哮喘模型大鼠支气管平滑肌肌球蛋白轻链激酶的表达
哮喘大鼠肺组织Akt蛋白表达上调对IL-4,IL-12和IL-13的影响
哮喘大鼠肺组织Akt蛋白表达上调对IL-4，IL-12和IL-13的影响作者：徐慧,戴元荣,夏晓东,吴成云作者单位：温州医学院附属第二医院呼吸内科，浙江温州【摘要】目的：研究Akt蛋白对支气管哮喘大鼠IL-4，IL-12和IL-13表达的影响。
方法：雄性SD大鼠24只，随机分为3组：对照组(C组)、哮喘组(A组)、渥曼宁青霉素组(Wortmannin，W组)，每组8只。
以卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立大鼠哮喘模型。
各组大鼠于末次激发后24 h，放血处死。
酶联免疫吸附试验(ELISA)测定BALF中IL-4，IL-13和IL-12的浓度;免疫组化法测定肺组织中p-Akt蛋白的表达;Western blot测定肺组织匀浆中p-Akt蛋白的含量。
结果：A组p-Akt蛋白的表达明显高于C 组，W组p-Akt蛋白的表达低于A组，但仍高于C组;BALF中IL-4，IL-13的含量A组明显高于C组，W组IL-4，IL-13的含量低于A组，但仍高于C组，BALF中IL-12的含量A组明显低于C组，W组IL-12的含量低于C组，但仍高于A组。
结论：哮喘大鼠模型中出现了Akt蛋白的激活，细胞因子失衡可能与Akt蛋白的激活有关。
【关键词】哮喘;细胞因子;磷脂酰肌醇3激酶;蛋白激酶BEffect of up-regulation of protein Akt in lung tissue of asthmatic rat on IL-4，IL-12 and IL-13 XU Hui，DAI Yuan-rong，XIA Xiao-dong，WU Cheng-yun，HE Jian-bo. Department of Respi-ratory Medicine，the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou，325027Abstract: Objective: To study the effect of protein Akt in asthma airway inflammation of asthmatic rats on the cytokine IL-4，IL-13 and IL-12. Methods: Twenty-four male adult Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into the control group (C)，the asthma group (A) and Wortmannin group (W). The rats’ asthma models were established，in which rats were sensitized with OVA and Al (OH)3，and repeatedly exposed to aerosolized ovalbumin. The rats were sacrificed at 24 hours afer last challege，Meanwhile the concentration of IL-4，IL-13 and IL-12 in BALF were measured with ELISA. The expressions of p-Akt protein were detected with Immuno-histochemistry (IHC). The level of p-Akt in lung homogenate was measured with Western blot. Results: The expressions of p-Akt protein of lung tissues in the group A were higher than thosein group C，and the expressions of p-Akt protein of group W were lower than that of group A，but higher than that of group C. The concentration of IL-4 and IL-13 in BALF of group A were significantly higher than that of group C and those of group W were lower than those of group A but higher than those of group C. The concentration of IL-12 in BALF of group A was significantly lower than that of group C and that of group W was lower than that of group C，but higher than that of group A. Conclusion: The protein Akt is activated in the asthmatic rats model，and the imbalance of cytokine and the airway inflammation in the asthmatic rats model maybe regulated by activation of Akt.Key words: asthma;cytokine;PI3K;PKB/Akt细胞因子是参与非特异性免疫反应、炎症反应的一组小分子多肽和糖蛋白。
TNF-α对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK12活性的影响的开题报告
TNF-α对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK12活性的影响的开题报告一、研究背景及意义哮喘是一种慢性气道炎症性疾病，其主要特征为气道狭窄和过度反应，导致呼吸困难和咳嗽等症状。
TNF-α是一种促炎症因子，在哮喘的发病机制中起着重要作用，研究发现TNF-α的水平与哮喘的严重程度有关，能够刺激气道平滑肌细胞增殖。
气道平滑肌细胞增殖会导致气道平滑肌的增厚，从而加剧哮喘的病情。
因此，研究TNF-α对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK12活性的影响，对于探究哮喘的发生发展机制，及为临床治疗提供新的思路和方法具有重要的理论和实际意义。
二、研究目的研究 TNF-α是否对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及 ERK1/2 活性有影响，探讨其机制。
三、研究内容及方法1. 建立哮喘模型大鼠：采用雌性 Sprague-Dawley 大鼠，给予鸡蛋白致敏和二氧化硫吸入制备哮喘模型。
2. 分组治疗：随机将大鼠分为PBS 组、TNF-α组和 PD98059 组，每组 10 只大鼠。
3. 采集气道平滑肌细胞：将大鼠气道切成小块，加入酶消化液，并用胶原酶和 DNA 酶处理使平滑肌细胞分离。
4. 测定细胞增殖及 ERK1/2 活性：采用 MTT 方法测定细胞增殖，Western blotting 检测 ERK 1/2 蛋白在不同组之间的相对表达量。
四、预期结果1. TNF-α可促进哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖。
2. TNF-α可激活 ERK 1/2 信号通路，提高气道平滑肌细胞增殖的活性。
3. PD98059 能够抑制ERK1/2 活性，降低气道平滑肌细胞增殖活性。
五、研究价值本研究可以为进一步探究 TNF-α在哮喘发病机制中的作用和气道平滑肌细胞增殖的调控机制提供新的思路与方法。
同时，研究结果也可以为临床治疗提供新的目标和方法。
IL-17在哮喘中的研究进展
IL-17在哮喘中的研究进展尹秀志(综述);曲书强(审校)【期刊名称】《临床肺科杂志》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】5页(P155-159)【作者】尹秀志(综述);曲书强(审校)【作者单位】150086 黑龙江哈尔滨，哈尔滨医科大学附属第二医院儿内科;150086 黑龙江哈尔滨，哈尔滨医科大学附属第二医院儿内科【正文语种】中文哮喘长期以来被认为是一种同质性疾病，其主要特点是慢性持续性气道炎症和气道高反应，导致反复的喘息、气促、胸闷、咳嗽。
然而，大量的队列研究分析表明，根据哮喘的临床和功能特点，区分了哮喘不同的临床表型[1]。
目前，口服糖皮质激素(OCS)、吸入性糖皮质激素(ICS)、长效支气管扩张剂是所有哮喘的基本治疗方案。
但是有一部分患者对于激素治疗不敏感或部分敏感，所以，应该将哮喘患者进行准确的分类，才能更好地靶向治疗[2,3]。
既往提出的Th2依赖性的过敏性气道炎症，曾是主要的发病机理，治疗效果理想，同时应用抗单克隆抗体(IgE、IL-5、IL-13、IL-4或者它们的受体)也可以有效控制该类型哮喘。
然而，对于Th2Low 型哮喘患者对于现有治疗方案效果不佳[4]。
Th2Low 表型发病机制仍然不明，但是这些患者主要表现为中性粒细胞性炎症。
IL-17是Th17细胞关键的促炎细胞因子，在哮喘中，有募集中性粒细胞炎症和参与气道重塑的作用。
该综述主要对IL-17在中性粒细胞性气道炎症、激素抵抗、气道重塑等几个方面做以下说明。
作者单位：150086 黑龙江哈尔滨，哈尔滨医科大学附属第二医院儿内科IL-17在1995年首次被克隆，是一种具有促炎作用的细胞因子。
IL-17家族包括6个成员的配体(IL-17A、B、C、D、E、F)和5个受体(IL-17RA、IL-17RB、IL-17RC、IL-17RD和SEF)。
其中发挥主要作用的为IL-17A即IL-17。
Zrioual等研究显示IL-17A与17F结构和氨基酸序列很相似，同时在染色体上的基因位点也相似，因此推测两者可能共享相同的受体，并存在相似的生物学效应，在体内外发挥着强大的致炎效应。
支气管哮喘大鼠模型的建立与气道反应性的测定
支气管哮喘大鼠模型的建立与气道反应性的测定吉宁飞;卞涛;陈力;符晓苏;殷凯生【期刊名称】《南京医科大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2006(026)011【摘要】目的:为了探讨支气管哮喘的发病机制,建立一种由卵蛋白(0VA)致敏并诱发的支气管哮喘大鼠模型.方法:24只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组和哮喘模型组,每组12只.予卵蛋白腹腔注射并雾化吸人制作SD大鼠支气管哮喘模型.予乙酰胆碱(Ach)行支气管激发试验;以动物呼吸机测定呼气相气道阻力(Re);以病理图像分析系统测定支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度和支气管黏膜和黏膜下炎性细胞数.结果:比较2组大鼠Re以及支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度和支气管黏膜和黏膜下炎性细胞数,结果显示造模成功;相关分析显示,在80～160 μg/kg浓度梯度的Ach激发后,哮喘模型组Re值与其病理形态学改变正相关(P＜0.01).结论:该方法能制备支气管哮喘大鼠模型;通过80～160 μg/kg浓度梯度的Ach激发后,Re的倍增可直接代表造模的成功.【总页数】4页(P1018-1020,封2)【作者】吉宁飞;卞涛;陈力;符晓苏;殷凯生【作者单位】江苏省老年医院干部保健科,江苏,南京,210024;南京医科大学第一附属医院呼吸科,江苏,南京,210029;江苏省老年医院干部保健科,江苏,南京,210024;江苏省老年医院干部保健科,江苏,南京,210024;南京医科大学第一附属医院呼吸科,江苏,南京,210029【正文语种】中文【中图分类】R562.25【相关文献】1.支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立 [J], 李斌恺;赖克方;洪燕华;王法霞;陈如冲;林少建;钟南山2.支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立 [J], 李斌恺;赖克方;洪燕华;王法霞;陈如冲;林少建;钟南山3.慢性烟曲霉暴露对支气管哮喘大鼠气道高反应性、气道炎症及气道重构的影响[J], 汪泽;高艳艳;刘永全;高福生4.缓解期支气管哮喘行气道反应性测定临床价值研究 [J], 林嘉镖;王桂兰;黄东明;黄娟;刘翔腾5.喘复康合剂对抗原致敏支气管哮喘大鼠气道高反应性的影响 [J], 王志强;王莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血管内皮生长因子及其受体2与哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖关系的研究
血管内皮生长因子及其受体2与哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖关系的研究邹晖;徐永健;张珍祥【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2010(019)004【摘要】目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体2(Flk-1)存哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中表达变化及其对ASMC增殖的影响.方法 SD大鼠18只,随机分为对照组,哮喘模型组和地塞米松下预组各6只,并培养各组气道平滑肌细胞.用免疫组织化学技术检测ASMC增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;用RT-PCR及Western blot方法分别检测VEGF和Flk-1mRNA及蛋白质在不同组大鼠ASMC 的表达程度.结果 (1)哮喘模型组ASMC PCNA表达较对照组和嘎干预组显著增加(P<0.05).(2)哮喘模型组ASMC VEGF164,VEGF188mRNA和VEGF205mRNA的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05或P<0.01).(3)哮喘模型组ASMC VEGF 及Flk-1蛋白质在大鼠ASMC中的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05).直线相关性分析显示.大鼠ASMC PCNA表达与大鼠ASMC中VEGF205,188,164及Flk-1mRNA表达水平呈正相关(r分别为0.79,0.86,0.83,0.68;P<0.05);大鼠ASMC PCNA表达与大鼠ASMC中VEGF及Flk-1蛋白质表达水平也呈正相关(r 分别为0.80,0.77;P<0.05).结论哮喘模型大鼠ASMC中VEGF及其受体Flk-1表达上调,并与气道平滑肌细胞增殖有密切关系.该结果提示VEGF及其受体2可能参与了哮喘气道重建中气道平滑肌细胞增殖的过程.【总页数】6页(P321-326)【作者】邹晖;徐永健;张珍祥【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R322.34【相关文献】1.核因子κB在蛋白激酶C诱导哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用 [J], 许淑云;徐永健;张珍祥;倪望;陈士新2.核因子κB在支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用 [J], 许淑云;徐永健;张珍祥;倪望;陈士新3.IL-19对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响 [J], 李年珍;张焕萍;柴景伟;张彬4.TGF-β1对不同阶段哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖的作用 [J], 蔺鹏翔;张焕萍;张爱芝5.TNF-α对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK1/2活性的影响 [J], 徐妍;张焕萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
针刺对哮喘大鼠气道重建模型气道平滑肌细胞T型钙通道蛋白表达的影响的开题报告
针刺对哮喘大鼠气道重建模型气道平滑肌细胞T型钙通道蛋白表达的影响的开题报告
本文旨在研究针刺对哮喘大鼠气道重建模型中气道平滑肌细胞T型
钙通道蛋白表达的影响，以探讨其在哮喘治疗中的潜在作用。
针刺作为一种传统医学疗法，在哮喘治疗中已得到广泛实践。
研究
表明，针刺可通过调节免疫系统、抑制炎症反应等多种途径来缓解哮喘
症状。
此外，T型钙通道在调节气道平滑肌细胞收缩中也发挥着重要作用。
因此，本研究将选取哮喘大鼠模型，建立气道重建模型，并通过免
疫荧光、Western blot等技术研究针刺对气道平滑肌细胞T型钙通道蛋白表达的影响，以期为其在哮喘治疗中的应用提供理论依据。
本研究预计将有以下亮点：第一，通过建立哮喘大鼠模型，可以更
好地模拟人体疾病，提高实验可靠性；第二，通过多种技术手段综合分析，可以较全面地了解针刺对气道平滑肌细胞T型钙通道蛋白表达的影响；第三，研究结果将为进一步探究哮喘治疗中针刺的作用机制提供基础。
在研究中，我们将注重实验的科学性和可靠性，并结合现有文献对
结果进行充分讨论和解释，以提高研究结果的说服力和应用价值。
莫西沙星增加哮喘大鼠气道平滑肌细胞Caveolin-1的表达_
(苏 ) 2016
0028 ], 荧 光 定 量 检 测 试 剂 盒
(
RR420A,中国上海驰勇生物科技有限公司)。
1 2 方法
复操作 3 次。
上 (
1 2 3),干预 ASMC48h 后, 在 细 胞 液 中 加
入 TRI
z
o
l 试 剂, 提 取 细 胞 RNA。 检 测 RNA 纯
r
oup A t
hea
s
t
hma
t
i
cg
r
oup wa
s
d
i
v
i
dedi
n
t
o3 g
r
oups i
nc
l
ud
i
ng a
s
t
hma
t
i
cc
on
t
r
o
lg
r
oup B
a
s
t
hma
t
i
cg
r
oup C t
o wh
i
ch
mox
i
f
l
oxa
c
i
nwa
sadded a
tt
he c
onc
en
t
r
a
t
i
on o
f5 mg L and a
tmen
tof Re
spi
ra
t
o
ry Medi
c
i
ne t
he Se
c
ond Af
i
l
i
《基于RNA-Seq的哮喘小鼠气管平滑肌组织转录组分析及小鼠气管平滑肌细胞的原代培养和鉴定》
《基于RNA-Seq的哮喘小鼠气管平滑肌组织转录组分析及小鼠气管平滑肌细胞的原代培养和鉴定》一、引言哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病，其发病机制复杂，涉及多种细胞和分子参与。
近年来，随着高通量测序技术的发展，RNA-Seq技术在哮喘研究中的应用越来越广泛。
本文旨在通过RNA-Seq技术对哮喘小鼠气管平滑肌组织进行转录组分析，并同时开展小鼠气管平滑肌细胞的原代培养和鉴定工作，以期为哮喘的发病机制研究提供新的思路和实验依据。
二、材料与方法1. 实验动物与分组选用SPF级BALB/c小鼠，随机分为正常对照组和哮喘模型组。
2. 哮喘模型建立通过雾化吸入过敏原等方法建立哮喘模型。
3. RNA-Seq技术进行转录组分析提取哮喘小鼠和正常小鼠的气管平滑肌组织RNA，进行高通量测序，并对数据进行生物信息学分析。
4. 小鼠气管平滑肌细胞的原代培养和鉴定（1）原代培养：取小鼠气管平滑肌组织，进行消化、离心、接种等步骤，培养平滑肌细胞。
（2）鉴定：通过免疫荧光、Western blot等方法鉴定培养的细胞为平滑肌细胞。
三、实验结果1. RNA-Seq转录组分析结果通过对哮喘小鼠和正常小鼠的气管平滑肌组织进行RNA-Seq 分析，我们发现哮喘组中多个与炎症、免疫、细胞增殖等相关的基因表达发生显著变化。
这些基因的差异表达可能参与了哮喘的发病过程。
2. 小鼠气管平滑肌细胞的原代培养和鉴定结果（1）原代培养：成功培养出形态良好、生长旺盛的小鼠气管平滑肌细胞。
（2）鉴定：通过免疫荧光和Western blot等方法鉴定，确认培养的细胞为平滑肌细胞，且纯度较高。
四、讨论本研究通过RNA-Seq技术对哮喘小鼠气管平滑肌组织的转录组进行了分析，发现多个与炎症、免疫、细胞增殖等相关的基因表达发生显著变化。
这些结果提示我们，哮喘的发病可能与这些基因的表达异常有关。
同时，我们还成功培养了小鼠气管平滑肌细胞，并进行了鉴定。
这些细胞可以为后续的机制研究提供重要的实验材料。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
哮喘模型大鼠支气管平滑肌肌球蛋白轻链激酶的表达
王勇生;桂淑玉;李永怀;周青;胡向阳;吴强;汪渊
【期刊名称】《安徽医科大学学报》
【年(卷),期】2006(41)1
【摘要】目的探讨哮喘模型大鼠支气管平滑肌肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达的变化.方法 SD大鼠24只,随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型激发1周组(B组)和哮喘模型激发2周组(C组).以卵蛋白(OVA)致敏和激发建立大鼠支气管哮喘模型,用免疫组织化学和免疫印迹法分析三组大鼠支气管平滑肌中MLCK表达.结果哮喘模型激发1周组大鼠支气管平滑肌MLCK表达较正常对照组明显增加,2周组增加更明显,差异均有显著性(P<0.05). 结论支气管平滑肌MLCK表达增加可能与哮喘发病有关.
【总页数】3页(P1-3)
【作者】王勇生;桂淑玉;李永怀;周青;胡向阳;吴强;汪渊
【作者单位】安徽医科大学第一附属医院呼吸内科,合肥,230032;安徽医科大学第一附属医院呼吸内科,合肥,230032;安徽医科大学第一附属医院呼吸内科,合
肥,230032;安徽医科大学分子生物学实验室和安徽省基因研究重点实验室,合肥,230032;安徽医科大学病理学教研室,合肥,230032;安徽医科大学病理学教研室,合肥,230032;安徽医科大学分子生物学实验室和安徽省基因研究重点实验室,合肥,230032
【正文语种】中文
【中图分类】R562.25;R345;R392.11
【相关文献】
1.硫化氢对糖尿病大鼠心肌肌球蛋白轻链激酶表达的影响 [J], 杨锐;贾强;刘小粉;王元元;高琴;马善峰
2.白藜芦醇下调肌球蛋白轻链激酶过表达抑制大鼠肝肿瘤增生 [J], 张孝林;俞浩;熊友谊;刘汉珍;赵磊;马世堂;周国梁;秦梅颂;周丽丽
3.胰岛素对糖尿病大鼠动脉壁肌球蛋白轻链激酶表达的影响 [J], 高峻岭;杜勇;左莉;朱华庆;周青;桂淑玉;汪渊
4.细胞外信号调节激酶1／2信号通路在慢性哮喘模型大鼠支气管平滑肌细胞迁移功能变化中的调控作用 [J], 谢敏;刘先胜;徐永健;张珍祥;白晶;倪望;陈士新
5.糖基化终末产物影响结肠平滑肌肌球蛋白轻链激酶表达在糖尿病大鼠结肠动力障碍中的作用 [J], 王庆娥;王云;朱滢;孙晓萌;林琳
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。