微生物标准操作规程9

焉耆县人民医院检验科微生物室

标准操作文件文件编号：WSW-SOP-007

版本号：2007 第1次修改

编写者：肖振清 冶辉审核者：许时菲修订日期：2012年1月15日

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M—H培养基配制标准操作规程

1．目的

规范M—H培养基配制操作规程，保证培养基质量。

2．原理

M—H培养基用Mueller-Hinton琼脂(水解酪蛋白琼脂)配制，淀粉为保护性胶体，能对抗细菌中的毒性物质，水解酪蛋白含多种氨基酸，牛肉浸膏能提供细菌氮源的主要营养物质。药敏试验中，为保证结果重复性及抑菌环的大小、清晰，因此培养基不含对抗生素及磺胺药物的拮抗剂。

3．用途

用于普通细菌的抗菌药物敏感试验。

4．配方

成品OXOIDM—H干粉38 g、蒸馏水1 000ml，pH 7.1～7.5。

5．操作步骤

将上述成分混合，校正pH。121~C高压灭菌15分钟。冷至50℃左右，无菌定量吸取25ml于直径9 cm的无菌平板内，凝固后冷藏备用。琼脂层厚4 mm。

6．储存条件

2～8℃冰箱。

7．有效期

实验室自行规定，确保培养基质量。

8．质量控制

8.1 质控频度 每次新配制时做质控。

8.2 质控方法及结果见表5—20。

表5—20配制M H培养基质最控制方法及结果

试验方法结果

无菌试验

<100块抽检5%,>100块随即抽取10块，35℃培

养24h

无细菌生长

质量检测在M-H培养基上涂布粪肠球菌ATCC29212，用甲氧卞啶/磺胺甲噁唑纸片进行药敏试验，35℃培

养24h 出现一个边缘清晰的抑菌圈，

直径应≥20mm

平行试验做质控时，取新旧批号的培养基同时做　

9．注意事项

9.1 倾注琼脂量为25 ml，平板深度4 mm。若太薄，易产生假

敏感。若太厚，平皿中的抗生素往下扩散而使抑菌环变狭窄，产生假耐药性。

9.2 PH会影响某些抗生素的活性。试验时不可将平板培养

在CO2培养箱中，否则会在琼脂的潮湿表面产生碳酸而降低PH值，将影响各种抗生素的扩散速度、抑菌环大小。