第一讲高效毛细管电泳法在药物分析中的应用

毛细管电泳-紫外检测法测定

用于清洗毛细管，防止样品残留。
标记物
用于增强样品在紫外检测器中的信号，提高检
测灵敏度。
实验设备
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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毛细管电泳仪
用于分离样品中的各组分，具有高分辨率和高灵敏度。
紫外检测器
用于检测样品中特定组分的紫外吸收光谱，从而确定组分的
性质和浓度。
洗脱泵
用于提供洗脱液，清洗毛细管内的残留物。
毛细管电泳-紫外检测法的优缺点
高分离效率
毛细管电泳具有高柱效和低扩散系数，能够实现高效分离。
微量样品需求
只需少量样品即可完成分析，适用于珍贵样品的分析。
毛细管电泳-紫外检测法的优缺点
快速分析
分析时间短，适合高通量分析。
多种检测模式
可结合多种检测器，如紫外、荧光、质谱等，实现多组分同时检测。
毛细管电泳-紫外检测法的优缺点
图表展示
通过柱状图、折线图等形式展示实验结果，便于直观地比较不同样品之间的差异。
结果分析
吸光度分析
根据实验数据，分析各样品在检测波长下的吸光度，探讨吸光度与样品浓度之间的关系。
分离效果评估
对毛细管电泳分离后的各组分进行紫外检测，分析分离效果，包括峰形、分离度等。
结果比较与讨论
1 2 3
不同样品比较
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结论
研究成果总结
毛细管电泳-紫外检测法是一种高效、灵敏的分离分析方法，适用于多种化合物的分离和检
测。
在本实验中，成功分离和检测了多种目标化合物，包括有机酸、氨基酸、肽类和蛋白质等
。
该方法具有较高的分离效率和灵敏度，能够满足实际应用的需求。

电化学分析法在药物分析中的应用

电化学分析法在药物分析中的应用电化学分析法electrochemical analysis 是基于溶液电化学性质的化学分析方法，是由德国电化学分析法化学家C.温克勒尔在19世纪首先引入分析领域的，仪器分析法始于1922年捷克化学家 J.海洛夫斯基建立极谱法。

电化学分析法的基础是在电化学池中所发生的电化学反应。

电化学池由电解质溶液和浸入其中的两个电极组成，两电极用外电路接通。

在两个电极上发生氧化还原反应，电子通过连接两电极的外电路从一个电极流到另一个电极。

根据溶液的电化学性质（如电极电位、电流、电导、电量等）与被测物质的化学或物理性质（如电解质溶液的化学组成、浓度、氧化态与还原态的比率等）之间的关系，将被测定物质的浓度转化为一种电学参量加以测量。

根据国际纯粹化学与应用化学联合会倡议，电化学分析法分为三大类：①既不涉及双电层，也不涉及电极反应，包括电导分析法、高频滴定法等②涉及双电层，但不涉及电极反应，例如通过测量表面张力或非法拉第阻抗而测定浓度的分析方法。

③涉及电极反应，又分为两类：一类是电解电流为0，如电位滴定；另一类是电解电流不等于0，包括计时电位法、计时电流法、阳极溶出法、交流极谱法、单扫描极谱法、方波极谱法、示波极谱法、库仑分析法等。

毛细管电泳在药物分析中的应用1前言毛细管电泳(CE)的历史可以归溯到1967年Hejerten发表的博士论文，现在人们普遍将CE定义为在内径100 μm以内的毛细管中进行的电泳分析，它的出发点应归功于1979年Mikkers等人在内径0.2 mm的聚四氟乙烯管中进行的研究。

1981年Jorgenson和Lukacs发表的研究论文对CE的发展作出了决定性的贡献，他们用内径75 μm的毛细管对荧光标识氨基酸化合物进行CE测定，获得理论塔板数高达40万的高分离性能，并且深入地阐明了CE的一些基本性能和分离的理论依据。

1984年Terabe［1］等人提出了胶束动电毛细管色谱法(MEKC)，使许多电中性化合物的分离成为可能，大大拓宽了CE的应用范围。

CE-MS联用技术的发展及其在天然药物分析中的应用

21世纪初毛细管管电色谱-质谱联用法（CEC-MS）发展起来， CEC可以不用含有非挥发性缓冲盐的流动相，仍然具有的高选择性及高分离能力的特点而言，有望解决背景电解质的问题。
CE-MS的发展
•CE-MS质谱类型的研究进展
在MS方面,几乎各种不同类型质量分析器的质谱仪都可与CE联用,其中三重四极杆质谱( TQ-MS )和离子阱质谱( IT-MS )以其仪器简单、分析速度快的特点应用最为广泛;
总结和展望
• 对于CE-MS未来的发展趋势, 主要仍将集中在提高CE的分离能力、新接口技术以及应用研究方面。
(1)毛细管涂层材料的发展:通过对毛细管进行涂层可有目的地减弱非特异性吸附, 同时还可控制电渗流(EOF) , 提高分离效率和重现性。
(2)通过在线富集或者与其他提取富集技术联用,进一步提高CE-MS的选择性和灵敏度。
CE-MS 的联用
虽然 CE在柱效方面比HPLC更好，但CE如果用对照品比对定性时存在重复性差、UV检测限低等缺点；
而质谱(MS)检测不仅有较高的灵敏度, 同时具有较强的定性能力,能够提供样品的结构信息.所以CE-MS是在改进CE的缺点基础上实现的强强联合，为近年来的研究热点。
CE-MS的发展
• 无鞘液接口技术由于不存在任何稀释效应而逐渐受到研究者的青睐。
• Fana li等设计了一种加压的液接型接口。液接型接口是无鞘液接口技术中比较特别的一种。与其他无鞘液接口相比, 液接型接口可以通过液接液体来改变CE 运行缓冲液的组成, 使其满足电喷雾离子源的要求。
芯片CE与ESI-MS联用的方法主要分为两类: 一类是将ESI源和CE 微芯片整合在一起, 另一类是把毛细管喷雾器附加在CE 微芯片内。后者的应用更为广泛, 其优势在于更有利于装置的微型化。

毛细管电泳技术在药学研究的应用概述

阿魏酸的峰。苏恒等采用高效毛细管电泳法，研究了江
浙蝮蛇蛇毒蛋白指纹图谱，为建立更全面的色谱指纹图谱，
满足蛇毒的全面质量管理的需要提供了依据。２２手性分离分析．
李英杰等提出了高效毛细管电泳拆分手性药物中间
体１甲基一一一３苯基丙胺的方法，分离快捷，为进一步开展１一甲基一一３苯基丙胺对映体的研究提供了依据。黄碧云等建立一种快速有效拆分苯磺酸氨氯地平对映体的分析方法。该法可快速有效地分离苯磺酸氨氯地平对映体，
ｃｎｅｅｃｏＪ．Ｅｅｔｈｒｓ，０６２（５：３２３２．ｃｃｔｔｎ［］ｌｍｐｏｉ２０，７１）１５— １８ｄｅｉｃｅｓ（收稿日期：２１．１２）０１１．９
基金项目：基金项目：福建省自然科学基金资助（目编号：００Ｏ０４、福建省医学创新课题资助（目项２１Ｊ１２）项编号：２１一Ｘ一３。０１Ｃ２）
ｐｏｅｉ，２０，２（４）１８— ３．ｈｒｓｓ０６７２：５２５１１
［２ＩＪＬＵＸＬＮＢ，ｔ１ｔｙｇｐｔｎｄｕｔａｔｎｂｉ１］ＬＵＸ，Ｉ，ＩＣｅａ．Ｓｄｉｒｅ — ｒｇｉｅｃｏｙ — ｕｎｏｉｎｒｉｍ
１定量分析
诱导荧光检测技术在玻璃芯片上研究了肝素与牛血清白蛋白之间的相互作用。该作者＿还采用毛细管电泳方法研究ｌｌ５种不同链长和不同硫酸基含量的硫酸寡聚糖（ｅＳＤｘ）和Ｇ—ＣＦ的相互作用。采用细胞生物学实验观察被筛选出的Ｓ

毛细管电泳

在其它工业领域中的应用
药品纯度及杂质检测石油化工产品杂质监测食品中有机酸检测及矿物质分析环境污染物分析金属阴和阳离子、金属阴和阳离子、无机离子检测烟草中成分检测纺织染料的测定表面活性剂测定
毛细管电泳存在问题
使用了小管径的毛细管，使用了小管径的毛细管，制备能力差光路短，光路短，要用高灵敏度的检测器检测样品凝胶、凝胶、色谱填充管要用专门的灌制技术大的侧面/截面积比会“放大”吸附的作用，大的侧面/截面积比会“放大”吸附的作用，导致蛋白质等的分离效率下降或无峰吸附会引起电渗的变化，吸附会引起电渗的变化，进而影响分离重现性
电渗（ ,EOF）电渗（electroosmotic flow ,EOF）
电渗流是一种液体相对于带电的管壁移动的现象。在毛细管电泳里在所指的电渗电渗是在高电压下，在毛细管电泳里在所指的电渗是：在高电压下，溶液中的正电荷与毛细管管壁表面的负电荷之间作引起流体朝负极方向运动的现象。用，引起流体朝负极方向运动的现象。
自动进样，缓冲液交换，数据处理
洁净：CE分离过程通常使用水溶液，洁净：CE分离过程通常使用水溶液，可免于分离过程通常使用水溶液接触HPLC流动相的毒性和污染，对人、 HPLC流动相的毒性和污染接触HPLC流动相的毒性和污染，对人、环境污染小
毛细管电泳与平板凝胶电泳的比较
毛细管电泳检测器选择定量自动化分辨率多与 HPLC 相当容易高平板凝胶电泳少困难困难低பைடு நூலகம்
电渗（续）电渗（
粒子在毛细管中同时受到泳流和渗流两种运动速度的影响，种运动速度的影响，粒子在毛细管电介质的运动速度应该是两种速度的矢量和：运动速度应该是两种速度的矢量和：

非水毛细管电泳技术在药物分析中的应用

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科技速递
和同时分离的能力，故可以用作药物杂
羟甲基甲酰胺 < 2345 = 、乙酸镁、柠檬酸（如高 < 748 = 、甲酸、甲磺酸及一些季铵盐氯酸四甲基铵）等作为电解质。缓冲盐的浓度可直接影响电泳介质的离子强度，从而影响 >?8@ 电势，而 >?8@ 电势的变化又会影响到电渗流。缓冲液浓度升高，离子强度增加，双电层厚度减小， >?A 电渗流减小，分析效率会提 8@ 电势降低，高。此外，也可通过增加样品的容量，增强样品的富集现象，从而提高分析灵敏度。离子还可以通过与管壁的作用以及对溶液粘度、介电常数的影响来影响电渗，但若离子强度过高或过低对提高分离效率均不利。
分析对象盐酸胺碘酮片罗红霉素多种制剂日夜百服宁克霉唑、酮康唑、苯扎贝特
手性药物分析
一些对映体组成相同、化学性质相近的药物，因构象上的差异导致不同的生物物理效应，故需要进行分离。手性试剂的浓度、种类及与对映体作用的强弱
温度影响分离重现性和分离效率，控制温度可以调控电渗流的大小。温度升高，缓冲液粘度降低，管壁硅羟基解离能力增强，电渗速度变大，分析时间减短，分析效率提高。但温度过高，不仅会导致有机溶剂的挥发，不利于准确定量，还会引起毛细管柱内径向温差增大，焦耳热效应增强，柱效降低，从而导致分离效率也会降低。
分析工作者的兴趣。与经典的水相 -. 相比，其检测手段增多，分析灵敏度大大提高，分析范围更广。
结构相近的药物的分离分析

高效毛细管电泳在中医药领域的最新进展和应用研究

２ＫｔｍｉｕａｈｍａＭｉｉＦｊ，ｏｈｔｕＩＡ，ｔ１ｉｌｓｎｈｓ６ａｕｒｓｉ，ｋｏｕｉＹｓｉｒｓＫｉｅＤｅａ．ＳｍｐｅｙｔｅｉｓｏｆＢ—Ｄ—Ｇｙｏｙａｏｉｅｓｎ一ＧｙｏｉａｅｆｍｍｎｓＣｅｌｃｐｒｓｓｕｉｇ１ｌｃｓｓｏＡｌｏｄ．ｈｍｎｄ３ｄｒＰａｍＢｌ２０５（）２０ｈｒｕｌ０４，２２：７，
参考文献
１ＴｓｅｋＪｏｖｓｉＡＭ．ｙｔｅｉｏｌｃｓｅｆｒｈｎｏＡＴ．ｕｄｉｈｓＳｎｈｓｆｇｙｏｉｓｏｏｒｓｄ２一（Ｐ一
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天津药学
ＴａｊＰａｍｃ２１ｉｉｈｒａｙ０１年ｎｎ
第２３卷第５期
３３
天苷方面显示了一定的优越性。但目前生物合成法还存在反应周期长、效价低的问题。因此，通过优化反应条件，缩短合成周期，提高红景天苷产率，并在此基础上合成活性更强，毒副作用小的新型红景天苷类似物具有重要意义。
Ｅｚｍａｉ２０４８ｎｙｔｃ，０６，０：
１郭益冰，２郑成，孟颖．红景天苷及其类似物的合成．通大学学报，南
２０８４：０９，（）９
２Ｌ８ｕＷＹ，ｉＹ，ｔ１ａｉｎｈｓｆｌｙＬｎＧＱ，ｕＨＬｅａ．ＦｃｅｓｔｅｉｏａｋｌｌｙｓＢ—Ｄ—ｇ～ｌｕ

毛细管电泳法的特点和CE-MS的构造

自动化与智能化
通过自动化和智能化技术，实现CE-MS的远程控制和实时监测，提高分析效率。
解决实际应用中的问题
样品处理
优化样品处理方法，减少基质干扰，提高分析准确度。
交叉污染
采取有效措施减少交叉污染，如定期清洗、更换分离介质等，确保分析结果的可靠性。
谢谢
Байду номын сангаасTHANKS
03 CE-MS的构造
CHAPTER
毛细管电泳仪
高效分离
毛细管电泳仪利用电场对带电粒子的作用力，实现高效分离不同成分的物质。
微量进样
毛细管电泳仪采用微米级的进样体积，可减少样品消耗，降低实验成本。
高灵敏度
毛细管电泳技术结合激光诱导荧光检测等高灵敏度检测方法，可实现对痕量物质的检测。
质谱仪
分子结构分析
质谱仪通过测量分子在电场和磁场中的行为，确定分子的质量和
结构信息。
高选择性
质谱技术可对复杂混合物中的目标分子进行高选择性检测，排除干扰物质。
定量分析
质谱技术可实现目标分子的定量分析，提供准确的物质浓度信息。
接口设计
高效传输
接口设计的主要目标是实现毛细管电泳分离后的样品溶液高效传输至质谱仪。
原理
在毛细管中施加电场，带电粒子在电场作用下产生迁移，根据其在电场中的迁移速度差异实现分离。
发展历程
1980年代初期
毛细管电泳技术开始发展，研究者发现使用毛细管可以产生电渗流，为电泳提供驱动力。
1980年代中期
成功分离氨基酸和多肽，奠定了毛细管电泳在生物分析领域的应用基础。
1990年代
毛细管电泳技术得到广泛应用，涉及蛋白质、DNA、糖类等多种生物分子的分离分析。