百合花粉生活力测定
淡黄花百合花粉活力及其测定方法比较
淡黄花百合花粉活力及其测定方法比较作者：刘伟丁长春沐建华来源：《江苏农业科学》2015年第04期摘要：用I-KI法、氯化三苯基四氮唑（TTC）法、离体萌发法连续7 d对淡黄花百合（Lilium sulphureum Baker）的花粉活力进行测定，结果表明，I-KI法、离体萌发法、TTC法测定的淡黄花百合花粉活力不完全相同。
I-KI法、离体萌发法所得花粉活力无显著差异。
I-KI 法、离体萌发法所得花粉活力无显著差异，由于I-KI法较离体萌发法简单、成本低、所需时间短，因此是快速测定淡黄花百合花粉活力的最佳方法。
开花第2至第4天花粉活力最高且无显著差异，这几天都可以进行杂交授粉，但从发育的角度考虑，以开花第2天授粉最佳。
关键词：淡黄花百合;花粉活力;离体萌发法;TTC法;I-KI法中图分类号： S682.2+65.03 文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）04-0198-02收稿日期：2014-06-03基金项目：云南省教育厅自然科学研究项目（编号：2013Y582）;文山学院重点学科资助项目（编号：09wsxk 02）。
作者简介：刘伟（1977—），男，湖南祁东人，硕士，讲师，从事植物学研究。
E-mail：liuwei00780@。
百合是世界五大切花之一，也是国内重要的高档花卉。
我国野生百合种质资源丰富，为培育百合新品种奠定了良好的种质资源基础[1]。
花粉是开展杂交育种最基本也是最重要的材料，花粉活力大小对育种效果影响很大，授粉前对花粉活力进行检测至关重要[2]。
许多学者对不同植物的花粉活力测定方法进行研究，常用的方法包括染色法、萌发法[3-7]。
郝瑞娟等比较了亚洲百合、东方百合、麝香百合的部分栽培品种花粉活力的测定方法，认为染色法简单，萌发法准确，育种时应将二者结合使用[8]。
赵兴华等对百合花粉生活力测定、贮藏方法进行了研究[9]。
张福平等研究了影响百合花粉活力的化学因素[10]。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉是植物生殖过程中非常重要的一环，其生活力的测定对于植物繁殖和生长具有重要意义。
花粉生活力测定方法是通过一系列的实验和观察，来评估花粉的生长和发育能力，从而为植物的繁殖提供科学依据。
本文将介绍几种常见的花粉生活力测定方法，希望能够对相关领域的研究者和爱好者有所帮助。
首先，传统的花粉生活力测定方法是通过染色观察花粉管的生长情况。
首先，将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中，然后观察花粉管在一定时间内的生长情况，通过显微镜观察花粉管的长度和形态，从而评估花粉的生活力。
这种方法简单直观，但需要显微镜等设备，且操作较为繁琐。
其次，现代的花粉生活力测定方法中，常用的是荧光显微镜观察法。
通过将花粉与特定的荧光染料结合，使花粉在荧光显微镜下呈现出特定的荧光信号，从而可以清晰地观察花粉管的生长情况。
这种方法操作简便，观察效果明显，对于大规模的花粉生活力测定具有很大的优势。
另外，还有一种常见的花粉生活力测定方法是通过花粉萌发率来评估花粉的生活力。
这种方法是将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中，然后观察一定时间内花粉的萌发情况，通过统计萌发的花粉数量来评估花粉的生活力。
这种方法简单易行，可以在较短的时间内获取较为准确的结果。
除了上述几种方法外，还有一些新兴的花粉生活力测定方法，如分子生物学技术的应用、电子显微镜的观察等，这些方法在花粉生活力测定领域也取得了一些重要的进展。
综上所述，花粉生活力测定是植物繁殖和生长研究中的重要内容，而花粉生活力的准确测定则需要科学、准确的方法。
不同的方法各有优劣，研究者可以根据具体的实验目的和条件选择适合的方法进行花粉生活力的测定，从而为植物繁殖和生长研究提供可靠的数据支持。
希望本文介绍的几种常见的花粉生活力测定方法对相关领域的研究者和爱好者有所帮助，也希望在未来的研究中能够有更多更准确的花粉生活力测定方法被发展和应用。
实验一 花粉生活力的测定
2 染色观察法 （1）碘-碘化钾染色法 先称取0.3g碘和1.3g碘化钾溶于100mL的蒸馏水 中，即成碘-碘化钾溶液。取少量花粉振播到用棉 球擦净的普通载玻片上，然后加水一滴，使花粉 散开，再加一滴碘-碘化钾溶液，盖上盖玻片，置 于显微镜下观察不同的三个视野，凡花粉粒被染 成蓝色的表示具有生活力，呈黄褐色为缺少生活 力的花粉（淀粉遇碘变蓝是淀粉的特性）。 （2）氯化三苯基四氮唑（TTC）法 凡具有生活力的花粉，在其呼吸作用过程中都有 氧化还原作用，而无生活力的花粉则无此反应， 因此当TTC渗入有生活力的花粉时，其脱氢酶在 催化去氢过程中与TTC结合，使无色的TTC变成 TTF而成红色。
通常花粉的形态、花粉中酶的活性以及积 累淀粉（淀粉质花粉）的多少与花粉生活 力密切相关，因此可以利用花粉的形态观 察、过氧化物酶、脱氢酶的活性高低、淀 扮的含量以及在人工培养基上花粉管萌发 的情况作为确定花粉生活力高低的标准。
【实验材料、主要仪器及试剂】 1 实验材料 各种园林植物的花粉。如百合、牡丹、凤仙花、 柳树、菊花、月季、凤仙花、紫茉莉等植物的花 粉。 2 主要仪器 载玻片、凹玻片、盖玻片、解剖针、毛笔、棉球、 显微镜、恒温温箱、瓷盘、镊子、培养皿、玻璃 棒、玻璃铅笔、凡士林、标签、冰箱。 3主要试剂 碘-碘化钾、氯化三苯基四氮唑、 Na2HPO4· 2H2O、KH2PO4、蔗糖或葡萄糖溶液、 H3BO3，Ca（NO3）2，MgSO掌握用形态法、染色法、发芽 法测定花粉生活力的具体技术和方法。 2 观察花粉在人工配制的培养基上的萌 发情况，认识花粉萌发形成花粉管的 外形和伸长过程，为理解植物的生殖 过程奠定基础。
【实验原理】 花粉的生活力因植物种类不同而差异很大。在自 然条件下，大多数植物的花粉从花药散出后只能 存活几小时，几天或几个星期。一般木本植物花 粉的寿命比草本植物的长，如在干燥、凉爽的条 件下，柑桔花粉能存活40～50天，椴树45天，苹 果10～70天，樱桃30～100天，麻栎一年。而在 草本植物中，如棉属花粉采下后24小时存活只有 65％，超过24小时很少存活；多数禾本科植物的 存活时间不超过一天，如玉米1～2天，水稻花粉 在田间条件下经3分钟就有50％丧失生活力，5分 钟后几乎全部死亡，是寿命最短的例子。花粉粒 的类型和生活力也表现了相关性，通常三胞花粉 的寿命较二胞花粉短，如水稻等禾本科植物为三 胞花粉，寿命都是比较短的。
几种百合花粉生活力测定及贮藏条件研究
几种百合花粉生活力测定及贮藏条件研究作者：郭思佳等来源：《江苏农业科学》2015年第09期摘要：以2种野生百合（山丹、有斑百合）、3种切花百合（西伯利亚、索邦、白天堂）和1种栽培百合（兰州百合）为材料，采用离体萌发法测定花粉生活力，研究花粉萌发最适的培养条件和保持花粉活力最适的贮藏条件。
结果表明，西伯利亚和索邦最适培养基配方为5%蔗糖+20 mg/L H3BO3，有斑百合和兰州百合为15%蔗糖+20 mg/L H3BO3，山丹为5%蔗糖+10 mg/L H3BO3，白天堂为10%蔗糖+80 mg/L H3BO3；除有斑百合外，其他百合均在室内散射光照射下花朵完全开放时萌发率最高；低温贮藏有利于保持花粉的活性，-20 ℃条件下贮藏1年，各百合花粉均有一定生命力。
关键词：百合；花粉；生活力；贮藏中图分类号： S682.2+65.03文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）09-0205-03百合（Lilium brownii var. viridulum Baker）为百合科百合属常见本草类植物，扎根处有鳞有茎[1]。
百合赏心悦目，多为观赏用，多彩且花瓣较大，盛开时清新柔美，常被用作室内盆栽、插花，众多园林小榭、高校雅阁里也频现身姿；百合还是常见的食材和药材[2]。
百合品种众多，目前记载的有115种，一半以上在中国被发现和培育，而其中又包括18个变异品种[3]。
目前，市场存在三大百合杂种系列，即东方百合、麝香百合、亚洲百合，生产中均存在抗病性和抗热性差、花色单一等问题，需要通过杂交育种方法培育更为优良的百合新品种[4]，这是获得百合新品种的主要途径[5]。
但是，由于很多百合品种杂合度较高、花粉活性较低且不宜贮藏，不宜作为父本使用[6]。
因此，对百合花粉生活力及其贮藏条件进行研究，对百合杂交育种工作的开展具有十分重要的意义。
对于百合花粉的萌发和贮藏，前人已做过不少研究。
张艺萍等对30个百合品种和2个野生百合的花粉生活力进行测定，结果表明，32个百合品种中，Casa Blanca的萌发率最高[7]；李润根等对万载龙牙百合花粉的萌发进行研究，认为醋酸洋红法测定龙牙百合花粉生活力效果最好[8]；孙晓光等研究亚洲百合精粹的开花习性及花粉特性，确定精粹百合花粉萌发的最适培养基为10%蔗糖+10 mg/L硼酸+10 mg/L氯化钙+0.5 g琼脂[9]；张艺萍等对32个基因型的百合品种进行贮藏条件研究，得出在冷藏条件下花粉萌发率随贮藏时间的推移总体呈下降趋势但下降速度比室温贮藏明显缓慢的结论[10]。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉生活力测定方法是一种评估人们对花粉过敏的程度和生活质量的指标。
它通过采用定量和定性的方法来测定人体对花粉的反应和影响，以便为患者提供相应的治疗和干预措施。
下面我将详细介绍花粉生活力测定方法的原理和步骤。
首先，花粉生活力测定方法需要进行花粉源的采集和制备。
花粉源可以是空气中的自然环境采集或人工培养的花粉。
采集后，需要将花粉样本进行处理和制备，包括去除杂质和保持花粉的活力。
其次，花粉生活力测定方法中常用的技术是皮试和血清学检测。
皮试是一种常用的检测方法，主要通过在患者皮肤表面划一道小口，然后将一定浓度的花粉溶液滴在皮肤上，观察皮肤是否出现过敏反应，如红肿、瘙痒等。
这种方法简单快捷，可以初步筛查患者的过敏反应。
血清学检测是通过采集患者的血液样本，检测血清中花粉特异性IgE抗体水平来评估过敏反应的程度。
常用的检测方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光试验（IFA），这些方法可以检测到血液中特定花粉过敏原的抗体水平，并根据抗体浓度的高低来评估患者的过敏程度。
除了皮试和血清学检测，还可以进行生活质量评估。
这是一种主观的方法，通常通过问卷调查的方式，询问患者对花粉过敏的影响程度和日常生活质量的变化。
问卷通常包括患者的症状、疾病活动、工作和学习能力、社交活动和睡眠质量等方面的评估，以便评估花粉过敏对患者生活的影响。
最后，花粉生活力测定方法可以通过统计分析和数据处理来得出评估结果。
根据皮试和血清学检测的结果、生活质量评估和患者的症状表现等，可以综合评估花粉过敏的程度和生活质量的变化。
这些评估结果可以帮助医生为患者制定个性化的治疗方案，包括药物治疗、免疫疗法和生活调整等。
综上所述，花粉生活力测定方法是评估人们对花粉过敏的程度和生活质量的一种指标。
通过采用皮试和血清学检测、生活质量评估等方法，可以全面分析患者的过敏反应和生活质量的变化，为患者提供针对性的治疗和干预措施。
这种方法对于花粉过敏的预防和管理具有重要的临床意义。
2实验二、花粉生活力测定
前 言
花粉生活力测定在育种 上的应用：
1 ．杂交工作中贮藏花粉 的生活力 2．雄性不育系的鉴定
实验目的：
学习并初步掌握作物花粉生 活力测定的常用方法
测定方法:
（一）I-KI染色鉴定
（二）TTC染色鉴定
（三）花粉粒发芽鉴定
实验方法 I-KI染色鉴定：
正常的成熟花粉粒体积较大， 并含有大量的淀粉粒，遇I-KI 呈紫黑色，不正常的花粉粒体 系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。
实验方法 TTC染色鉴定：
具有生活力的花粉中含有 脱氢酶，它能催化引物使脱下 的氢与TTC结合，生成红色化 合物甲替。凡有生活力的花粉 呈红色，生活力弱的呈浅红色， 无生活力的
在人工培养基上进 行发芽试验，可以比较 准确地判断花粉的生活 力。
实验步骤
I-KI染色鉴定：
用镊子夹一个花药于载玻片 上滴上一滴1%I-KI溶液 用镊子将花药夹碎并把碎片 去干净盖上盖玻片置显微 镜下观察。
实验步骤
TTC染色鉴定：
取花药5-10个用刀片割破两 头—置于指形管中—加 入几滴0.2%TTC溶液盖住 花药置30℃温度染色3060分钟同上压片镜检。
实验步骤
发芽鉴定：
在酒精灯上溶化培养基（20%蔗糖+2%琼 脂） — 用玻棒蘸取溶化的培养基在载玻 片上涂成薄层— 几分钟后涂（抖）上花 粉粒—置加有湿滤纸的培养皿中— 置 30℃培养箱保温—每隔15分钟观察一次 发芽情况—至大部分花粉管长度超过花 粉粒直径时调查100粒花粉，统计发芽率。
实验安排
1．每三人一组，一人做小麦、二人做 油菜；
小麦
油菜
2 ．准备 TTC 染色和发芽试验的材料， 置培养箱保温； 3．调试显微镜，I-KI染色鉴定； 4．TTC染色鉴定、发芽率调查。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉是植物生殖的重要组成部分，其生活力的测定对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
本文将介绍几种常用的花粉生活力测定方法，希望能够对相关领域的研究者和生产者有所帮助。
首先，最常见的花粉生活力测定方法是离体培养法。
这种方法首先需要收集新鲜的花药，然后在适当的培养基上进行培养，观察花粉的萌发情况来判断其生活力。
离体培养法的优点是操作简单，结果可靠，因此被广泛应用于植物育种和种子生产中。
其次，荧光显微镜法也是一种常用的花粉生活力测定方法。
这种方法利用荧光显微镜观察花粉颗粒的形态和结构，通过判断其内部结构的完整性来评估花粉的生活力。
荧光显微镜法对花粉的观察更加直观，能够提供更多的信息，但需要专业的设备和操作技能。
另外，还有一种叫做染色法的花粉生活力测定方法。
这种方法通过在花粉颗粒上涂抹特定的染料，然后观察染色情况来判断花粉的生活力。
染色法简单易行，可以快速得到结果，但对染料的选择和浓度有一定要求。
除了上述方法，还有一些新兴的花粉生活力测定方法，比如电子显微镜法、流式细胞仪法等。
这些方法在技术上更加先进，能够提供更为精细的数据，但也需要更高的成本和专业的操作技能。
综上所述，花粉生活力的测定对于植物育种和种子生产具有重要意义，而不同的方法各有优劣。
在选择具体的测定方法时，需要根据实际情况和研究目的进行综合考虑，以便选择最适合的方法。
希望本文介绍的内容能够对相关领域的研究者和生产者有所启发，推动相关领域的科研工作和生产实践取得更好的成果。
实验：园艺植物花粉生活力测定
天竺葵柱头上的花粉粒
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
蒂氏荚蒾花粉（灰色) 其中一个已开始萌发
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
勿忘草的花粉 最小的花粉粒之一，直径只有0.005毫米
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
花锦葵属植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
桦树的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
柳树花粉粒
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
染色者为发育不良、生活力弱的花粉。观察3~4个视野，
五、方法步骤：
（三）花粉生活力试验
3.取另一载玻片，加少量同种待测花粉，然后在花
粉上滴试剂Ⅰ和试剂Ⅱ各一滴，仔细搅匀，盖上盖
玻片，用镊子轻轻压实。经3～4分钟后，放在显微
镜下检查。
有生活力的花粉呈红色或玫瑰色，无生活力的 花粉为黄色或无色，连续观察3～4个视野，分别记 录有生活力及无生活力的花粉数。
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
凤梨科植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
百合花粉生活力测定
孙永田
（齐齐哈尔大学生命科学与农林学院园艺101，齐齐哈尔 161006）
摘要百合，球根花卉近年来在我国市场需求越来越大，培育新的百合品种是我国花卉科研工作者的工作之重。
通过染色观察发测定百合花粉生活力，本实验采用两种方法为碘-碘化
钾法和α-奈酚法。
关键词百合生活力测定染色观察法碘-碘化钾法α-奈酚法
引言我国球根花卉近年来生产面积不断扩大，特别是百合种球的用量不断增加，根据资料统计2004年国内种植百合的面积达2567hm2，生产切花4.7亿枝，但是每年生产中使用的种球一亿粒以上都是从荷兰进口的。
我国是百合属植物自然分布的中心，原产于中国的约47种，野生百合种质资源丰富，有很多独特的特性。
但是长期以来，我国百合的育种工作远远落后于荷兰、美国、日本等发达国家，充分利用我国丰富的野生百合资源和国外的优良品种资源，培育具有自主知识产权的百合新品种，打破垄断行为，加快百合产业的发展，是我国花卉科研工作者的当务之急。
当前育成的百合新品种中，大部分采用的是常规杂交育种方法，一部分为远缘杂交种。
进行杂交工作之前，熟悉掌握花粉的生活力是育种工作的必要准备。
从花粉生活力作为亲本选择的标准进行亲本筛选，提高杂交授粉成功率。
1 试验方法和试验方案
1.1试验方法
染色观察法
1.1.1碘-碘化钾法（I-KI）
碘-碘化钾溶液的配制：取2g碘化钾溶于5~10ML蒸馏水中，然后加入1g碘，待全部溶解后加入蒸馏水至300ML定容。
取适量新鲜花粉置于载玻片上，加1滴蒸馏水，再加1~2滴碘-碘化钾溶液，盖上盖玻片，置于低倍显微镜下观察。
凡花粉粒被染成蓝色的表示具有生活力，呈黄褐色为缺少生活力的花粉。
1.1.2α-奈酚法
A.配置药液：①将0.20g联苯胺溶于100ml的50%的乙醇中，盛入棕色瓶中，放暗处备用。
②将0.15gα-奈酚溶于100ml的乙醇中，盛入棕色瓶中，放暗处备用。
③将0.25克碳酸钠溶于100ml蒸馏水中，盛入白色瓶中备用。
④将以上三种溶液等量混合，即成“甲液”，盛入棕色瓶中。
⑤将3%过氧化氢，临用前用蒸馏水稀释成0.3%溶液，即成“乙液”，随配随用。
B.制片：取花粉少许，撒入凹型载玻片的凹点内，滴入“甲液”，片刻后再滴入“乙液”，三至五分钟后，在显微镜下观察不同的五个视野。
凡有生活力的花粉为红色或玫瑰红色。
黄色的（不着色的），为无生活力的花粉。
1.2实验方案
取同种百合花，不同生长程度的百合花花粉，分别用两种方法染色实验花粉生活力。
取5
组花粉，每组花粉查看五个视野观察花粉生活力情况，每个视野读书用“，”隔开。
A表示从开裂的百合花花药上采集的花粉，A取三组。
B表示从即将开裂的百合花花药上采集的花粉，B取两组。
2结果与分析
碘-碘化钾法（I-KI）α-奈酚法
具生活力的花粉粒数花粉粒总数具生活力的花粉粒
数
花粉粒总数
A1 34,39,52,49,43 52,54,54,52,51
A2 44,54,27,29,38 49,54,36,32,43
A3 72,52,47,51,38 78,58,53,55,41
B1 42,36,47,33,29 46,39,51,34,31
B2 37,31,28,25,37 39,33,30,29,41 百合花整体生活力较高，从即将开裂的百合花花药上采集的花粉生活力比从开裂的百合花花药上采集的花粉生活力稍强。
3结论与讨论
依据各组平均数测算，A组花粉生活力=87.82%，B组花粉生活力=92.43%，从即将开裂的百合花花药上采集的花粉生活力更高。
参考文献
赵统利，周翔，朱鹏波，邵小斌，李玉娟.百合花粉生活力测定方法的比较研究.江苏农业科学，2006,5:88 赵兴华，张道旭，印东生，李丹，张艳玲.百合花粉生活力测定和贮藏方法研究.北方园艺，2009（2）：172~175
百合花粉生活力测定
班级：园艺122班
姓名：孙永田
学号：2012800456。