生物仪器分析(PPT转word)
生物仪器分析-前沿PPT课件

4、仪器分析实验课是本门课程的重要组成部分,它的 成绩尽管不计入最后成绩,但是希望大家要重视实 验和实验报告。
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11
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8
学习仪器分析的目的
掌握仪器的工作原理、仪器的结构以及 如何利用仪器来获取有关物质系统的化学 成分与化学结构等方面的信息。
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仪器分析的三个重要环节
掌握仪器分析的基本原理
了解仪器的结构和性质,学会 一些仪器的使用
掌握用仪器来进行定性、定量 分析的各种方法
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对生物仪器分析课程的学习要求
生命科学与技术学院
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1
教材
主教材 《仪器分析选论》 孙毓庆主编 科学技术出版社 2005.7 第一版
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2
副教材 《现代生物科学仪
器分析入门》 徐金森编 化学工业出版社 2004.6 第一版
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仪器分析选论
第1章 绪论 第2章 分析化学实验的设计和优化方法 第3章 质谱技术与质谱仪 第4 章 光谱技术与光谱仪 第5章 免疫分析法
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课程安排
总学时:32(24+8;16周,每周2学时) 第1章 绪论 2学时 第2章 分析化学实验的设计和优化方法 2学时 第3章 质谱技术与质谱仪 4学时 第4章 光谱技术与光谱仪 12学时 第5章 免疫分析法 4学时
实验------------------------------------- 8学时
学习仪器分析的目的?掌握仪器分析的基本原理?了解仪器的结构和性质学会些仪器的使用一些仪器的使用仪器分析的三个重要环节?掌握用仪器来进行定性定量分析的各种方法对生物仪器分析课程的学习要求1掌握生物样品的制备方法实验的设计与优化为进行仪器分析打下基础
【全版】生物学仪器分析光学分析概论推荐PPT

*光线照射在物体表面后,部分光线发生反射或透射;
以能谱区电磁波作为分析光的分析技术为能谱分析;
频率( γ )
光的空间参数: λ 与σ
光→光待的测时物间→参光数信:号γ(产生或变化)→检测处理→定性定量
(1)光谱分γ=析C法/λ: = C *σ
γ—测—定只待取测决物于质光的源光;谱,根据光谱的频率特征和强度特征分别进行定性和定量。
光→待测物→光信号(:
光的测微定粒待性测参物数质与的波光动谱性,根参据数光的谱关的系频:率特征和强度特征分别进行定性和定量。
(2)非E光谱= 分h析v 法=: h c/ λ
h为利普用朗光克的常非量频;率性质(折射、衍射、反射、干涉、旋转等)的变化作为分析信息的方法。
光互的补微 色粒:性参数与波动性参数的关系:
*光线E照射= 在h物v 体=表h面c后/ λ,部分光线发生反射或透射;
1h、为电普磁朗波克的常基量本;性质 *(光1线)到、达光人的眼波后动形性成颜色 *光物是体一的种颜电色磁是波由于物体吸收了某种色光;
互 补色
(2)是光振的动微电粒场性与振动磁场在空间的传播;
光描的述传光播的速微度粒性的参数是能量(E);
光谱与分媒析质法有是关现,代在仪真器空分中析的中传应播用速最度广为泛3×的1一0类8m分/s析; 方法
光的具微 有粒波性动参性数和与粒波子动性性参数的关系:
具E有波= 动h性v 的=光h量c子/ λ流
光h为谱普分朗析克法常是量现;代仪器分析中应用最广泛的一类分析方法
光在介质中传播时的速度 小于在真空中的传播速度,其速度的变化与介质的
折射率有关:
n = Sin i / Sin r = C / γ
互补色: *光线照射在物体表面后,部分光线发生反射或透射; *反射或透射光线在强度和光谱组成方面会发生改变 (物体对光谱成分的不同吸收造成); *光线到达人眼后形成颜色 *物体的颜色是由于物体吸收了某种色光; *物体颜色与物体吸收色光的颜色称为互补色;
生物技术实验室仪器操作简介PPT课件

FR-980生物电泳图像分析系统
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系统简介:
系统可以通过紫外/可见光分析装置及透光扫描仪直接 获得核酸、蛋白质凝胶电泳图像。系统配置有 SmartView生物电泳图像分析软件,可以进行密度扫 描、密度定量、分子量计算等电泳分析。此外,该系统 含有多种图像滤波器,可降低图像的噪音,从而获得较 清晰的图像。
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操作程序:
台面清洁消毒 紫外灯灭菌30分钟
进行无菌操作 清理工作台面
紫外消毒30分钟 关闭紫外灯、电源
注意事项:
1)工作台面上,不要存 放不必要的物品,以 保持工作区内的洁净 气流不受干扰。
2)操作时一定注意关掉 紫外,防止对实验人 员造细菌和细胞培养以及核酸等有关实验所用的
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溴化乙锭(EB)为扁平状分子,在紫外 照射下发射荧光。EB可与DNA分子形成EBDNA复合物,其发射的荧光强度较游离状态EB 发射的荧光强度大10倍以上,且荧光强度与 DNA的含量成正比。用肉眼观察,可检测到5 ng以上的DNA。
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附 注:
1.影响DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素:
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注意事项
1、电泳仪工作时,禁止人体接触电极、电泳物及其它 可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,以免触电, 同时要求仪器有良好接地端,以防漏电。
2、仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头, 以防短路。
3、由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳所通过的 电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同, 故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。
备及核酸检测
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带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电 泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类:自由界 面电泳不需支持物,这类电泳目前已很少使用;而区 带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支 持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶 性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中最常 用的是琼脂糖凝胶电泳其优点主要在于操作简单、快 速、灵敏。
生物仪器分析原理与方法绪论幻灯片

从20世纪初到现在,诺贝尔奖颁发给仪器创造、 开展与相关的实验工程达27项之多。
《生物仪器分析原理与方法》——第一章 绪论
《生物仪器分析原理与方法》——第一章 绪论
科学仪器使人类基因组方案提速
人类基因组方案与曼哈顿原子弹方案、阿波罗 登月方案并称科学史上三大方案。
人类基因组由大约30亿碱基对组成,分布在23 对染色体上,大约含6万多个基因。
人类基因组测序方法及其效率
测序方法
年代 测序方式 所需时间 所需经费
常规凝胶电泳法 1990 手工
《生物仪器分析原理与方法》——第一章 绪论
3、科学仪器是可持续开展的保证和指路标
20世纪后期,由于科学仪器科技和产业〔主要 是分析仪器〕的开展,人类突然感觉到了环境 污染对人类社会和经济可持续开展的重大意义 和严重影响。觉察了大气层臭氧空洞的产生、 开展及其危害以及厄尔尼诺现象、温室效应、 热带雨林破坏等等生态平衡问题的产生、开展 及其危害……发现和监测所有这一切危及人类 社会和经济可持续开展甚至人类本身生育、遗 传、疾病、生存根底的大问题,都是直接依靠 现代分析检测科技和现代科学仪器〔分析仪器〕 的开展和广泛应用。
三、学习参考资料
?现代生物科学仪器分析入门?,徐金森主编,化学工业出版社, 2004。
?现代生物化学与分子生物学——仪器与设备?, 雷东风编著,科 学出版社,2006。
?生命科学仪器使用技术教程?, 滕利荣,孟庆繁主编,科学出版 社,2021。
?离心别离?,金绿松,林元喜主编,化学工业出版社,2021。 ?生物化学仪器分析与实验技术 ?,周先碗,胡晓倩编,化学工业
生物实验室常用仪器简介课件

提供恒定的温度环境,用于培养微生物、细胞等生物材料。
光照培养箱
具备光照和温度控制功能,适用于植物、藻类等需要光照的生物材料的培养。
厌氧培养箱
创造无氧环境,用于厌氧微生物的培养。
CO2培养箱
模拟细胞在体内的生理环境,提供恒定的温度、湿度和CO2浓度,用于细胞培养。
培养箱的工作原理
通过电热元件加热或制冷剂循环实现温度 控制。
生物实验室常用仪器简介
CONTENTS
• 显微镜 • 分光光度计 • 离心机 • PCR仪 • 培养箱
01
显微镜
显微镜的种类
光学显微镜
利用可见光和透镜组合放大物体 ,主要用于观察固定样本。
01
Байду номын сангаас电子显微镜
02 利用电子替代可见光放大物体, 具有更高的分辨率,常用于观察 细微结构。
荧光显微镜
利用荧光物质标记样本,通过特
注意平衡放置样品,确保转子平衡,避免 发生意外。
在使用前应检查仪器是否正常工作,并定 期进行维护和保养。
04
PCR仪
PCR仪的种类
普通PCR仪
适用于一般基因扩增实验。
荧光定量PCR仪
适用于实时荧光定量PCR实验,可对 DNA、RNA进行定量检测。
高通量PCR仪
具有高通量、高效率的特点,适用于大规 模基因组学研究。
使用前的准备
检查仪器是否正常工作,准备好 所需的试剂和样品。
操作步骤
按照实验要求设定程序,包括变 性温度、复性温度、延伸时间等 参数,启动程序开始实验。
注意事项
避免交叉污染,每次实验前要清 洗仪器和实验台面;定期对仪器 进行维护和保养;注意安全,避 免烫伤和电击等意外事故。
(完整word版)生化仪器分析

(完整word 版)生化仪器分析平动能→平动能级;转动能→转动能级→分子的转动光谱;振动能→振动能级→分子的振动光谱;电子运动能→电子运动能级→分子的电子光谱.2由于平动能级只是在同一能级上运动,所以该能级不产生分子光谱。
基本构造有5部分:辐射光源.单色器。
吸收池.光电检测器.显示器2主要技术指标:波长范围。
波长精度.波长的重现性.光度的测量精度.光度测量的重现性。
杂散光.分辨率.一步洗脱:实验室常用的洗脱方式,用一种浓度的洗脱剂进行洗脱,适用于组分比较单一或者被分离组分非常明确,吸附的量占主要部分2分布洗脱:采用不同浓度的洗脱剂或采用不同种类的洗脱剂进行洗脱,适用于两种以上的组分且吸附数量较少,分离度差别大的组分3梯度洗脱:采用浓度连续变化的洗脱剂进行洗脱,适用于多种组分且吸附数量较多,分离度差别较小,分离度差别较小,上述两种方法难以分离的组分选择:缓冲容量: 在缓冲容量满足的前提下尽量降低缓冲液浓度;PH 值:缓冲液PH 值与等电点至少相差1个单位;离子强度:尽可能采用低离子强度;保护剂:某些特殊样品需加保护剂保持不稳定性质2选择原则有利于样品的稳定;有利于样品的吸附和洗脱;有利于样品的后处理;考虑缓冲液是否有毒性;考虑是否有热源 上样量:通常上样量不超过交换容量10%~20%2样液浓度:浓度不宜过高,若较高样液浓度,最好先用缓冲液进行稀释再上样3离子强度:样液离子强度不能过高,若高采用较高离子强度的缓冲液,若低采用低离子强度的缓冲液上样4流速:对浓度低的样液流速可快一些,对高浓度的样液流速可慢一些紫外~结构:辐射光源.单色器.样品池。
检测器.显示器荧光~结构:激发光源.激发单射器。
样品池.发射单色器。
检测器。
显示系统2差异:①测光角度不同,荧光分光光度计的检测器的位置与入射光源的方向成900角,其对面的背景为暗背景,紫外分光光度计检测器的位置与入射光源方向平行,其对面的背景为亮背景②单色器位置不同,荧光~设在检测器前面,样品的发射光经单色器分光后进入检测器,可以除去样品发射以外的辐射,使分析更有专一性,紫外~设在样品池前面,光束先进入分光器分光后再进入样品池③比色杯不同,荧光~使用的样品池是四面透光的样池可作为紫外用,紫外~两面透光的样池,不能作为荧光~用。
生物学仪器分析第五章1ppt课件

(三)调整产品组合策略
扩大产品组合策略 垂直多样化策略 向上延伸 向下延伸 双向延伸 水平多样化策略 相关系列多样化策略 无关联多样化策略
缩减产品组合策略
第二节 产品生命周期
一、产品生命周期的概念
榨取策略:大大降低销售费用,如广告费等,以增加眼前利 润。
PLC的意义
积极作用
● 居安思危,保持清醒 ● 成功无限,永远创新 ● 明确特点,应对挑战 ● 预测市场,掌握先机
消极作用
● 理论抽象 ● 界限模糊 ● 指导滞后
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营销策略组合
4Ps:
产品策略 Product strategy
定价策略 Pricing strategy
分销策略 Placing strategy
促销策略 Promotion strategy
基本征: 整体性、复合型、灵活性、主动性。
第一节 整体产品与产品组合策略
一、整体产品的概念
市场营销学所讲的产品,是人们通过购买或 租赁所获得的需要的满足。换句话说,凡是 提供给市场、用于满足人们某种需要的任何 事物(包括实物、服务、主意等),都是市 场营销学所讲的产品。这种产品既可以是实 物形态的,也可以是非实物形态的。
对策——快 广泛传播商品信息,帮助消费者了解商品,提高认知程度, 解除疑虑,培育市场。 积极攻克产品制造中尚未解决的问题,稳定质量,并及时根 据市场反馈,对产品进行改进。 采取行之有效的价格与促销组合策略。
导入期价格与促销组合策略
迅速夺取策略:指以高价格和高促销水平推出新产品的策 略。
环境监测与仪器分析生物PPT课件

生物监测主要方法
一、生物群落监测方法 二、生物测试法 三、细菌学检验法
第7页/共77页
一、生物群落监测方法
生物群落监测中的对象:
生生物未,受这污是染长的期环自境浮然水游发体生展中物的生结活浮动角果着游物类,多生 、 和也种物 轮 桡是多( 虫 足生样、 类原态的枝生)系水 统保持相对平衡的标志。当水体浮受游到生污物染-后藻,类水 水生自消污生然亡染物生,指的 态 抗示群 平 性生落 衡 生物结系物构统旺着的和被盛底各生个破生栖种生体坏长动基物数,,物质-量最群-表附就终落面栖着上息会结结于的在发果构长有水生 是 单期机体变 敏 一浸体底化 感 ,没群部水, 生 这落淤中。泥使 物 是 生物群落监测法的理内、论石依块据或。砾石表面及其间隙中
菌应用于环境监测,Beckman公司依据发光细菌的发光原 理,已推出用于环境监测的生物毒性检测仪Microtox。
第27页/共77页
生物发光法是结合生命有机体的生物物理和生物化学过程, 检测的是处于环境中的生物,提供的是一个综合的整体指 标,因此比传统的检验方法更迅速,直接反映环境污染对 生物的影响。
褐藻
金鱼
第20页/共77页
蝴蝶鱼
绿藻
图6.1 可用于水生生物毒性试验的部分鱼类和藻类
静水式鱼类急性毒性试验 供试鱼的选择和驯养
❖ 要选择无病、行动活泼、鱼鳍完整 舒展、食欲和逆水性强、体长(不 包括尾部)约3 cm的同种和同龄的 金鱼。
❖ 选出的鱼必须先在与试验条件相似 的生活条件(温度、水质等)下驯 养7 d以上;试验前一天停止喂食; 如果在试验前4 d天内发生死亡现 象或发病的鱼高第于21页10/共%77,页 则不能使 用。
10.0 7.5 5.6 4.2 3.2 2.4 对照组
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生物仪器分析(PPT转word)1第一章绪论第一节概述第二节仪器分析方法的主要评价指标2分析化学与仪器分析的关系?分析化学是提供物质中元素或化合物组成的科学和技术。
定性分析:获得试样中原子分子及功能基的相关信息。
定量分析:获得试样中一种或多种组成的相关含量。
34一、仪器分析的定义采用比较复杂或特殊的仪器设备,通过测量物质的某些物理或物理化学性质的参数及其变化来获取物质的化学组成、成分含量及化学结构等信息的一类方法。
这些方法一般都有独立的方法原理及理论基础。
5二、仪器分析的作用体育(兴奋剂)生活产品质量(鱼新鲜度、食品添加剂、农药残留量) 环境质量(污染实时检测) 法庭化学(DNA技术,物证)6化学:新化合物的结构表征;分子层次上的分析方法;生命科学:DNA测序;活体检测;7环境科学:环境监测;污染物分析;材料科学:新材料,结构与性能;药物:天然药物的有效成分与结构,构效关系研究; 仪器分析虽然不是一门独立的学科,但是这些方法在化学学科中非常的重要~89 仪器分析的发展过程阶段一:16世纪,天平的出现。
分析化学具有了科学的内涵;20世纪初,依据溶液中四大反应平衡理论,形成分析化学的理论基础。
分析化学由一门操作技术变成一门科学;20世纪40年代前,化学分析占主导地位,仪器分析种类少和精度低; 10阶段二:20世纪40年代后,仪器分析的大发展时期。
仪器分析使分析速度加快,促进化学工业发展;化学分析与仪器分析并重,仪器分析自动化程度低;为什么出现在这一时期,一系列重大科学发现,为仪器分析的建立和发展奠定基础。
(1)Bloch F 和Purcell E M;建立了核磁共振测定方法;诺贝尔化学奖1952年;(2)Martin A J P 和Synge R L M;建立了气相色谱分析法;诺贝尔化学奖1952年;(3)Heyrovsky J,建立极谱分析法,诺贝尔化学奖1959年仪器分析的发展引发了分析化学的第二次变革。
11阶段三:八十年代初,以计算机应用为标志的分析化学第三次变革。
(1)计算机控制的分析数据采集与处理:实现分析过程的连续、快速、实时、智能;促进化学计量学的建立。
(2)化学计量学:利用数学、统计学的方法设计选择最佳分析条件,获得最大程度的化学信息。
化学信息学:化学信息处理、查询、挖掘、优化等。
(3)以计算机为基础的新仪器的出现:傅里叶变换红外;色-质联用仪。
1215电化学分析方法的分类19仪器分析的特点1. 灵敏度高,检出限低。
2. 选择性好。
3. 操作简便,分析速度快,易于实现自动化。
4. 相对误差一般较大。
5. 仪器价格一般来说比较昂贵。
2021五、仪器分析的发展方向快速、准确、自动、灵敏,适应特殊分析 22仪器分析课程的主要内容仪器分析方法,包括方法原理、仪器结构、操作条件选择、应用; 四大类:光分析法、电分析法、色谱分析法、其他分析法;特点:内容繁多、各成体系;每类方法有其特点、内在规律、应用范围; 23课程性质与目标1. 课程性质仪器分析:化学+物理学+电子技术+计算机 (综合性学科)2. 课程目标培养两类人才:分析仪器的熟练应用者——解决问题;创新型人才——发现问题,开拓新领域;(1 ) 掌握常用仪器分析方法原理、应用,熟悉仪器结构;(2 ) 使学习者具备选择适宜的分析方法的能力; 25第二节仪器分析方法的主要评价指标一、精密度二、准确度三、选择性四、标准曲线的线性范围五、灵敏度六、检出限26准确度和精密度1.准确度和精密度——分析结果的衡量指标。
( 1) 准确度??分析结果与真实值的接近程度准确度的高低用误差的大小来衡量;误差一般用绝对误差和相对误差来表示。
(2) 精密度??几次平衡测定结果相互接近程度精密度的高低用偏差来衡量,偏差是指个别测定值与平均值之间的差值。
(3) 两者的关系精密度是保证准确度的先决条件;精密度高不一定准确度高;两者的差别主要是由于系统误差的存在。
271.1准确度试样含量的测定值与试样含量的真实值(或标准值)相符合的程度称为准确度。
准确度常用相对误差度量式中:x为试样含量的测定值,µ为试样含量的真值或标准值 281.2精密度精密度是指使用同一方法,对同一试样进行多次测定所得测定结果的一致程度。
精密度常用测定结果的标准偏差s或相对标准偏差(RSD)sr量度.同一分析人员在同一条件下测定结果的精密度称为重复性;不同实验室所得测定结果的精密度称为再现性29301.3误差的种类、性质、产生的原因及减免1. 系统误差(1) 特点a.对分析结果的影响比较恒定;b.在同一条件下,重复测定,重复出现;c.影响准确度,不影响精密度;d.可以消除。
31(2) 产生的原因a.方法误差——选择的方法不够完善例: 测定中方法有较大的干扰b.仪器误差——仪器本身的缺陷例: 仪器末校正或试样末调零。
c.试剂误差——所用试剂有杂质例:去离子水不合格;试剂纯度不够(含待测组份或干扰离子)。
d.主观误差——操作人员主观因素造成例:操作误差322. 偶然误差( 1) 特点: a.不恒定 b.难以校正 c.服从正态分布(统计规律)( 2) 产生的原因: a.偶然因素 b.配制试剂时读数3. 过失误差331.4 误差的减免1. 系统误差的减免(1) 方法误差——采用标准方法,对比实验 (2) 仪器误差——校正仪器 (3) 试剂误差——作空白实验2. 偶然误差的减免——增加平行测定的次数,最少三次。
34二、选择性选择性是指分析方法不受试样中基体共存物质干扰的程度。
选择性越好,干扰越少。
35三、标准曲线标准曲线是待测物质的浓度或含量与仪器响应信号关系曲线。
由于是用已知浓度的标准溶液绘制的,所以称为标准曲线。
371.标准曲线的线性范围标准曲线的直线部分所对应的被测物质浓度(或含量)的范围称为该方法的线性范围。
38393.相关系数r当两个变量之间直线关系不够严格,数据的偏离较严重时,虽然也可以求得一条回归线,但是,实际上只有当两个变量之间存在某种线性关系时,这条回归线才有意义。
判断回归线是否有意义,可用相关系数r来检验。
相关系数的定义式为:r值在-1.0000与+1.0000之间。
相关系数的物理意义如下:(1),r,=1时,y与x之间存在严格的线性关系,所有的yi值都在回归线上。
(2) ,r,=0时, y与x之间完全不存在线性关系。
(3) 0<,r,<1时, y与x之间存在一定的线性关系。
,r,值愈接近1,线性关系就愈好40五、灵敏度物质单位浓度或单位质量的变化引起响应信号值变化的程度,称为方法的灵敏度,用S表示。
S=dy/dc或dy/dm式中:dc和dm分别为被测物质的浓度和质量的变化量,dy为响应信号的变化量。
灵敏度也就是标准曲线的斜率。
斜率越大,方法的灵敏度就越高。
(五)检出限某一方法在给定的置信水平上可以检出被测物质的最小浓度或最小质量,称为这种方法对该物质的检出限。
检出限表明被测物质的最小浓度或最小质量的响应信号可以与空白信号相区别。
用D来表示。
sb为空白信号的标准偏差,S是方法的灵敏度,也就是标准曲线的斜率。
方法的灵敏度越高(工作曲线的斜率越大)。
精密度越好,检出限就越低。
42 本章作业1、现代仪器分析法有何特点,它的测定对象与化学分析法有什么不同,2、评价一台仪器分析方法的主要技术指标是什么,3、现代仪器分析主要有那些分析方法,第二章紫外-可见分光光度分析法颜色的产生白光(太阳光):由各种单色光组成的复合光吸光光度法的基本原理能复合成白光的两种颜色的光叫互补色光。
物质所显示的颜色是吸收光的互补色。
一、光的基本性质光的波长λ(cm)、频率γ (Hz) ,它们与光速c的关系是:在真空介质中,光速为2.9979×1010cm/s。
单个光子的能量E与上述三要素的关系是:E,,光子的能量;h,,普朗克常数(6.625×10,34J?s)二、能级与跃迁分子中的电子总是处在某一运动状态中,每一种状态都具有一定的能量,属于一定能级。
当它得到时,电子由于受到光、热、电等的激发,得到适当的能量,从一个能级转移到另一个能级,称为跃迁。
分子能级跃迁分子能级跃迁较原子能级跃迁更为复杂。
分子内部除了电子运动状态外,还有核间的相对运动,即核的振动和分子围绕着重心的转动。
振动能变化、转动能变化以及电子运动能量变化1、同一种物质对不同波长的光吸收能力是否存在差异,2、不同的物质对相同波长的光的吸收是否存在差异,分子只会选择吸收满足能级差能量的波长,各种分子内部结构不同,分子的能级也千差万别,各种能级之间的间隔也互不相同,这样就决定了它们对不同波长的光线的选择性吸收。
吸收曲线改变通过某一吸收物质的入射光的波长,并记录某物质在每一波长处的吸光度(A),然后以波长为横坐标,以吸光度为纵坐标作图,这样的谱图称为该物质的吸收光谱或吸收曲线。
反映了它在不同的光谱区域内吸收能力的分布,可以从波形,波峰的强度、位置及数目来了解物质内部信息叶绿素的结构和吸收光谱三、比色法通过显色反应,比较待测溶液与标准溶液颜色的深浅来确定待测物质的含量为比色法。
目视比色法光电比色法分子吸收分光光度法(分光光度分析法)几乎所有的无机离子和许多有机化合物可以用分光光度法进行测定。
如土壤中的氮、磷以及植物灰、动物体液中各种微量元素的测定。
通常,待测物质的含量1,10,5,时,能够用分光光度法准确测定。
所以它主要用于测定微量组分。
分光光度分析法:基于发射的电磁辐射与待测物质相互作用后所产生的辐射信号与物质组成及结构关系所建立起来的分析方法。
光源单色器样品检测器基本特点:1一般光分析法均包含三个基本过程;(1)能源提供能量;(2)能量与被测物之间的相互作用;(3)产生信号。
2选择性测量,不涉及混合物分离(不同于色谱分析);3涉及大量光学元器件。
18光波是一种电磁波。
电磁波包括无线电波、微波、红外光、可见光、紫外光、x射线等。
如果按照其频率或波长的的大小排列,可见光只是电磁波中一个很小的波段。
见表12,1吸收曲线的讨论(1)同一种物质对不同波长光的吸光度不同。
吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax(2)不同浓度的同一种物质,其吸收曲线形状相似λmax不变。
而对于不同物质,它们的吸收曲线形状不同。
因此吸收曲线可以提供物质的结构信息,并作为物质定性分析的依据之一。
(4)不同浓度的同一种物质,在某一定波长下吸光度 A 有差异,在λmax处吸光度A 的差异最大。
此特性可作为物质定量分析的依据。
(5)在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大,所以测定最灵敏。
吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。
四、分子吸收光谱与分子结构1(紫外—可见吸收光谱有机化合物的紫外—可见吸收光谱,是其分子中外层价电子跃迁的结果(三种):σ电子、π电子、n电子。