50000，超高速离心机Fr>50000。
如Allegra 64R台式高速冷冻离心机。
数显恒温水浴锅、恒温水浴、恒温油浴、低温水槽、电动搅拌玻璃恒温水浴锅4℃、－20℃、－80℃如三洋MDF-U3386S.储存罐、运输罐 如 YDS-30产品血球计数板，血球计数仪如五分类血球计数仪。
可分为一级、二级和三级三大类以满足不同的生物研究和防疫要求如格兰仕微波炉如Cyflow®PloidyAnalyser CytoFL EX流式主要为塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。
塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用的，可以用于植物材料的培养。
如Kenker无菌微生物培养皿。
细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V 型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔等；根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。
塑料离心管，玻璃离心管，钢制离心管如美国BD Falcon离心管、15ml离心管、50ml离心管、锥形离心管。
分为电子移液器、瓶口移液器、电子滴定器，普通型适合细胞和组织的悬浮培养；标准型具有良好的细胞贴壁性能，适用于细胞的贴壁生长，专用型表面含有含氮官能团，能促进某些特殊细胞(如肿瘤细胞)的贴壁、生长和分化。
药物分析药物现代仪器分析法
What do you need to work with FFF
FFF differs from a standard HPLC in the column. Here the column is the channel. The channel is capillary with rectangular cross-section. There is no stationary phase inside the channel and separation is generated by an external field applied perpendicularly to the mobile phase flowing inside the channel.
● 未来的研究领域： 与生命科学相关，如生物医学、高通量的药物合成 筛选、卫生检疫等。随着人类基因组计划的初步完成，已步入后基因 组时代，单核甘酸多态性分析、基因表达分析、基因变异分析以及蛋 白组分析等， 由于μTAS有大规模平行处理能力，可望成为后基因组 时代的支撑性技术。
§7. 场流分离技术
The FFF mechanism combines elements of chromatography and field-driven techniques such a electrophoresis and ultracentrifugation. Like chromatography, FFF is an elution technique; like field-driven techniques, FFF requires a field or gradient. The field in FFF is applied at right angles to flow and serves to drive components into different stream laminae in a capillary channel. The different velocities of the fluid laminae across the channel develops the separation induced by the action of field.
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原子光谱――由原子能级之间跃迁产生的光谱称为原子光谱．分子光谱――由分子能级跃迁产生的光谱称为分子光谱．摩尔吸光系数：表示物质的浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时溶液的吸光度。
离子选择性电极：也称膜电极，能选择性地响应待测离子的浓度（活度）而对其他离子不响应，或响应很弱，其电极电位与溶液中待测离子活度的对数有线性关系，即遵循能斯特方程式。
保留值：表示试样中各组分在色谱柱中停留的时间或将组分带出色谱柱所需流动相体积的数值。
HPLC与GC差别1．分析对象的区别GC：适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品；但对高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品，尤其对大多数生化样品不可检测HPLC：适于溶解后能制成溶液的样品（包括有机介质溶液），不受样品挥发性和热稳定性的限制，对分子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分子和离子型样品均可检测2．流动相差别的区别GC：流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用力，只与固定相有相互作用。
HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起正向作用。
且流动相种类较多，选择余地广，改变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用，当选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相也可以增大分离选择性。
3．操作条件差别GC：加温操作HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小）高效液相色谱有哪几种定量方法，其中哪种是比较精确的定量方法，并简述之。
高效液相色谱的定量方法与气相色谱定量方法类似，主要有归一化法、外标法和内标法。
其中内标法是比较精确的定量方法。
它是将已知量的内标物加到已知量的试样中，在进行色谱测定后，待测组分峰面积和内标物峰面积之比等于待测组分的质量与内标物质量之比，求出待测组分的质量，进而求出待测组分的含量何谓正相色谱及反相色谱？在应用上各有何特点？答：正相色谱：流动相的极性小于固定相的极性。
反相色谱：流动相的极性大于固定液的极性。
何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？解：在一个分析周期内，按一定程序不断改变流动相的组成或浓度配比，成为梯度洗提。
是改进液相色谱分离的重要手段。
梯度洗提与气相色谱中的程序升温类似。
但是前者连续改变的是流动相的极性、PH或离子强度，而后者改变的温度程序升温也是改进气相色谱分离的重要手段。
气相色谱仪的基本设备包括哪几部分?各有什么作用?答：气路系统、进样系统、分离系统、温控系统以及检测和记录系统．气相色谱仪具有一个让载气连续运行的管路密闭的气路系统．进样系统包括进样装置和气化室．其作用是将液体或固体试样，在进入色谱柱前瞬间气化，然后快速定量地转入到色谱柱中．红外吸收光谱法与紫外可见吸收光谱法有何不同？紫外-可见吸收光谱：让不同波长的光通过待测物，经待测物吸收后，测量其对不同波长光的吸收程度(吸光度A)，以吸光度A为纵坐标，辐射波长为横坐标作图，得到该物质的吸收光谱或吸收曲线，即为紫外—可见吸收光谱。
红外光谱：又称为分子振动转动光谱，属分子吸收光谱。
样品受到频率连续变化的红外光照射时，分子吸收其中一些频率的辐射，分子振动或转动引起偶极矩的净变化，使振-转能级从基态跃迁到激发态，相应于这些区域的透射光强减弱，记录百分透过率T%对波数或波长的曲线，即为红外光谱。
区别--起源不同1.紫外吸收光谱由电子能级跃迁引起紫外线波长短、频率高、光子能量大，能引起分子外层电子的能级跃迁。
电子跃迁虽然伴随着振动及转动能级跃迁，但因后者能级差小，常被紫外曲线所淹没。
除某些化合物蒸气(如苯等)的紫外吸收光谱会显现振动能级跃起迁外，一般不显现。
因此，紫外吸收光谱属电子光谱。
光谱简单。
2.中红外吸收光谱由振—转能级跃迁引起? 红外线的波长比紫外线长，光子能量比紫外线小得多，只能收起分子的振动能级并伴随转动能级的跃迁写出范第姆特方程表达式和各参数的中文名称。
答：：H：理论塔板高度u：流动相线速度A：涡流扩散系数B：纵向扩散系数C：传质阻抗系数气相色谱仪的检测类型有哪几种？各有什么特点？各适合哪类物质？气相色谱检测器按其原理不同可分为浓度型和质量型两大类：浓度型检测器的响应信号由进入检测器的组分浓度所决定，如热导池、电子捕获检测器等；而质量型检测器的响应信号则上单位时间内进入检测器的组分质量所决定，如氢焰、火焰光度检测器等等。
（1）热导池检测器（TCD）是一种应用很广泛的通用型检测器，它的结构简单，灵敏度适宜，稳定性较好，对所有物质都有响应。
（2）氢焰离子化检测器（FID）对大多数有机物有很高的灵敏度，结构简单、响应快、稳定性好，是目前应用最广的检测器之一。
（3）电子捕获检测器（ECD）是一种高灵敏度的选择性检测器，它只对具有电负性的物质（如含卤素，S，P，N，O的化合物）有响应，电负性越强，灵敏度越高，响应信号与进入检测器的电负性物质浓度有关，ECD是浓度型检测器。
（4）火焰光度检测器（FPD）对硫、磷化合物的高选择性、高灵敏度的检测器，亦称硫磷检测器。
什么是光谱分析法，它包括哪些主要方法？答：当物质高温产生辐射或当辐射能与物质作用时，物质内部能级之间发生量子化的跃迁，并测量由此而产生的发射，吸收或散射辐射的波长和强度，进行定性或定量分析，这类方法就是光谱分析法．光谱分析法主要有原子吸收光谱法、原子发射光谱法、原子荧光法、紫外－可见分光光度法、红外光谱法、分子荧光法、X射线荧光法等．按光子能量从高到低的顺序：γ射线，X射线，紫外，可见，红外，微波，无线电波液相色谱有几种类型?它们的保留机理是什么? 在这些类型的应用中,最适宜分离的物质是什么?解:液相色谱有以下几种类型:液-液分配色谱; 液-固吸附色谱; 化学键合色谱;离子交换色谱; 离子对色谱; 空间排阻色谱等.液-液分配色谱的保留机理是通过组分在固定相和流动相间的多次分配进行分离的。
可以分离各种无机、有机化合物。
液-固吸附色谱是通过组分在两相间的多次吸附与解吸平衡实现分离的.最适宜分离的物质为中等相对分子质量的油溶性试样，凡是能够用薄层色谱分离的物质均可用此法分离。
化学键合色谱中由于键合基团不能全部覆盖具有吸附能力的载体,所以同时遵循吸附和分配的机理,最适宜分离的物质为与液-液色谱相同。
离子交换色谱和离子色谱是通过组分与固定相间亲合力差别而实现分离的.各种离子及在溶液中能够离解的物质均可实现分离，包括无机化合物、有机物及生物分子，如氨基酸、核酸及蛋白质等。
在离子对色谱色谱中,样品组分进入色谱柱后,组分的离子与对离子相互作用生成中性化合物,从而被固定相分配或吸附进而实现分离的.各种有机酸碱特别是核酸、核苷、生物碱等的分离是离子对色谱的特点。
空间排阻色谱是利用凝胶固定相的孔径与被分离组分分子间的相对大小关系,而分离、分析的方法。
最适宜分离的物质是：另外尚有手性色谱、胶束色谱、环糊精色谱及亲合色谱等机理。
什么是光谱分析法，它包括哪些主要方法？答：当物质高温产生辐射或当辐射能与物质作用时，物质内部能级之间发生量子化的跃迁，并测量由此而产生的发射，吸收或散射辐射的波长和强度，进行定性或定量分析，这类方法就是光谱分析法．光谱分析法主要有原子吸收光谱法、原子发射光谱法、原子荧光法、紫外－可见分光光度法、红外光谱法、分子荧光法、X射线荧光法等．．Lambert-Beer定律的物理意义是什么？为什么说Beer定律只适用于单色光？浓度C与吸光度A线性关系发生偏离的主要因素有哪些？朗伯－比耳定律的物理意义：当一束平行单色光垂直通过某溶液时，溶液的吸光度A与吸光物质的浓度c及液层厚度l成正比。
Beer定律的一个重要前提是单色光。
也就是说物质对单色光吸收强弱与吸收光物质的浓度和厚度有一定的关系。
非单色光其吸收强弱与物质的浓度关系不确定，不能提供准确的定性定量信息。
浓度C与吸光度A线性关系发生偏离的主要因素（1）定律本身的局限性：定律适用于浓度小于0.01 mol/L的稀溶液，减免：将测定液稀释至小于0.01 mol/L测定（2）化学因素：溶液中发生电离、酸碱反应、配位及缔合反应而改变吸光物质的浓度等导致偏离Beer定律。
减免：选择合适的测定条件和测定波长（3）光学因素：非单色光的影响。
减免：选用较纯的单色光；选max 的光作为入射光杂散光的影响。
减免：选择远离末端吸收的波长测定散射光和反射光：减免：空白溶液对比校正。
非平行光的影响：减免：双波长法（4）透光率测量误差：减免：当±0.002<ΔT< ± 0.01时，使0.2<A<0.7 当ΔT< 0.0001时，使0.2<A<2.0为什么作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤、脱气高效液相色谱仪所用溶剂在放入贮液罐之前必须经过0.45μm滤膜过滤，除去溶剂中的机械杂质，以防输液管道或进样阀产生阻塞现象。
所有溶剂在上机使用前必须脱气；因为色谱住是带压力操作的，检测器是在常压下工作。
若流动相中所含有的空气不除去，则流动相通过柱子时其中的气泡受到压力而压缩，流出柱子进入检测器时因常压而将气泡释放出来，造成检测器噪声增大，使基线不稳，仪器不能正常工作，这在梯度洗脱时尤其突出。
试举例说明生色团和助色团.答:分子中含有非键或键的电子体系,能吸收外来辐射时并引起–*和n–*跃迁,可产生此类跃迁或吸收的结构单元,称为生色团.主要的生色团有–C=O,–N=N–,–N=O等.含有孤对电子(非键电子对),可使生色团吸收峰向长波方向移动并提高吸收强度的一些官能团,称之为助色团,如–OH,–OR,–NHR,–SH,–Cl,–Br,–I等.与紫外分光光度计比较，荧光分光光度计有何不同？？答：光源：激发光源强度比吸收测量中的光源强度大。
单色器：两个单色器激发单色器和发射单色器。
检测器：荧光强度很弱，检测器有较高灵敏度。
试样池：荧光分析中要求用石英材料。
由于荧光强度与透过光强度小的多，因此测量荧光时必须严格消除透过光的影响。
色谱法有哪些类型？其分离的基本原理是什么？答：气体为流动相的色谱称为气相色谱（GC），根据固定相是固体吸附剂还是固定液（附着在惰性载体上的一薄层有机化合物液体），又可分为气固色谱（GSC）和气液色谱（GLC）．液体为流动相的色谱称液相色谱（LC）。
同理，液相色谱亦可分为液固色谱（LSC）和液液色谱（LLC）．超临界流体为流动相的色谱称为超临界流体色谱（SFC）。
随着色谱工作的发展，通过化学反应将固定液键合到载体表面，这种化学键合固定相的色谱又称化学键合相色谱（CBPC）。
试述塔板理论和速率理论的要点答:塔板理论反色谱柱看作一个蒸馏塔,借用蒸馏塔中"塔板"的概念来描述组分在两相间的分配行为.它的贡献在于解释色谱流出曲线的形状,推导出色谱流出曲线方程,及理论塔板数的计算公式,并成功地解释了流出曲线的形状及浓度极大值的位置,还提出了计算和评价柱效的参数.速率理论提出,色谱峰受涡流扩散,分子扩散,气液两相间的传质阻力等因素控制,从动力学基础上较好解释影响板高的各种因素,对选择合适的操作条件具有指导意义.根据三个扩散方程对塔板高度H的影响,导出速率理论方程或称Van Deemter方程式:H=A + B/u + Cu式中u为流动相的线速度;A,B,C为常数,分别代表涡流扩散项系数,分子扩散项系数,传质阻力项系数.何谓荧光效率？具有哪些分子结构的物质有较高的荧光效率？荧光效率又称荧光量子效率，是物质发射荧光的量子数和所吸收的激发光量子数的比值称，用Ψf表示。