1糖的呈色反应和定性鉴定

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生物化学实验

生物化学实验

⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸(硫酸或盐酸)作⽤下,脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物,后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。

注意:因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性,不是糖类的特异反应。

2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下,酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛,后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。

此反应是酮糖的特异反应。

因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢,只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。

2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基,因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原,同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。

糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。

本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。

它们都是Cu2+的碱性溶液,能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊(颗粒⼤)或黄⾊(颗粒⼩)的Cu2O沉淀。

实验⼆脂肪碘值的测定碘值(价)是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。

碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数,可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。

脂肪中常含有不饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键,能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。

常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。

脂肪的不饱和程度越⾼,所含的不饱和脂肪酸越多,与其双键起加成作⽤的碘量就越多,碘值就越⾼。

故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。

I2+-CH=CH--CHI-CHI-本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。

⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后,⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量,然后计算出待测脂肪吸收的碘量,求得脂肪的碘值。

加成作⽤:IBr+-CH=CH--CHI-CHBr-剩余溴化碘中碘的释放:IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘:I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题:何谓空⽩溶液和空⽩实验?空⽩实验有何意义?在各种分析⽅法中,为消除⼲扰,⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。

糖的核磁共振性质

糖的核磁共振性质

HO
+10.6
HO
O S +0.2
OH OH
O R
+7.6
OH HO
HO
-4.4 +6.0
O S -0.3
OH OH
OH HO
S O +3.3
-4.7 +6.8
O R -0.6 O
R
+3.4
OH
23
3.酯苷、酚苷的苷化位移规律: 苷化位移值较特殊,端基碳与羰基
碳(即苷元α-碳)均向高场方向位移, β-C向低场方向位移。
※ 电压:30-50V/cm
※ 时间: 30-120min ※ 显色剂:p-甲氧基苯胺-硫酸。 ※ 注意:必须使用冷却系统,将温度维持在
0℃,以免烧坏支持体。 ※ 本法常用 2.超离心法 ※ 原理:由于微粒在离心力场中移动的速度 与微粒的密度、大小与形状有关,故将多糖
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溶液进行密度梯度超离心时,如果是组成均一 的多糖,则应呈现单峰。 ※ 具体做法:
2、多糖纯品实质上是一定分子量范围的均 一组分。
3.多糖纯度常用的测定方法
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(一)纯度测定方法 1.高压电泳法 ※ 原理:由于中性多糖导电性差、分子量大 在电场中的移动速度慢,常将其制成硼酸络合 物进行高压电泳。 ※ 电泳支持体:玻璃纤维丝、纯丝绸布等。 ※ 缓冲液:pH=9-12的硼砂溶液。
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β-D-甘露吡喃甲苷 13C1=104.5ppm
27
② 如果苷元为链状结构,则糖端基碳的苷化 位移值随着苷元为伯、仲、叔基而递减。
例如: 与糖的甲苷化学位移比较,苷元 分别为伯、仲、叔基时,糖端基碳的苷化 位移值的变化情况如下,
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O O CH2 CH3

高中生物常见试剂及变色反应

高中生物常见试剂及变色反应

高中生物常见试剂及变色反应高中生物常见试剂大全1.斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。

用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。

2.班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。

和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。

用于尿糖的测定。

3.双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。

用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。

如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。

4.苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。

用于检测脂肪。

可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。

5.二苯胺:用于鉴定DNA。

DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。

6.甲基绿:用于鉴定DNA。

DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。

吡罗红:检测RNA,呈红色7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。

8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。

9、95%的酒精溶液:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖,使细胞分离开来。

“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15%盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。

洗去卡诺氏液8%盐酸:(1)盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;(2)盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合11. 龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色改良苯酚品红染液:检测染色体,红色健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色12.20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。

(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

第二章 糖类的化学

第二章 糖类的化学

第三节 寡糖的结构和性质
第一节 概 述
2.命名
(1) 单糖:依据来源命名:如葡萄糖曾是从葡萄中提取出来的, 果糖在水果中含量较高,所以分别称为葡萄糖和果糖。 根据单糖分子中含有的碳原子数命名:丙糖、丁糖 、戊糖、 己糖等。如上面提到的核糖、脱氧核糖均含5个碳原子,故 称为戊糖,而葡萄糖、果糖、半乳糖则是含6个碳原子的己 糖。 依据糖分子中的羰基位置不同命名:醛糖和酮糖,例如葡萄 糖和果糖虽然都是己糖,但前者羰基位于分子末端,相当于 醛的衍生物,把它称为己醛糖;后者的羰基位于2-C位,相 当于酮的衍生物,把它称为己酮糖。 (2) 寡糖的命名: 依据碳原子数分别称为二糖、三糖、四糖等 依据来源名称,如蔗糖、麦芽糖等。
三、环糊精
1.结构——环糊精为含有6-8个葡萄糖基的环状寡糖具有一定的抗 酸、碱和酶的作用,容易同一些小分子或离子形成包含络合物等 特点。
2.用途——环糊精在工业上有广泛用途 环糊精因其特殊的分子结构和上述的特殊性质,常作为 稳定剂、乳化剂、增溶剂、抗氧化剂等,广泛用于食品、 医药、轻工及农业化工等方面。
二、寡糖的性质
1.旋光性和变旋性——寡糖都有旋光性,个别 没有变旋性 寡糖分子中都存在不对称碳原子,因而都有 旋光性。例如蔗糖具右旋性,比旋光度为 +66.5°;麦芽糖和乳糖也都具有各自的比旋 光度。但并非所有寡糖都有变旋性,蔗糖由 分子中不存在半缩醛羟基,所以不具有变旋 性;麦芽糖和乳糖保留有半缩醛羟基,因而 具变旋性。
第二节
单糖的结构和性质
四碳糖由于具有2个不对称碳原子,其分子结构就可能有4种 (22)不同的排布方式, 因此具有4个对映异构体,依此类推, 凡分子中含 n 个不对称碳原子的,就有2n个旋光异构体.

(整理)实验一糖和蛋白质的理化性质检验

(整理)实验一糖和蛋白质的理化性质检验

实验一糖和蛋白质的理化性质检验(4学时)第一部分蛋白质的理化性质第一节蛋白质的颜色反应一、实验目的掌握鉴定蛋白质的原理和方法。

二、实验原理蛋白质分子中的某种或某些基团与显色剂作用,可产生特定的颜色反应,不同蛋白质所含氨基酸不完全相同,颜色反应亦不同。

颜色反应不是蛋白质的专一反应,一些非蛋白物质亦可产生相同颜色反应,因此不能仅根据颜色反应的结果决定被测物是否是蛋白质。

颜色反应是一些常用的蛋白质定量测定的依据。

三、实验器材与试剂实验器材1. 鸡蛋1个2. 吸管1.0mL(×1)3. 试管1.5cm×15cm(×2)4. 试管架5. 试管夹2个6. PH试纸(5-7)7. 水浴锅实验试剂1. 卵清蛋白液:将鸡(鸭)蛋白用蒸馏水稀释20-40倍,离心,上清液冷藏备用。

2.1%茚三酮溶液:1g茚三酮溶于95%乙醇并稀释至100mL。

3. 浓硝酸:比重1.42。

4. 10%NaOH溶液:10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100mL。

四、实验方法A. 黄色反应蛋白质分子中含有苯环结构的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等)。

遇硝酸可硝化成黄色物质,此物质在碱性环境中变为橘黄色的硝苯衍生物(苯及苯丙氨酸较难硝化,需用浓硫酸促进之。

反应如下:操作方法:于一试管内,置蛋白质溶液10滴及浓硝酸5滴,加热,冷却后再加10%NaOH溶液20滴,观察颜色变化。

B. 茚三酮反应蛋白质与茚三酮共热,则产生蓝紫色的还原茚三酮、茚三酮和氨的缩合物。

此反应为一切蛋白质及a-氨基酸所共有。

含有氨基的其他物质亦呈此反应。

亚氨基酸(脯氨酸和羟脯氨酸)与茚三酮反应呈黄色。

操作方法:取1mL蛋白质溶液置于试管中,加3-5滴茚三酮试剂,加热至沸,即有蓝紫色出现。

注意:此反应必须在pH5-7进行。

C.双缩脲反应(参考实验)将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而形成双缩脲。

双缩脲在碱性环境中,能与硫酸铜结合成红紫色的络合物,此反应称为双缩脲反应。

1糖的呈色反应和还原糖的检验(讲稿)

1糖的呈色反应和还原糖的检验(讲稿)

糖的呈色反应和还原糖的检验(讲稿)本次实验目的是了解鉴定糖和还原糖的原理以及方法,并通过实验操作予以验证。

2人一组,前1-18组1个实验室。

二、实验原理。

糖的鉴定:糖经浓无机酸处理,脱水产生糠醛或糠醛衍生物。

戊糖形成糠醛,己糖则形成羟甲基糠醛。

这些糠醛和糖醛衍生物在浓无机酸作用下,能与酚类化合物缩合生成有色物质。

与一元酚如α-萘酚作用,形成三芳香环甲基有色物质。

与多元酚如间苯二酚作用,则形成氧杂蒽有色物质。

通常使用的无机酸为硫酸。

如用盐酸,则必须加热。

常用的酚类为α-萘酚、甲基苯二酚、间苯二酚和间苯三酚等,有时也用芳香胺、胆酸、某些吲哚衍生物和一些嘧啶类化合物等。

还原糖和非还原糖的鉴别:含有自由醛基(-CHO)或酮基(>C=O)的单糖和二糖为还原糖。

在碱性溶液中,还原糖能将金属离子(铜、铋、汞、银等)还原,糖本身被氧化成酸类化合物,此性质常用于检验糖的还原性,并且常成为测定还原糖含量的各种方法的依据。

三、实验内容本次实验一共采用了6种糖液作为测试糖液,2%葡萄糖,果糖,麦芽糖,蔗糖,1%淀粉溶液和1种未知糖液,每种糖液均有专门的移液管移取(贴有标签,有些实验可能只需加几滴,可以在移液管头部套上胶头滴加),不要弄混,所有试剂都有相应的移液管移取(大概4个组公用1套),用后请放回原位,方便别的同学使用。

实验包括2个部分,共7个实验。

(一)糖的呈色反应1.Molish反应(α-萘酚反应)本实验是鉴定糖类最常用的颜色反应。

糖在浓酸作用下形成的糠醛及其衍生物与α-萘酚作用,形成红紫色复合物。

在糖溶液与浓硫酸两液面间出现紫环,因此又称紫环反应。

自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。

此外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等皆呈颜色近似的阳性反应。

因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。

步骤:取6支已标号的试管,分别加入各种测试糖液lmL(约15滴),再各加入Molish 试剂2滴,摇匀。

生物化学实验指南

生物化学实验指南

实验一糖的呈色反应和定性鉴定目的要求(1) 学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法。

(2) 了解鉴定还原糖的方法及其原理。

Ⅰ. Molish反应——α-萘酚反应实验原理糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物与α-萘酚作用形成紫红色复合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称紫环反应。

自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。

此外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸以及丙酮、甲酸和乳酸均呈颜色近似的阳性反应。

因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。

试剂Molish试剂:取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL,临用前配制,棕色瓶保存。

1%葡萄糖溶液;1%蔗糖溶液;1%淀粉溶液。

操作方法取试管,编号,分别加入各待测糖溶液1 mL,然后加两滴Molish试剂,摇匀。

倾斜试管,沿管壁小心加入约1mL浓硫酸,切勿摇动,小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。

用水代替糖溶液,重复一遍,观察结果。

Ⅱ. 蒽酮反应实验原理糖经浓酸作用后生成的糠醛及其衍生物与蒽酮(10-酮-9,10-二氢蒽)作用生成蓝绿色复合物。

试剂蒽酮试剂:取0.2g 蒽酮溶于100mL 浓硫酸中,当日配制。

待测糖溶液,同Molish试验。

操作方法取试管,编号,均加入1mL蒽酮溶液,再向各管滴加2 ~ 3滴待测糖溶液,充分混匀,观察各管颜色变化并记录。

Ⅲ. 酮糖的Seliwanoff反应实验原理该反应是鉴定酮糖的特殊反应。

酮糖在酸的作用下较醛糖更易生成羟甲基糠醛。

后者与间苯二酚作用生成鲜红色复合物,反应仅需20-30秒。

醛糖在浓度较高时或长时间煮沸,才产生微弱的阳性反应。

试剂Sediwanoff试剂:0.5g 间苯二酚溶于1升盐酸(H2O∶HCl=2∶1)(V/V)中,临用前配制。

1%葡萄糖;1%蔗糖;1%果糖。

操作方法取试管,编号,各加入Sediwanoff试剂1mL,再依次分别加入待测糖溶液各4滴,混匀,同时放入沸水浴中,比较各管颜色的变化过程。

生物化学实验ppt-new全

生物化学实验ppt-new全
淀粉遇碘呈蓝色,是由于碘被吸附在淀粉上,形成一复合物, 此复合物不稳定,极易被醇、氢氧化钠和加热等使颜色褪去,其 他多糖大多能与碘呈特异的颜色,此类呈色物质也不稳定。
淀粉在酸催化下加热,逐渐水解成分子较小的糖,最后水解 成葡萄糖,其过程如下:淀粉--各种糊精—麦芽糖—葡萄糖。淀 粉完全水解后,失去与碘的作用,同时出现单糖的还原性。
五、操作
1、RNA的提取 称取5g干酵母粉于100ml烧杯中,加入0.2%NaOH溶
液30ml,沸水浴加热30min,经常搅拌。冷却,加入乙酸 数滴,使提取液呈酸性(PH5-6,用试纸试之),离心1015min(1000r/min),取上清液,加入两倍体积的95%乙醇, 边加边搅拌。加毕,静置,待完全沉淀,离心5min (1000r/min),取沉淀物,沉淀物即为粗RNA,可作鉴 定和测定含量用。 2、鉴定
试剂
管号 0 1
2
4
6
2mg/ml卵清蛋白质/ml
0.0 0.3 0.6 1.2
1.8
蒸馏水/ml
3.0 2.7 2.4 1.8
1.2
双缩脲试剂/ml
2.0 2.0 2.0 2.0
2.0
充分混合,在540nm比色
蛋白质浓度/(mg/ml)
0.0 0.2 0.4 0.8
1.2
A540nm
需于显色后30min比色测定,30min后可能有雾状沉淀产生。各管由显色到比色的时间应尽 可能一致。
一、目的 掌握稀碱法提取酵母RNA的原理和方法。
二、原理 酵母核酸中RNA含量较多,DNA则少于2%。
RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使 其沉淀,由此即可得到粗RNA制品。
用碱液提取的RNA有不同程度的降解。
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欢迎同学们上 《生物化学实验》
任课教师: 高志勇 杨明园 陈颖卓
生科院2003室 zygao@
不及格(<60分) 有下列情况者,实验项目成绩评为不及格: 1.不能完成基本的实验操作; 2.实验报告马虎、内容不全、无数据处理过程或 数据处理过程不完整、实验无结论等; 3.抄袭实验报告; 4.未做实验,但模仿指导教师笔迹签字伪造原始 数据的; 5. 无故缺席或者迟到30分钟以上者,不能补做, 该次实验成绩按0分记。
2. 用学到的知识和实验区分和鉴定五种未知 糖溶液。
浓酸
酮糖 + 间苯二酚
鲜红色复合物 1min
(果糖)

浓酸
醛糖 + 间苯二酚
淡黄色复合物 10-20 min
(葡萄糖)

1ml Seliwanoff 试剂 + 200ml 各待测糖 加热
Seliwanoff 反应
鉴定还原糖 4)Fehling试验
5)Benedict试验
还原糖能在碱性溶液中将二价铜离子还原成一价氧化 亚铜(红色沉淀),而糖本身氧化成各种羟酸。非还原糖 则无此特性。 醛糖比较容易被氧化,甚至能被弱氧化剂氧 化成酸,如Fehling试剂和Benedict试剂;而酮糖一般不易 被氧化,只有在长时间或强氧化剂的作用下才被分解。
4. 比较各管的颜色并记录。
2)蒽酮反应 (糖定量)
浓酸
糖 + 蒽酮
蓝绿色复合物
该蓝绿色复合物在630nm有最大的吸收峰,并且在 一定范围内,颜色与糖量的多少成正比。 1) 勿混入沉淀; 2) 不同糖类呈色深浅不同,故仅用于单一糖类的测定。
1ml 蒽酮试剂 + 100ml 各待测糖
蒽酮反应
3)Seliwanoff 反应 (鉴定酮糖)
紫红色复合物
• 各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸、草酸、甘油醛 等均产生近似的颜色反应(假阳性)
• 果糖浓度过高时,由于浓硫酸对它的焦化作用,将呈现红色及褐色
Molish 实验步骤
1. 对试管做标号
2. 每管1ml各待测糖溶液+ 100ml Molish试剂
3. 倾斜试管,沿管壁小心加入约 1ml 浓硫酸,切勿摇动,小心竖直后仔细 观察两层液面交界处的颜色变化
寡糖 (oligosaccharide):2-10个单糖脱水后以糖苷键相连而成
多糖 (polysaccharide):由糖苷键结合的糖链,超过10个以上 的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物
单糖
全部都是还原糖,分为丙糖、丁糖、戊糖、己糖、庚糖等
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
葡萄糖 (Glucose) 醛糖
果糖(Fructose)
均多糖:淀粉、纤维素等 杂多糖:透明质酸等
还原糖
非还原糖
单糖 葡萄糖(醛糖) 淀粉 果糖(酮糖) 纤维素
双糖 麦芽糖 乳糖 纤维二糖
蔗糖
多糖 还原糖
淀粉 纤维素
目的
实验
▪ 鉴定是否存在糖类
Molish反应
▪ 测定糖类的含量
蒽酮反应
▪ 鉴定酮糖和醛糖
Seliwanoff反应
▪ 鉴定还原糖和非还原糖 Fehling试验
实验一
糖的呈色反应和定性鉴定
实验目的及要求
➢ 学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法 ➢ 学习鉴定还原糖的方法及其原理 ➢ 加强对糖的结构和性质的理解
糖(saccharide) Cn (H2O)n
多羟基醛或多羟基酮以及它们的聚合物或衍生物 单糖 (monosaccharide):不能被水解成更小分子的糖
▪ /biochemistry/bioc800/bio cindx.htm
▪ /~cmg/ ▪ / ▪ 赵永芳. 生物化学技术原理及应用.北京. 科学出版
社.2002 ▪ 沈同 王镜岩.生物化学.高等教育出版社.2002
Fehling 试剂: 氢氧化钠 + 硫酸铜 + 酒石酸钾钠 Benedict试剂:氢氧化钠 + 硫酸铜 + 柠檬酸钠
Fehling反应
Benedict反应
6)Barfoed试验 (区分单糖和还原二糖)
在酸性溶液中,单糖和还原二糖的还原速度 有明显差异。在弱酸性Barfoed试剂(巴弗德氏 试剂)的作用下,煮沸时,单糖能将Cu2+还原成 砖红色的氧化亚铜,时间约为3分钟,而还原二 糖则需20分钟左右。
实验报告的书写
(1)实验目的 (2)实验原理 (3)药品试剂 (4)实验方法和步骤 (5)实验结果:包括原始数据的记录和结果
计算等。原始数据记录在实验报告空格处, 每次实验的原始数据均需要老师签字。 (6)讨论 其中的实验目的和原理部分作为预习报告。
有关网址和参考书目
▪ /molebio/biochem_books .htm
酮糖
CH2OH C=O
H–C–OH
CH2OH
双糖
非还原糖 蔗糖(sucrose)
D-葡萄糖 部分
D-果糖 部分
还原二糖 麦芽糖 (maltose)
D-葡萄糖部分 D-葡萄糖部分
还原二糖 乳糖
(lactose)
D-葡萄糖部分
D-半乳糖部分
多糖
非还原糖,难溶于水,不溶于有机溶剂,在 酸性条件下水解可生成寡糖或单糖
Benedict试验
▪ 鉴定单糖与还原二糖 Barfoed试验
葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、淀粉,及水
1)Molish反应 (糖定性)
浓酸
糖 + a-萘酚
紫红色复合物 (紫环反应)
OH
OH

浓 H2SO4
2
HOH2C
HOH2C O CHO
浓 H2SO4
O
C
羟甲基糠醛
HO3S
OH
O SO3H
糠醛
当加热时间过长,非还原性二糖经水解后也 能呈现阳性反应。
Barfoed反应
试剂 糖
Molish 蒽酮 Seliwanoff Fehling Benedict Barfoed
100 ml 1 ml 1 ml
甲1ml 乙1ml
2 ml
2ml
1 ml 100 ml 200 ml 200 ml 200 ml 200 ml
H2SO4
1ml
混匀
沸水浴
沸水浴 沸水浴 沸水浴 3min 5min 3-20min
观察,记录 **
**
冷却 冷却
**
请勿将含浓酸的溶液倒入废液缸,应倒入水池中,流水冲洗
冷却




边加热边观察,区分不同糖类的反应时间
实验内容
1. 用上述六种糖鉴定实验检测已知六种糖, 以水为阴性对照;其中蒽酮实验只需观察 颜色深浅,不需测定OD;
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