胱抑素C(Cys-C)测定标准操作程序
胱抑素C校准品产品技术要求模板
医疗器械产品技术要求编号：胱抑素C校准品1.产品型号/规格及划分说明1.1规格6×1mL、6×10mL、6×100mL。
1.2 组成：在水基质中添加胱抑素C纯品，牛血清（稳定剂）<0.1%。
各校准品的浓度及编号为：1号校准品（简称：CYSC 'S 1#）： 0.0mg/L；2号校准品（简称：CYSC 'S 2#）：（0.3～0.7）mg/L；3号校准品（简称：CYSC 'S 3#）：（0.7～1.3）mg/L；4号校准品（简称：CYSC 'S 4#）：（1.5～2.5）mg/L；5号校准品（简称：CYSC 'S 5#）：（3.0～5.0）mg/L；6号校准品（简称：CYSC 'S 6#）：（6.0～10.0）mg/L。
1.3 适用范围与XX生化股份有限公司的胱抑素C测定试剂盒配套使用，用于建立系统校准曲线。
1.4 产品储存条件及有效期(体外诊断试剂适用):在（2～8）℃避光保存，有效期为12个月。
2.性能指标2.1 外观：无色澄清液体；标签内容清晰。
2.2 装量：液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 溯源性：根据GB/T 21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，该校准品溯源至参考物质（ERM-471/IFCC）。
2.4 准确度用校准品配合试剂检测参考物质（ERM-471/IFCC），测值与参考物质靶值的相对偏差应在±10%范围内。
2.5 重复性2号校准品：CV＜10%。
3～6号校准品：CV＜5%。
2.6 稳定性2.6.1 效期稳定性：按照标签条件保存，产品有效期为12个月。
在效期满后30天内其中一天检测，其外观、准确度、重复性应符合2.1、2.4、2.5的要求。
2.6.2开瓶稳定性：开瓶后，在(2～8)℃保存，可稳定14天。
在第15天检测，其外观、准确度、重复性符合2.1、2.4、2.5的要求。
检验科生化胱抑素C测定的标准操作规程
检验科生化胱抑素C测定的标准操作规程【目的】体外检测血清胱抑素C (CysC )含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理当血清中的胱抑素C与试剂中的抗体结合后，形成免疫复合物，使反应液产生浑浊，在540〜6nm 波长测定反应液浊度，其浊度高低反映血清中胱抑素C(CysC)的含量。
二、试剂1.试剂本科使用北京世纪沃德生物科技有限公司CysC试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：2.校准要求北京世纪沃德生物科技有限公司提供的配套校准品。
校准频次全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
三、操作样品为血清。
本法为终点法。
参数见后附，附录A。
试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。
四、计算△A测c= X C△A标准°式中：c测定血清胱抑素C浓度，mg/L;△A测定一一标本管吸光度；△A标准标准管吸光度；C°校准液中胱抑素C浓度，mg /L;△ A =A2-A1五、质控程序1.建议采用朗道水平2（正常范围质控）和水平3 （病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。
胱抑素操作程序
胱抑素操作程序1.目的规范胱抑素检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。
3.术语4．测定原理4．1测定方法：免疫比浊终点法。
4. 2 测定原理：样本中的Cys-C与超敏化的抗Cys-C抗体胶乳颗粒试剂反应形成免疫复合物，在570nm 波长处检测吸光度，其变化程度与样本中的Cys-C含量成正比。
用已知浓度的Cys-C标准做标准曲线，样本的浓度根据测出的吸光度从做好的标准曲线中得出。
5．标本5.1血清或血浆。
室温（25℃）稳定6天，密封保存于4℃可以稳定12天，-80℃稳定超过14个月。
5.2标本采集：见生化标本采集程序。
6.试剂6.1试剂来源：金斯尔试剂。
6.1.1组成包装规格：R1 45ml×1 R2 15ml×16.1.2试剂准备试剂为液体双试剂，开瓶即可使用，用后及时置于2～8℃避光保存。
6.1.3试剂稳定性2 - 8℃避光保存稳定至有效期。
已经开启的试剂注意避免污染。
7.仪器参数设定OLYMPUS AU2700参数设定：金斯尔试剂仪器参数设定具体参见试剂厂家提供的相应仪器参数说明书。
8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。
8.1.2仪器经过大保养后。
8.1.3挪动仪器的安装地点。
8.1.4更换试剂批号。
8.1.5室内质控失控。
8．2 AU2700金斯尔试剂系统的校准：8.2.1 准备：金斯尔配套生化校准物.8.2.2 保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存有效期，开启后注意避免污染。
8.2.3保存位置：低温冰箱-20℃。
8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的相应位置放定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。
9．室内质控及失控纠正：见临床生化室内质控程序9．1质控物来源：柏乐液体质控品（批号： 45613）。
胱抑素C(Cys C)
北京索莱宝科技有限公司
胱抑素C（Cys C）
货号：C6180
规格：10mg
保存：4℃存放，或分装后-20℃或-80℃长期保存
来源：基因重组表达
分子量：约13kDa左右（SDS-PAGE检测）
纯度：≥90%（SDS-PAGE检测）
保存缓冲液：PBS缓冲液，pH7.4
产品说明：
Cys C是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，也被称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白，广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中，是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质，分子量为13.3KD，由122个氨基酸残基组成，可由机体所有有核细胞产生，产生率恒定。
循环中的胱抑素C仅经肾小球滤过而被清除，是一种反映肾小球滤过率变化的内源性标志物,并在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代谢分解，不返回血液，因此，其血中浓度由肾小球滤过决定，而不依赖任何外来因素，如性别、年龄、饮食的影响，是一种反映肾小球滤过率变化的理想同源性标志物。
正常情况下，Cys C在血清和血浆中的浓度为0.51-1.09mg/L(参考范围)。
当肾功能受损时，Cys C在血液中的浓度随肾小球滤过率变化而变化.肾衰时，肾小球滤过率下降，Cys C在血液中浓度可增加10多倍，若肾小球滤过率正常，而肾小管功能失常时，会阻碍Cys C在肾小管吸收并迅速分解，使尿中的浓度增加100多倍。
Cys C是基因工程产品，具有很高的免疫原性。
它可以用于免疫动物产生Cys C抗体，从而用于Cys C 检测试剂盒的核心原料，另外Cys C本身也可以作为校准、质控、参照物质等用于相关的试剂盒和实验检测。
注意事项：
不可用于人体实验。
第1页，共1页。
血清胱抑素C检测评价妊高征肾功能
血清胱抑素C检测评价妊高征肾功能目的对血清胱抑素C检测评价妊高征肾功能进行分析。
方法对研究对象清晨空腹采血进行胱抑素C（Cys-C）检测方法胶乳免疫比浊法。
结果妊高征组与健康对照组各项数据差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论胱抑素C是一种理想的反应GFR（肾小球滤过率）变化的内源性标志物，可用于妊娠高血压早期肾功能损害的诊断。
标签：血清胱抑素C；妊高征肾功能；诊断妊娠高血压综合征简称妊高征，是妊娠晚期常见的并发症，临床特点主要以高血压、水肿、蛋白尿、抽搐、昏迷、心衰等，及时诊治并动态监测对患者及胎儿有重要意义。
肾衰早期无特异性明显症状及体征，更无明显形态学变化[1]。
目前常用肾功能（血肌酐、尿素氮、肌酐清除率、血尿酸）检测方法为主，但不能灵敏地反映肾功能早期损害，而且受性别、年龄、饮食、生理变化、操作等方面的影响，会导致漏诊[2]。
本文检测各期妊高症患者与正常晚期孕妇、健康体检者的胱抑素C（Cys-C）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Cr）、尿酸（UA），探讨个检测项目对妊高征肾功能损害的意义。
1 资料与方法1.1 一般资料选取2013年1月～2014年5月在我院健康体检40例，建卡产前检查孕妇157例，孕前无心、脑、肾脏及高血压等疾病。
其中正常晚期孕妇40例，轻度妊娠高血压（血BP≦140/90mmHg，尿蛋白++）组70例，中度妊娠高血压（血压140/90 mmHg～160/110 mmHg，尿蛋白+）组35例，重度妊娠高血压（血压BP>160/110 mmHg，尿蛋白2+～4+）11例。
1.2 方法清晨空腹采集静脉血3 mL，2h内检测。
胱抑素C（Cys-C）检测方法胶乳免疫比浊法。
试剂浙江泰斯特生物技术有限公司：BUN、Cr、UA试剂中生北控生物科技股份有限公司。
检验仪器Accute TBA-40FR型生化分析仪。
各检测项目室内质控在控。
1.3 统计学方法采取统计学软件SPSS 21.0对数据进行分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。
半胱氨酸蛋白酶抑制剂C测定的检验程序验证及三种测定方法比较的开题报告
半胱氨酸蛋白酶抑制剂C测定的检验程序验证及三种测定方法比较的开题报告一、研究背景半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C，Cys C）是一种由146个氨基酸组成的低分子量蛋白，分子量约为13kDa，主要由于肾小球滤过机制清除而在血液中存在，是一种很好的肾小球滤过率（GFR）指标。
Cys C与肌酐相比，其受年龄、肌肉量、性别、肾外脏器等因素的影响较小，且呈现更为准确和灵敏的动态变化。
目前，Cys C测定已成为临床上评估肾功能的重要方法，尤其在早期肾病筛查、老年人肾功能监测等方面具有广泛的应用价值。
二、研究目的1.对Cys C的检测程序进行验证，确定检验的准确性和可靠性。
2.比较三种常见的Cys C测定方法在准确性、精确度和操作性上的优缺点，为临床应用提供参考。
三、研究内容和方法1.检验程序验证中，本研究将采用两组标准样品和两组质控品来检验Cys C的测定程序，其中标准样品采用动态时间点法制备，浓度分别为0.8mg/L和1.2mg/L；质控品分别为低、中、高三档，浓度分别为0.4mg/L、0.8mg/L、1.2mg/L。
通过对比检验结果和理论值，计算准确度和精密度指标，验证Cys C检验程序的准确性和可靠性。
2.对三种常见的Cys C测定方法（nephelometric assay、enzyme-linked immunosorbent assay、particle-enhanced turbidimetric assay）进行比较，分别测定标准样品和人体血清中的Cys C浓度，并计算准确度和精密度指标。
在操作性上对比各方法，包括手部操作时间、样品处理时长等。
四、研究意义和预期结果本研究通过Cys C检验程序的验证和三种测定方法的比较，旨在提高Cys C测定的准确性和精确度，并为进一步临床应用提供参考。
预期结果包括从实验上验证Cys C检验程序的可靠性、比较三种测定方法在准确性、精确度和操作性上的优缺点，并得出结论推荐最优测定方法。
胱抑素C SOP
【方法与原理】样品中的CYS-C与试剂中抗人CYS-C抗体胶乳颗粒发生凝集反应，凝集反应形成抗原抗体复合物而产生浊度，其浊度高低在一定量抗体存在时与样品中CYS-C成正比。
通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中CYS-C的含量。
【标本要求】血清或EDTA血浆，采血后应及时分离，避免溶血，2-8℃可稳定2天。
【仪器】日立7080 全自动生化分析仪【试剂及配套品】1.试剂厂商：利德曼2.试剂：试剂1：0.1mol/L甘氨酸缓冲液试剂2：适量抗人CYS-C抗体的胶乳颗粒3.试剂稳定性：在2-8℃避光密封保存可稳定12个月。
4.质控品：朗道质控液5.校准品：厂家配套校准品【参数设置】1. Sample vol:2.0 uL Dil vol:0 uL Pre-Dilution Rate:12. Reagent 1 vol:200 uL Dil vol:0 uL3. Reagent 2 vol:40 uL Dil vol:0 uL4. wavelength Pri:540 Sec:7005. Point Fst:14 Lst:276. Method:FIXDE Reaction:+7. Linearity:8. Lag Tine:9. Min OD: Max OD:10.Reagent OD Limit:FirstL-2.0000 FirstH2.5000 LastL-2.0000 LastH2.500011.Dynamic range: L0.00 H18.0012.Cal type:Serum13.Correiation factor:See updated information on pararneters【项目校准】1.定期校准，参照厂商说明2.更换试剂批号后，应校准。
3.维护保养之后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
4.质控失控后，在进行其他相应处理后。
胱抑素C(CysC) 测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)性能指标上泰
胱抑素C（CysC）测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）性能指标1.性能指标1.1外观外观应符合表2要求。
表1试剂盒内各组成的外观性状1.2装量液体试剂装量要求不低于标示量。
1.3试剂空白吸光度在主波长处的试剂空白吸光度应≤1.200。
1.4分析灵敏度测定1.00mg/L样本时，吸光度差值（ΔA）应在0.010-0.200范围内。
1.5线性范围1.5.1 试剂盒在[0.20,8.00]mg/L范围内，线性相关系数r≥0.990。
1.5.2 在[0.20,2.00] mg/L范围内，线性绝对偏差应不大于±0.20mg/L；在[2.01,8.00] mg/L 范围内，线性相对偏差应不大于±10%。
1.6精密度1.6.1 重复性变异系数（CV）应不大于5%。
1.6.2 批间差试剂盒批间相对极差R应不大于10%。
1.7准确度相对偏差应不超过±10%。
1.8分析特异性样本中胆红素≤400μmol/L、血红蛋白≤5g/L、脂肪乳≤0.2%、VC≤0.5g/L时，对试剂检测结果的偏差影响应在±10%以内。
1.9校准品正确度量值传递的正确度应符合E≤1。
n1.10质控品赋值准确度在用校准品校准后的生化分析仪上测试定值质控品，结果应在制造商指定的赋值范围内。
1.11校准品/质控品均匀性1.11.1瓶内均匀性：CV应不大于10%。
瓶内1.11.2瓶间均匀性：CV应不大于10%。
瓶间1.12校准品/质控品生物安全性校准品或质控品的HBsAg、HIV抗体、HCV抗体、梅毒螺旋体TP抗体检测应为阴性。
1.13校准品赋值结果及其不确定度的表示方式应使用规范的表示方式，主要表示方式可选择：a）赋值结果±扩展不确定度；b）赋值结果，扩展不确定度。
1.14量值溯源应明确分析物的量值溯源。
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胱抑素C（Cys-C）测定标准操作程序
1.摘要
胱抑素C检测常用于肾功能指标的监控，肾移植患者的术后检测和透析患者肾功能检测。
2.适用范围
程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清、血浆中CysC的浓度。
3.职责
使用AU5811自动生化分析仪进行测定胱抑素C浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,科室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法
上海科华生物工程股份有限公司生产的胱抑素C（CysC）试剂盒采用的是乳胶增强免疫透射比浊法。
5.原理
待测人血清的胱抑素C（CysC）与试剂中包被于聚苯乙烯粒子上的纯化羊抗CysC抗体结合，形成不溶性免疫复合物，该免疫复合物由于包被的聚苯乙烯粒子而使浊度进一步放大，在羊抗CysC抗体足量的情况下，其浊度与人血清中CysC含量成正比，与相同条件下操作的校准品比较，通过剂量/反应曲线求出样本中CysC的含量。
6.仪器
AU5811自动生化分析仪
7.试剂
7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供
7.2试剂瓶内主要成分：Tris-HCL(PH7.4)缓冲液、0.1M 的NaN3、0.1M包被了羊抗CysC
抗体的聚苯乙烯粒子
7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为
12个月。
试剂不可冰冻。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制
8.1校准程序：使用上海科华公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：无。
8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。
8.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》
8.5室间质评：
9.标本
、肝素钠抗凝的血浆样本，避免溶血。
9.1标本为新鲜血清样本，或采用EDTA·Na
2
若不能及时测定，请将血清与凝血块分离或相应抗凝剂抗凝的血浆与血细胞分离后的上清样本，尽快置于-20℃保存，避免反复冻融。
9.2标本拒收：由实验室人员核收送来标本，如有溶血、已被污染、标识不清或与申请
单不符状况，一律要求重新留取标本。
9.3标本处理：收集编号后离心获取血清/血浆以备检测使用。
10.测定程序
10.1分析参数：详见参数表。
10.2操作步骤：签收样本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
10.3获取结果：在AU5811仪器上或AU5811传送的中文系统电脑上查找相应结果。
10.4结果报告：对检验后的结果进行审核，系统分析，判断结果的可报告性。
可报告的
结果直接发报告，对不可报告结果进行复检后发报告。
11.计算
标准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。
无需手工计算，每个标本的结果自动打印
12.废液处理
参阅检验科《安全手册》废液处理标准规程处理。
13.操作性能
13.1可报告范围：本法对CysC检测范围为0-8.00 mg/L。
当样品测定值超过上限时，应
将样品用9 g/L氯化钠溶液作倍比稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。
13.2特异性/干扰：当样品中胆红素浓度≤485umol/L，血红蛋白浓度≤10g/L，乳糜≤2%
时对测定结果的影响可忽略。
13.3灵敏度：本试剂的检测限不高于0.50mg/L。
13.4精密度:重复性CV%≤10% 批间差≤15%
14.注意事项
14.1试剂盒仅用于体外诊断。
测定结果仅作为相关疾病的临床诊断依据。
14.2使用试剂时请根据实际使用量多少，将试剂倒入干净容器再测定，其余试剂盖紧后
放回冰箱。
14.3请等标本有些可能含有感染性成份，因此应以具有感染危险性而充分注意操作。
14.4试剂盒中含有防腐剂叠氮钠，切勿吞咽，避免与皮肤及粘膜接触。
如不慎接触，应
用大量清水冲洗。
如误服，应立即上医院诊治。
15.参考值
健康成年人：0.40-1.10mg/L。
如果结果做为诊断指标应结合病史及其它临床检查结果。
16.临床意义
本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆样本中胱抑素C（CysC）的含量，作辅助诊断用。
人血清或血浆中的胱抑素C是肾小球滤过率的敏感指标。
因此常用作肾功能指标的监控，肾移植患者的术后检测和透析患者肾功能检测。
17.支持性文件
17.1AU5811自动生化分析仪使用说明书。
17.2 AU5811自动生化分析仪分析参数。
17.3上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂说明书。
18.参考文献
18.1John W.Skong and Harry L.Pardue,Clin.Chem.34/2:309-315(1988).
18.2P aul C.Fu and Vlasta Zic, Annals of Clinical and Laboratory Science, V ol.8 No.4:323-329(1978).。