青海部分牧区牦牛酸奶中乳杆菌的分离与鉴定
青海地区奶牛无乳链球菌的分离与鉴定
青海地区奶牛无乳链球菌的分离与鉴定杨有武【摘要】Streptococcus agalactiae is one of pathogenic bacterium that inducing mastitis of dairy cow. In order to master the popularity and laid the reference for selection of medicine to treat mastitis, 258 samples were collected from 16 dairy cow farms in Qinghai province, and 137 Streptococcus strains were isolated,including Streptococcus agalactiae 42 strains after subculture, gram straining, plasma-coagulase test, CAMP test, biochemical tests and animal pathogenicity tests. The results indicated that Streptococcus agalactiae was the primary pathogenic bacteria of mastitis. All of Streptococcus agalactiaes were hypersensitive to cephradine, and partially resistant to amikacin ofloxacin, ampicillin and sulfanilamide group after K-B medicine sensitivity test.%无乳链球菌是导致奶牛乳房炎的常见病原菌之一,为了掌握青海地区无乳链球菌的流行情况及常用药物的敏感性,从而为本地区更好的预防与治疗奶牛乳房炎提供保障.本试验在青海地区16个奶牛场共采集258份乳房炎乳样,经革兰氏染色与绵羊鲜血琼脂培养基培养纯化,获得疑似链球菌137株;随后经玻片法血浆凝固酶试验、CAMP试验、生化试验与动物致病性试验对无乳链球菌进行鉴定,结果显示,137株链球菌中含有无乳链球菌42株,分离率为30.7％;经K-B纸片扩散法对无乳链球菌耐药性检测结果显示,该地区无乳链球菌主要对头孢类高度敏感,对氧氟沙星、磺胺类、氨苄青霉素与阿米卡星中度敏感.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2012(039)002【总页数】3页(P191-193)【关键词】奶牛;乳房炎;无乳链球菌;分离鉴定【作者】杨有武【作者单位】青海省海北州海晏县兽医站,青海海北812200【正文语种】中文【中图分类】S857.2+6随着经济增长与生活质量的不断提高，中国乳制品的需求量呈现了不断上升的趋势，因此，增加原料奶的产量以提高经济效益成为了每个奶牛养殖业主追求的目标。
一株从青海酸奶中分离出来的嗜酸乳杆菌的分离鉴定与特性研究
一株从青海酸奶中分离出来的嗜酸乳杆菌的分离鉴定与特性研究张雅茹;薛莉;左志刚;张进;马征途【期刊名称】《农产品加工·创新版》【年(卷),期】2017(000)001【摘要】从青海酸奶中分离鉴定出嗜酸乳杆菌,并对其进行降血脂的研究.结合细菌形态学和16S rDNA序列同源性分析进行鉴定,并通过检测总胆固醇和甘油三酯的含量来确定嗜酸乳杆菌降血脂的能力.结果表明,从青海酸奶中分离出的菌株为嗜酸乳杆菌,其能降低小鼠血清中的胆固醇,可见嗜酸乳杆菌具有降血脂的功能.%To isolate one kind of Lactobacillus acidophilus in yogurt from Qinghai and investigate its hypolipidemic action.Bacterial identification is performed on the basis of bacterial morphology and 16S rDNA sequence homology analysis,and the hypolipidemic action is researched by determining Lactobacillus acidophilus reducing the content of total cholesterol and triglycerides.The results show that the bacterium is Lactobacillus acidophilus,which can reduce content of total cholesterol and ctobacillus acidophilus is characterized by reducing blood fat.【总页数】4页(P44-46,49)【作者】张雅茹;薛莉;左志刚;张进;马征途【作者单位】内蒙古双奇药业股份有限公司,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古双奇药业股份有限公司,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古双奇药业股份有限公司,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古双奇药业股份有限公司,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古双奇药业股份有限公司,内蒙古呼和浩特010010【正文语种】中文【中图分类】Q93.34【相关文献】1.酸奶中乳酸杆菌分离鉴定及其与女性生殖道感染有关的生理生化特性研究 [J], 王江;李晶;律娜;朱宝利;张瑞芬2.一株嗜酸乳杆菌的分离鉴定及其生物学特性研究 [J], 杜志琳;尹望;李雪平;3.西宁传统发酵酸奶中乳酸菌的分离鉴定及发酵特性研究 [J], 姚沛琳;苏博;张新剑;黄悦;姜华4.西宁传统发酵酸奶中乳酸菌的分离鉴定及发酵特性研究 [J], 姚沛琳;苏博;张新剑;黄悦;姜华;5.青海酸奶中乳酸菌的分离鉴定及抑菌谱研究 [J], 杜琨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一株牦牛源产细菌素植物乳杆菌的分离鉴定及其基因组和胞外蛋白组研究
一株牦牛源产细菌素植物乳杆菌的分离鉴定及其基因组和胞外蛋白组研究乳酸菌分泌的细菌素因其安全、无毒且有较强的抑菌活性,能被机体降解,不产生耐药性等优点,被普遍认为是抗生素的有效替代物。
牦牛是青藏高原的特有畜种,是当地牧民赖以生存的重要物资,但还未见到对牦牛胃肠道产细菌素乳酸菌分离鉴定的相关报道。
本实验的目的是对牦牛肠道产细菌素乳酸菌进行分离鉴定,研究其生物学特性并从分子水平上诠释其益生特性,为进一步开发牦牛专用的微生态制剂奠定基础,取得如下成果:1一株牦牛源产细菌素植物乳杆菌的分离鉴定用含有0.5%碳酸钙MRS固体培养基从19份牦牛粪便样本中分离出91株乳酸菌,采用牛津杯法筛选产细菌素乳酸菌,并利用16S rRNA鉴定。
结果表明:在排除有机酸、过氧化氢等干扰因素后,从分离纯化到的91株乳酸菌中筛选到9株对大肠杆菌ATCC25922和金葡球菌ATCC25923仍有明显抑制作用的菌株,并且对蛋白酶敏感,初步认定为产细菌素乳酸菌;经16S rRNA鉴定为4株海氏肠球菌、3株屎肠球菌、1株蒙氏肠球菌、1株植物乳杆菌。
鉴于植物乳杆菌抑菌效果最好并且是《饲料添加剂品种目录》和《食品添加剂品种目录》中允许使用的菌种,所以选其为研究对象,命名为植物乳杆菌SWUN5815。
进一步的研究表明:该菌株对临床分离的牦牛腹泻病原菌具有很强的广谱抑菌活性;此菌株在pH=2时存活率为58.2%,pH=3时存活率为86.9%,胆盐浓度0.3%时存活率为66.8%,具有良好的耐酸耐胆盐能力;对Caco-2细胞粘附率为42%;对常用的抗生素敏感,不具耐药性。
因此,该菌株是一株有潜力的候选益生菌株。
2植物乳杆菌SWUN5815株对小鼠增重和肠黏膜免疫的作用40只18 g左右的雌性昆明小鼠分成4组,每组10只。
1-3组为实验组,每日分别灌服5×106 CFU、5×107 CFU、5×108 CFU的植物乳杆菌SWUN5815,连续灌胃21 d;4组为对照组,灌服相同体积的MRS肉汤作对照。
西藏、川西青藏高原牧区自然发酵牦牛酸奶中优良乳酸菌的筛选及鉴定
西藏、川西青藏高原牧区自然发酵牦牛酸奶中优良乳酸菌的筛选及鉴定吴均;赵晓娟;陈佳昕;杜木英;阚建全【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2013(034)017【摘要】从西藏、川西青藏高原牧区自然发酵的牦牛酸奶样品中分离出56株乳酸菌菌株,通过初筛选出遗传稳定性好、凝乳时间短、感官性能好的乳酸菌10株,再通过对各种发酵性能的测定最终筛选出7株性能优良的乳酸菌.这7株菌的凝乳时间在6～8h之间,凝乳时的酸度在69.99～92.31°T之间,冷藏期间滴定酸度增加了8.46～20.94°T,活菌数为107～1011CFU/mL,产生的乙醛和双乙酰含量分别为14.21～30.76μg/mL和0.51～1.55μg/mL.通过16S rDNA分子鉴定得出:TG1-1为干酪乳杆菌或副干酪乳杆菌,TG1-11为副干酪乳杆菌,TG3-2和DLDQ2-1为干酪乳杆菌,TG2-4、KDLL-2为屎肠球菌,TG3-4为坚忍肠球菌.【总页数】6页(P150-155)【作者】吴均;赵晓娟;陈佳昕;杜木英;阚建全【作者单位】西南大学食品科学学院,重庆 400715;西南大学食品科学学院,重庆400715;西南大学食品科学学院,重庆 400715;西南大学食品科学学院,重庆400715;重庆市特色食品工程技术研究中心,重庆400715;农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(重庆),重庆 400715;西南大学食品科学学院,重庆400715;重庆市特色食品工程技术研究中心,重庆400715;农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(重庆),重庆 400715【正文语种】中文【中图分类】TS252.1【相关文献】1.川西高原牧区自然发酵酸乳中优良乳酸菌性能测定及应用 [J], 敖晓琳;张小平;李诚;鲁妮;Kristina Lindstr(o)m2.西藏牧区自然发酵牦牛酸奶的乳酸菌菌种筛选及工艺优化 [J], 廖钰婷;吴均;龙谋;杜木英;阚建全3.甘肃藏区自然发酵牦牛乳中优良乳酸菌的筛选及鉴定 [J], 秦虹;梁琪;张卫兵;张炎;米兰4.川西高原牧区自然发酵酸乳中优良酸奶发酵剂菌种的筛选 [J], 敖晓琳;鲁妮;张小平;李诚5.自然发酵牦牛酸奶中乳酸菌的分离鉴定 [J], 金鑫燕;闫忠心因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
牦牛酸乳中耐酸耐胆盐乳酸菌的分离筛选和鉴定
牦牛酸乳中耐酸耐胆盐乳酸菌的分离筛选和鉴定
李洋;赵欣;张玉;王洪伟;索化夷
【期刊名称】《食品与机械》
【年(卷),期】2018(034)007
【摘要】通过对青海地区采集的牦牛酸乳中乳酸菌的分离鉴定,共获得48株乳酸菌.以生长旺盛且可用于食品的11株乳酸菌为研究对象,进行人工胃液和胆盐耐受性评价.结果表明,有6株菌株在pH 3.00人工胃液中存活率>50.00％,2株菌株在0.30％胆盐中生长率>15％.其中鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601为最佳抗性菌株,在人工胃液中存活率为119.53％,在0.30％胆盐中生长率为41.64％.
【总页数】7页(P23-28,33)
【作者】李洋;赵欣;张玉;王洪伟;索化夷
【作者单位】西南大学食品科学学院,重庆 400715;重庆第二师范学院功能性食品协同创新中心,重庆 400067;西南大学食品科学学院,重庆 400715;西南大学食品科学学院,重庆 400715;西南大学食品科学学院,重庆 400715
【正文语种】中文
【相关文献】
1.降胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及其耐酸耐胆盐性能研究 [J], 陈仪婷;张红星;谢远红;金君华;刘顺
2.耐酸耐胆盐益生乳酸菌的筛选与鉴定 [J], 吕源玲
3.耐酸耐胆盐乳酸菌的鉴定及筛选 [J], 李利;孔丽;张宁;赵伟超;肖亦农;李炳学;韩晓日
4.阿拉善双峰驼酸驼乳中乳酸菌的分离鉴定及耐酸和耐盐研究 [J], FAHAD Shah;徐鸿洋;智超;宫海萌;张和平;赵国芬
5.酸汤中乳酸菌的鉴定及其耐酸、耐胆盐和抗氧化活性 [J], 王祎然;韦明明;张涵;周天瑞;姜梅
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青藏高原牦牛酸奶中降胆固醇乳酸菌的筛选及特性研究
722019/10中国食品工业张娟 李文苑 高利娥 马莹 丁梓桐 李福厚 郭旭生兰州大学 生命科学学院益生菌与生物饲料研究中心，甘肃省，兰州市，730000Zhang Juan Li Wenyuan Gao Lie Ma Ying Ding Zitong Li Fuhou Guo Xusheng(Probiotics and Biological Feed Research Center, College of Life Sciences, Lanzhou University, Lanzhou, Gansu Province, China, Postal code: 730000)基金：兰州市人才创新创业项目（2016-RC-55） 中图分类号：Q93青藏高原牦牛酸奶中降胆固醇乳酸菌的筛选及特性研究摘要：目的：本研究旨在从天祝、那曲、若尔盖、玉树、红原和玛曲采集的202份牦牛酸奶样品中，筛选出具有高降胆固醇特性的优良菌株。
方法：选择MRS、M17和SL 培养基（MRS 培养基是培养乳酸菌的基础培养基，M17培养基和SL 培养基均为分离乳酸菌的培养基，其中SL 培养基为分离嗜酸性乳酸菌的培养基）进行分离纯化，过氧化氢筛选阴性菌。
根据邻苯二甲醛法测定胆固醇，筛选具有降解脂溶性胆固醇能力的菌株，水溶性胆固醇法复筛验证菌株降解能力，16S rDNA 分子生物学法鉴定其种属。
结果：分离纯化后总计720株乳酸菌，所有菌株经初筛都具有一定的胆固醇降解能力，其中降解率在68%以上的菌株，共有52株，菌株BX39的胆固醇降解率高达90.05%；复筛发现菌株BT18胆固醇降解率高达96.26%；16S rDNA 分子生物学法分析比对后发现，72株乳酸菌中有64株罗伊氏乳杆菌、4株乳酸片球菌、3株瑞士乳杆菌和1株植物乳杆菌。
结论：罗伊氏乳杆菌BT18具有高降胆固醇特性，可作为后备菌株进一步的研究和利用。
关键词：青藏高原，牦牛酸奶，益生菌，胆固醇，邻苯二甲醛法Abstract: Objective: In this study, 202 yak yoghurt samples collected from Tianzhu, Naqu, Zoige, Yushu, Hongyuan and Maqu were screened for excellent strains with high cholesterol-lowering properties. Methods: MRS, M17 and SL medium were selected (MRS medium is the basic medium for culturing lactic acid bacteria, M17 medium and SL medium are the medium for separating lactic acid bacteria, and SL medium is the medium for separating eosinophilic lactic acid bacteria) The separation and purification are carried out, and the catalase test is a negative bacterium. According to the phthalic acid method, the cholesterol is determined, the strain with the ability to degrade cholesterol is screened , and the 16S rDNA molecular biology method is used to identify the species. Results: After isolation and purification, a total of 720 strains of lactic acid bacteria were screened. All strains had certain cholesterol degradation ability. There were 52 strains with statistical degradation rate above 68%, and the cholesterol degradation rate of one strain of BX39 was as high as 90.05%. After repeated screening, the cholesterol degradation rate of strain BT18 was as high as 96.26%. After 16S rDNA molecular biology analysis, 72 strains of lactic acid bacteria were found, including 64 strains of Lactobacillus reuteri, 4 strains of Pediococcus acidilactici, 3 strains of Lactobacillus helveticus and 1 strain of Lactobacillus plantarum. Conclusion: Lactobacillus reuteri BT18 has high cholesterol-lowering properties for further research and development.Key words: Qinghai-Tibet Plateau, yak yoghurt, probiotics, cholesterol, phthalaldehyde method, CLC number: Q93Screening of the ability of lactic acid bacteria to lower cholesterol in yak yoghurt on Qinghai-Tibet Plateau前言现代生活中不健康的生活习惯和高糖高脂饮食摄入，会导致人体血清中胆固醇含量过高，从而引发多种疾病，例如心血管疾病，癌症和非酒精性脂肪肝等[1-3]，这些疾病威胁着人类的健康与生命。
青海部分牧区牦牛传统乳制品中优势乳酸菌的鉴定
ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ｄ ａ ｉ ｙ ｒ ｌ ａ ｃ ｔ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｅ ｓ ａ ｎ ｄ ｂ ｕ ｉ ｌ ｄ ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｔ ｒ ｅ ｅ ｒ ｆ ｏ ｍ Ｑ ｉ ｎ ｇ ｈ ａ ｉ Ｌ ａ ｃ ｔ ｏ ｂ ａ ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｅ ｓ 。 Ｍｅ ｔ ｈ － ｏ ｄ ｓ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｃ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ｄ ａ ｉ ｒ ｙ ｒ ｆ ｏ ｍ ｐ ａ ｓ ｔ ｏ ｒ ａ ｌ ｓ ｉ ｎ Ｙ ｕ ｓ ｈ ｕ ， Ｇ ｕ ｏ ｌ ｕ ｏ ａ ｎ ｄ Ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｎ ａ ｎ ｐ ｒ ｏ ｆ ｅ ｃ ｔ ｕ ｒ ｅ ｏ ｆ Ｑ ｉ ｎ ｇ ｈ ａ ｉ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｎ ｔ ｈ ｅ
传统牦牛酸奶中产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定
传统牦牛酸奶中产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定
梁小东;汤承;雷江英;沈凡钰;陈德纯
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2022(41)8
【摘要】采用溶钙圈法对来自青海海南藏族自治区、四川阿坝、甘孜理塘的牦牛酸奶样品的菌株进行分离筛选,采用形态学观察和16S r RNA序列分析进行鉴定;测定筛选菌株上清液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)抑菌活性;考察筛选菌株上清液对蛋白酶的耐受性及对抗生素的敏感性,并确定细菌素种类。
结果表明,共分离筛选出6株菌(编号为A1~A2及
G1~G4),其中菌株A1~A2被鉴定为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus),菌株G1~G4被鉴定为屎肠球菌(Enterococcus faecium);菌株G3对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌圈直径>20 mm,且对蛋白酶不耐受,表明该菌株产细菌素,对常见抗生素敏感,经细菌素基因鉴定证实,该菌株产肠球菌素A和肠球菌素P。
综上,菌株G3可作为产细菌素益生菌的候选菌株。
【总页数】6页(P77-82)
【作者】梁小东;汤承;雷江英;沈凡钰;陈德纯
【作者单位】西南民族大学畜牧兽医学院;动物医学四川省高校重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.3
【相关文献】
1.传统发酵食品中产细菌素乳酸菌的筛选与鉴定
2.牦牛奶酪中产细菌素乳酸菌菌株的筛选
3.西藏、川西青藏高原牧区自然发酵牦牛酸奶中优良乳酸菌的筛选及鉴定
4.内蒙古传统乳制品中产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定
5.新疆传统酸奶中产胞外多糖乳酸菌的筛选与鉴定
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一种益生性牦牛源乳酸菌的分离、鉴定及初步筛选的方法[发明专利]
专利名称：一种益生性牦牛源乳酸菌的分离、鉴定及初步筛选的方法
专利类型：发明专利
发明人：吴庆侠,董海龙,朱洪云,刘忠艳
申请号：CN201710852452.6
申请日：20170919
公开号：CN108441434A
公开日：
20180824
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于生物技术领域且公开了一种益生性牦牛源乳酸菌的分离、鉴定及初步筛选的方法，分离步骤为：取粪便样品中间部分约1g加入到装有已灭菌冷藏的蛋白胨缓冲液中，无菌条件下吸取1mL粪便上清液接种到装有MRS液体培养基中，37℃需氧及厌氧培养各24h，取200μl菌悬液进行MRS平板涂布，需氧及厌氧培养各24h，选取可疑单个菌落接种至相应平板培养基，划线培养后37℃需氧及厌氧培养各24h，再次选取单个菌落接种至相应平板培养基37℃需氧及厌氧培养，如此纯化2次后，选取单个菌落接种至相应斜面培养基，37℃需氧及厌氧培养各24h，4℃冰箱保存备用。
本发明起到保护肠黏膜的作用，从而减轻肠上皮的炎症和腹泻。
申请人：西藏农牧学院
地址：西藏自治区林芝地区巴宜区育才西路100号
国籍：CN
代理机构：北京中索知识产权代理有限公司
代理人：宋涛
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牦牛乳酸菌的分离与鉴定研究
牦牛乳酸菌的分离与鉴定研究牦牛乳酸菌是一类生长在牦牛乳制品中的微生物，它们能够发酵乳制品并产生乳酸。
对于牦牛乳酸菌的分离与鉴定研究，是为了探索其在乳制品加工过程中的作用、发酵特性、功能以及潜在的应用价值。
本文将从牦牛乳酸菌的分离、鉴定方法和研究进展方面进行探讨。
一、牦牛乳酸菌的分离牦牛乳酸菌的分离是研究的第一步，通过分离可以获取到原始的菌株，为后续的鉴定和研究提供基础。
常用的分离方法包括表面划线法、稀释法和厌氧法等。
具体操作步骤如下：1. 表面划线法：将牦牛乳制品样品均匀涂布在适宜的固体培养基上，使用无菌的匀涂棒划线，然后在适当的温度下进行培养。
待菌落出现后，用无菌环针进行遴选，然后重新培养以确保单菌落数量。
2. 稀释法：将牦牛乳样品适当稀释，然后将稀释液均匀涂布在固体培养基上，培养后进行挑选和筛选。
3. 厌氧法：对于一些需要在厌氧条件下生长的乳酸菌，可以采用厌氧培养法进行分离。
将样品接种到含有适宜酸碱指示剂的厌氧培养基中，通过颜色变化来判断是否有乳酸菌生长。
二、牦牛乳酸菌的鉴定鉴定牦牛乳酸菌的目的是确定其分类地位和种属。
鉴定可以使用多种方法，包括形态学观察、生理生化特性分析和分子生物学方法。
具体措施如下：1. 形态学观察：观察牦牛乳酸菌的形态特征，包括菌落形态、菌体形态、气泡形成和芽孢形成等。
2. 生理生化特性分析：通过检测牦牛乳酸菌的生理生化特性，如产酸能力、气体产生、温度和pH值耐受性等。
常用的方法包括酶活性测定、糖利用能力测试和抗生素敏感性试验等。
3. 分子生物学方法：利用分子生物学方法可以更准确地鉴定牦牛乳酸菌的分类地位和种属信息。
例如，可以使用16S rRNA基因序列分析、PCR扩增和限制酶切以及序列分析等。
三、牦牛乳酸菌的研究进展近年来，对牦牛乳酸菌的研究取得了一些重要进展。
以下是几个研究方向的简要介绍：1. 发酵特性：研究人员对牦牛乳酸菌的发酵特性进行了深入研究，包括产乳酸速率、产物种类和酸度调节等方面。
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青海部分牧区牦牛酸奶中乳杆菌的分离与鉴定X胡勇,刘书杰(青海省畜牧兽医科学院,西宁,810016)摘要:利用MRS培养基,对青海部分牧区收集的15份牦牛酸奶,进行了乳杆菌的分离,对分离得到的9株疑似乳杆菌,对其中的3株进行生物学鉴定。
结果:分离株均为兼性厌氧菌,在MRS培养基上,菌落较大、透明、灰白色,镜检为杆状细菌,革兰氏染色阳性,过氧化氢酶试验为阴性,乳糖发酵阳性,牛乳发酵试验阳性,符合乳杆菌的特性。
关键词:牦牛;酸奶;乳杆菌中图分类号:S852.61+2文献标识码:B文章编号:1003-7950(2007)03-0018-02 Isolation and Identification of Lactobacillus in Yak Yoghourt in Part pasture of Qinghai ProvinclHU Yong et al(Qinghai Acade my of Animal and Veterinary Sciences,Xining810016)Abstract:9Strains of suspec t Lactobacillas were isolated from15samples of yak yoghourt that were collected in the part pasture of Qinghai province with MRS culture medium,and3strains of them were identified with biochemistry test.The results showed that the suspect Lactobacillus isolated were facultative anaerobes,and the colonies of them in MRS culture mdeium were hyaline,bigger and gray-white colour,These suspect Lactobacillus were rod shape under microscopy.and gram-positive.The catalase test was negative reac tion and lactose fermented test and milk fermented test were positive reaction.These results indicated that3strains of isolafes were identified as Lactobacillus.Key words:Yak;Yoghourt;Lactobacillus青海省现有牦牛380万头,占全国总数的37.8%。
牦牛乳的乳汁浓稠、营养价值高,蛋白质和脂肪含量分别达5.24%和7.0%,且含有大量的挥发性脂肪酸,并富有良好的风味。
由于地理环境所限,牦牛乳产品的开发仍处于原始落后的现状。
牦牛乳主要是牧民自食、打酥油,没有形成商品。
广大牧区居住着以藏族和蒙古族为主的纯牧区牧民,他们沿用传统而古老的方法加工乳制品,这种方法生产的乳制品较好地保存了当地自然环境中的有益微生物(特别是乳酸菌)。
本研究的目的在于从青海省藏区牦牛酸奶中分离得到具有较好的生物学特性的乳酸菌,以此来开发出具有高原特色的绿色无污染的风味牦牛酸奶、饮料、酸牛奶等奶产品,推向市场,这样既可增加牧民的收入,也为青海省牦牛乳走向市场打开了一条出路。
为此,我们于2006年6~10月份进行了青海藏区牦牛酸奶中乳酸菌的分离与初步鉴定。
1材料与方法1.1样品来源:样品采自青海省玉树州、果洛州和大通种牛场的牧民家的牦牛酸奶样品15份。
其中玉树州的3份,果洛州的5份,大通种牛场7份。
无菌操作每份样品各收集20mL,在4e保存带回实验室分菌。
1.2培养基1.2.1MRS培养基112:葡萄糖20g;蛋白胨10g;牛肉膏10g;酵母提取物5g;柠檬酸二铵2g;磷酸氢二钾2g; MgSO4#7H2O0.58g;MnSO4#4H2O0.25g;吐温80为1mL;蒸馏水1L;琼脂15g。
1.2.2牛乳培养基122:将鲜奶脱脂(含有1%酵母浸膏、1%葡萄糖),分装,121e灭菌15min,冷却后供活化菌株,测试发酵性能使用。
1.3仪器:恒温培养箱酸度计显微镜1.4方法1.4.1乳杆菌的分离132:把牦牛酸奶样品直接划线接种到MRS平板培养基上,37e下48h厌氧培养后,挑取可疑菌落,染色镜检。
1.4.2乳杆菌的分离纯化13,42:把可疑乳杆菌直接划在MRS培养基上,37e下48h厌氧培养后,挑取单个菌落,接种到脱脂乳中进行厌氧或需氧培养,然后做触酶试验和革兰氏染色,镜检,用MRS固体斜面培养基接种纯培养,并保存在4e下备用或冻干保存。
1.4.3厌氧培养方法:本试验采用在干燥器中按100mL体积加1g焦性没食子酸的比例,加入适量的2mol P L NaOH溶液,使其接触发生吸氧反应。
同时放入事先准备好的厌氧指示剂,若指示剂无色,则表示为厌氧状态的方法进行厌氧培养。
将酸乳稀释到所需的稀释度,用接种环将酸奶接入MRS培养基平皿中,接好的培养皿倒置培养,置于干燥器中,37e培养48~ 72h。
1.4.4被检菌的活化:把被检菌按下列程序接种:脱脂乳培养基y MRS液体培养两代y备用。
1.4.5生长温度试验:将活化的被检菌种接种在MRS 液体培养基中,在15e、45e两种温度下培养,48~ 72h,判定其结果,试管内浑浊为细菌生长,判定为阳性(+),试管内透明者判定为阴性(-)。
1.4.6牛乳发酵试验:将菌株的培养物以10%的接种量接种于灭菌脱脂乳中培养24h测pH。
1.4.7糖发酵试验:将活化的被检的杆菌接在糖发酵管内,37e培养48~72h,根据管内颜色变化来判定结果。
1.4.8生理生化反应:吲哚反应、产硫化氢试验、硝酸盐还原试验、明胶水解试验、联苯胺反应试验。
2结果2.1牦牛酸奶样品中乳杆菌的分离结果:本次试验中从15份牦牛酸奶样品中分离出了9株疑似乳杆菌,对其中的3株(QMB1,QMB2和QMB3)进行了以下生化试验。
2.2形态及菌落特征:三株菌革兰氏染色均为阳性,触酶试验为阴性,在MRS培养基生长的菌落形态为灰X收稿日期:2007-03-16基金项目:西部专项(2003BA90IA25)青藏高原牦牛产业化生产关键技术的研究。
18青海畜牧兽医杂志2007年第37卷第3期(总第189期)白色,表面粗糙:QMB3菌株的菌落中间有白色的小突起;菌体细长杆状,两端椭圆,单个或成链状出现。
2.3 生长温度试验:3株菌株在15e 和45e 的条件下生长良好。
2.4 牛乳发酵试验:牛乳发酵试验结果见表1。
表1牛乳发酵试验结果菌种QMB1QMB2QMB3凝固+-+pH 3.684.123.75注:+为凝固;-为不凝固;2.5 生理生化反应:3株菌的吲哚反应、产硫化氢试验、硝酸盐还原试验和明胶水解试验均为阴性。
表2三株乳杆菌的碳水化合物反应糖发酵QMB1QMB2QMB3葡萄糖乳糖麦芽糖苷露醇蔗糖半乳糖纤维二糖蜜二糖松三糖七叶苷木糖山梨醇阿拉伯糖甘露糖棉子糖鼠李糖蕈糖果糖-----+---+--------+-+--+++---------+-----+---+---+---+2.6 糖发酵试验:三株菌对不同糖的利用结果见表2。
3 讨论3.1 进行鉴定的3株菌均为革兰氏阳性菌,触酶试验阴性,呈长链或短链状的杆状菌。
从培养特性来看,3个菌株全部为兼性厌氧菌,并且牛乳发酵试验都使牛乳的pH 下降,根据以上结果初步鉴定3个菌株均为乳杆菌。
3.2 通过温度试验可看出,这3个菌株在15e 和45e 两种温度都生长、糖发酵试验中的结果与152中乳杆菌鉴定特性有所差异,这可能与青海牧区特殊的生态环境和气温温差大,牧民的传统制品制造工艺有一定的关系,也可能属于一个新种,需对其进行全面系统的研究,筛选出优良菌种,研制具有民族风味的新型乳制品。
参考文献112郝士海.现代细菌学培养基和生化试验手册1M 2.北京:中国科学出版社,1992.122谢正,吴挹芳.现代微生物培养和试剂手册1M 2.福建科学技术出版社,1994.132王琦,周雨霞,李少英,等.内蒙古地区乳制品中乳酸菌的分离、鉴定1J 2.内蒙古农业大学学报,1997,(2)B 1) 6.142敖敦格日勒,王琦,李少英,等.内蒙古锡林郭勒盟两个旗乳与乳制品中乳杆菌的分离与鉴定1J 2.内蒙古农业大学学报,1998,(2)B 1)10.152布坎南RE,吉本斯NE.伯杰氏细菌鉴定手册1M 2.北京:科学出版社,1984.致谢:在乳杆菌的分离和鉴定过程中得到青海省畜牧兽医科学院兽医所李小卉和马利青两位副研究员的大力支持;同时,青海省畜牧兽医科学院畜牧所的柴沙陀、吴克选和叶成君副研究员提供部分牦牛酸奶样品,在此致谢。
#牧医简报#藏獒的应激综合症的防治X李 敏1,宋永鸿2(执笔)(1.青海省贵南县沙沟乡兽医站,813100;2.青海省畜牧兽医总站,西宁,810003)中图分类号:S829.2 文献标识码:C 文章编号:1003-7950(2007)03-0019-01 近年来,人们对藏獒的重视越来越高,促使藏獒的养殖和贩运也越来越热。
其交易市场也不断增加扩大,用汽车、火车、或飞机长途贩运,反复上市出售,几易其主。
期间,环境、气候、海拔等不断更换,饲养模式和方法也不断改变,再加上在运输途中又经历饥饿、寒冷、饱食、闷热恐惧等不良刺激,促使藏獒在途中引发了应激综合症。
1 临床症状病犬近期有长途贩运和市场交易的病史,临床表现为精神不振,眼睛无神,鼻部干燥,饮食欲不振或废饱,有的流涎,有呕吐,结膜潮红,眼角有分泌物,或伴有腹胀症状。
粪便干燥或腹泻,心跳加快,呼吸增数,初期体温无明显变化,如无及时治疗或治疗护理不当,往往造成死亡。
2 病因分析犬只在长途贩运中受到各种因素的刺激,致使机体呈现以交感神经兴奋,肾上腺素分泌增高为主的一系列神经内分泌机能失调,并由此引起多种功能和代谢的改变。
尤其是在运输过程中受到持续颠簸振动,从而表现出心跳、呼吸加快,血压升高,或因组织胺的蓄积引起胃肠和呼吸道黏膜充血、水肿,加之气候、环境的改变,水土不服,途中饥饱不均,或突然喂大量高脂肪、高蛋白食物,则更加重胃肠负担,使病情进一步恶化。
3 治疗3.1 有胃肠道症状的应清理胃肠,可用温的0.1%高锰酸钾进行深部灌肠,反复进行几次,排净肠道的恶臭粪便,在灌肠时,先插管后缓慢注入,防止损伤肠壁。
3.2 控制和预防病原菌继发感染,可选用氨苄西林,头孢菌素等抗菌药物。