圆二色分析
简述圆二色谱的原理及应用
简述圆二色谱的原理及应用原理圆二色谱（Circular Dichroism，简称CD）是一种研究物质光学活性的技术。
其基本原理是通过测量样品对左旋光和右旋光的吸收差异，来研究物质结构和手性。
圆二色谱的原理主要涉及到电磁波的旋转和手性分子的相互作用。
电磁波可以被视为电场和磁场的横向振动，而这两个场的振动方向垂直于波传播方向。
在自由空间中，电磁波的电场和磁场是相互垂直、相互平行并且幅度相等的。
然而，在手性分子存在的情况下，电场和磁场的振动可能会被干扰，从而导致电磁波的旋转。
根据圆二色效应，左旋光和右旋光在经过手性分子样品后会发生旋光现象。
当左旋光与手性分子相互作用后，其振动面会发生旋转，而右旋光则会与之相反地发生旋转。
这种旋光现象称为旋光分散（Optical Rotation），而测量这种旋光差异的技术就是圆二色谱。
圆二色谱可以通过测量样品对左旋光和右旋光的吸收程度差异来分析和表征生物大分子、有机化合物和无机配合物的结构、构象和手性特征。
应用圆二色谱在化学、生物化学、生物医学和药物研发领域具有广泛的应用。
下面是一些常见的圆二色谱的应用：1.结构分析和构象研究：圆二色谱可以用来确定分子结构和构象。
根据样品测得的CD谱图，可以通过比对已知的标准谱图或者进行计算模拟，来推断分子的立体结构、构象和手性特征。
2.蛋白质折叠和结构变化：圆二色谱可用于研究蛋白质的二级结构、折叠状态和构象变化。
蛋白质的二级结构（如α-螺旋、β-折叠等）会对圆二色谱谱图产生特定的影响，因此可以通过分析谱图来了解蛋白质的结构信息。
3.酶的活性和结构：通过圆二色谱可以研究酶的结构和活性。
酶的结构与其功能密切相关，圆二色谱可以帮助研究人员揭示酶的结构与功能之间的关系，并优化酶的催化活性。
4.药物研发：圆二色谱在药物研发中发挥着重要作用。
通过对药物分子的圆二色谱谱图的分析，可以了解药物的结构、构象和活性与手性之间的关系，从而指导药物改良和设计。
圆二色谱测试：红外光谱分析的得力助手
圆二色谱测试：红外光谱分析的得力助手在生物制药领域，药物的质量控制是至关重要的。
为了确保药物的纯度和有效性，科学家们需要使用各种分析技术来进行药物的表征和分析。
其中，圆二色谱测试作为一种重要的分析方法，被广泛应用于生物药物的研究和开发过程中。
本文将详细介绍圆二色谱测试的原理、应用和优势，帮助读者更好地了解这一分析技术。
一、圆二色谱测试的原理圆二色谱测试是一种基于红外光谱的分析方法，通过测量样品对不同偏振方向的圆偏振光的吸收情况，来获取样品的结构和构象信息。
圆二色谱测试主要依赖于分子中手性中心的存在，手性分子对圆偏振光的吸收会导致光的旋光现象，从而产生圆二色信号。
通过测量样品对左旋和右旋圆偏振光的吸收差异，可以得到样品的圆二色谱图。
图1。
二、圆二色谱测试的应用圆二色谱测试在生物制药领域有着广泛的应用。
首先，它可以用于药物的纯度检验。
不同的药物分子具有不同的手性结构，通过圆二色谱测试可以确定药物样品中手性分子的含量和纯度，确保药物的质量。
其次，圆二色谱测试还可以用于药物的结构分析。
药物的结构对其活性和稳定性有着重要影响，通过圆二色谱测试可以获取药物分子的构象信息，帮助科学家们了解药物的结构特征，从而指导药物的设计和改进。
此外，圆二色谱测试还可以用于蛋白质的研究和分析，帮助科学家们揭示蛋白质的结构和功能。
三、圆二色谱测试的优势相比于其他分析方法，圆二色谱测试具有一些独特的优势。
首先，圆二色谱测试是一种非破坏性的分析方法，可以在不破坏样品的情况下获取样品的结构信息。
这对于药物的研究和开发非常重要，可以避免样品的浪费和损坏。
其次，圆二色谱测试具有高灵敏度和高分辨率的特点，可以检测到极小浓度的手性分子，并且可以区分不同手性分子的结构差异。
这使得圆二色谱测试在药物分析中具有很大的优势。
此外，圆二色谱测试还可以进行在线监测，实时监测药物的质量和稳定性，提高生产过程的控制和效率。
圆二色谱测试作为一种重要的分析方法，在生物制药领域发挥着重要的作用。
CD圆二色谱解读：探索生物大分子结构之谜
CD圆二色谱解读：探索生物大分子结构之谜一、圆二色谱的神秘面纱圆二色谱（Circular Dichroism，简称CD）是一种光谱学方法，用于研究生物大分子（如蛋白质和核酸）的结构。
它的原理是基于生物大分子对左旋和右旋偏振光的吸收差异。
这种差异反映了生物大分子的立体结构，因此，CD圆二色谱被广泛应用于生物制药分析领域。
二、CD圆二色谱的工作原理CD圆二色谱的工作原理是基于生物大分子的手性。
手性是一种物质的基本性质，表现为对左旋和右旋偏振光的吸收差异。
生物大分子（如蛋白质和核酸）都具有手性，因此，通过测量其对左旋和右旋偏振光的吸收差异，可以获取其立体结构信息。
三、CD圆二色谱的应用CD圆二色谱的应用非常广泛，主要用于生物大分子的结构研究。
例如，通过CD圆二色谱，我们可以确定蛋白质的二级结构，包括α-螺旋、β-折叠和随机卷曲等。
此外，CD圆二色谱还可以用于研究蛋白质的热稳定性、酶活性、配体结合等性质。
四、CD圆二色谱的优势CD圆二色谱的优势在于其简单、快速和无损。
首先，CD圆二色谱的操作简单，只需要将样品溶解在适当的溶剂中，然后通过光谱仪进行测量。
其次，CD圆二色谱的测量速度快，一般只需要几分钟就可以完成。
最后，CD圆二色谱是一种无损检测方法，不会对样品造成损害，因此，可以用于研究生物大分子的动态过程。
五、CD圆二色谱的挑战与未来尽管CD圆二色谱具有许多优势，但也面临一些挑战。
例如，CD圆二色谱对样品的浓度和纯度要求较高，对于浓度低或杂质多的样品，可能无法获得准确的结果。
此外，CD圆二色谱只能提供生物大分子的平均结构信息，无法获取其具体的三维结构。
然而，随着科技的进步，我们有理由相信，CD圆二色谱的应用将更加广泛。
例如，通过结合其他技术（如核磁共振和X射线晶体学），我们可以获取生物大分子的更详细的结构信息。
此外，通过改进光谱仪的设计和优化测量方法，我们可以提高CD圆二色谱的灵敏度和准确性。
图1。
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圆二色谱 样品浓度
圆二色谱样品浓度
圆二色谱是一种常用于研究蛋白质二级结构的技术。
它通过测量左旋和右旋偏振光在圆周方向上的吸收差异来获得样品的信息。
样品的浓度、操作步骤等都会影响实验结果。
一、样品浓度：
1．蛋白质的浓度通常在0.1-10mg/mL范围内。
对于某些蛋白质，较低的浓度可能提供更好的分辨率，而某些蛋白质则需要更高的浓度才能观察到结构变化。
2．如果样品太稀，可能会由于光路中的散射导致背景噪声增加；如果样品太浓，则可能会出现光饱和现象，导致检测器接收到的光强过强，同样会增加背景噪声。
二、操作步骤：
1．在测量前，应将蛋白质样品在测定温度下平衡至少30分钟。
2．每次测量前，应确保仪器已经预热至少30分钟。
3．选择适当的扫描速度，通常在100-1000nm/min范围内。
4．记录至少3次扫描以获取可重复的结果。
5．在实验结束后，务必用溶剂清洗仪器，以确保没有蛋白质残留在仪器中，这有助于延长仪器的使用寿命。
6．为了确保结果的准确性，建议在每次实验时都进行背景扫描，并从最终结果中减去背景。
进行圆二色谱分析时，需要注意不同波长下的测量结果可能不同，因此通常会测量整个光谱范围（例如190-260nm），以便获得更全面
的信息。
此外，如果观察到任何异常的CD信号（例如非常强的或与预期不符的信号），这可能是蛋白质变性的迹象，此时应重新检查实验条件。
圆二色谱的原理及其应用pdf
圆二色谱的原理及其应用一、圆二色谱的原理圆二色谱是一种分析化学技术，用于测定物质的旋光性质。
它在药学、化学和生物学等领域有着广泛的应用。
圆二色谱原理基于物质分子对左旋光和右旋光的吸收性差异。
圆二色谱利用圆二色变化测定物质对圆偏振光的旋光角度和吸收度的关系。
当线偏振光通过样品时，正交两个互相垂直的圆偏振分量，产生旋光现象。
如果样品吸收左旋光的圆偏振分量多于右旋光的圆偏振分量，样品会产生负圆二色变化。
相反，如果样品吸收右旋光的圆偏振分量多于左旋光的圆偏振分量，样品会产生正圆二色变化。
圆二色谱测定的结果可用光谱表示，通常为色散图。
色散图由圆二色变化在不同波长处的数值表示。
通过分析色散图，可以确定物质的结构、构型以及与其他分子间的相互作用。
二、圆二色谱的应用圆二色谱有广泛的应用领域，下面列举了几个常见的应用方面：1. 蛋白质结构研究圆二色谱在蛋白质结构研究中扮演着重要角色。
蛋白质的结构与功能密切相关，圆二色谱可以提供关于蛋白质二级结构的信息，如α-螺旋、β-折叠等。
通过圆二色谱的测定，可以确定蛋白质的二级结构比例，从而推测蛋白质的折叠状态和功能。
2. 药物研究和分析圆二色谱在药物研究和分析中也得到了广泛应用。
通过圆二色谱的测定，可以研究药物与其他分子之间的相互作用，从而帮助优化药物设计和药物疗效评估。
3. 分子手性性质研究圆二色谱可用于分析分子的手性性质。
手性是化学物质的一种重要性质，与其生物活性、药物活性以及光学性质相关。
圆二色谱可以通过测定物质对旋光的吸收情况，从而确定其手性性质。
4. 化学反应动力学研究圆二色谱在化学反应动力学研究中起到了重要作用。
通过测定反应过程中圆二色变化的特征，可以研究反应的速度和路径，并推断反应机理。
三、使用圆二色谱的注意事项使用圆二色谱时，需要注意以下几点：1.样品准备：样品的纯度和浓度对测定结果有重要影响。
样品应尽可能纯净，并适当稀释，以避免吸光度过高引起的光散射效应。
圆二色谱的原理和应用
圆二色谱的原理和应用原理圆二色谱是一种用来分析物质的光学技术，它能够测量物质对不同偏振光波的吸收和旋光性质。
它的原理基于光的波动理论和旋光性质。
旋光性质旋光性是指物质对偏振光通过时会导致光的偏振面发生旋转的性质。
物质对光的旋光性可以分为正旋光性和负旋光性。
正旋光性表示物质使偏振光的偏振面顺时针旋转，负旋光性表示物质使偏振光的偏振面逆时针旋转。
旋光性可以通过旋光仪进行测量。
光的偏振光波一般是沿着特定的方向振动的，这个方向就是光的偏振方向。
偏振光通过介质之后，其偏振方向可能会发生改变，这种现象称为偏振光的旋转。
圆二色谱法圆二色谱法是通过测量物质对不同偏振方向的肩振光波的吸光度差异来分析物质的技术。
它使用圆二色偏振器和检测器进行测量。
圆二色偏振器分为正旋光和负旋光的偏振器，检测器测量不同偏振方向的肩振光波的吸光度差。
应用圆二色谱在生物化学、药物化学和有机化学等领域有广泛的应用。
蛋白质结构分析圆二色谱可以用来分析蛋白质的二级结构，如α-螺旋、β-折叠等。
蛋白质的二级结构对其功能和稳定性有重要影响，因此了解蛋白质的二级结构对于研究蛋白质的结构和功能十分重要。
药物研发圆二色谱可以用来研究药物的立体化学特性。
有机化合物通常会存在手性，不同手性的化合物可能具有不同的药理活性。
通过圆二色谱分析药物的手性可以帮助研发人员合成更有效的手性药物。
有机化学研究圆二色谱可以用来研究有机化合物的结构和手性。
有机化合物的手性对其性质和反应具有重要影响。
通过圆二色谱分析有机化合物的手性可以帮助有机化学研究人员了解其结构和性质。
生物医学研究圆二色谱可以用来研究生物体内的分子结构。
许多生物分子具有手性，其手性对其功能和相互作用有重要影响。
通过圆二色谱可以研究生物分子的手性及其与其他分子的相互作用，有助于了解生物体内的生化过程。
总结圆二色谱是一种用于分析物质的光学技术，通过测量物质对不同偏振光波的吸收和旋光性质来分析物质。
圆二色谱广泛应用于蛋白质结构分析、药物研发、有机化学研究和生物医学研究等领域。
蛋白质构象揭秘：深入解读圆二色谱谱图分析技术
蛋白质构象揭秘：深入解读圆二色谱谱图分析技术引言蛋白质是生物体内重要的功能分子，其构象决定了其功能和相互作用方式。
而圆二色谱谱图分析技术是一种常用的手段，可以揭示蛋白质的构象信息。
本文将深入解读圆二色谱谱图分析技术，带您一起探索蛋白质构象的奥秘。
一、什么是圆二色谱谱图分析技术圆二色谱谱图分析技术是一种通过测量蛋白质对不同波长的圆偏振光的吸收和散射来分析其构象的方法。
圆二色谱谱图可以提供关于蛋白质二级结构、折叠状态和相互作用等信息。
通过分析圆二色谱谱图，我们可以了解蛋白质的构象特征，从而深入研究其功能和相互作用机制。
图1。
二、圆二色谱谱图的解读1.α-螺旋和β-折叠的特征。
圆二色谱谱图中，α-螺旋和β-折叠是常见的蛋白质二级结构。
α-螺旋在190-200 nm范围内表现为负吸收峰，而β-折叠则在200-230 nm范围内表现为正吸收峰。
通过观察这些吸收峰的强度和位置，我们可以初步判断蛋白质的二级结构组成。
2.蛋白质的折叠状态。
圆二色谱谱图还可以提供关于蛋白质折叠状态的信息。
对于已折叠的蛋白质，其圆二色谱谱图呈现出明显的特征峰；而对于未折叠的蛋白质，谱图则较为平坦。
通过分析谱图的形状和特征峰的位置，我们可以了解蛋白质的折叠状态，进而推测其稳定性和功能。
3.蛋白质的相互作用。
圆二色谱谱图还可以用于研究蛋白质的相互作用。
当蛋白质与其他分子或配体结合时，其圆二色谱谱图可能发生变化。
例如，蛋白质与配体结合后，谱图中的特征峰位置和强度可能发生改变。
通过对比不同条件下的谱图，我们可以揭示蛋白质与其他分子之间的相互作用机制。
三、圆二色谱谱图分析的应用领域圆二色谱谱图分析技术在生物药物领域有着广泛的应用。
以下是一些常见的应用领域：1.蛋白质结构研究。
圆二色谱谱图分析技术可以用于研究蛋白质的结构。
通过分析谱图，我们可以了解蛋白质的二级结构组成、折叠状态和稳定性等信息，从而揭示其结构特征和功能机制。
2.药物研发。
圆二色谱谱图分析技术在药物研发中也发挥着重要的作用。
圆二色光谱分析小结
3.3.9圆二色性（Circular dichroic，CD）测定1%(w/w)的蛋清溶液调节到pH 4.0，6.0，10.0，在85oC加热不同时间，离心，取上清液，然后稀释至100~200μg/mL溶液。
对照组为天然蛋清样品。
用Jasco J-715光度计测定样品的CD谱。
测定条件设定：测定波长范围190~250 nm，25oC，比色皿光径1 mm，分辨率0.2 nm，扫描速率100 nm/min，扫描5次。
使用Jasco SSE软件确定样品的二级结构百分含量。
3.4.6蛋白质的二级结构对DH的影响蛋白酶的水解反应还受到蛋白质的结构的影响，一般结构紧密的蛋白质提供的酶切位点少于结构松散的蛋白质。
因此有必要研究蛋白质结构对DH的影响。
蛋白质的热处理可能引起二级、三级和四级结构的变化。
从二级结构看，α-螺旋结构表现蛋白质分子的有序性，而其结构如β-折叠、β-转角、无规卷曲等反映了蛋白质分子的松散性[26]。
蛋白质分子的有序性差，越有利于蛋白酶的水解。
目前，研究蛋白质构象最好的方法是x-射线衍射，但对结构复杂、柔性的生物大分子蛋白质来说，制备蛋白质单晶较为困难。
二维、多维核磁共振技术能测出溶液状态下蛋白质分子的构象，可是对分子量较大的蛋白质的计算处理非常复杂。
相比之下圆二色性是研究稀溶液中蛋白质分子构象的一种快速、简单、较准确的方法。
圆二色性在紫外区段(190~240 nm)，主要生色团是肽链，这一波长范围的CD谱包含着生物大分子主链构象的信息。
在一般情况下，实验中得到的CD谱线是α-螺旋、β-折叠和无规卷曲构象的CD 谱的线性迭加[27]。
图3-7显示天然蛋清的CD谱线a在222 nm处和208 nm处呈负峰，在190 nm附近有一正峰，这是存在部分α-螺旋构象的特征。
谱线b、c、d、e在221 nm处的负谱带减弱，意味着α-螺旋的百分比减小。
谱线b、c、d、e向短波长方向移动，即发生蓝移。
由于发色团吸收光谱发生位移主要取决于它的微环境更加亲水或疏水的结果[28]，因此谱线b、c、d、e蓝移的发生说明体系的亲水性降低,即疏水性增加。
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旋光色散(ORD): 旋转角度与波长的函数关系.
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
6. ORD与CD光谱 同时产生。
包括同样的分子结构信息：光学活性 物质分子中的丌对称生色团。
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
6.3 康顿效应 (cotton effect)及ORD、CD和UV间的关系
1. 理想情况下：λmax（UV） =λmax(CD) =λk (ORD) 实际情况：三者接近，但丌 一定重合 2. ORD谱和CD谱都可用来 测定有特征吸收的手性化合 物的绝对构型 3. CD谱：容易解析 ORD谱：比较复杂
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
2. 光的偏振
自然光, 振动矢量, 偏振矢量,平面偏振光, 线偏振光, 偏振面
平面偏振光 (直线偏振光)
. ...
.
自然光
. ...
. ...
晶轴相互平行时， 透射光强度最大；
晶轴夹角为α时， 透射光强度与 cos2α成正比。
. ...
起偏器
检偏器
晶轴相互垂直时， 透射光强度为零；
白质来说浓度在0.2mg/mL（实际调试得到最佳数据），池子长度是1mm （0.5 mm （0.1 mm，0.05mm，0.02mm；强吸收改变池厚度，或者增 加样品浓度和增加扫描次数) ；体积： 350 ml
溶剂和缓冲溶液选择的原则是使样品在测定的波长范围 内其吸光度尽量
的小（溶剂的吸收表如下）；丌能用HCl来调pH，因为在低的UV波殌Cl离子会干扰CD的测定；等于或低于5 mM 保证蛋白稳定
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
五. ECD圆二色光谱仪样品制备及数据分析
1. CD测试样品要求
液体样品
1. 样品必须透明，如有悬浮或沉淀，则需过滤或离心以除去
沉滤。2. 在测定的光谱范围内，吸光度值丌应超过2.0。最优
信噪比的吸光度值为0.86。
固体样品
单晶样品，需足够大且需合适的样品架；薄膜样品，可以是
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
（1） 固体CD光谱测试方法: 微晶末法 惰性介质 (KBr、KCl、CsI) 压片法 石蜡油糊法 成膜法 单晶法 漫反射 (DRCD)法
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(2) 固体手性CD测试
第五章 圆二色光谱
OBS CD + LD + Br
a: 求平均的方法 b: 连续旋转方法
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
圆二色光谱 Circular Dichroism
(CD)
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
1. 手性是自然界的基本特性
大多数有机分子都是手性的； 小分子光学活性; 多数生命体系中其重要作用的分子是具有多种异构体 ； （包括氨基酸，糖，蛋白质，核酸，维生素，萜烯，类 生物碱类，类固醇。）
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
四. 电子圆二色仪器简介
1. 手性CD光谱方法分类及功学活性物质对左右圆偏振光吸收差异。 手性化合物立体结构和电子跃迁的重要谱学手段)。 旋光色散 (ORD-) (光学活性物质对圆偏振产生角度变化). 振动圆二色 （VCD-virbl Circular Dichroism） 手性拉曼（ROA-Raman Optical Activity ） 圆偏振収光（CPL-Circularly Polarized Luminescence） 荧光圆二色（FCD-Fluorescence-Detected Circular Dichroism） 磁圆二色（MCD-Magnetic Circular Dichroism） 线二向性 (LCD-Linear Dichroism）
θ＝2.303 (Al Ar) (度) 4π
长轴：矢量相位相同时的强度
短轴：矢量相位相反时的强度
θ：平面偏振光离开样品槽的
角度——椭圆度
[θ]= θ·M/100lc=3300Δε
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第五章 圆二色光谱
4. 椭圆率表示CD中使用符号
比椭圆率[y]l
The Specific Ellipticity ：[] = /CL 摩尔椭圆率[ ] The Molar Ellipticity ：[ ]l = Mw [y]l /100,
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
（5） 固体CD光谱失真分析
可能是AF 效应、散射效应与杂 散光联合作用下的后果
CD谱中一些主要吸收峰的波长収生蓝秱 (或红秱) 幵且伴随着浓度下秳度 丌等的变形 (失真) 吸收峰型的复原; 而在収生逆浓度依赖现象的CD谱中。
ORD是渐近线，两端不回归
ORD 吸收带附近，旋光度由负到正 吸收带附近，旋光度由正到负
正Cotton效应 负Cotton效应
CD 正CD带 负CD带
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
6.2 CD和ORD-科顿效应的关系
CD比ORD容易辨别重叠峰
CD比ORD弱带易检测
CD比ORD更容易拟合
CD比ORD提供较多意义明确的信息表明 有三个生色团，其中两个有光学活性
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
（3）固体CD光谱表征的样品准备
波长: 200-450 nm; 扫描速率: 500 nm·min-1; 狭缝宽度: 2-4 nm; 灵敏度: 标准。除非特殊需要每次测试只做一次 扫描。 将待测样品 (KCl 圆片或成膜石英片) 放置得尽可能靠近检 测器, 以减小散射效应, 幵使其严格垂直于入射光轴。 可将圆片或石英片垂直绕光轴转动一定角度后重复测试 (或采用旋转装置), 固体CD谱是否受线双折射(LB)和线二 色性(LD)的影响.
实用仪器分析
5. 圆二色与旋光仪区别
第五章 圆二色光谱
测试方法：
1.旋光度： 旋光仪 （绝对旋光值）
2.公式: obs [ ]T l c
[ ]T
obs
lc
与光穿透的样品厚度l、溶液样品中旋光性物质的浓度c成正 比 (在一定的浓度范围内)， 且与该光波长λ、样品温度T
圆二色和旋光区别和关联
a. 光学器件差别 ，b. 光学活性物质检测两种丌同方面
实用仪器分析
第五Y 章 圆二色光谱
3. 圆偏振光
圆偏振光是两个频率和振幅相同,偏振面互相垂直的平面偏振光,如果其 相位差90度,则它们合成一个圆偏振光。产生由光电调节器.
左圆偏振光
右圆偏振光
椭圆偏振光
朝光源看 电场矢量方向按顺时针方向旋转的，称为右圆偏振光； 电场矢量方向按逆时针方向旋转的，称为左圆偏振光。
第五章 圆二色光谱
5. 旋光度 (OR)和旋光色散 (ORD) 光折射：一束光通过物质后，其电场矢量传播速度的减 小称之为折射，可用折射率n0表示 折射率n: 在真空中的速度C不在某种物质中的速度v之 比为折射率。
旋光现象是平面偏振光通过旋光物质时，组成平面偏振光的左旋圆偏 光和右旋圆偏光在介质中的传播速度不同 (折射率不同，nL不等与nR)， 存在圆双折射。
3. [θ] 的物理意义-椭圆率
椭圆偏振光电场矢量端点在空间的轨迹投影到垂直于光传播方向的平面 上为一椭圆，此椭圆的短轴a不长轴b之比的反正切。用箭头的长短代 替强度。因而光在传播时，它的矢量和将产生的一椭圆轨道. (圆二色 性大小也可用椭圆度来表示)
θ＝tg-1 （a 弧度）
b
由理论分析可推出椭圆率和圆二色性间的关系为 180
实用仪器分析
2. 圆二色性与振幅
Beer-Lanmbert Law
A= lgI0/I
=(1/2.303) lnI0/I
=εCL
ΔA=AL- AR =Δε C L
第五章 圆二色光谱
Optical active object
L ?
Ex= E0 cos [ωt-(2L /λ)n +φ0]
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
狭缝带宽（SBW）的选择：SBW应保持至少为NBW
（被扫描物质的自然带宽）的十分之一；在远紫外一般为2nm；
实用仪器分析
3. 液体测试条件选择
第五章 圆二色光谱
HT图重要性：在高于600650V 表示没有过多的光达 到检测器，需要秲释样品 或者用短光秳的样品池
狭缝宽度尽可能大些（减少噪音），但是需要实际调节 带宽至少是噪音的1/10 , 否则信号变形 ；远紫外处用2 nm ； 芳香团用1 nm (有很好的精细结构)
第五章 圆二色光谱
4. 振动圆二色谱：红外光区频率下的圆二色 (Vibrational Circular Dichroism, VCD).
相对于ECD 优点 （1） 最大优势：丌需要分子中含有生色团 (紫外吸收), 几乎 所有手性分子都在红外区有吸收, 都会产生VCD 谱图。 （2）丌需要化合物有紫外吸收, 应用范围极广。 （3）相对于ECD, VCD 谱峰较窄, 信号丰富, 更容易判断。 （4）ECD计算的是分子在激収态的能量, VCD计算的是分子 在基态下的振动, 从目前计算化学的能力方面考虑, 计算VCD 更加准确。
透明的无机固体薄膜，也可以是有机高分子薄膜；由液体样
品快速冷却形成透明的玱璃态样品。所有固体样品的吸光度
值也丌应大于2.0。
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
2. 样品CD实验中几个注意事项 用N2除臭氧和氧气；氙灯产生臭氧，臭氧在低于195nm范围有吸收谱 样品的浓度应使其吸光度在0.6—1.2之间，可得到较好的信躁比，对蛋
实用仪器分析
第五章 圆二色光谱
（4） 固体CD光谱表征浓度调试方法
方法：2.00 mg晶体不98.0 mg氯化钾混合, 得晶体质量分数为获得1/50、 1/100、1/200、1/400、1/800、1/1600、1/3200、均以同一次采样, 制 得一组1/50-1/6400 的浓度(质量分数)梯度圆片, 以保证各个浓度梯度圆片 的手性来源一致。