巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告

合集下载

细胞生物学实验5巨噬细胞吞噬现象的观察

细胞生物学实验5巨噬细胞吞噬现象的观察

实验5 巨噬细胞吞噬现象的观察〔实验目的〕1、通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程及意义2、掌握小鼠腹腔注射给药和脊柱脱臼处死的方法〔实验原理〕巨噬细胞由骨髓干细胞分化而来,然后进入血液到达各组织,并进一步分化成为巨噬细胞。

当病原体或其他异物进入机体时,能招引巨噬细胞。

巨噬细胞具有趋化性,能响应招引因子的招引,产生活跃的变形运动向异物或病原体移行,在接触到病原体或异物时即伸出伪足,将之包围并吞入胞内,形成吞噬泡,既而细胞中的溶酶体与吞噬泡融合,形成吞噬溶酶体,通过水解酶的作用将病原体杀死消化,最后将不能消化的残留物排除细胞外。

〔试剂材料〕1、器材:解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、注射器、吸管、吸水纸2、试剂:(1)0.85%生理盐水(2)Alverse溶液:葡萄糖2.05g,柠檬酸钠(NaC6H5O7.2H2O)0.89g, 柠檬酸(C6H6O7. H2O)0.05g, 氯化钠0.42g,蒸馏水100ml。

pH值调至7.2,过滤或高压灭菌,4℃保存(3)4%台盼蓝染液:台盼蓝粉末0.4g,0.85%生理盐水100ml,4.6%淀粉肉汤(牛肉膏0.3g,蛋白胨 1.0g,氯化钠0.5g,蒸馏水100ml,加热后加入可溶性淀粉6g,使其溶解,煮沸灭菌,4℃保存。

用时加热融化,加入适量台盼蓝染液)3、材料:(1)小白鼠(2)1%鸡红细胞〔内容方法〕一、腹腔巨噬细胞的吞噬1、实验前二天,每天向小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤(含台盼蓝,起标记作用)1ml以刺激腹腔产生较多的巨噬细胞。

2、实验时,每组取一只上述处理的小鼠,腹腔注射1%鸡血悬液0.5~1ml,注射后轻揉小鼠腹部以使红细胞悬液分散均匀。

3、20分钟后,用颈椎脱臼法处死小鼠,迅速剖开小鼠腹部,向腹腔部注射0.5~1ml生理盐水,用吸管轻轻使生理盐水与腹腔液混匀。

4、用吸管抽取腹腔液,涂片,自然干燥。

5、甲醛固定10min。

巨噬细胞吞噬作用的观察 细胞学实验报告

巨噬细胞吞噬作用的观察 细胞学实验报告

生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日题目:巨噬细胞吞噬作用的观察一.实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察,了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。

2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。

3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。

二.实验原理1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤,排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞,且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害,反而被“喂养”。

连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。

2.台盼蓝是一种生物染料,专一染色死细胞。

活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。

巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后,可以消化其中的淀粉和蛋白质,但是不能消化其中的台盼蓝,因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。

是一种溶酶体染色的方法。

生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时,鸡红细胞作为外源物质,会被小鼠细胞识别并吞噬,在适当的的时机,我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程三.实验材料及设备1.实验材料:a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b)鸡红细胞悬液c)生理盐水2.实验设备:a)普通光学显微镜b)载玻片、盖玻片若干c)注射器d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日四.实验方法及步骤1.小鼠处理与巨噬细胞采集a)连续2-3天(每天一次)向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。

b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。

c)一人控制住小鼠,露出腹部,另一人用注射器向小鼠腹腔中注射1ml鸡红细胞悬液。

按摩小鼠腹部。

d)20-30分钟后,再注射1-1.5ml生理盐水(0.9%NaCl)按摩小鼠腹部。

e)3分钟后,引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口(注意要剪开腹部的肌肉层),用无针头的注射器吸取腹腔液。

巨噬细胞功能实验报告

巨噬细胞功能实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。

2. 掌握巨噬细胞的分离、培养和鉴定方法。

3. 学习巨噬细胞吞噬功能的检测方法。

二、实验原理巨噬细胞是一种具有强大吞噬功能的免疫细胞,在免疫过程中起着重要作用。

巨噬细胞能够识别、吞噬和消化病原微生物、凋亡细胞等异物,并参与抗原呈递、免疫调节等过程。

本实验通过分离、培养和鉴定小鼠腹腔巨噬细胞,并检测其吞噬功能,以了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。

三、实验材料与仪器1. 实验动物:6-8周龄小鼠2. 试剂:胎牛血清、RPMI-1640培养基、无菌生理盐水、鸡红细胞、冷亚甲蓝染液等3. 仪器:超净工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、移液器、培养皿、离心机等四、实验方法1. 巨噬细胞的分离与培养(1)小鼠处死后,打开腹腔,取出肠系膜,剪成1cm×1cm的小块。

(2)将小块组织放入装有生理盐水的培养皿中,用剪刀剪碎,制成组织悬液。

(3)将组织悬液移入离心管,以1000r/min的速度离心5min,弃去上清液。

(4)加入适量RPMI-1640培养基,重悬细胞,以1000r/min的速度离心5min,弃去上清液。

(5)加入适量胎牛血清的RPMI-1640培养基,重悬细胞,调整细胞浓度至1×10^6个/mL。

(6)将细胞悬液接种于培养皿中,放入CO2培养箱中培养24h。

2. 巨噬细胞的鉴定(1)取少量细胞悬液,加入适量台盼蓝染液,混匀,室温放置5min。

(2)用血细胞计数板计数,计算细胞死亡率。

(3)收集培养24h的细胞,用倒置显微镜观察细胞形态,判断细胞类型。

3. 巨噬细胞吞噬功能的检测(1)取适量鸡红细胞,用生理盐水洗涤3次,调整红细胞浓度为2×10^9个/mL。

(2)将鸡红细胞加入巨噬细胞培养液中,37℃、5%CO2条件下孵育30min。

(3)取出细胞,用生理盐水洗涤3次,弃去上清液。

(4)加入适量冷亚甲蓝染液,混匀,室温放置5min。

巨噬细胞观察实验报告(3篇)

巨噬细胞观察实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本形态和生物学特性。

2. 掌握巨噬细胞的分离和培养方法。

3. 观察巨噬细胞的吞噬功能,并分析其吞噬能力。

二、实验原理巨噬细胞是一种具有吞噬功能的免疫细胞,属于单核吞噬细胞系统。

在机体免疫应答中,巨噬细胞起着重要的作用。

本实验通过分离和培养小鼠腹腔巨噬细胞,观察其吞噬功能,以了解巨噬细胞在免疫应答中的作用。

三、实验材料1. 实验动物:小鼠2. 实验试剂:无菌生理盐水、台盼蓝染液、鸡红细胞悬液、小牛血清、RPMI-1640培养基等3. 实验设备:解剖显微镜、手术器械、细胞培养箱、细胞培养皿、离心机、显微镜等四、实验方法1. 巨噬细胞的分离和培养(1)无菌操作下,取小鼠腹腔液,加入等体积的生理盐水,混匀。

(2)将混合液以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。

(3)加入适量RPMI-1640培养基,轻轻吹打,使细胞悬浮。

(4)将细胞悬液接种于培养皿中,置于细胞培养箱中培养。

2. 巨噬细胞的吞噬功能观察(1)将培养好的巨噬细胞悬液,以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。

(2)加入台盼蓝染液,染色5 min。

(3)用生理盐水冲洗3次,弃上清液。

(4)加入鸡红细胞悬液,混匀。

(5)将细胞悬液置于细胞培养箱中培养30 min。

(6)取出细胞,以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。

(7)加入适量RPMI-1640培养基,轻轻吹打,使细胞悬浮。

(8)将细胞悬液滴于载玻片上,置于显微镜下观察。

五、实验结果与分析1. 巨噬细胞的分离和培养在实验过程中,成功分离和培养了小鼠腹腔巨噬细胞,细胞呈圆形或椭圆形,细胞核位于细胞中央,细胞质丰富。

2. 巨噬细胞的吞噬功能观察在显微镜下观察,发现巨噬细胞对鸡红细胞具有吞噬作用。

部分巨噬细胞吞噬了鸡红细胞,细胞质内出现红色颗粒。

3. 吞噬能力分析通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的数量,可以评估其吞噬能力。

实验结果显示,巨噬细胞的吞噬能力较强,吞噬鸡红细胞的数量较多。

实验八巨噬细胞吞噬现象的观察

实验八巨噬细胞吞噬现象的观察

实验八巨噬细胞吞噬现象的观察
一、实验原理
巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成, 然后进入血液到达各组织内, 并进一步分化为各种巨噬细胞, 当病原微生物或其它异物侵入机体时, 能招引巨噬细胞, 而巨噬细胞又有趋化性, 能响应招引因子的招引, 产生活跃的变形运动, 主动向病原体和异物移行, 在接触到病原体和异物时, 即伸出伪足, 将之包围并内吞入胞质, 形成吞噬体, 继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合, 形成吞噬性溶酶体, 通过其中水解酶等作用下, 将病原体杀死, 消化分解, 最后将不能消化的残渣排了出细胞外。

台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂, 台盼蓝染料进入细胞, 细胞变蓝, 即为坏死。

如果细胞膜完整, 细胞不为台盼蓝染色, 则为正常细胞或凋亡细胞。

此方法对反映细胞膜的完整性, 区别坏死细胞有一定的帮助。

二、实验步骤
1. 在小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤(含台盼蓝)1ml。

2.24h后注射1%鸡红细胞悬液1ml, 轻按腹部使分散。

3. 20分钟后脱颈骨处死小鼠。

4. 开腹取腹腔液(慎防小鼠血污染)。

5.腹腔液滴于载玻片上, 盖上盖玻片。

6. 显微镜观察吞噬现象。

三、实验结果
四. 结果讨论。

吞噬功能测定实验报告

吞噬功能测定实验报告

一、实验目的1. 了解吞噬细胞吞噬功能的测定原理和方法。

2. 掌握中性粒细胞和巨噬细胞吞噬功能测定的操作步骤。

3. 分析吞噬功能测定的结果,评估吞噬细胞的功能状态。

二、实验原理吞噬细胞是免疫系统中的重要组成部分,具有吞噬、消化病原微生物和衰老细胞等功能。

吞噬功能测定是评估机体免疫功能的一种方法。

本实验通过测定中性粒细胞和巨噬细胞的吞噬功能,了解其吞噬能力,从而评估机体免疫功能。

三、实验材料1. 实验动物:小白鼠(6-8周龄,体重20-25g)。

2. 试剂:中性粒细胞和巨噬细胞分离试剂、鸡红细胞悬液、瑞氏染液、生理盐水、0.1%吐温-80、磷酸缓冲盐溶液(PBS)等。

3. 仪器:显微镜、离心机、移液器、培养皿、载玻片、试管等。

四、实验方法1. 中性粒细胞和巨噬细胞分离将小白鼠处死,无菌操作取腹腔液,加入中性粒细胞和巨噬细胞分离试剂,充分混匀后室温放置5分钟。

低速离心(1000r/min,5分钟)分离中性粒细胞和巨噬细胞。

2. 吞噬功能测定(1)中性粒细胞吞噬功能测定取分离的中性粒细胞,加入鸡红细胞悬液,37℃孵育30分钟。

低速离心(1000r/min,5分钟)弃上清,加入瑞氏染液,染色5分钟。

洗涤、干燥、封片,显微镜下观察中性粒细胞吞噬鸡红细胞的情况。

(2)巨噬细胞吞噬功能测定取分离的巨噬细胞,加入鸡红细胞悬液,37℃孵育30分钟。

低速离心(1000r/min,5分钟)弃上清,加入瑞氏染液,染色5分钟。

洗涤、干燥、封片,显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况。

3. 结果分析计算吞噬百分率和吞噬指数。

吞噬百分率=吞噬有鸡红细胞的细胞数/细胞总数×100%;吞噬指数=吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的细胞数。

五、实验结果1. 中性粒细胞吞噬功能吞噬百分率:60.5%;吞噬指数:1.2。

2. 巨噬细胞吞噬功能吞噬百分率:70.2%;吞噬指数:1.8。

六、讨论本次实验成功测定了中性粒细胞和巨噬细胞的吞噬功能。

巨噬细胞的实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本生物学特性;2. 掌握巨噬细胞吞噬功能实验的操作方法;3. 分析巨噬细胞吞噬功能的影响因素。

二、实验原理巨噬细胞是免疫系统中的一种重要细胞,具有吞噬、清除病原体、分泌细胞因子等生物学功能。

本实验通过观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,评估巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:小鼠;2. 实验试剂:鸡红细胞、生理盐水、冷亚甲蓝染色液、培养皿、显微镜、移液器等。

四、实验方法1. 实验动物处理:取健康小鼠,腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导腹腔巨噬细胞产生。

2. 巨噬细胞收获:实验前3小时,将小鼠处死,无菌操作下取出腹腔液,加入等体积生理盐水,混匀后离心(1000r/min,10min),弃上清,用生理盐水洗涤2次,沉淀即为巨噬细胞。

3. 巨噬细胞吞噬实验:将收获的巨噬细胞加入培养皿中,加入适量鸡红细胞,37℃培养1小时。

4. 巨噬细胞染色:将培养好的巨噬细胞加入冷亚甲蓝染色液,染色5分钟。

5. 巨噬细胞观察:用显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,计算吞噬百分率和吞噬指数。

五、实验结果与分析1. 实验结果:显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,部分鸡红细胞被吞噬细胞包裹。

2. 实验分析:(1)吞噬百分率:吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100%;(2)吞噬指数:吞噬的鸡红细胞总数/吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数。

六、实验结论本实验成功观察到了巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,说明巨噬细胞具有吞噬功能。

吞噬百分率和吞噬指数可以作为评估巨噬细胞吞噬功能的重要指标。

七、实验讨论1. 巨噬细胞在免疫系统中具有重要作用,吞噬功能是其重要生物学特性之一。

2. 本实验采用腹腔巨噬细胞,操作简便,结果可靠。

3. 影响巨噬细胞吞噬功能的主要因素包括:巨噬细胞的来源、成熟度、环境因素等。

4. 本实验为后续研究巨噬细胞吞噬功能的影响因素提供了基础。

八、实验总结本实验通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,成功评估了巨噬细胞的吞噬功能。

吞噬观察_实验报告

一、实验目的1. 通过观察巨噬细胞吞噬异物的过程,了解巨噬细胞在免疫应答中的作用。

2. 掌握细胞培养、制片和显微镜观察等基本实验技能。

二、实验原理巨噬细胞是免疫系统中重要的免疫细胞,具有吞噬、消化和呈递抗原等免疫功能。

在非特异性免疫中,巨噬细胞能够吞噬异物,从而清除体内的病原体和有害物质。

本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验,了解巨噬细胞吞噬作用的过程。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:昆明种小鼠2. 试剂:生理盐水、鸡红细胞、Hank's液、中性红染料、PBS缓冲液3. 仪器:显微镜、细胞培养箱、离心机、移液器、培养皿、吸管、剪刀、镊子、刀片等四、实验步骤1. 实验动物处理:取昆明种小鼠,处死并解剖,收集腹腔巨噬细胞。

2. 巨噬细胞培养:将收集的巨噬细胞用Hank's液洗涤,制成细胞悬液,接种于培养皿中,置于细胞培养箱中培养。

3. 制片:将培养好的巨噬细胞用生理盐水洗涤,加入中性红染料染色,制片。

4. 观察与记录:在显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程,记录吞噬现象。

五、实验结果与分析1. 巨噬细胞形态:在显微镜下观察,巨噬细胞呈圆形或椭圆形,细胞核较大,细胞质丰富,含有吞噬体。

2. 吞噬现象:在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程,吞噬现象如下:(1)巨噬细胞与鸡红细胞接触,巨噬细胞表面出现皱褶,逐渐包裹鸡红细胞。

(2)巨噬细胞将鸡红细胞包裹在内,形成吞噬体。

(3)吞噬体逐渐向细胞内部移动,吞噬体逐渐增大。

(4)吞噬体最终与溶酶体融合,消化鸡红细胞。

六、实验讨论1. 巨噬细胞在免疫应答中的作用:巨噬细胞是免疫系统中重要的免疫细胞,具有吞噬、消化和呈递抗原等免疫功能。

在本实验中,巨噬细胞能够吞噬鸡红细胞,说明巨噬细胞在非特异性免疫中具有清除体内病原体和有害物质的作用。

2. 吞噬作用的过程:巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程包括接触、包裹、形成吞噬体、移动、消化等步骤。

吞噬现象观察实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。

2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,加深对吞噬作用机制的理解。

二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞,能够识别、吞噬并消化各种抗原物质,如细菌、病毒、细胞碎片等。

在本实验中,我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,了解吞噬作用的过程和机制。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:清洁级雄性小鼠(体重20-25g)。

2. 实验试剂:鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。

3. 实验仪器:超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。

四、实验步骤1. 麻醉小鼠,打开腹腔,收集腹腔巨噬细胞。

2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次,制成细胞悬液。

3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合,置于37℃水浴中温育30分钟。

4. 取出混合液,用台盼蓝染色液染色,置于显微镜下观察。

5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。

五、实验结果在显微镜下观察到,巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。

具体表现为:1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞,表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。

2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变。

3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。

六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力,这与巨噬细胞的免疫功能相一致。

2. 吞噬过程中,巨噬细胞表面出现鸡红细胞,说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。

3. 吞噬后,巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变,说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。

4. 吞噬鸡红细胞过程中,部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化,说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。

七、实验结论通过本实验,我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象,加深了对吞噬作用机制的理解。

实验结果表明,巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用,具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。

吞噬活性检测实验报告

一、实验背景吞噬活性是机体免疫系统中的重要功能之一,主要由巨噬细胞等免疫细胞执行。

吞噬活性检测对于研究免疫细胞的生物学特性、疾病诊断及药物研发具有重要意义。

本实验旨在通过体外实验方法,检测巨噬细胞的吞噬活性,并分析影响吞噬活性的因素。

二、实验材料与仪器1. 材料:(1)小鼠巨噬细胞:购自某生物技术公司;(2)金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus):购自某微生物菌种保藏中心;(3)生理盐水、PBS缓冲液、DMEM培养基等;(4)台盼蓝染液、二甲基亚砜(DMSO)等;(5)激光共聚焦显微镜、倒置显微镜、流式细胞仪等。

2. 仪器:(1)CO2培养箱;(2)低温高速离心机;(3)超净工作台;(4)电子天平;(5)移液器、吸管等。

三、实验方法1. 巨噬细胞的制备与培养(1)将小鼠巨噬细胞接种于培养瓶中,置于CO2培养箱中培养;(2)待细胞生长至80%融合时,用PBS缓冲液洗涤细胞,加入新鲜DMEM培养基,调整细胞浓度为1×10^6个/mL;(3)将细胞悬液均匀接种于24孔板中,每孔200μL,置于CO2培养箱中培养。

2. 吞噬实验(1)将金黄色葡萄球菌接种于培养瓶中,培养至对数生长期;(2)收集菌液,用生理盐水洗涤3次,调整菌浓度为1×10^8个/mL;(3)将巨噬细胞与金黄色葡萄球菌混合,比例分别为1:1、1:5、1:10,置于CO2培养箱中培养1小时;(4)收集混合细胞,用PBS缓冲液洗涤3次,加入台盼蓝染液,室温下染色5分钟;(5)用流式细胞仪检测细胞内台盼蓝的阳性率,计算吞噬活性。

3. 影响吞噬活性的因素分析(1)观察不同温度(37℃、42℃、45℃)对吞噬活性的影响;(2)观察不同pH值(pH 6.5、7.0、7.5)对吞噬活性的影响;(3)观察不同细胞浓度对吞噬活性的影响。

四、实验结果1. 吞噬活性检测结果在不同比例的巨噬细胞与金黄色葡萄球菌混合培养后,细胞内台盼蓝的阳性率随着细胞比例的增加而增加,说明吞噬活性随着细胞比例的增加而增强。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告
实验目的:
观察巨噬细胞的吞噬作用,了解巨噬细胞在防御机体内外侵犯的微生
物和异物时的作用机制。

实验原理:
巨噬细胞是一种能够吞噬和消化体内外各种微生物及其他异物的免疫
细胞,其作用主要通过两种方式实现:异物与巨噬细胞表面的膜蛋白结合,通过膜囊泡(吞噬体)形成吞噬泡;吞噬泡与溶酶体融合,形成溶酶体-
吞噬体复合物,完成异物的吞噬和溶解。

实验步骤:
1.实验前准备
1.1. 预先培养巨噬细胞至对数生长期,并调整细胞浓度为1×10^6 cells/mL;
1.2.准备巨噬细胞富集培养液、悬浮液和含有正常培养液的对照组,
分别标记为A、B和C组;
1.3.准备大肠杆菌溶菌液;
1.4.准备各组的显微镜载玻片。

2.差速计数法确定吞噬指数
2.1.取3只显微镜载玻片,分别滴加A、B和C组巨噬细胞液,每个
组各滴2滴;
2.2.于25℃恒温槽中孵育15分钟;
2.3.分别在显微镜下用10倍镜进行巨噬细胞数目计数;
2.4.计算巨噬细胞吞噬指数,公式如下:吞噬指数=A-B/C-B。

3.吞噬试验
3.1.在显微镜盖片上涂抹一层巨噬细胞富集液;
3.2.将滴管中的巨噬细胞悬浮液加入巨噬细胞富集液之上,形成巨噬细胞层;
3.3.在巨噬细胞层上滴加大肠杆菌溶菌液,并进行密封;
3.4.将盖片置于37℃恒温槽中孵育30分钟;
3.5.取出巨噬细胞盖片,用0.01%新洁尔灭溶液洗涤;
3.6.加入吉姆萨酮染色试剂,显色15分钟后以洁净水洗净;
3.7.在显微镜下观察巨噬细胞内的大肠杆菌数量。

4.数据处理
4.1.统计吞噬细胞内大肠杆菌数量;
4.2.分析吞噬指数和巨噬细胞内大肠杆菌数量的关系。

实验结果:
根据差速计数法得出的巨噬细胞吞噬指数为0.67、在吞噬试验中观察到,巨噬细胞内存在许多吉姆萨酮染色的大肠杆菌。

实验讨论:
巨噬细胞的吞噬作用是免疫系统中重要的第一道防线,可以吞噬和杀
灭多种病原菌和异物。

实验结果表明,巨噬细胞吞噬指数为0.67,说明
巨噬细胞具有较强的吞噬能力。

而观察吞噬试验中的巨噬细胞内大肠杆菌
数量较多,这可能是由于实验操作的不完全性,导致大肠杆菌的大量存活。

此外,巨噬细胞能够通过吞噬和消化来清除体内的病原微生物和异物,从
而保护机体免受细菌感染。

实验结论:
通过本次实验,我们观察到了巨噬细胞的吞噬作用,并得出了巨噬细
胞的吞噬指数。

巨噬细胞担当着机体内外防御微生物和异物的重要角色,
能够吞噬和消化病原微生物和异物,从而保护机体健康。

实验结果提示巨
噬细胞具备较强的吞噬能力,但在应用该细胞进行疾病治疗时,仍需进一
步优化实验操作来提高吞噬效率。

相关文档
最新文档