细胞培养常用试剂配制
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常用试剂配制
PBS溶液配制：用电子天平准确称取NaCl 8.0 g，KCl 0.2 g，KH2P04 0.29 g，Na2HP04—12H20 1.42 g溶于800 mL的超纯水中，用磁场搅拌器搅拌至溶解后调节pH值为7.2～7.4，然后定容至1L。置于高压灭菌锅中灭菌30min，冷却到室温后分装，于4℃冰箱冷藏备用。
DMEM／12高糖培养液：将袋装的DMEM／12粉末溶于800ml的超纯水中，同时加入3.79碳酸氢钠，66mg青霉素钠和100mg的硫酸链霉素，用磁力搅拌器充分混匀，调节pH值为7.2-7.4，然后定容至1L。用孔径为0.229μm的滤膜过滤除菌，分装后置于4℃冰箱冷藏备用。用于培养细胞的培养液为上述DMEM／12高糖溶液中加入10％-20％(体积比)的胎牛血清。
0.25％胰蛋白酶一0.02％EDTA消化液：准确称取0.25g的Trypsin和0.02g的EDTA，用PBS在容量瓶中定容至100ml，调节pH值为7.2-7.4，用孔径为0.22μm的滤膜过滤除菌，用2mL的离心管分装，冻存于-20℃冰箱备用。
双抗：80mL的超纯水中加入80万u的青霉素钠和100万u的硫酸链霉素，0．22μm的滤膜过滤除菌后，用2mL的离心管分装，冻存于-20℃冰箱备用。
二甲亚砜(dimethylsulfoxide，DMSO)冻存液：将DMSO、FBS和DMEM／12按1：3：6的比例混匀，现配现用。