食品专业毕业论文
食品专业论文六篇

食品专业论文六篇食品专业论文范文1现代高职教育的宗旨是以培育职业力量为主线,以市场需求和就业为导向。
高职生物化学课程的定位要紧扣这一宗旨,树立“以同学为本、培育同学职业力量”的教学理念,着重培育同学的自主学习力量、实践力量和创新思维力量,兼顾同学职业素养、团队素养、人文素养的培育[2]。
作为一门基础学科,生物化学主要阐述生物大分子的化学组成和分子结构以及在体内的代谢变化。
通过本课程教学使同学理解生物化学的基本学问和基本技能,把握生物化学的主要概念和规律,了解近代生物化学的主要成果;寓综合职业力量与全面素养的培育于教学之中,培育同学科学思维的力量、运用所学的生物化学学问解释、分析和动手解决有关实际问题的力量。
2构建高职食品类专业特色的生物化学课程标准体系生物化学课程在食品科学系食品类专业主要涉及生物技术、食品加工、食品养分与检测3个专业。
这些专业的主要就业岗位包括食品、药品、酶制剂生产企业等的生产岗位、质量管理岗位、检验检测岗位等。
生物化学课程的基础内容有其自身的学科特点,不同专业对生物化学课程的要求各不相同,如生物技术专业主要向同学传授生物体的化学组成、结构及功能;物质代谢及其调控;遗传信息的贮存、传递与表达;细胞间信息传递等生命科学内容。
食品加工专业则侧重于生物活性、酶促反应、生物转化、大分子物质代谢等内容,其中物质代谢是讲解的重点。
食品养分与检测专业重点在于对组成成分的定性、定量测定、对被测物的定性、定量及分别、提纯,包括对一些仪器如分光光度计、电泳仪、层析仪等的使用。
3课程设计3.1制定合理的教学大纲和教学方案教学大纲是培育方案的详细表现形式,食品科学系每学年对食品类各专业市场需求和岗位变化进行调研,准时对食品类专业进行论证、调整,以此制定合理的教学大纲和教学方案,包括教学目标、任务、内容、体系、范围、进度、教学方法、考核与评价体系等。
在制定生物化学教学大纲和教学方案时,以长三角区域经济社会进展需求为宗旨,结合现代生命科学进展方向,将职业道德教育与职业素养教育内容融入课程教学中,加强同学职业力量与职业养成教育。
食品专业毕业论文5000字

食品专业毕业论文5000字一、食品企业内部控存在的问题1.控制环境较差,管理当局缺风险管理的经营理念食品行业的准入的门揽通常较低,致使该行业内管理人员的管理水平整体不高。
有些管理人员从来没有参加过有关管理的学习或培训,企业内控环境的较差。
2.控制活动不足,职责不分离权责划分是影响企业内控环境的一个方面。
食品行业是劳动密集型的产业,待遇通常不高,较难吸引高素质人才。
加上大多的中小食品企业都是从最初的作坊式生产发展为规模化生产的民营企业,管理不是很到位,没能区分好每一环节的职能责任。
3.对控制的监督不力没能及时评价控制的设计及其运行情况,也没能采取必要的纠正措施。
二、完善企业内部控制的措施1.企业应营造一个良好的风险控制环境首先应树立全面的风险管理理念,建立风险管理责任制度,将风险管理责任和任务层层分解,落实到每一个员工身上,将责任履行与绩效和奖惩考核严格挂钩,从经济上、制度上约束和规范企业员工思想和行为,从而保障风险管理目标实现。
其次应健全食品安全风险管理机构,完善公司治理结构。
设立由总经理管理的风险管理职能机构,具体负责整个企业风险管理实施,风险责任指标分解、风险责任履行记录,风险责任评价与考核;各部门车间设置风险管理专员具体负责风险责任纠偏、风险暴露损失统计以及信息反馈等。
第三,应培养员工的职业道德和胜任能力。
企业应以讲诚信、求质量,保安全等作为职业道德规范,引导员工行为。
2.强化对企业现行的食品安全风险管理体系的检测、分析和评定及时发现和检测风险管理及企业内部控制制度的缺陷,了解员工对风险管理的的执行情况和执行结果,评价员工风险管理绩效及食品安全风险管理的履责情况,奖优惩劣,促进员工更好履行风险管理职责,以保障全面风险管理目标实现。
3.建构和实施良好的风险控制体系首先,实施全面质量管理,建立食品产品质量控制体系,保障食品产品质量。
食品质量是保障食品安全的基础,质量越好,相对而言,食品安全的风险越小。
大专食品毕业论文范文

大专食品毕业论文范文食品安全是当今世界上人们所关注的焦点问题之一,每年食源性疾病所造成的严重后果,使食品安全问题已成为全球公众健康优先考虑的问题。
下面是店铺为大家整理的食品毕业论文,供大家参考。
食品毕业论文范文一:食品检验结果的质量控制研究摘要:随着经济的不断发展,人们的生活质量在很大程度得到了提升,食品安全成为人们关注的焦点。
从近些年我国的食品安全问题情况来看,食品安全问题对人们的身体健康造成了很大的威胁,所以加强对食品的检验和质量控制就比较重要。
主要就食品检验结果的质量控制进行详细分析,希望能通过此次理论研究有助于食品安全的进一步强化。
关键词:食品安全;食品检测;质量控制引言食品安全是社会民生的基础保障,让老百姓吃上放心的食品才能够促进社会的和谐稳定发展。
近些年食品安全问题相对严重,这就需要通过相应的措施进行应对,加强对食品检验以及对其检验结果的质量控制,充分保障食品的安全性。
故此对食品检验结果质量控制就有着实质性意义。
1食品检验及抽样过程的质量控制分析1.1食品检验内涵食品的质量检验主要是按照某一食品执行的产品标准实施的符合性检验,然后出具公正性的检验报告,在检验结果方面对食品判定是合格或者不合格。
对食品进行质量检验技术性比较强,同时也是对实验室能力水平的一种反映,而食品质量检验的准确性就对食品企业的生存有着严重影响,所以这就需要加强对食品的安全检验结果的质量控制[1]。
对每个检验的环节都要充分重视,保障检验结果的完整性以及准确性。
1.2食品检验抽样过程的质量控制分析食品的检验过程是按照一定的程序进行实施的,首先是对食品的抽样检查,这也是检验工作的头道工序,抽样过程中要能够有代表性。
具体的操作过程要结合不同产品在抽样前制定合理的抽样方案,并能够明确抽样的依据以及方法和地点等,抽样人员最少2名,要持证上岗,并填写抽样单,抽样单位确认后再进行签字和盖章,还要对样品进行确认[2]。
加强对抽样人员业务素质以及道德品质的教育,抽样过程要坚持原则,也就是随机抽样的原则,通过对同批产品中上中下几个位置进行取样。
食品专业毕业论文范文

食品专业毕业论文范文食品专业毕业论文范文近年来,随着人们生活水平的提高和健康意识的增强,食品安全问题备受关注。
作为食品专业的学生,我深感责任重大。
在我即将毕业之际,我决定以食品安全为主题,撰写一篇毕业论文,以探讨食品安全问题,并提出一些解决方案。
在论文的第一部分,我将介绍食品安全问题的背景和重要性。
随着全球化的进程,食品供应链变得越来越复杂,食品从生产到消费的过程中涉及了许多环节。
然而,许多食品安全事件的发生,如有毒食品、添加有害物质等,给人们的生命健康带来了巨大威胁。
因此,保障食品安全已经成为各国政府和民众的共同责任。
接着,我将探讨食品安全问题的原因和影响。
食品安全问题的根源在于食品生产和加工环节中的不规范操作和管理。
例如,农药和化肥的滥用、食品添加剂的过量使用等,都会对食品的质量和安全性造成严重影响。
此外,食品安全问题还涉及到政府监管的不力、企业的利益驱动等因素。
这些问题的存在,不仅威胁着消费者的健康,也损害了食品行业的声誉。
在论文的下一部分,我将提出一些解决食品安全问题的措施。
首先,政府应加强对食品行业的监管力度,严格执行相关法律法规,对违规行为进行严厉处罚。
同时,政府还应加强食品安全宣传教育,提高消费者的食品安全意识和知识水平。
其次,食品企业应加强自身的内部管理,建立健全的质量控制体系,确保食品的质量和安全性。
此外,企业还应积极引进先进的生产技术和设备,提高生产效率和食品质量。
最后,消费者也应增强自我保护意识,选择正规渠道购买食品,避免购买来源不明的产品。
在论文的最后一部分,我将探讨食品安全问题的未来发展趋势。
随着科技的进步和人们对食品安全的关注,食品检测技术将会得到更加广泛的应用。
例如,基因检测技术可以用于检测食品中的转基因成分,红外光谱技术可以用于检测食品中的添加剂和污染物等。
此外,人们对有机食品和绿色食品的需求也在不断增加,未来食品行业将更加注重生态环保和可持续发展。
综上所述,食品安全问题是一个复杂而严峻的问题,需要政府、企业和消费者共同努力来解决。
食品科学毕业论文

食品科学毕业论文食品加工业是现代化生产技术的集中体现,而食品科学则是研究食品生产原料、食品加工和储存、食品营养价值及安全卫生方面的科学学科,关键在于如何保证食品质量的安全。
在当前食品安全问题愈加突出的背景下,就显得异常重要。
本文主要研究了食品加工中的蛋白质水解与乳酸菌发酵对豆腐营养成分影响的研究。
一、研究目的通过研究不同水平的蛋白水解和乳酸菌发酵对豆腐营养成分中可溶性蛋白、游离氨基酸和活性酶的影响,探讨了蛋白质水解及乳酸菌发酵对豆腐营养成分及营养价值的影响,以期为豆制品的开发提供新的技术支持和理论支持。
二、研究方法1、材料准备豆腐制作的原料为大豆,乳酸菌选用Lactobacillus casei。
2、试验设计将豆腐分为4组,分别添加微生物酶助剂和乳酸菌进行发酵处理。
实验组1-3分别添加蛋白质水解剂,第4组作为对照组。
3、分析方法(1) 可溶性蛋白含量的测定:采用Bradford法进行测定。
(2) 游离氨基酸含量的测定:采用高效液相色谱法进行测定。
(3) 活性酶含量的测定:采用比色法进行测定。
4、数据统计与分析试验结果经过图像化处理,并采用SPSS统计软件进行统计分析。
三、研究结果1、可溶性蛋白含量的变化与对照组相比,添加酶助剂的实验组蛋白质可溶性明显增加。
特别是实验组3,在添加了一定量的蛋白质水解剂后,可溶性蛋白含量达到了最高点。
可以得出结论:蛋白质水解剂的加入可以显著提高可溶性蛋白质的含量。
2、游离氨基酸含量的变化与对照组相比,添加酶助剂的实验组游离氨基酸含量明显增加。
特别是实验组3,在添加了一定量的蛋白质水解剂后,游离氨基酸含量达到了最高点。
可以得出结论:蛋白质水解剂的加入可以显著提高豆腐中游离氨基酸的含量。
3、活性酶含量的变化与对照组相比,添加酶助剂的实验组活性酶含量明显提高。
特别是实验组3,在添加了一定量的蛋白质水解剂后,活性酶含量达到了最高点。
可得出结论:蛋白质水解剂的加入可以显著提高豆腐中的活性酶含量。
食品专业毕业论文

食品专业毕业论文食品专业毕业论文随着人们对食品安全和健康的关注度不断提高,食品专业成为了当今社会中备受瞩目的领域之一。
作为一名食品专业的学生,毕业论文是我在大学期间的重要任务之一。
在这篇文章中,我将分享我在食品专业毕业论文中的研究内容和心得体会。
首先,我选择了“食品添加剂对人体健康的影响”作为我的研究主题。
食品添加剂是食品加工过程中常用的一种物质,它们可以改善食品的质地、口感和保鲜性。
然而,人们对食品添加剂的安全性存在着一定的疑虑。
因此,我通过对相关文献的调研和实验数据的分析,探讨了不同食品添加剂对人体健康的潜在影响。
在论文的第一部分,我对食品添加剂的种类和用途进行了介绍。
我列举了常见的食品添加剂,如防腐剂、色素、增稠剂等,并解释了它们在食品加工中的作用。
同时,我还对食品添加剂的法规和标准进行了概述,以便读者了解当前食品添加剂使用的监管情况。
接下来,我详细分析了食品添加剂对人体健康的潜在影响。
我从食品添加剂的安全性评估、长期摄入对健康的影响以及特定人群的风险等方面展开了讨论。
通过对相关研究和实验的综合分析,我得出了一些结论。
例如,某些食品添加剂在高剂量或长期摄入的情况下可能对人体健康产生负面影响,但一般情况下,食品添加剂在合理使用的情况下是安全的。
在论文的第三部分,我提出了一些改进和建议,以进一步提高食品添加剂的安全性。
我建议加强对食品添加剂的监管和标准制定,以确保其使用符合安全要求。
此外,我还鼓励食品加工企业增加对食品添加剂的研究和开发,寻找更安全、更健康的替代品。
通过完成这篇毕业论文,我不仅加深了对食品添加剂的理解,还提高了我的研究能力和写作能力。
在整个研究过程中,我学会了如何有效地收集和整理文献资料,如何进行实验设计和数据分析,以及如何将复杂的科学问题用简洁明了的语言进行表达。
毕业论文不仅是对所学专业知识的总结和应用,也是对自己研究能力和学术素养的一种考验。
通过这次毕业论文的写作,我深刻体会到了科研的艰辛和乐趣。
食品加工技术毕业论文

食品加工技术毕业论文食品加工技术作为一门跨学科的综合性学科,它涉及食品科学、工程学、微生物学、营养学等多个领域。
随着科技的进步和消费者对食品品质要求的提高,食品加工技术在保障食品安全、提升食品营养价值、延长食品保质期等方面发挥着越来越重要的作用。
本文通过对食品加工技术的深入研究,旨在探讨其在现代食品工业中的应用和发展趋势。
首先,食品加工技术的核心在于通过物理、化学或生物方法改变食品的形态、结构、性质和风味,以满足消费者的需求。
例如,通过干燥、冷冻、腌制等方法可以延长食品的保质期;通过发酵、酶解等生物技术可以改善食品的营养价值和风味。
其次,食品加工技术在保障食品安全方面发挥着至关重要的作用。
通过高温杀菌、辐照处理、化学防腐剂等手段可以有效杀灭或抑制食品中的微生物,防止食品腐败变质。
同时,食品加工过程中的质量控制也是确保食品安全的关键环节,包括原料的选择、加工环境的卫生、生产过程的监控等。
再次,食品加工技术的发展也促进了食品工业的创新。
新型加工技术如超高压处理、脉冲电场、超声波等非热处理技术的应用,可以在不破坏食品营养成分的前提下,实现食品的杀菌和保鲜。
此外,食品加工技术还为开发功能性食品、有机食品等新型食品提供了技术支持。
最后,食品加工技术的未来发展趋势将更加注重食品的营养价值和健康效应。
随着消费者对健康饮食的重视,食品加工技术将更加注重保留和增强食品中的营养成分,减少加工过程中的营养素损失。
同时,食品加工技术也将更加注重环境友好和可持续发展,如采用清洁能源、减少废弃物排放等。
综上所述,食品加工技术在现代食品工业中扮演着不可或缺的角色。
通过不断的技术创新和质量控制,食品加工技术将为消费者提供更安全、更营养、更美味的食品,同时也为食品工业的可持续发展做出贡献。
食品科学与工程毕业论文

食品科学与工程毕业论文食品科学与工程毕业论文食品科学与工程是一个涵盖广泛领域的学科,它研究食品的生产、加工、质量控制以及与人类健康相关的各个方面。
食品科学与工程的毕业论文是一个重要的学术项目,旨在培养学生的研究能力和科学素养。
在这篇文章中,我将探讨一些可能的食品科学与工程毕业论文的主题,并提供一些研究方法和思路。
一、食品加工技术的研究食品加工技术是食品科学与工程领域的核心内容之一。
学生可以选择某种特定的食品加工技术进行研究,例如酿酒技术、乳制品加工技术、果蔬加工技术等。
在研究中,学生可以探索改进现有技术、开发新的加工方法或者研究加工过程中的关键问题。
例如,学生可以研究如何提高某种食品的加工效率,如何改善产品的质量和口感,或者如何减少加工过程中的能耗和环境污染。
二、食品安全与质量控制的研究食品安全与质量控制是食品科学与工程领域的另一个重要方向。
学生可以选择某种特定的食品安全问题或者质量控制方法进行研究。
例如,学生可以研究某种食品中的致病微生物的检测和控制方法,或者研究某种食品中的化学污染物的检测和去除方法。
在研究中,学生需要运用各种分析技术和实验方法,例如PCR技术、质谱分析等。
此外,学生还可以探索如何利用新的技术手段来提高食品的质量和安全性,例如纳米技术、冷冻技术等。
三、食品营养与健康的研究食品营养与健康是食品科学与工程领域的一个重要分支。
学生可以选择某种特定的食品或者营养成分进行研究。
例如,学生可以研究某种食品中的营养成分的含量和变化规律,或者研究某种食品对人体健康的影响。
在研究中,学生需要运用各种营养评估方法和实验手段,例如营养成分分析、动物实验等。
此外,学生还可以探索如何利用食品来预防和治疗某些疾病,例如利用食品中的活性成分来抗氧化、抗炎等。
四、食品工程与装备的研究食品工程与装备是食品科学与工程领域的另一个重要方向。
学生可以选择某种特定的食品工程问题或者装备进行研究。
例如,学生可以研究某种食品加工设备的设计和改进,或者研究某种食品生产线的优化和自动化。
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食品专业毕业论文Coca-cola standardization office【ZZ5AB-ZZSYT-ZZ2C-ZZ682T-ZZT18】题目:重组乙醛脱氢酶的分离纯化及其酶学性质研究姓名:学院:专业:班级:学号:指导教职称:师:目录重组乙醛脱氢酶的分离纯化及其酶学性质研究摘要:【目的】研究工程菌 BL21(DE3)/pET32a-istALDH产乙醛脱氢酶的纯化和酶学性质。
【方法】工程菌经过 IPTG 诱导后产生乙醛脱氢酶,通过Ni-NTA 亲和层析纯化,得到纯度较高的酶蛋白,并对纯酶进行了酶学性质及动力学研究。
【结果】酶最终被纯化了9倍,并达到电泳纯。
经过SDS-PAGE 测得该酶的分子量约为57 kDa。
以乙醛为底物,酶促反应的最适温度为40℃,最适pH值为,热稳定性和酸碱稳定性相对较差;金属离子K+、Li+、AL3+对酶均具有激活作用,而Ag+、Zn2+、Gu2+对酶促反应具有强烈的抑制作用,酶活性基本丧失,在化合物EDTA、DTT中活性明显提高,SDS使酶完全丧失活性;反应的最适底物是乙醛和NAD+,乙醛和NAD+动力学常数Km值分别为L和L,最大反应速度Vmax分别为mg和mg。
【结论】研究为重组乙醛脱氢酶纯酶的纯化、得到稳定性好、活性高的酶反应体系及利用该酶进行催化反应和工业化应用提供了重要参数。
关键词:乙醛脱氢酶;纯化;酶学性质Study on Purification and Characterization ofRecombinant ALDHStudent majoring in National Life Science and Technique Talent TrainingBase? Jie XuTutor Zhaoxin LuAbstract:[Objective] To purify and characterize recombinant aldehyde dehydrogenase expressed in engineered strain E. Coli BL21(DE3)/pET32a-istALDH. [Methods] The aldehyde dehydrogenase gene was expressed in engineered strain after IPTG induction and the crude enzyme was obtained by sonication. We purified the recombinant aldehyde dehydrogenase by using metal chelate affinity chromatography on a Ni-NTA column. Then we characterized catalytic kinetic parameter of purified enzyme. [Results] The molecular weight of aldehyde dehydrogenase measured by SDS-PAGE was kDa. The enzyme had an optimum temperature at 40℃, and an optimum pH of . It was unstable with thermostability and pH stability. Metal ions K+、Li+ and AL3+ could active the enzyme activity, while Ag+、Zn2+ and Gu2+could strongly inhibit the enzyme activity. The compounds EDTA and DTT could active the enzyme apparently while SDS could greatly inhibit the enzyme. The optimal substrates were acetaldehyde and NAD+ with the kinetic constant Km of mmol/L and mmol/L, respectively and Vm of mg and mg,respectively.[Conclusion] These results may provide an important basis for industrial applications of the recombinant aldehyde dehydrogenase.Key words: aldehyde dehydrogenase; purification; characterization引言目前与酒精中毒关系密切的许多候选基因中研究最多的就是参与乙醇代谢的乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)和乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)[1-2]。
前者使乙醇转化为乙醛,后者使乙醛进一步转化为乙酸,最终分解为二氧化碳和水【3】。
乙醛脱氢酶属于氧化还原酶类,广泛存在于微生物、植物和动物体中【4】。
在人体中,一般都存在前一种酶,而且数量基本相等,但缺少后一种酶的人就比较少,此酶突变后活性缺失,导致乙醛在肝脏内大量累积,导致肝脏损伤及某些癌症疾病【5-6】,因此在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注。
国内外对于乙醇脱氢酶的酶学性质、分离纯化等研究比较成熟,而对于ALDH的研究较少【7】,国内已有相关研究如乙醛脱氢酶基因在甜菜、菠菜和水稻中【8-10】的表达等等,目前,ALDH的提取一般是以动物为原料,主要是从动物的肝脏中提取,这制约了该酶的产量[11-12],通过微生物发酵、分离纯化ALDH具有很大的市场前景,本课题通过从重组大肠杆菌中分离纯化得到ALDH,并对其进行酶学性质的测定,为乙醛脱氢酶的工业化应用奠定基础。
乙醛脱氢酶分离纯化及其性质的研究对将来控制和减少酒精性肝病的预防和健康教育工作有重要意义1材料与方法材料菌株基因工程菌E. Coli BL21(DE3)/pET32a-istALDH由食品院酶工程实验室构建、保藏。
培养基LB培养基(w/v):胰蛋白胨10,酵母粉5,NaCl 10, pH 。
121℃高压灭菌20min。
主要试剂IPTG(上海生工生物有限公司);牛血清白蛋白(国药集团化学试剂有限公司);凝血酶为标准品(中国药品生物制品检定所);琼脂糖(电泳级)(中国医药(集团)上海化学试剂公司);考马斯亮蓝G-250(美国Sigma公司);酵母提取物、胰蛋白胨等(英国Oxoide公司);乙醛、甲醛、丁醛、戊醛等醛类物质;EDTA、DTT、2-ME、SDS、PMSF等化合物;其它试剂均为市售分析纯。
主要仪器手体式压力蒸汽灭菌锅(上海医用核子仪器厂)BC/BP-225SB海尔冰柜(海尔集团)OPIONpH计MODEL818PYX-DHS-50X65 隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂)UV-1601紫外分光光度计(日本SHIMADZU公司)HYG-A全温摇瓶柜(太仓实验设备厂)Sartorious电子精密天平(北京赛多利斯天平有限公司)SW-CJ-IBU洁净工作台(苏州安泰空气技术有限公司)Centrifuge 5804R冷冻离心机(德国eppendorf公司)BS-100A自动部分收集器(上海沪西分析仪器厂)BIO-RAD PAC1000微型电泳仪(BIO-RAD 生命医学产品有限公司)凝胶成像系统Gel Doc2000 (BIO-RAD公司)1.2 方法乙醛脱氢酶的表达和制备从保存于-70℃超低温冰箱的基因工程菌甘油菌中挑取少许菌液划线于LB平板(含氨苄青霉素100μg/mL和%葡萄糖),37℃培养12-14h,挑单菌落接入LB培养基(含氨苄青霉素100μg/mL和%葡萄糖)于30℃、100rpm培养过夜(11h),然后以4%的接种量转接到100mL的LB培养基(含氨苄青霉素100μg/mL和%葡萄糖),37℃、180rpm培养约至OD600为时,加入IPTG至终浓度为ml,15℃、180rpm培养15h诱导乙醛脱氢酶的表达。
将100mL发酵液于4℃、9000rpm离心10分钟收集菌体,重悬于50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液(pH )中,冰水浴中超声5s,间歇10s,400W 破碎15min后,10,000rpm离心15min收集上清即得粗酶液。
乙醛脱氢酶的纯化用缓冲液(含50mmol/L PBS、L NaCl, pH 平衡床体积为2mL的Ni-NTA小柱,在粗酶液加入5mmol/L咪唑后上样,样品过三次,然后分别用10倍介质体积的浓度为50 、100、150、200、500mmol/L 咪唑洗脱,每2ml收集一管,测定酶活,收集洗脱液后经SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色鉴定纯化蛋白。
乙醛脱氢酶活力测定酶活测定体系(3mL): mol/L Tris-HCl, 2mmol/L乙醛, mmol/L NAD+,10 mmol/L 2-巯基乙醇, mol/L KCl,待测酶液。
用分光光度法,在25℃、340nm下测定NADH吸光度的变化。
定义每分钟催化还原1μmol NAD+所需要的酶量为一个酶活单位。
蛋白含量测定采用Bradford法【13】,以牛血清白蛋白为标准蛋白,测595nm处吸光值,计算蛋白质含量。
纯度鉴定和分子量测定采用垂直板SDS-PAGE电泳测定乙醛脱氢酶的纯度和分子量,分离胶浓度为12%,浓缩胶浓度为5%。
乙醛脱氢酶酶学性质酶的最适反应pH及pH稳定性在不同pH的缓冲液(L Tris-HCL缓冲液,;L磷酸钾缓冲液,pH –;L甘氨酸-氢氧化钠缓冲液,pH –)中测定酶活力,研究酶促反应的最适反应pH。
将酶液分别置于不同pH的缓冲液中,30℃保温1 h,按常规酶活测定方法测定剩余酶活力,以未处理的酶活为100%,研究酶的酸碱稳定性。
酶的最适反应温度及热稳定性在不同温度下测定酶活力,考察酶的最适反应温度。
将酶液在不同温度水浴锅中保温2 h,每15min取样测量其对应的剩余酶活力,以未处理的酶活为100%,考察酶的热稳定性。
金属离子和其他化合物对酶活力的影响在不同反应体系中分别加入 mmol/L和 mmol/L的各种金属离子和化合物,测定酶活力,以未加入的酶液做对照,观察金属离子和化合物对酶活力的影响。
不同底物对酶活性的影响用不同底物取代原测定方法中的底物,测定酶的活力,考察酶的最适作用底物。