单克隆抗体和多克隆抗体的区别

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单克隆抗体和多克隆抗体的区别

单克隆抗体和多克隆抗体的区别

单克隆抗体和多克隆抗体的区别一、单克隆抗体(一)单克隆抗体单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。

通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B 细胞杂交瘤。

1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠B细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。

将这种杂交瘤作单个细胞培养,可形成单细胞系,即单克隆。

利用培养或小鼠腹腔接种的方法,便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体,其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,而且在培养过程中,只要没有变异,不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。

这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。

(二)优势和局限性1.单克隆抗体的优点(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。

(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。

(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。

(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。

2.单克隆抗体的局限性(1)单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。

由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。

(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。

(3)制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高。

(三)应用1.检验医学诊断试剂作为检验医学实验室的诊断试剂,单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点,广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。

多克隆抗体与单克隆抗体的区别

多克隆抗体与单克隆抗体的区别

多克隆抗体与单克隆抗体的区别多克隆抗体特点:1.识别任一抗原上的多个表位。

所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。

2.多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。

3.通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。

抗体制备:制备成本低廉且制备速度较快。

制备过程比单克隆抗体简单。

优点:多克隆抗体可识别任一抗原上的多个表位,因此具有以下优点:a.高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。

但是,这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。

b.可识别多个表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。

c.与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。

d.可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质,还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。

通常是检测变性蛋白质的首选。

f.多表位通常可提升检测的稳定性。

缺点:a.易产生批次间差异。

b.产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。

c.由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。

d.不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。

单克隆抗体​特点:1.不易产生批次间差异。

2.仅由一种抗体亚型组成(例如 IgG1、IgG2、IgG3)。

如需使用二抗进行检测,应针对正确的亚类选择抗体。

抗体制备:技术要求较高。

应用技术之前需接受专门培训。

需要花费较长时间制备杂交瘤细胞。

优点:a.制得的杂交瘤细胞为持续且可再生产的单克隆抗体来源,而且所有批次均相同,有助于提升实验过程和实验结果的一致性和标准化水平。

b.单克隆抗体只检测每个抗原上的一个表位,因此具有以下优点:切片和细胞染色产生的背景信号更少。

特异性地检测一个靶表位,不易与其它蛋白质发生交叉反应。

由于具有高特异性,单克隆抗体非常适于用作实验中的一抗,其产生的背景染色信号通常显著低于多克隆抗体。

如何选择合适的单、多克隆抗体及抗原

如何选择合适的单、多克隆抗体及抗原

如何选择合适的单、多克隆抗体及抗原多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb):用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物,可刺激机体多个B细胞克隆,产生针对多种抗原表位的不同抗体。

所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物,即多克隆抗体。

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。

通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。

一、单多抗优缺点二、单抗和多抗的选择如果对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多(WB/IP/IF/ICC等),可以选择制备单克隆抗体。

多克隆抗体的特异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限。

所以在用多抗做免疫检测时,更容易造成背景,例如在WB 中有杂带,在IHC 中背景较深等等。

虽然还存在着交叉反应的问题,但由于多抗识别多个抗原表位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结果也不会受到影响。

另外多抗需要免疫原的量大,如果免疫原制备困难,建议制备单抗。

若对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做ELISA 检测,可以选择制备多克隆抗体。

多抗相比较单抗仍然有制备时间短、首次制备成本低的特点,在一些情况下也是一种选择。

另外,在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。

三、抗原的选择抗原的选择可以是天然蛋白、重组可溶蛋白、重组变性蛋白和多肽,抗原质量越高,最终制备高质量抗体的几率也会越大!目前抗体制备常采用重组蛋白或多肽作为抗原。

常规情况下,重组蛋白作为抗原往往含有更多的抗原决定簇,既有空间表位,也会有线形序列表位,对于机体的免疫刺激也会相对充分一些,那么最终获取应用面较广的抗体几率也会大很多,尤其是目的蛋白已证明有修饰或者复杂结构的,一般都会优先选择重组蛋白。

多克隆抗体和单克隆抗体的用途盘点

多克隆抗体和单克隆抗体的用途盘点

多克隆抗体和单克隆抗体的用途盘点单克隆抗体的定义:单克隆抗体是仅与目标蛋白某一特定表位结合的单一抗体。

单克隆抗体的制备:简洁来说就是将免疫原注射到宿主动物体内产生免疫反应,之后把 B 细胞从脾脏中移出,单种 B 细胞与骨髓瘤细胞融合为 B 细胞杂交瘤,成为一个永生化胞株。

这样一来,杂交瘤的 B 细胞就会始终产出只识别单一表位的单克隆抗体,通常这个胞株会有一个特定的克隆号(clone number),用来与其他胞株区分。

杂交瘤接下来可以被注射到小鼠的腹腔中大量生产,杂交瘤分泌富含抗体的一种液体,被称作腹水,用注射器抽取纯化,就可获得大量的单克隆抗体。

多克隆抗体定义:多克隆抗体是指与目标蛋白上多种不同表位结合的多种不同抗体. 多克隆抗体制备:多克隆抗体的第一步和单克隆抗体一样,都是将免疫原注射到宿主体内产生免疫反应,激活了多种B细胞。

不同的是免疫过后,多克隆抗体就直接从免疫宿主的血清中分别出来,或接着进行纯化,没有与骨髓瘤细胞融合的过程。

一旦宿主动物死亡,需要免疫新的动物,这时血清中的抗体就会有所不同。

虽然多抗每批次有稍微差别,但是由于它识别的表位多,这个差别影响并不算太大,而单克隆抗体虽然价格偏高,可是特异性更强更稳定。

可以说单抗和多抗是各有各的优点。

多克隆抗体和单克隆抗体的用途:1、定义多克隆抗体和单克隆抗体有用性的两个关键特征涉及它们各自对抗原的特异性和灵敏度。

2、抗体的特异性是由其结合域和目标抗原之间的相对亲和力打算的,而其他分子是存在的。

对这种特异性的利用对免疫学讨论人员和临床医生来说是至关重要的,由于很多应用都是利用多克隆和/或单克隆抗体来特地检测目标分子。

结合抗原特异性,抗体的灵敏度是一个重要的参数,打算了它在试验室的有用性。

3、高灵敏度的抗体特别适用于诊断应用,如免疫沉淀、West Blot 和酶联免疫吸附试验(ELISA),由于它们能够识别低水平的目标抗原。

免疫沉淀是一种分析技术,通过使用特异性结合抗原的抗体将抗原从混合物中分别出来。

单克隆抗体技术的基本原理

单克隆抗体技术的基本原理

单克隆抗体技术的基本原理单克隆抗体技术(Monoclonal antibody technology)是一种利用体外细胞融合技术制备大量拥有相同特异性的抗体的方法。

该技术第一次成功地于1975年由科学家科尔和米尔斯坦开发,并获得了1984年的诺贝尔生理学或医学奖。

单克隆抗体技术已经成为生物医学研究、药物开发和诊断等领域中重要的工具。

单克隆抗体与多克隆抗体相比,具有以下几个显著优势:首先,单克隆抗体具有高度特异性。

多克隆抗体是由多个B淋巴细胞分泌的抗体混合物组成,因此可能具有各自不同的特异性。

而单克隆抗体则由同一种B淋巴细胞克隆分裂形成,具有相同的特异性。

这种高度特异性使得单克隆抗体在抗原检测和治疗方面具有更高的准确性和效能。

其次,单克隆抗体具有高度稳定性。

传统的多克隆抗体的产生是通过免疫动物,如小鼠或兔子,激发抗原,因此有可能引起免疫动物自身的免疫反应。

这种反应可能降低多克隆抗体的稳定性。

然而,单克隆抗体技术是在体外进行的,不需要使用动物,因此不会出现这种问题。

单克隆抗体的制备主要包括以下几个步骤:1. 免疫原的制备:根据需要,可以制备多种类型的免疫原,如蛋白质,多肽,糖类或小分子化合物。

免疫原的选择取决于需要检测或治疗的目标。

2. 免疫动物的免疫:在选择的免疫动物(如小鼠)体内注射免疫原,以激发免疫动物产生特异性抗体。

通常,需要多次免疫来促使免疫系统产生足够高水平的抗体。

3. 脾细胞的提取:在适当的免疫时间点,收集免疫动物的脾脏,以提取免疫细胞。

这些细胞包括深受影响的B淋巴细胞,它们是产生抗体的主要来源。

4. 囊泡瘤细胞的提取:选择特定的肿瘤细胞系,如骨髓瘤细胞系,来提取囊泡瘤细胞。

囊泡瘤细胞有一种特殊的能力,即在长时间无限次的分裂中保持产生抗体的能力。

5. 细胞融合:将免疫细胞和囊泡瘤细胞以一定比例混合,并使用聚乙二醇等融合剂在体外将其融合成杂交瘤细胞。

杂交瘤细胞继承了免疫细胞的抗体产生能力和囊泡瘤细胞的无限次分裂能力。

单克隆抗体和多克隆抗体的区别

单克隆抗体和多克隆抗体的区别

单克隆抗体和多克隆抗体有很多区别首先1.制备上的区别经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经HAT培养基筛选、ELISA检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物一般为balb/c小鼠腹腔中用腹水培养,收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体;而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原纯度越高越好直接注入到动物体内进行免疫,经过3~4次免疫,ELISA测其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体;因此制备多抗的周期就比单抗的短,首次制备价格也比单抗要低;2.应用上的区别单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势;单克隆抗体的特异性高,一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗体,因此可以对其特异性进行全面、系统地验证;但如果所识别的抗原表位被破坏,实验的结果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一;而多克隆抗体的特异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限;所以在用多抗做免疫检测时,更容易造成背景,例如在WB中有杂带,在IHC中背景较深等等;虽然还存在着交叉反应的问题,但由于多抗识别多个抗原表位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结果也不会受到影响;在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出;单抗与多抗的区别是什么摘要:本文主要介绍了单克隆抗体与多克隆抗体的定义,并介绍单抗、多抗在制备流程、特点及应用上的区别;单抗与多抗的定义抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位;一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体;由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体;而由多个B淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体;从某种角度而言,多抗是多种单抗的混合物;制备上的区别经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经HAT培养基筛选、ELISA检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物一般为balb/c小鼠腹腔中用腹水培养,收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体;而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原纯度越高越好直接注入到动物体内进行免疫,经过3~4次免疫,ELISA测其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体;因此制备多抗的周期就比单抗的短,首次制备价格也比单抗要低;应用上的区别单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势;单克隆抗体的特异性高,一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗体,因此可以对其特异性进行全面、系统地验证;但如果所识别的抗原表位被破坏,实验的结果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一;而多克隆抗体的特异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限;所以在用多抗做免疫检测时,更容易造成背景,例如在WB中有杂带,在IHC中背景较深等等;虽然还存在着交叉反应的问题,但由于多抗识别多个抗原表位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结果也不会受到影响;在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出;如果对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多WB/IP/IF/ICC等,可以选择;若对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做ELISA检测,可以选择;单克隆抗体与多克隆抗体的对比表格交叉反应:从理论上说,用小鼠抗原制备的抗体应只能用于小鼠,但是由于动物种属之间,特别是相近的动物之间存在着同源性如大鼠与小鼠,这样会导致抗体发生交叉反应,即用一种动物抗原制备的抗体也可与其它一些物种的抗原反应;。

抗体及抗体的选择

抗体及抗体的选择

抗体及抗体的选择抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。

抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。

由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。

抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构,叫做抗原决定簇。

一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇,因而使机体产生好几种不同的抗体,最终产生出抗体是浆细胞。

只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系,纯系的英文为Clone,音译就是克隆。

由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。

单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。

另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。

多克隆抗体又简称多抗。

与之相对应的叫单克隆抗体,简称单抗。

动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。

当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。

被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞(浆细胞)和记忆B细胞,大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分布到血液、体液中。

如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。

单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体,称为单克隆抗体。

首先我们认识下单克隆抗体与多克隆抗体的区别:1、抗原决定簇:决定抗原性的特殊化学基团,可刺激B淋巴细胞产生对应的抗体。

多克隆抗体名词解释

多克隆抗体名词解释

多克隆抗体名词解释多克隆抗体,也称多抗,是由许多不同的抗体分子组成的复合物,它们有助于提高体内免疫力和减少对外界病原体的抵抗能力。

抗体是体内产生的蛋白质分子,可以与外界病原体结合,从而抑制病原体的复制和毒性。

它们能够分辨外来物质与内部物质的区别,并能够识别外来的病原体,从而阻止它们对人体的入侵。

不同的抗体分子有不同的结构,因此它们能够识别和结合外来病原体的不同结构。

由多种抗体分子组成的多克隆抗体可以更有效地识别和结合外来病原体,从而提高人体抗感染的能力。

多克隆抗体主要分为三类:单克隆抗体(scFv)、二克隆抗体(Fab)和四克隆抗体(Fc)。

单克隆抗体是一种由同种单克隆抗体分子组成的抗体,该抗体可以特异性结合抗原,从而抑制抗原的复制和毒性。

二克隆抗体是在单克隆抗体的基础上改进的一种抗体,它由一个可以特异性识别抗原的单克隆抗体分子和一个能够促进抗体与抗原结合的二克隆抗体组成。

四克隆抗体是由两个二克隆抗体分子组成的抗体,该抗体有助于抗体与抗原结合,能够在单克隆抗体和二克隆抗体之间发挥补充作用。

多克隆抗体的使用有助于提高人体的免疫力,能够更有效地抵御外界的病原体侵害。

现在,多克隆抗体的应用已经在分子生物学、生物药学、微生物学、免疫学、药物开发以及肿瘤研究方面发挥了重要作用。

例如,多克隆抗体可以用于识别和抑制病毒颗粒,有助于抑制病毒的复制和毒性;多克隆抗体可以用于检测和识别细菌,有助于抑制细菌的生长;多克隆抗体可以用于识别肿瘤细胞,有助于抑制肿瘤细胞的生长。

多克隆抗体的研究也可以用于抗癌疗法,例如局部抗癌治疗,其中抗体可以与特定的癌细胞结合,有助于抑制肿瘤细胞的生长。

此外,多克隆抗体还可以用于抗AIDS疗法,其中抗体可以结合HIV病毒,抑制HIV病毒的复制和毒性。

总之,多克隆抗体是一种有效的抗感染技术,它能够提高人体对外界病原体的抵抗能力,具有重要的应用价值。

多克隆抗体在分子生物学、生物药学、微生物学、免疫学等领域的研究和应用,将为抗感染技术和抗癌治疗提供新的思路,为人类健康作出重大贡献。

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单克隆抗体和多克隆抗体有很多区别
首先
1.制备上的区别
经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经HAT培养基筛选、ELISA检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物(一般为balb/c小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体。

而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越高越好)直接注入到动物体内进行免疫,经过3~4次免疫,ELISA测其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体。

因此制备多抗的周期就比单抗的短,首次制备价格也比单抗要低。

2.应用上的区别
单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。

单克隆抗体的特异性高,一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗体,因此可以对其特异性进行全面、系统地验证。

但如果所识别的抗原表位被破坏,实验的结果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一。

而多克隆抗体的特异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限。

所以在用多抗做免疫检测时,更容易造成背景,例如在WB中有杂带,在IHC中背景较深等等。

虽然还存在着交叉反应*的问题,但由于多抗识别多个抗原表位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结果也不会受到影响。

在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。

单抗与多抗的区别是什么
摘要:本文主要介绍了单克隆抗体与多克隆抗体的定义,并介绍单抗、多抗在制备流程、特点及应用上的区别。

单抗与多抗的定义
抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。

一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。

由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。

而由多个B淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体。

从某种角度而言,多抗是多种单抗的混合物。

制备上的区别
经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经HAT培养基筛选、ELISA检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物(一般为balb/c小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体。

而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越高越好)直接注入到动物体内进行免疫,经过3~4次免疫,ELISA测其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体。

因此制备多抗的周期就比单抗的短,首次制备价格也比单抗要低。

应用上的区别
单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。

单克隆抗体的特异性高,一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗体,因此可以对其特异性进行全面、系统地验证。

但如果所识别的抗原表位被破坏,实验的结果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一。

而多克隆抗体的特异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限。

所以在用多抗做免疫检测时,更容易造成背景,例如在WB中有杂带,在IHC中背景较深等等。

虽然还存在着交叉反应*的问题,但由于多抗识别多个抗原表位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结果也不会受到影响。

在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。

如果对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多(WB/IP/IF/ICC等),可以选择制备单克隆抗体。

若对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做ELISA检测,可以选择制备多克隆抗体。

单克隆抗体与多克隆抗体的对比表格
* 交叉反应:从理论上说,用小鼠抗原制备的抗体应只能用于小鼠,但是由于动物种属之间,特别是相近的动物之间存在着同源性(如大鼠与小鼠),这样会导致抗体发生交叉反应,即用一种动物抗原制备的抗体也可与其它一些物种的抗原反应。

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