醛糖还原酶5’端(AC)n二核苷酸重复序列多态性与2型糖尿病合并冠心病相关性
醛糖还原酶5’端(AC)n二核苷酸重复序列多态性与2型糖尿病合并冠心病的相关性[摘要] 目的本研究旨在调查山东地区汉族人群醛糖还原酶(ar)5’端(ac)n二核苷酸重复序列多态性,探讨ar5’端(ac)n重复序列多态性与2型糖尿病(dm)、2型糖尿病合并冠心病(chd)之间的关系。
方法随机选取新诊断2型糖尿病患者74例,2型糖尿病合并冠心病者68例,正常对照组116例。
应用聚合酶链式反应(pcr)、琼脂糖凝胶电泳技术、聚丙烯酰胺凝胶电泳技术及dna 测序检测ar等位基因,比较各组等位基因分布频率。
结果 3组均发现7种等位基因(z-6~z+6),各组间等位基因分布频率差异无统计学意义。
结论 ar基因5’端(ac)n二核苷酸重复序列多态性等位基因不是糖尿病、糖尿病合并冠心病发病的独立危险因素。
[关键词] 2型糖尿病;醛糖还原酶;基因;多态性;冠心病[中图分类号] r587 [文献标识码] a [文章编号] 2095-0616(2013)15-21-03relationship between an (ac)-n dinucleotide repeat polymorphic marker at 5’ end of the aldose reductase gene and type 2 diabetes mellitus with coronary heart disease xue yamei1 liu changshan2 wang xiujun2 lei peipei11.graduate faculty, weifang medical university, weifang 261053, china;2.department of endocrinology, weifang people’s hospital of shandong province, weifang 261041,china[abstract] objective to investigate ar 5’end (ac)n polymorphism in han nationality population in shandong district,and discuss its relationship between type 2 diabetes (t2dm),type 2 diabetes with coronary heart disease(chd). methods 74 patients with newly diagnosed type 2 diabetes mellitus, type 2 diabetes mellitus with coronary heart disease in 68 cases, 116 cases of normal control group were randomly selected. polymerase chain reaction (pcr), agarose gel electrophoresis, polyacrylamide gel electrophoresis and dna sequencing were used to detect ar alleles, allele frequency distribution in each group were compared. results three groups were found seven alleles (z-6~z+6), there were no obvious difference of allele frequency distribution between groups. conclusion ar 5’end (ac)n polymorphisms may not the independent risk factors for diabetes mellitus,and diabetes combined with coronary heart disease.[key words] type 2 diabetes; aldose reductase; genes;polymorphism; coronary heart disease糖尿病是世界发病率最高慢性病之一。
长期高血糖可引起各种慢性并发症(dcc),包括各种大血管和微血管病变,如冠心病、视网膜病变、糖尿病肾病等,糖尿病性大血管病变是导致糖尿病患者死亡的重要原因之一。
dcc发病机制多种,以醛糖还原酶为限速酶的多元醇代谢途径[1]与dcc有着密切的关系。
微卫星dna具有高度多态性,常作为基因与疾病相关性研究标志,随着研究进展,ar基因5’端微卫星位点多态性与dcc关系受到关注。
大多数学者研究此位点多态性与糖尿病性微血管病变的关系,较少学者研究其与大血管病变的关系。
本研究旨在研究ar 5’端(ac)n二核苷酸重复序列的多态性,及其与糖尿病、糖尿病合并冠心病的关系,进而探讨基因变异在糖尿病导致大血管病变的可能作用。
1 资料与方法1.1 一般资料dm组:按1999年who糖尿病诊断标准,随机选取2012年3月~2013年3月于本院内分泌科新诊断的2型dm患者74例,男41例,女33例,平均年龄(56.1±11.3)岁,无冠心病史及糖尿病肾病、视网膜病变等合并史,心电图无st改变。
dm+chd组:选取2012年3月~2013年3月于本院内分泌科住院的2型糖尿病合并冠心病的患者68例,男39例,女29例,平均年龄(65.0±8.1)岁,糖尿病诊断标准如上,chd诊断标准为冠状动脉造影结果示左主干、左前降支、左回旋支、右冠状动脉至少一支狭窄≥50%。
正常对照组:为健康体检者116例,男59例,女57例,平均年龄(37.7±11.2)岁,口服75 g葡萄糖耐量试验正常。
以上所分3组对象具有对照可比性,均为山东汉族人,彼此之间无血缘关系,排除肝脏疾病、肾病综合征、脑血管病变、糖尿病急性并发症、感染、手术等应激情况,无其他代谢性疾病和恶性肿瘤等。
1.2 方法1.2.1 生化指标测定葡萄糖氧化酶法测定血糖,免疫比浊法测定hba1c,chod-pap法测定tc,gpo-pap法测定tg,spd法测定hdl-c,suk法测定ldl-c。
1.2.2 dna提取用solarbio人全血基因组dna提取试剂盒(离心柱型)从外周血白细胞中提取dna,于-20℃保存。
1.2.3 聚合酶链反应(pcr)(ac)n引物参照文献[2],pr1(5’-gaatcttaacatgctctgaacc-3’)pr2(5’-gcccagccctatacctagt3’),均由上海生物工程技术服务有限公司合成。
pcr反应体系为25 μl,含dna模板2 μl,上下游引物各1 μl,tag酶0.25 μl,dntp 0.25 μl,10×buffer 2.5 μl,灭菌三蒸水18 μl。
反应参数:94℃始变性5 min,94℃变性30 s,56.3℃退火30 s,72℃延伸2 min,共32个循环,最后于72℃孵育10 min,产物置于4℃保存。
1.2.4 方法取5 μl pcr产物用2%琼脂糖凝胶电泳,凝胶成像系统检测,证实扩增片段是否在预计132~144 kb之间。
然后取5 μl pcr产物进行8%变性聚丙烯酰胺电泳,硝酸银染色,凝胶成像系统检测。
选取基因型为纯合子的dna样本,pcr扩增产物送上海生物工程测序,并将其作为标准,与其他样品pcr产物进行变性聚丙烯酰胺电泳,确定基因型。
1.3 统计学处理统计分析用spss17.0软件完成,计量资料用(),等位基因频率比较用x2检验,p0.05),dm+chd组与dm组相比7种等位基因分布频率差异无统计学意义(p>0.05)。
见表2。
表2 ar基因(ac)n等位基因在各组中分布频率[n(%)]等位基因正常对照组(n=116)dm组(n=74)dm+chd组(n=68)z-6 6(2.59) 4(2.70) 4(2.94)z-4 14(6.03)10(6.76) 4(2.94)z-2 26(11.21) 16(10.81) 14(10.29)z 82(35.34) 54(36.49) 52(38.24)z+2 76(32.76) 50(33.78) 48(35.29)z+4 24(10.34) 18(12.16) 12(8.82)z+6 4(1.72) 2(1.35) 2(1.47)3 讨论ar属于还原性辅酶ⅱ(nadph)依赖型醛-酮还原酶家族,存在于神经、肌肉、肾脏、血管等组织中。
ar可催化多种亲水性的醛还原为相应的醇[3]。
高血糖状态下ar激活导致山梨醇在细胞内的蓄积,扰乱细胞内游离肌醇的利用。
高血糖的毒性以及随其改变的肌醇含量下降和多元醇活性增加、血管通透性改变等是冠脉粥样硬化发生、发展的重要原因,具体机制如下所述[4]:高血糖引起的多元醇活性增加抑制了组织肌醇池水平达到细胞外肌醇水平的能力,导致散在的磷脂酸肌醇池消耗,各种代谢和生物调节过程发生改变,造成血管平滑肌功能紊乱、血管内皮损伤;糖尿病早期出现毛细血管壁细胞损伤,病变血管扩张,邻近正常毛细血管流过的血液减少,细胞逐渐丧失,最后成为无功能血管,因而大血管壁的血液供应出现障碍,供氧不足,最终导致糖尿病大血管病变,尤其主动脉和冠状动脉粥样硬化。
1995年ko等[5]的研究确定了ar基因5’端微卫星位点,发现7种等位基因,其中z-2等位基因与糖尿病视网膜病变早发有关。
陆续有学者对此微卫星位点研究,同样有一些学者发现(ac)n重复序列与2型糖尿病视网膜病变有相关性[6-7],也有一些学者认为与糖尿病肾病有相关性[8-9]。
多数研究此微卫星位点与糖尿病性微血管病变的关系,研究结果不一。
本研究通过pcr扩增、基因测序等技术对山东地区2型糖尿病患者ar基因5’端二核苷酸重复序列多态性分析,得出7种等位基因为z-6~z+6,这与ko等[5]研究一致。
比较正常对照组、糖尿病组、糖尿病合并冠心病组7种等位基因分布频率,各组间结果差异无统计学意义,说明ar基因5’端二核苷酸重复序列多态性等位基因不是糖尿病、糖尿病合并冠心病的独立危险因素。
糖尿病大血管病变是血糖控制不良、多元醇活性增加、肌醇数量减少,及生活习惯、环境等多方面因素共同作用的结果。
另外本研究ar基因5’端微卫星位点基因多态性与糖尿病性大血管病变无明显相关,可能与样本含量相对较小、人种、地域、环境等有关,我们需完善样本大小、选择不同人种等进一步探讨,以便为以后糖尿病合并冠心病临床治疗在基因水平方面提供更加有效途径。
醛固酮合成酶基因多态性与2型糖尿病合并高血压及普伐他汀疗效的关系
•基层园地•醛固酮合成酶基因多态性与2型糖尿病合并高血压及普伐他汀疗效的关系黄红梅,羊暑艳,杨茂君成都市双流区第一人民医院(四川大学华西空港医院)内分泌科•四川成都610200摘要:目的分析醛固酮合成酶(C’y P l l B2)基因r S531564位点多态性在2型糖尿病(T2D M)合并原发性高血压(E H)患者中的分布特征,探讨该遗传多态性对普伐他汀改善T2D M合并高血压患者动脉粥样硬化程度疗效的影响。
方法选取2018年1月至2019年5月成都市双流区第一人民医院内分泌科收治的T2D M合并E H患者(T2D M+E H组)310例,单纯T2D M患者(T2D M组)170例,同期健康人群120人(对照组)为研究对象,人院采集空腹肘静脉血测定血脂水平.T a q m a n荧光探针法测定C'y P l l B2基因r.v531564位点基因型。
丁2DM+E H组经普伐他汀治疗6个月,治疗前后检测颈动脉内膜中层厚度(I M T)及血脂和高敏C反应蛋白(h s C R P)水平。
分析C T P11B2基因《53〗564位点基因型分布情况及其与普伐他汀疗效的相关性。
结果T2DM+E H组体质量指数、收缩压、舒张压、空腹血糖、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油、总胆固醇高于对照组,体质量指数、收缩压和舒张压高于丁201^组(均/3<0.05);基因型(:(:和等位基因(:分布频率比较,对照组>丁201^组>丁201^十£^^组(P<0. 05);基因型G G/GC'患者I M T、h s C R P、总胆固醇、三酰甘油、LD L-C高于C.C患者(P<0.05);普伐他汀治疗6个月后.T2DM+E H组患者I M T、h s C R P、总胆固醇、三酰甘油、LDL-C显著降低(P<0. 05),基因型G G/G C与C C患者治疗前后I M T、h s C R P、总胆固醇、总胆固醇、三酰甘油、LDL-C差值的差异无统计学意义(P>0.05)。
2型糖尿病合并冠心病患者的同型半胱氨酸水平及代谢关键酶基因多态性特点
文章编号 :100028020 (2009) 0120039204
ห้องสมุดไป่ตู้
卫 生 研 究
JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH
2 型糖尿病合并冠心病患者的同型半胱氨酸 水平及代谢关键酶基因多态性特点
罗丹 鄢盛恺1 程歆琦2 宋耀虹2
本研究将分析中国北方地区糖尿病合并冠心病患者的 Hcy 水 系包括 :引 物 013μmolΠL , dNTP200μmolΠL ,10 ×buffer 5μl , MgCl2
平及 MTHFR C677T、CBS844 ins68 基 因分 布特 点 ,探讨三者与 2 115mmolΠL , Taq 酶 215U , 基因组 DNA015μg , 总体积 50μl 。反应
产物经 Hinf I 酶切 ,酶切产物进行电泳 检测 。CBS 844ins68 多 态性检测 :检 测每位 受 CBS 844 ins68 位 点的基 因多 态性 。根 据参考 文 献[3 ] 设 计下 列 引物 ,正 义 链 : 5′2CTG GCC TTG AGC
(DM + CHD 组) 70 例 , 均 为北 京协 和医 院心 内科 因冠 心病 住 院的糖尿病患者 ,男 39 例 ,女 31 例 ;年 龄 ( 6119 ±612) 岁 。单
空军总医院临床检验中心 ,北京 100036
Vol. 38 No. 1 Jan. 2009 3 9
·论著·
达能营养中心 DANONE INSTITUTE CHINA
青年科学工作者论坛 Young Scientists′Forum
摘要 :目的 探讨中国北方地区糖尿病合并冠心病者同型半胱氨酸 ( Hcy) 及其代谢相关酶亚甲基四氢叶 酸还原酶 (MTHFR) C677T及胱硫醚β2合成酶 (CBS) 844 ins 68 基因多态性的特点 。方法 研究对象 均为北方 汉族人群 ,包括无血缘关系的 70 名糖尿病合并冠心病患者 、71 名糖尿病患者和 85 名健康人群 。应用荧 光偏 振免疫法 (FPIA) 测定 Hcy 水平 ,应用微粒子酶免分析免疫法 (MEIA) 测定血浆叶酸 、维生素 B12浓度 ,同时 测定
血管紧张素转换酶2基因A9570G多态性与2型糖尿病合并冠心病的相关性研究
+C HD组 G 等位 基 因频 率 及 G 基 因型 频 率 高 于对 照 组 及 T D 组 , 异 有 统 计 学 意 义 ( =4 7 I P=0 0 9及 Y =4 9 3 2M 差 Y .8 , .2 ! .3 , P=0 06 ; 女 性 .3组 间 等 位 基 因 频 率 及 基 因 型 构 成 差 异 均 无 统 计 学 意 义 ( ! . 3 , =0 9 I及 Y .2 )在 Y =0 0 7 P .8 != i2 3 P = .4.
1 .De a t n f Emeg n’ p rme t r e e o ,Na saC nr lHop t l JGu n nh e ta s i ’ a g ao
/ l C t nOu n d n o ic ,Gu n z o 5 5 2 1d i i a g o g Pr vne 0 y a g h u 1 7; .De a t n f C r ilg De a t n f Eme— 1 4 p rme t a doo y, o p rmet r o g n3, De a t n f En o 7 lg Z u n s t l }l td t o te nMe ia ies y, a g e  ̄、一 p rme t d eioo o rt h j gHopi i a a A} ii e S uh r d c lUnv ri Gu n 一 a o t
例 , 有 患 者 按 是 否 并 发 CHD 分 为 T2 所 DM + CHD 组 和 T2 DM 组 , 照 组 1 0例 为 健 康 体 检 者 . 用 聚 合 酶 链 反 应 和 限 制 性 对 0 应
内切 酶 片段 长度 多态性 的 方 法 检 测 A E C 2基 因 A9 7 G 多 态性 , 5( ) 综合 分析 AC 2基 因 A 5 0 多 态性 与 T DM 并 发 CH 的 E 97G 2 D 关 系 。结 果 : 男性 , 照 组 和 T D 组 等 位 基 因频 率 及 基 因型 构 成 差 异 均 无 统 计 学 意 义 ( =0 0 4 P=0 8 6 . T D 在 对 2 M Y .2 . . 7 ) 但 2 M
Lp-PLA2与2型糖尿病合并冠心病的相关性
D01:10.19392/ki.1671-7341.201718206Lp-PLA&与2型糖尿病合并冠心病的相关性金大鹏1武英伟2!理论研究________________________________________________________________________________科技风2〇17年9月下'承德医学院附属医院心脏内科河北承德〇67000;2.承德医学院附属医院检验科河北承德067000摘要:目的:探讨血浆脂蛋白相关磷脂酶A)(L p-P L A2)与2型糖尿病(T2D M)合并冠心病(C H D)的关系。
方法+T2D M合并C H D组60例,T2D M无血管并发症组50例,健康体对照组50例,评估L p-P L A2水平、阳性率及与疾病的相关性。
结果+L p-P L A2水平及阳性率T2D M合并C H D组、T2D M组高于对照组,T2D M合并C H D组高于T2D M组(P均<0.05)。
L p-P L A2与T2D M合并C H D及T2D M均呈正相关关系(P<0.05)。
结论+T2D M合并C H D及T2D M患者L p-P L A2水平明显升高,L p-P L A2水平与T2D M 合并C H D密切相关,检测L p-P L A2对预测T2D M合并C H D具有一定的临床价值。
关键词:血浆脂蛋白相关磷脂酶A);2型糖尿病;2型糖尿病合并冠心病糖尿病慢性血管并发症是患者死亡及致残的首要原因,其中75%患者死于冠心病(C H D)⑴。
2型糖尿病(type2 diabetesm el l i t U S,T2D M)约占糖尿病的90%[2],存在高水平的炎症反应。
血浆脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A),L p-P L A)) 是一种血管炎性指标,是 C H D 的一个独立预测因子[3,4]。
《2024年MCP-1、PAPP-A、GSH-PX与冠心病合并糖尿病的相关性研究》范文
《MCP-1、PAPP-A、GSH-PX与冠心病合并糖尿病的相关性研究》篇一一、引言随着人口老龄化进程的加速和不良生活习惯的增多,冠心病的发病率呈现出持续上升的趋势。
与此同时,糖尿病作为冠心病的主要并发疾病,两者的关联日益明显。
本研究的目的是探讨MCP-1、PAPP-A和GSH-PX与冠心病合并糖尿病的相关性,以期为临床诊断和治疗提供新的思路和依据。
二、研究背景MCP-1(单核细胞趋化蛋白-1)、PAPP-A(骨磷蛋白肽A)和GSH-PX(谷胱甘肽过氧化物酶)均为生物标志物,与心血管疾病和糖尿病的发生、发展密切相关。
在冠心病合并糖尿病患者中,这些生物标志物的水平变化可能为疾病的发生和发展提供线索。
三、研究方法本研究采用回顾性分析方法,收集了冠心病合并糖尿病患者和健康人群的血液样本。
通过检测血液中MCP-1、PAPP-A和GSH-PX的浓度,分析这些生物标志物与冠心病合并糖尿病的相关性。
同时,结合患者的临床资料,如年龄、性别、病程等,进行综合分析。
四、结果1. 生物标志物水平比较:与健康人群相比,冠心病合并糖尿病患者血液中MCP-1、PAPP-A和GSH-PX的浓度均显著升高(P<0.05)。
2. 生物标志物与疾病严重程度的关系:随着冠心病病情的加重和糖尿病病程的延长,MCP-1、PAPP-A和GSH-PX的浓度呈上升趋势。
3. 生物标志物与临床指标的关系:MCP-1、PAPP-A和GSH-PX的浓度与患者的年龄、性别、病程等临床指标具有一定的相关性。
其中,年龄越大、病程越长,生物标志物的浓度越高。
4. 相关性分析:通过统计分析发现,MCP-1、PAPP-A和GSH-PX的浓度与冠心病合并糖尿病的发生、发展密切相关(P<0.05)。
其中,MCP-1和PAPP-A的浓度与冠状动脉粥样硬化的程度呈正相关,而GSH-PX的浓度则与患者的血糖水平呈正相关。
五、讨论本研究表明,MCP-1、PAPP-A和GSH-PX的浓度在冠心病合并糖尿病患者中显著升高,且与疾病的严重程度和临床指标具有一定的相关性。
载脂蛋白A5与2型糖尿病合并冠心病相关性分析
G hna g l tp yi oyD p r et teH l u t nt n l ec H si l H bi H nsu 0 3 0 uC uf a .Ee r hs l eat n, h ai nI e ai a P ae opt , ee, egh i 50 0 co og m x nr o a
河北 中医 2 1 5月第 3 0 0年 2卷第 5期
∞蠹 蔓篡誊 ≥。 要 薯
Hee JT M, y 00, o 3 , o5 bi C Ma 1 V l 2 N . 2
7 83
● 医l I 代 = 药
载脂蛋 白 A 5与 2型 糖 尿 病 合 并 冠 心病 相 关 性 分 析
醇 (D L L—c 、 P A 、 P B 0 。结果 ) A O 1 A O 10
① 观察组 和对 照组的 A O 5水 平较正 常组 降低 ( <0 0 ) 观察 PA P .5 ,
组较对照组 降低 ( < .5 , 察组和对照组的 T T P 00 )观 C、G和 L L—C均较正 常组 明显 升高(P < .5 , D 00 ) 观察组
h s tl d vd d i t h e r u s by die s o pi , ii e no t r e g o p s a e, Amo g te ,6 we e ai n sfo d p rme to n c ioo y i a n h m 0 r p te t m e a t n fe do rn lg n r
2型糖尿病合并冠心病患者血清炎性标志物变化与冠状动脉病变的相关性分析
2型糖尿病合并冠心病患者血清炎性标志物变化与冠状动脉病变的相关性分析摘要】目的:探讨2型糖尿病合并冠心病患者血清炎性标志物变化与冠状动脉病变的相关性分析。
方法:被纳入本次研究的50名2型糖尿病合并冠心病患者与50名2型糖尿病患者均为2015年9月至2016年9月在我院接受治疗的患者,分别对两组患者的PCT、Hcy、hs-CRP水平进行对比,分析患者血清炎性标志物变化与冠状动脉病变对疾病的影响。
结果:观察组2型糖尿病合并冠心病患者PCT (0.84±0.13)、Hcy(12.93±4.42)、hs-CRP水平(3.29±1.34)明显高于对照组2型糖尿病患者PCT(0.13±0.03)、Hcy(6.2±2.42)、hs-CRP(1.83±0.44)水平,两组患者的临床数据均具有统计学意义(P<0.05)。
结论:通过对患者的PCT、Hcy、hs-CRP水平进行分析,2型糖尿病合并冠心病患者血清炎性标志物变化、冠状动脉病变与心血管事件的发生密切相关,通过患者的PCT、Hcy、hs-CRP水平,可尽早及时的对患者的心血管事件进行预防,降低心血管事件的发生。
【关键词】2型糖尿病合并冠心病;血清炎性标志物;冠状动脉病变【中图分类号】R587.1 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2018)05-0123-02动脉粥样硬化[1]的发生与患者是否发生炎症反应密切相关,而血清炎症因子是一个观察患者是否出现心血管疾病的重要指标,血清超敏C反应蛋白的升高是导致患者发生冠心病的重要因素[2]。
而多数的临床研究数据表明,绝大多数心血管疾病患者均有不同程度的降钙素原升高;动脉粥样硬化是由于患者的高同型半胱氨酸水平的升高,使得患者的血栓形成加速、炎症反应增加、以及血管内皮功能障碍等,进而诱发心血管疾病[3]。
本次研究中,选取了50名2型糖尿病合并冠心病患者与50名2型糖尿病患者,100名患者均为2015年9月至2016年9月在我院接受治疗的患者,分别对两组患者的PCT、Hcy、hs-CRP水平进行分析,研究患者血清炎性标志物变化与冠状动脉病变之间的联系。
醛糖还原酶抑制剂对大鼠肾脏醛糖还原酶基因表达的影响
型对照组 ( M组)之间没有显著性差异 (>. ) P 0 5. 0
() 组、L组、H 组大鼠肾脏 A m N 水平明显高于 C组 2M R R A
(<. ) 给予醛糖还原酶抑制剂依帕司他 4 P 0 5; 0 周后, 组、 L H
组 A mR A 水平低于 M 组 (< . ) R N P 0 5 ,但 L组和 H组之间 0
天峰医 科大李中 铸吸士嵘 位恰次
摘
要
目的: 糖尿病肾病是糖尿病最严重和常见的慢性并发症之一。 流行病学研 究发现糖尿病肾病的发生在不同的种族和人群中差异很大, 一些糖
尿病患者无论血糖如何严格控制仍可出现糖尿病肾病等并发症; 相 反, 一些长期血糖控制差的患者却从不出现慢性并发症, 提示遗传 因素参与了糖尿病肾病的发生,大量研究显示醛糖还原酶 ( R A)
A mN a im N R A及 p cn A水平, R -t R 观察依帕司他对A m N / R A R
P cn A是否 有影响。 -t m N ai R
结果: 1 肾病各组 ( () M组、 组、 L H组) 的肾功能相关指标均明显异于
正常对照组 ( 0 5,但给药组 ( C组)(< . ) P 0 L组、H组)与模
是其候选基因之一。 醛糖还原酶抑制剂 (R )已 A I 经应用于临床治
疗中, R 在 D 但关于 A I N治疗中的作用的 报道结果不一,本研究 旨 在观察A I R 依帕司他对大鼠肾脏 A m N 水平和肾功能相关 R A R
指标的影响。 方法:运用在单侧肾结扎的基础上注射 S Z T 的方法建立大鼠 糖尿病肾病
npr a y p a o l t l bt i o ic t us nr acno , t r n s ni n eh pt g o h r o n m o r s u he s i fa d e g d e ne w e t r p g n l t ad p wt t h g us e ea st g us hu i r c bte e fe e n o i pr a n r v e o io
醛糖还原酶基因多态性及其活性与广西汉族2型糖尿病微血管病变关系的研究
【 关键词 】 2型糖尿病 ; 糖尿病微血管病变; 醛糖还原酶; 基 因多态性 ; 广西; 汉族
【 中图分类号】 R 5 8 7 . 1 【 文献标识码】 A 【 文章编号】 0 2 5 3 . 4 3 0 4 ( 2 0 1 3 ) 1 0 . 1 2 9 1 . 4 0
D OI : 1 0 . 1 1 6 7 5 / j . i s s n . 0 2 5 3 — 4 3 4. 0 2 0 1 3 . 1 0 . 0 6
S t u d y o f As s o c i a t i o n b e t we e n P o l y mo r p h i s m a n d I t s Ac i t v i t y o f Al d o s e Re d u c t a s e Ge n e a n d Ty p e 2 Di a b e ic t Mi c r o a n g i o p a t h y o f Ha n Na t i o n a l i t y i n Gu a n g  ̄ d
WU L i — l i , S H E N Y u , HA N G n ・ h u a n , L U O Z u o - j i e , Q I N Y i n - f e n , 1 I L i , Z H OU. 1 i a , X I A N J i n
中国人群2型糖尿病患者付氧酶基因多态性与冠心病关系的研究
7 7F GC-AGTACTTGATGTAGCTCTTTC 194
7R TAATTATCACTCTGCAGACTT
8 8F GC-GTGTTTTACTTTATGTCTTGTT 249
8R AAGTCACTTATCTGGTTCATT
4.序列分析:割下DGGE纯合子型异常条带,溶于去离子水中,以浸润液内DNA为模板,用相同条件进行PCR再扩增。产物纯化后从正反链同时进行荧光末端标记自动测序。
关键词:糖尿病,非胰岛素依赖型; 冠状动脉疾病; 聚合酶链反应; 付氧酶; 变性梯度凝胶电泳
The relationship between paraoxonase gene polymorphism and coronary artery disease in type 2 diabetes mellitus in a Chinese population
9 9F GC-GCATAAGGTTGTTTTAAGTGAC 295
9R GCCTCAGTTTCTATGGCATG
注:“GC-”=5' CGCCC GCCGC GCCCC GCGCC CGTCC CGCCG CCCCC GCCGC 3'
3.变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析:灌制40%~70%变性梯度(以含7mmol/L尿素+40%甲酰胺溶液作为100%变性液浓度)的7.5%聚丙烯酰胺凝胶,上样后80V电泳16h,溴化乙锭染色,紫外灯下观察结果。
二、实验方法
1.基因组DNA制备:采外周血5ml,溶解红细胞后,用蛋白酶K消化法和酚/氯仿抽提白细胞中基因组DNA。
2.聚合酶链反应(PCR)引物及条件:应用Bio-Rad公司MacMelt软件设计9对引物(表1),扩增所有外显子及其两翼部分内含子序列,根据PCR扩增片段的模拟电泳解离行为,在一侧引物的5’端加由40G/C碱基组成的“GC-夹”,使PCR产物一端形成熔点(Tm)较高不易解链的“夹子”。在50μl PCR扩增体系中,基因组DNA 200~500ng,dNTP 0.2 mmol/L,引物0.15~0.45μmol/L,MgCl2 1.5~2.0 mmol/L,1×缓冲液(Tris-HCl 10mmol/L pH 8.3,KCl 50mmol/L,0.01%明胶),Taq DNA聚合酶(Promega公司)1U。经94℃变性5分钟,再经94℃(变性),45秒;51℃~62℃(退火),1分钟;72℃(延伸),1分钟,循环扩增35个周期,72℃继续延伸10分钟。
