炮制对决明子中六种游离蒽醌含量的影响
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究决明子是一种中药材，富含多种生物活性成分，其中的多酚类物质被认为具有很多药理活性。
为了更好地研究决明子中多酚成分的含量变化，我们进行了一项研究。
我们购买了新鲜的决明子并进行了炮制处理。
炮制前的决明子被晒干并研磨成粉末状，作为对照组。
炮制后的决明子则按照传统的方法进行处理，包括炒制、炸制、曝晒和烘干等步骤。
处理过程中，我们定期采集样品，并分别制备成决明子提取物。
接下来，我们使用不同的溶剂对决明子提取物进行提取，包括水提取、乙醇提取和乙醚提取等。
提取物经过提取后，我们使用高效液相色谱法（HPLC）对其中的多酚成分进行定量分析。
我们选取了一些常见的多酚类化合物作为指标化合物，包括儿茶素、黄酮类、花青素等。
通过分析结果，我们发现炮制前后的决明子中多酚成分的含量有所不同。
在水提取物中，炮制后的决明子中儿茶素的含量显著增加，而黄酮类和花青素的含量略有下降。
在乙醇提取物中，炮制后的决明子中儿茶素和花青素的含量都有所增加，而黄酮类的含量略有下降。
而在乙醚提取物中，炮制后的决明子中儿茶素和黄酮类的含量均有所上升，花青素的含量维持相对稳定。
综合以上结果，我们可以得出结论：决明子的炮制处理对其中的多酚成分的含量有一定的影响。
具体来说，炮制处理可以增加决明子中儿茶素的含量，尤其是在乙醇提取物和乙醚提取物中更为明显。
但对于黄酮类和花青素的含量，炮制处理的影响并不明显。
这项研究对于了解决明子中多酚成分的含量变化具有重要意义。
了解决明子中多酚成分的变化有助于我们更好地理解其药理活性和药用价值，并提供科学依据为决明子的合理利用和开发提供参考。
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究决明子，是一种常见的中药材，自古以来就被广泛用于中医药治疗。
决明子中含有丰富的多酚成分，如黄酮类、类黄酮类等，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性，对人体健康具有重要作用。
炮制是中药材加工的重要环节，研究决明子中多酚成分炮制前后含量变化，对于指导决明子的加工生产以及提高其药效具有重要意义。
本研究旨在探讨决明子中多酚成分在不同炮制过程中的含量变化，以期为其炮制工艺的优化提供科学依据。
本文将对决明子中多酚成分的种类及其生物活性进行简要介绍，随后介绍实验材料和方法，最后对炮制前后多酚成分含量进行分析，总结结果并探讨产生变化的原因。
一、多酚成分及其生物活性多酚类化合物是一类富含酚羟基的化合物，具有很强的抗氧化活性，能够清除体内的自由基，减少细胞氧化损伤，对预防和治疗氧化应激相关疾病具有积极作用。
决明子中的多酚成分主要包括黄酮类、类黄酮类等，具有很强的抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性，对人体健康具有重要作用。
二、实验材料和方法1. 实验材料：本实验所用的决明子为市场上新鲜采购的，经鉴定为决明子。
实验所用试剂均为优级纯，且均在国内外购买。
2. 实验方法：将决明子按照传统炮制工艺进行处理，分别采用不同的炮制方法（如炒制、烘制、蒸制等），并在不同炮制时间下进行取样。
提取样品中的多酚成分，并采用高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）进行分析。
三、炮制前后多酚含量变化分析在不同的炮制过程中，决明子中的多酚成分经历了明显的含量变化。
在炒制过程中，决明子的总黄酮含量逐渐增加，并在一定时间后达到峰值，随后出现下降趋势。
在烘制过程中，总黄酮含量也发生了较大变化，但峰值出现的时间和持续时间与炒制过程有所不同。
蒸制过程中，决明子的总黄酮含量变化较为平缓，但在一定时间后也出现了下降趋势。
不同的炮制工艺还会对决明子中的其他多酚成分产生影响。
例如类黄酮类在不同的炮制过程中也呈现出不同的变化规律，有的呈现上升趋势，有的则呈现下降趋势。
决明子不同清炒品中葸醌类成分的含量测定
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２ １ 对照品溶液 的制备 ．
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究决明子是我国传统中药之一，具有清热泻火、明目的功效，主要成分是多种氨基酸、脂肪酸和多酚类物质等。
其中，多酚类物质是决明子的重要活性成分。
近年来，随着人们对中药的认识不断提高，越来越多的研究表明，炮制对中药的有效成分有着深刻的影响。
本文通过对决明子中多酚成分在炮制前后的变化情况进行研究，探讨了炮制对中药有效成分的影响。
多酚类物质是一类具有多种化学结构的天然产物，包括单宁酸、黄酮类、类黄酮等。
研究发现，炮制对中药的多酚类化合物具有不同程度的影响。
在研究中，我们选取了新鲜决明子和炮制后的决明子进行比较，通过高效液相色谱法（HPLC）测定了其多酚类物质含量的变化。
结果发现，新鲜决明子中多酚类物质的含量与炮制后的决明子相比存在明显差异。
其中，单宁酸是决明子中主要的多酚类物质之一，其含量约占决明子多酚类物质含量的60%-80%。
炮制前后的单宁酸含量变化如下：炮制方法单宁酸含量（mg/g，相对含量）未炮制 63.21干法炮制 58.56水泡炮制 55.67浸泡炮制 51.34微波炮制 45.26从上表可以看出，不同的炮制方法对决明子中单宁酸的含量变化有着不同的影响。
其中，水泡炮制和浸泡炮制对单宁酸的含量影响最为显著，其次是干法炮制和微波炮制。
这可能与炮制方法所采用的温度、时间、湿度等因素有关。
除了单宁酸外，黄酮类、类黄酮等其他多酚类化合物的含量也随炮制方法的不同而有所变化。
例如，黄酮类化合物芦丁在未炮制的决明子中含量为4.23mg/g，而在经过水泡炮制后的决明子中芦丁含量降低了近一半，只有2.18mg/g。
此外，我们还研究了不同炮制时间对决明子多酚类化合物含量的影响。
在干法炮制和水泡炮制中，分别选择了10min、20min、30min、40min、50min和60min的炮制时间。
结果发现，随着炮制时间的延长，决明子中多酚类化合物含量逐渐降低。
在干法炮制中，炮制40min后，单宁酸的含量已经下降了近30%；在水泡炮制中，炮制20min后，芦丁的含量已经下降了超过一半。
比较生、炒决明子中有效成分的含量
取决明子生品和炒制品粉末各约 ２ ， ．ｇ精密称 ０
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工 表 ２ 样品含量测定 结果
２ ０ 年 ３月 ０７
水浴上 加热 ３ ｎ放置 ２ ｎ 比色。用 ５０ｎ ０ｍｉ， ０ｍｉ后 ２ ｍ
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精 密 吸 取 上 述 对 照 品溶 液 ０ 、．、．、． ．１ １ ２、 ５ ０ ５ ０ ２５３０ ，分 别置 于 ５ Ｌ量瓶 中 ，加 ５ ａ Ｈ一 ．、． ｍＬ ０ｍ ％Ｎ Ｏ
２ Ｈ ・： （： 混合液溶解 ， ％Ｎ ， ０ １ ） Ｈ １ 摇匀 、 定溶至刻度。 在
收稿 日期 ：０ ６ １— ６ ２０ － ０ １
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第 ２ 卷第 ２期 １ ２ ０ 年 ３月 ０７
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Ｖｏ ＿ ｏ ２ ｌ Ｎ ． ２１ Ｍａ ．Ｏ ７ ｒ ０ ２比较生 Βιβλιοθήκη 炒决明子 巾有 效成 分昀 昌量
１ 仪器 与材料
Ｕ ７７ Ｒ （ Ｖ ５ Ｃ Ｔ 上海精 密科 学仪 器有 限公 司 ） ； Ｆ １０ Ａ ６４电子分析天平 ； 决明子 （ 安徽海鑫 中药饮 片
有限公司 ， 符合 Ｃ ２０ 年版一部 ， Ｐ ００ 并按决明子炮制 项下制备炒决 明子 ）１８ 二羟基蒽醌对照品（ ；，一 中国 药品生物制品检定所）所用试剂均为分析纯。 ；
解， 摇匀 、 定溶 至刻 度ｐ ｌ 。在水 浴 上加热 ３ ｎ放置 ０ ， ｍｉ
２ 方法号结果
２１ 对 照品溶 液 的制备圈 ．
２ ｉ后 ， ０ ｎ 用相应试剂作空白， Ｕ ７７ Ｒ ｍ 于 Ｖ ５Ｃ Ｔ紫外分 光光 度 计上 进行 全 波长 扫描 ，最 大 吸收 波长为 ） ２肿 ， Ｌ ０ 确定检测波长为 ５０ ｍ ２ 。 ｎ
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究作者：王青来源：《科学导报·学术》2019年第09期摘要：本实验建立紫外分光光度法测定决明子中炮制前后多酚含量的方法。
以乙醇作为溶剂，制备供试品溶液并进行方法学研究。
没食子酸标品在1.00～3.50µg/mL范围内线性关系良好（R2=0.9993），回归方程为：y=0.198x-0.0130，样品平均回收率分别为98.63%。
本论文所建立的方法稳定可靠，简便可行，为决明子药材的质量评价和质量控制奠定了基础。
关键词：决明子；炮制；紫外分光光度法1 仪器与试药U-1810紫外分光光度计（河北普新精密仪器有限责任公司）、没食子酸对照品（批号：140509，陕西乐博生化科技有限公司）、福林酚试剂（批号：P/NF-9252，美国公司）、决明子（采购于盛堂制药公司）经鉴定为豆科植物决明或者小决明的干燥成熟种子。
2 方法与结果2.1对照品溶液的制备称取没食子酸对照品约20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加蒸馏水溶解并定容至刻度，即得。
2.2 决明子的炮制不同的炮制方法浸出的多酚含量均有不同程度的降低或升高。
决明子经炮制后，多酚浸出物含量有所提高，传统炮制方法认为，用文火炒至发出香气即可，所以本实验研究决明子的炮制应以炒至外焦内老黄色、种皮破裂具有香气为宜。
2.3 供试品溶液的配制供试品溶液的制备：取粉碎后的决明子粉末0.5g，精密称定，加入乙醇50mL，精密称定重量，放置在水浴上超声加热回流30分钟，静置冷却后，再称重，用乙醇补足失重，摇匀，过滤，精密吸取25mL过滤液，减压回收乙醇，残渣用碳酸钠溶解至10 mL量瓶中定容，摇匀，即得。
2.4 最大波长的确定精密量取供试品溶液和对照品溶液各适量，分别放置于容量瓶中，各加水至等刻度，加福林酚试剂，摇匀，静置，加7.5%Na2CO3溶液适量，加水至刻度，摇匀，精置后，同时作空白对照，在波长为400-800nm可见光区扫描，获取最大吸收波长为740nm。
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究决明子是中药材，具有清热明目、润肠通便的功效。
其中，多酚成分是其主要活性成分之一，具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性。
然而，传统的炮制方法会影响决明子中多酚成分的含量。
因此，本文旨在研究常用的炮制方法对决明子中多酚成分的影响。
一、实验材料1.决明子：购自药房，洗净晒干。
2.水煎、蒸制、水浸、酒浸：按传统炮制方法操作。
二、实验方法1.多酚含量测定：采用Folin-Ciocalteu法。
将0.1g样品加入10ml的70%乙醇中，在室温下振荡24h。
使用含有0.5%多酚标准品的Folin-Ciocalteu试剂对样品进行不足5min 的反应。
最终，用UV-Vis分光光度计测定反应物的吸光度值。
2.数据分析：对得到的数据进行统计学分析。
三、实验结果1.多酚含量：经过不同炮制方法后，决明子中多酚含量存在显著差异（P<0.05）。
其中，水煎组的多酚含量最高，为5.32±0.09mg/g，蒸制组的多酚含量最低，为2.54±0.12mg/g，水浸组的多酚含量为4.17±0.10mg/g，酒浸组的多酚含量为3.82±0.11mg/g（见表1）。
炮制方法多酚含量（mg/g）水煎 5.32±0.09*蒸制 2.54±0.12水浸 4.17±0.10酒浸 3.82±0.11注：*表示与其他组的差异具有显著性（P<0.05）。
2.多酚含量变化趋势：不同炮制方法下，决明子中多酚含量变化趋势不同。
水煎组、水浸组和酒浸组的多酚含量呈先升高后下降的趋势，蒸制组的多酚含量呈下降趋势（见图1）。
四、实验分析本研究结果表明，不同炮制方法对决明子中多酚含量有明显影响，主要可能是由于炮制过程中的加热和溶剂提取等因素引起的。
水煎组、水浸组和酒浸组的多酚含量呈先升高后下降的趋势，可能是由于决明子中多酚成分的析出和水解、氧化等因素引起的。
炮制方法对决明子中蒽醌类成分含量的影响
［］ 王孝涛 ， ３ 曹晖． 中药炮制制毒增效论（ 】中 Ｊ．
国中药杂 志， ９ ， ４ ３ ： ４— ４ ． １ ９ ２ （） １６ １ ８ ９
［ 】 余 晓东 ， ４ 高新跃， 窦立新， 中药炮制对药 等． 性的影响 ［ ］ 时珍国 医国药， ０ ４ １ （ ： Ｊ． ２０，５１ ）
用 高效液相 色谱 法测定总蒽醌类成分含 量。结果： 决明子生制 品的蒽醌类含量低于炒制品。 结论 ： 炮制方法对决
明子蒽醌类的含量有一定影响。 ［ 关键词］决 明子； 蒽醌类； 学成分； 化 炮制； 高效液相 色谱 法
［ 图分 类 号］ Ｒ ８ 中 ２３ ［ 献 标 识码 ］ Ａ 文 ［ 章 编 号］ １ ０— ８ ２ ２ １） ６ ０ ２ — ２ 文 ４ ６ ５ （０ ０— ０ １ ０ ０ ２
己 方法与结果 ２ １ 药 物 炮 制 ① 生 决 明子 ： 决 明 子 ３０ｇ净 ． 将 ０ 制， 即得 。 炒 决 明子 ： 净制 的决 明子 ３ ０ｇ置 炒 ② 将 ０ 制 容器 中 ， 预 热锅 底 ， 中 火炒 至 微 黄 ， 出晾 先 用 取
凉， 即得 。
Ｒ ５— ８ 上 海 亚 荣 生 化 仪器 厂 生产 ； 热 真 空 干 Ｅ２ ９ ， 电
ｐ ｏ ｅ ｓ ｄ ｐ ｏ ｕ ｔ ．Ｒｅ ｕ ｔ ｒ ｃ ｓｅ ｒ ｄ ｃｓ ｓｌ ：Ｃｏ ｔ ｎ ｆ ａ ｔｒ ｑ ｉ ｏ ｏ ｎ ｅ ｉｎ ｎ ｕ ｐ ｏ ｅ ｓ ｄ ｐ ｏ ｕ ｔｗａ ｏ ｒ ｔ ａ ａ ｎ ｎ ｅ ｔ ｏ ｎ ｈ ａ ｕ ｎ ｎ ｉｇ ｄｅ ｔ ｉ ｎ ｒ ｃ ｓｅ ｒ ｄ ｃ ｓ ｌｗｅ ｈ ｎ ｔ ｔｉ ｒ ｈ ｐ ｏ ｅ ｓ ｄ ｐ ｏ ｕ ｔ． ｎ ｌ ｓｏ ： ｒ ｃ ｓ ｉ ｇ ｍｅｈ ｄ ｓ ｏ ｄ ｄ ｆ ｉ ｆ ｃ ｎ ｃ ｎ ｅ ｔｏ ｎ ｒ ｑ ｉ ｏ ｅ ｉ ｇ ｅ ｉ ｎ ｎ ｒ ｃ ｓｅ ｒ ｄ ｃ ｓ Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ Ｐ ｏ ｅ ｓ ｔ ｏ ｈ ｗｅ ｅ ｎ ｔ ｅ ｆ ｔｏ ｏ ｔ ｎ ｆａ ｔ ａ ｕ ｎ ｎ ｎ ｒ ｄ ｅ ｔｉ ｎ ｉ ｅ ｅ ｈ
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究
决明子中多酚成分炮制前后含量变化的研究决明子是一种广泛应用于中药领域的中草药之一，具有清热解毒、明目等功效。
决明子中含有多种活性成分，其中多酚类化合物是其主要成分之一。
在传统的炮制过程中，往往会对决明子进行烘干、炭烤等处理，以增强其功效。
然而，这种炮制过程是否会影响决明子中多酚类化合物的含量，目前尚未有明确的结论。
因此，本研究旨在探究决明子在炮制前后多酚类化合物含量的变化规律。
实验方法：首先，将新鲜的决明子进行粉碎，将粉碎后的样品分成两组，一组进行炮制后的处理，另一组则作为对照组进行对比。
对于炮制组的处理方法，我们采用传统的炭烤法进行炮制，具体包括将决明子放入炭火上烤烤至表面发黑为止，然后取出晾凉备用。
接下来，对两组样品进行多酚类化合物的提取。
我们采用乙酸乙酯作为提取剂，将样品与提取剂混合后进行超声处理等步骤，最终得到提取液。
然后，我们利用高效液相色谱法（HPLC）对提取液中多酚类化合物的含量进行测定。
具体的HPLC条件如下：色谱柱为C18（4.6mm×250m m，5μm）；流动相A为乙腈-水（35:65，v/v）；流动相B为乙酸-水（5:95，v/v）；梯度洗脱方式：0-20min，5%→20% B；20-30min，20%→40% B；30-35min，40%→80% B；35-40min，80% B；检测波长为280nm；流速为1.0 mL/min；柱温为25℃。
结果：经过HPLC测定，我们发现，经过炮制后的决明子中多酚类化合物的含量明显提高。
在对照组中，决明子中多酚类化合物含量为20.2±2.1 mg/g，而在炮制组中，含量为36.6±3.6 m g/g，两者之间的差异具有显著性。
此外，我们还进一步对炮制时间进行了探究，发现炮制时间对多酚类化合物的含量存在一定的影响。
当炮制时间为40分钟时，含量达到最高点，为39.2±4.1 mg/g，之后随着炮制时间的延长而逐渐下降。
议决明子炮制前后化学成分变化研究
议决明子炮制前后化学成分变化研究【摘要】目的：研究决明子在炮制前后化学成分的整体变化，寻求炮制增效的物质基础，揭示炮制机理。
方法：取决明子生品和炮制品，分别用甲醇和水提取，将提取液进行高效液相色谱分析。
比较决明子生品和炒制品醇提液和水提液的色谱图。
结果：决明子炒制品醇提液中，有1种原有成分消失，产生了2种新成分，同时有1种成分含量显著下降，有1种成分含量显著上升；决明子炒制品水煎液中，产生了3种新的成分，同时有3种物质的含量显著下降，有2种物质含量显著上升。
在醇提液和水提液中都有同一种新成分产生。
结论：决明子炮制后缓和药物性能，增强疗效的物质基础很可能是药性猛烈的成分(蒽醌类)被部分破坏，含量减少或转变成了新的成分，因而缓和药性；同时炒制更利于一些成分溶出，其含量增加而致疗效增强。
【关键词】决明子；高效液相色谱；化学成分；炮制决明子为豆科植物决明或小决明的干燥成熟种子，为临床用中药。
始载于《神农本草经》，性味甘、苦、咸、微寒，归肝、大肠经，具有清肝明目、润肠通便的作用，现代研究证明决明子具有降血压、降血脂、保肝、抗菌等活性，同时又可作为保健饮品的原料。
现对决明子的化学成分、药理作用、临床应用等方面的研究工作进行综述，以利于对决明子进一步开发利用。
1 仪器与材料1.1 仪器岛津lc-1oa高效液相色谱仪，配二级管阵列检测器，色谱柱phenomenexcl8(4.0mm×25.0mm,5μm)。
1.2 试剂甲醇(色谱纯)，水为二次蒸馏水。
1.3 药材饮片生决明子。
1.4 色谱条件色谱柱为phenomenexcl8流动相为甲醇-水(1;2)；流速0.8ml/min；检测波长230nm(决明子);柱温30℃。
2 方法2.1 样品的提取与分析2.1.1 炒决明子醇提取样品精密称量炒决明子2g，加入10ml甲醇溶解，室温下放置2h，再超声波振荡提取20min，过滤、定容到10ml容量瓶中备用(1号样品)。
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炮制对决明子中六种游离蒽醌含量的影响戈大春;沈多荣;王卓君【摘要】目的:比较炮制对决明子中主要活性成分游离蒽醌含量的影响.方法:采用高效液相色谱法检测决明子中6种游离蒽醌类成分的含量,分别为橙黄决明素,大黄酸,决明蒽醌,大黄素,大黄酚,大黄素甲醚,并比较其炮制前后的含量变化.结果:炮制后6种游离蒽醌变化情况为,橙黄决明素和大黄酸的含量变化没有显著性差异,决明蒽醌的含量升高了25％,大黄素的含量升高了21％,大黄酚的含量降低了15％,大黄素甲醚的含量降低了21％.结论:炮制对决明子中主要活性成分游离蒽醌类成分的含量会产生不同的影响,有些游离蒽醌含量保持不变,有些游离蒽醌含量会有显著升高,有些游离蒽醌含量会明显降低.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2018(013)007【总页数】3页(P1763-1765)【关键词】决明子;炮制;游离蒽醌;含量变化【作者】戈大春;沈多荣;王卓君【作者单位】江苏省苏州市吴中人民医院药剂科,苏州,215128;江苏省苏州市吴中人民医院药剂科,苏州,215128;江苏省苏州市吴中人民医院药剂科,苏州,215128【正文语种】中文【中图分类】R283;R284决明子为豆科一年生草本植物决明Cassia obtusifolia L.或小决明Cassia tora L.的干燥成熟种子[1]。
决明子在临床上为常用中药，具有清肝明目、润肠通便的功效[2-3]。
决明子又称“还瞳子”，含有多种维生素和丰富的氨基酸、脂肪、碳水化合物等，临床实验证明，喝决明子茶可以清肝明目、防止视力模糊、降血压、降血脂、减少胆固醇等，对于防治冠心病、高血压都有较好的疗效[4]。
决明子在临床上应用有生决明子和炒决明子之分，其中生决明子长于清肝热，润肠燥，具有清热明目，润肠通便的功效，用于目赤肿痛，大便秘结；炒决明子则寒泻之性缓和，有平肝养肾的功效，可用于头痛、头晕、青盲内障等[5-6]。
因此，经过炮制之后的决明子其性质发生了较为明显的改变，这与其中相关化学成分的改变有关，因此，研究炮制前后决明子中有效成分的含量变化可对揭示决明子炮制之后药性为何改变提供一定的科学依据。
决明子中的蒽醌类成分是决明子中一大类代表性药效成分，具有泻下和抗氧化等活性。
为了探索决明子炮制过程中相关药效物质基础的变化规律，我们选择了蒽醌类(橙黄决明素，大黄酸，决明蒽醌，大黄素，大黄酚，大黄素甲醚)成分作为指标，采用高效液相色谱法，比较炮制前后蒽醌类共6个指标性成分含量变化，为研究炮制对决明子药效的改变提供一定的参考和借鉴。
1 仪器与试药1.1 仪器日本岛津LC-20AT型高效液相色谱仪(DAD检测器，四元梯度泵，柱恒温箱，在线脱气机)，BSA822-CW型十万之一电子天平(德国赛多利斯公司)。
1.2 试药橙黄决明素，大黄酸，决明蒽醌，大黄素，大黄酚，大黄素甲醚对照品均由本实验室自制，结构经UV、NMR、MS、IR鉴定，用高效液相色谱法(HPLC)测定纯度均>98.0%(峰面积归一化法)，乙腈(HPLC级，Fisher公司)，甲醇(色谱纯，Fisher公司)，水为重蒸水，其余试剂为分析纯(北京化学试剂厂)。
1.3 分析样品决明子药材于2017年购自安徽亳州药材市场，经专家鉴定为豆科植物决明Cassia obtusifolia L.的成熟种子，产于河北、安徽。
决明子饮片由本实验室自行制备，炮制方法按照《中华人民共和国药典》2015年版一部中决明子饮片项下规定操作，取净决明子，照清炒法(附录ⅡD)文火炒至微有香气，取出，放凉，备用。
2 方法与结果2.1 色谱条件 Thermo Syncronis C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流动相乙腈(A)-1%冰乙酸水溶液(B)梯度洗脱(0～60 min，35%～75%A)，流速1mL/min，柱温30 ℃，检测波长254 nm，进样量10 μL。
2.2 对照品溶液的制备精密称取橙黄决明素、大黄酸、决明蒽醌、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚适量，置100 mL量瓶中，加75%甲醇溶解，定容至刻度，配置成质量浓度分别为1213.0，627.0，542.0，68.9，49.14，83.6 μg/mL的各对照品贮备液。
精密吸取各对照品贮备液适量，配制成质量浓度为101.08，52.25，25.81，9.19，10.92，6.97 μg/mL的混合对照品贮备液。
2.3 供试品溶液的制备取决明子生品及炮制品粉末(过四号筛)约0.2 g，精密称定，置50 mL具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇25 mL称定质量，置水浴上加热回流1 h，放冷，再称定质量，用75%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，用0.45 μm微孔滤膜滤过即得，备用。
2.4 专属性试验精密量取“2.2”项下混合对照品溶液和供试品溶液各适量，按“2.1”项下色谱条件进样测定。
结果，在该色谱条件下，各待测成分间、待测成分与杂质峰间均能达到基线分离，分离度>1.5，其他成分对待测成分的测定无干扰，理论塔板数以橙黄决明素峰计>6 000。
见图1。
2.5 线性关系考察分别精密吸取混合对照品溶液0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00 mL，分别置10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，得到系列浓度的6种成分混合对照品溶液。
进样10 μL，测定峰面积，记录数据。
分别以进样量为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)绘制标准曲线，进行线性回归分析。
见表1。
2.6 精密度试验吸取对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件，连续重复进样6次，每次10 μL，测定6种化合物的峰面积并计算RSD值。
记录橙黄决明素、大黄酸、决明蒽醌、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的峰面积，RSD分别为0.15%，0.12%，0.13%，0.16%，0.18%，0.11%(n=6)，表明仪器精密度良好。
图1 6种成分高效液相色谱图注：1.橙黄决明素；2.大黄酸；3.决明蒽醌；4.大黄素；5.大黄酚；6.大黄素甲醚表1 线性关系考察结果(n=6)化合物线性方程R2线性范围(μg/mL)橙黄决明素Y=14 238X-4 3860.999 64.421～101.08大黄酸Y=28 761X-6 8420.99953.118～52.25决明蒽醌Y=43 821X-3 7810.999 40.892～25.81大黄素Y=36 702X-2 7830.999 20.098～9.19大黄酚Y=49 821X-5 2130.999 70.114～10.92大黄素甲醚Y=32 412X-2 3980.999 60.078～6.97表2 决明子6种游离蒽醌的稳定性实验化合物RE(%)2 h4 h8 h12 h24 h橙黄决明素-1.81.1-0.41.11.2大黄酸0.6-1.10.50.41.6决明蒽醌-1.1-0.80.80.61.1大黄素0.6-0.41.30.31.2大黄酚0.80.9-1.20.60.8大黄素甲醚-0.91.2-1.30.61.12.7 重复性试验称取同一批决明子样品500 mg，共6份，按“2.2”项下供试品溶液制备方法操作，按“2.1”项下色谱条件测定，外标法计算浓度，计算RSD值。
结果橙黄决明素、大黄酸、决明蒽醌、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的RSD分别为2.1%，2.5%，2.4%，2.3%，2.2%，2.5%(n=6)，表明重复性良好。
表3 决明子生品与炮制品6种蒽醌苷元的含量比较样品橙黄决明素大黄酸决明蒽醌大黄素大黄酚大黄素甲醚生品0.0522±0.0050.0382±0.0080.0156±0.0020.0078±0.00040.0124±0.0020.0086±0.0003炮制品0.0513±0.0060.0376±0.0070.0195±0.0010.0094±0.00030.0105±0.0010.0068±0.0002含量变化——25%(+)21%(+)15%(-)21%(-)2.8 稳定性试验按“2.2”项下方法操作制备决明子供试品溶液，在“2.1”项色谱条件下，分别在0，2，4，8，12，24 h测定。
外标法计算6种化合物不同时间点浓度并与0 h比较，计算RE值。
结果表明供试品溶液在24 h内稳定。
见表2。
2.9 回收率试验称取已知含量的决明子样品6份，每份约500 mg，分别加入精密量取的1213.0 μg/mL的橙黄决明素0.70 mL、627.0 μg/mL的大黄酸0.6 mL、542.0 μg/mL的决明蒽醌0.3 mL、68.9 μg/mL的大黄素0.4 mL、49.14 μg/mL 的大黄酚0.5 mL、83.6 μg/m L的大黄素甲醚0.3 mL，按“2.2”项下供试品溶液制备方法操作，并按“2.1”项下色谱条件测定，以各化合物浓度计算回收率。
化合物1、2、3、4、5、6的平均回收率在98.3%～99.2%之间，RSD<2.0%。
2.10 样品测定结果取购自安徽亳州药材市场的决明子生品6份和相应的炮制品6份，按照上述“2.1”“2.2”项下成分含量测定方法，测定其中的橙黄决明素、大黄酸、决明蒽醌、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量，对生品和炮制品含量进行比较。
见表3。
3 讨论决明子采用高效液相色谱法测定蒽醌准确、灵敏，高效[7-8]。
本研究表明决明子生品与炮制品比较，其中游离蒽醌橙黄决明素、大黄酸的含量未见明显变化，说明在炮制过程种，这2种游离蒽醌成分的稳定性较好。
而决明蒽醌、大黄素的含量在生品基础上经过炮制之后，含量明显增加，有可能是生品决明子其中所含的蒽醌苷类在炮制过程中分解产生了游离蒽醌苷元所造成的。
大黄酚、大黄素甲醚的含量在炮制后明显下降，说明这2种游离蒽醌在决明子中的稳定性较差，在炮制过程种，部分成分被破坏损失，从而造成含量减少。
对于橙黄决明素、大黄酸的含量未发生明显变化的情况，也有可能是这2种游离蒽醌苷元含量处在一种动态平衡之中，即使在炮制过程中，这种动态平衡也没有被打破。
而另外2种含量变化情况的游离蒽醌，其含量动态平衡在炮制过程中，因为加热而被破坏。
其中含量减少的原因可能是生成苷元的速率由于炮制受热而低于苷元分解的速率，而含量增加的原因也可能是生成苷元的速率由于炮制受热高于了苷元分解的速率。
不同炮制方法对决明子活性成分游离蒽醌含量影响的研究较多[9-12]，其结果多比较不同炮制方法对蒽醌类成分含量的影响。
对采用清炒法炮制对6种游离蒽醌含量的影响研究未见报道。
对于决明子中这类蒽醌苷元由于炮制而导致的含量变化不同的研究结果，我们也正在对其变化的本质原因进行寻找，从而更好地指导中药炮制过程，使其更加科学化，能够在一定程度上更好地确保中药品质，提升中药质量。