非水毛细管电泳_紫外检测法测定肉桂中的肉桂酸和肉桂醛

第26卷第2期2007年3月 分析测试学报FENXI CESH I X UEBAO(J ournal of Ins tru m en talAnal ys i s)V ol 26No 2274~276非水毛细管电泳/紫外检测法测定肉桂中的肉桂酸和肉桂醛李利军1,黄文艺2,冯 军2,程 昊2,孔红星1,吴健玲2(1.广西工学院 生物与化学工程系,广西 柳州 545006;2.广西大学 化学与化学工程学院,广西 南宁 530005)摘 要:建立了用非水相体系高效毛细管电泳/紫外检测法同时测定肉桂酸和肉桂醛的新方法,考察了运行电压、非水相介质和电解质等因素的影响。

在25 下,以乙腈和碳酸丙烯酯(体积比32)的混合液为缓冲体系的溶剂,缓冲体系中含25mm o l/L十六烷基三甲基溴化铵,0 375%( )乙酸,以碳酸丙烯酯为样品溶剂,重力进样30s,运行电压20kV,毛细管总长45c m,有效长度30c m, 75 m,检测波长310n m。

肉桂酸线性范围为4~100m g/L,r=0 9994,检出限为0 80mg/L,R SD为1 07%。

肉桂醛的线性范围10~240m g/L,r=0 9996,检出限为2 30mg/L,R SD为2 19%。

应用于肉桂中的肉桂醛和肉桂酸的测定,结果满意。

关键词:肉桂;肉桂酸;肉桂醛;非水相体系;毛细管电泳;紫外检测中图分类号:O657 8;R284 1 文献标识码:A 文章编号:1004-4957(2007)02-0274-03D eter m i nati on of C i nna m al dehyde and C i nna m ic A ci d i n C i nna m on byN on aqueous Capill ary E l ectrophoresis w ith UV D etecti onLI L i j u n1,HUANG W en y i2,FENG Jun2,C HENG H ao2,KONG H ong x i n g1,WU Jian li n g2(1.D epart m ent o f B iolog i ca l and Che m ical Eng i nee ri ng,G uangx iU niversity of T echnology,L i uzhou 545006,Ch i na;2.Co ll ege of Chem istry and Chem ical Eng i neeri ng,G uangx iU n i versity,N ann i ng 530005,Ch i na)Abstrac:t A ne w m ethod for the deter m i n ation of ci n na m al d ehyde and cinna m ic ac i d w as established by non aqueous cap illar y electrophoresisw ith UV detecti o n.The effects of the d ifferent types of non-aque ous buffer so l u ti o ns,the concentrati o ns of electro l y te and the applied vo ltage were i n vestigated.The buff eri n g soluti o n used in this ne w m ethod w as the m ixture o f acetonitrile and pr opy lene carbonate(32,by vo l u m e)contai n i n g0 375%( )acetic acid and25mm o l/L hexadecyltri m ethyl a mm on i u m bro m i d e.The applied voltage w as20k V and the UV detection w avelength w as310nm.The li n ear ranges of the m et h od w ere10-240m g/L(r=0 9996)for ci n na m a l d ehyde and4-100m g/L(r=0 9994)for c i n na m ic aci d,respecti v e l y.The recoveries of c i n na m a l d ehyde and c i n na m ic ac i d w ere97%,104%and the de tection li m its w ere2 3m g/L,0 80mg/L,respecti v e l y.Th ism ethod was si m p le,rapid a nd accurate.It had been successf u ll y used for the deter m i n ati o n of cinna m aldehyde a nd cinna m ic ac i d in c i n na m on.Key w ords:C inna m on;C inna m ic ac i d;C inna m a l d ehyde;N on aqueous;Cap illary electrophoresis;UV detecti o n肉桂为植物肉桂(C innam o mum cass,la Pres1 )的干燥树皮,具有补火助阳、活血通经的功效,用于阳痿、宫冷、腰膝冷痈、肾虚作喘等症。

肉桂酸和肉桂醛是肉桂中的两种活性成分。

肉桂醛具有镇静、镇痛及解热作用[1];肉桂酸具有抗菌、升高白细胞、利胆[2]、抗癌[3]作用。

文献曾报道用气相色谱法[1,4]、导数光谱法[5]、薄层扫描法[2,6]和高效液相色谱法[7-9]等测定肉桂醛含量;紫外分光光度法[10]和毛细管电泳法[11-12]等测定肉桂醛和肉桂酸,但到目前为止,还没有利用非水毛细管电泳法同时测定肉桂酸和肉桂醛两种组分的报道。

由于肉桂醛和肉桂酸在水中的溶解度较低,而易溶于有机溶剂,因此本文利用非水毛细管电泳技术,采用能同时溶解肉桂酸和肉桂醛的乙腈和碳酸丙烯酯作为缓冲液溶剂,以十六烷基三甲基溴化铵为电解质,以乙酸调节p H值,实现了对肉桂酸和肉桂醛的分离分析,建立了非水体系毛细管电泳-收稿日期:2006-03-18;修回日期:2006-08-06基金项目:广西教育厅科研基金资助项目(2000392);广西自然科学基金资助项目(0481019)作者简介:李利军(1966-),男,湖北黄梅人,教授,理学博士,T e:l0772-*******,E-ma i:l lilij un0562@s i na co m275第2期李利军等:非水毛细管电泳/紫外检测法测定肉桂中的肉桂酸和肉桂醛紫外检测法同时测定肉桂中两种有效成分的含量,方法简便、准确,可为不同产地肉桂的质量控制提供依据。

1 实验部分1 1 仪器与试剂ACS2000型高效毛细管电泳仪(北京彩陆科学仪器有限公司),负电源:电压0~30kV可调,未涂层石英毛细管75 m,总长45c m、有效长度30c m,检测波长310nm。

UV 2102PC型紫外-可见分光光度计(Un ico i n str um en ts C o.,Ltd)。

肉桂醛,国药集团分析试剂有限公司;肉桂酸,中国医药上海化学试剂公司;碳酸丙烯酯、乙腈,国药集团化学试剂有限公司;十六烷基三甲基溴化铵,湘中地质实验研究所;氢氧化钠,乙酸。

以上所有试剂均为分析纯。

1 2 样品的处理将肉桂(市购)置于60 的烘箱内烘12h,然后研磨成粉。

准确称取0 5g肉桂粉置于容量瓶内,用25mL甲醇浸泡,超声波振荡30m in,浸泡4h,再进行超声波振荡30m i n后过滤,滤渣用甲醇冲洗3遍,合并滤液。

将滤液用真空旋转蒸发器在40 下蒸干,所得固体用碳酸丙烯酯溶解,过滤后转移至25mL的容量瓶内,定容至刻度,制成样品溶液。

1 3 实验条件与操作电压:20kV;进样方式:重力进样;进样高度:11c m;进样时间:30s;检测波长310nm;环境温度:25 。

毛细管的处理:实验前依次用1m ol/L N a OH水溶液、双蒸水、无水乙腈分别冲冼5m i n,进样前用缓冲液冲洗5m in,实验4h后更换缓冲液。

实验结束后依次用无水乙腈、二次蒸馏水冲洗,并用二次蒸馏水浸泡过夜。

实验所用的溶液进样前均用0 45 m的滤膜过滤,并经超声波脱气。

2 结果与讨论2 1 分离条件选择2 1 1 检测波长的选择 实验以纯碳酸丙烯酯为参比液,分别对1g/L肉桂酸和肉桂醛的碳酸丙烯酯溶液在200~400nm波长之间进行扫描,发现肉桂酸和肉桂醛分别在310、342nm处有最大吸收,并且肉桂醛在310nm处也有较强的吸收,因此本实验选取310nm作为检测波长。

2 1 2 缓冲体系的选择 (1)试剂的选择:在非水体系中常用乙腈或碳酸丙烯酯作为分离分析中性物质的溶剂。

虽然乙腈的电渗流较大,用作缓冲液溶剂时分析时间短,但乙腈对表面活性剂的溶解能力有限,因此不能将肉桂酸和肉桂醛有效分离。

表面活性剂易溶于碳酸丙烯酯,以碳酸丙烯酯为溶剂时,能将肉桂酸和肉桂醛有效地分离,但其电渗流小,分离分析时间长。

因此本实验以乙腈和碳酸丙烯酯的混合液为缓冲试剂。

考察了不同比例的乙腈和碳酸丙烯酯的混合液,发现随着碳酸丙烯酯的比例的增加分析时间越长,但若碳酸丙烯酯所含的比例太低则表面活性剂的溶解能力将受到限制,肉桂酸和肉桂醛将不能很好地分离。

通过实验发现乙腈和碳酸丙烯酯的比例为32时分析时间较短,而且能使肉桂酸和肉桂醛很好地分离。

因此本实验选择32的乙腈和碳酸丙烯酯的混和液为缓冲体系的溶剂。

(2)十六烷基三甲基溴化铵浓度的选择:在非水相体系时,表面活性剂的临界胶束浓度(C M C)要比在水相体系时大得多。

因此本实验选择C MC较小的十六烷基三甲基溴化铵调节电渗流。

考察了十六烷基三甲基溴化铵的浓度为5~30mm o l/L时的实验效果。

结果表明,十六烷基三甲基溴化铵浓度对分析时间有很大影响。

低浓度时基线稳定,但分析时间长、样品峰很宽,而且肉桂酸的峰有拖尾现象;随着浓度的增大,峰宽变窄,分析时间逐渐缩短,在15mm o l/L分析时间最短;浓度大于15mm ol/L 时分析时间又逐渐增长。

但十六烷基三甲基溴化铵浓度的改变不能完全克服肉桂酸的峰拖尾现象。