游离脂肪酸(free fatty acid ,FFA )含量测定试剂盒说明书
游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法)产品技术要求haifeng

游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法)适用范围:本产品适用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸(NEFA)含量。
1.1 产品规格1.2主要组成成分注:校准品、质控品具有批间、赋值特异性,具体值详见靶值单。
2.1外观2.1.1试剂盒标签标识清晰,外包装完整无破损;2.1.2 试剂1:无色或淡黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;2.1.3 试剂2:无色或淡黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;2.1.4 校准品:无色或浅黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;2.1.5 质控品:无色或浅黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2 净含量净含量不低于标示值。
2.3 空白吸光度在主波长546nm、副波长700nm、37℃条件下,试剂空白吸光度A≤0.2。
2.4 线性范围(0.05,3.00)mmol/L范围内,相关系数r≥0.990;(0.05,1.00]mmol/L范围内,绝对偏差不超过±0.10mmol/L;(1.00,3.00)mmol/L范围内,相对偏差不超过±10.0%。
2.5分析灵敏度在产品说明书规定参数设定条件下,测定浓度1.0mmol/L的样本,吸光度变化△A≥0.05。
2.6 精密度2.6.1批内重复性CV≤10.0%。
2.6.2 批间差相对极差R≤10.0%。
2.7 准确度与已上市产品比对:(0.05,3.00)mmol/L范围内,相关系数r≥0.990;(0.05,1.00]mmol/L范围内,绝对偏差不超过±0.10mmol/L;(1.00,3.00)mmol/L范围内,相对偏差不超过±10.0%。
2.8 校准品2.8.1 均一性CV≤5.0%2.8.2 开瓶稳定性:开瓶后3天,相对偏差不超过±10.0%。
2.9 质控品2.9.1赋值有效性:测定值在质控靶值范围内。
2.9.2 均一性:CV≤5.0%。
NEFA游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法)产品说明书

游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD 法)说明书【产品名称】通用名称:游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD 法)英文名称:Nonestesterified fatty acid Assay Kit (Enzymic Method)(NEFA )【包装规格】R1:2⨯60ml 、R2:2⨯20ml ;R1:2⨯45ml 、R2:2⨯15ml ;R1:1⨯45ml 、R2:1⨯15ml ;校准品(选配):1⨯2ml (1个水平)。
【预期用途】用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸的含量。
临床上主要用于高血脂症、冠心病和动脉粥样硬化的辅助诊断。
【检验原理】游离脂肪酸和辅酶A 在乙酰辅酶A 合成酶(ACS )的作用下反应生成乙酰辅酶A 。
乙酰辅酶A 在乙酰辅酶A 氧化酶(ACOD )的作用下生成H 2O 2,随后通过Trinder ’s 底物在过氧化物酶(POD )的作用下生成有色物质。
【主要组成成分】由试剂R1、R2和校准品组成。
试剂R1:乙酰辅酶A 合成酶(ACS )0.8KU/L 、MgCl 2(氯化镁)5mmol/L 、吐温-20 0.1%;试剂R2:乙酰辅酶A 氧化酶(ACOD)20KU/L 、过氧化物酶( POD )30KU/L 、吐温-20 0.1%;校准品:含十六(烷)酸水溶液。
校准品可以溯源至北京华宇亿康校准品,注:校准品浓度见每批瓶标示。
不同批号试剂盒中各组分不可以互换。
【储存条件及有效期】试剂和校准品在2℃~8℃避光条件下保存可以稳定365天。
试剂和校准品开瓶后2℃~8℃可稳定15天。
备注:生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。
【适用仪器】日立7180、奥林巴斯AU680、贝克曼LX-20/DXC800、迈瑞BS-380、朕江T900全自动生化分析仪。
【样本要求】1、空腹静脉采血,样本为新鲜的血清样本。
2、样本采集后立即离心分离,并在当日检测,如当日不能检测,冷藏2℃~8℃下可稳定48h ;避免反复冻融。
游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒(ACS-ACOD酶法)产品技术要求百奥泰康

游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒(ACS-ACOD酶法)适用范围:该产品用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸的浓度。
1.1产品规格1.2 组成成分1.2.1 试剂组成试剂1:磷酸盐缓冲液(pH=7.0) 50mmol/L;辅酶A 0.5mmol/L;ATP 3 mmol/L;乙酰辅酶A合成酶(ACS ) 0.4KU/L;)2mmol/L;氯化镁(MgCl2偶联终点比色法结合成份(Trinder结合成份)0.5g/L;表面活性剂和稳定剂<1%;试剂2:磷酸盐缓冲液(pH=7.0) 50mmol/L;乙酰辅酶 A 氧化酶(ACOD )30KU/L;过氧化物酶(POD ) 45KU/L;4-氨基安替比林(4AAP) 1.5g/L;表面活性剂和稳定剂<1%1.2.2 校准品的组成单水平的液体校准品,在50mM pH7.0的磷酸盐缓冲液中添加十六烷酸纯品,稳定剂<0.5%;定值范围:0.8-1.2mmol/L。
1.2.3质控品的组成两个水平的液体质控品,在牛血清(20g/L)中加入十六烷酸纯品,添加的牛血清的比例为5%-10%,稳定剂<0.5%;目标浓度范围:低水平(0.30-0.60)mmol/L,高水平(0.80-1.20)mmol/L。
2.1 外观液体双试剂:试剂1:无色或淡黄色澄清液体;试剂2:黄色澄清液体。
校准品:无色或淡黄色澄清液体。
质控品:无色或淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 空白吸光度试剂空白吸光度应≤0.3。
2.4 分析灵敏度浓度为0.5mmol/L时,吸光度差值的绝对值在0.01-0.2范围内。
2.5 线性在(0,3.0]mmol/L线性范围内,线性相关系数r 应≥0.995;在(0,1.2] mol/L 时绝对偏差不超过0.18mmol/L;在(1.2,3.0]mmol/L范围内的相对偏差不超过±15%。
2.6 精密度变异系数CV应≤6%2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应≤10%。
sigma 游离脂肪酸使用说明书

sigma 游离脂肪酸使用说明书一、产品介绍sigma游离脂肪酸是一种常用的化学试剂,可广泛应用于生化实验室中的各种研究和分析领域。
该产品为透明液体,无色或微黄色,是高纯度游离脂肪酸的混合物。
二、产品规格sigma游离脂肪酸可提供多种规格选择,包括不同链长和饱和度的脂肪酸。
请在购买前查阅相关产品目录,确认所需规格并咨询供应商获取详细信息。
三、存储条件sigma游离脂肪酸应保存在阴凉干燥的地方,远离直接阳光照射和高温。
为保持其稳定性和活性,建议在-20℃下存储,并避免多次冻融。
在正确的储存条件下,该产品的保质期为24个月。
四、实验室安全操作1.使用前请穿戴合适的防护实验服、手套和面部防护,并确保操作台面洁净。
2.避免吸入产品蒸汽或粉尘,如果发生吸入,请迅速到空气清新处休息。
3.避免接触皮肤和眼睛,如不慎接触,请立即用大量清水冲洗,并寻求医疗救助。
4.请勿摄入该产品,如不慎摄入,请立即就医并出示产品说明书。
五、实验操作指南1.使用前请确保实验室操作台面整洁,并准备好所需实验器材。
2.根据实验需要,准备适量的sigma游离脂肪酸。
3.请根据实验需求选择适当的溶剂进行溶解。
sigma游离脂肪酸在一些有机溶剂中更容易溶解,如乙醇、氯仿等。
4.溶解后的溶液可以直接用于实验,或根据实验步骤需要进一步处理。
5.实验结束后,请妥善处理废液和废弃物,并遵守本地环境保护法规。
六、注意事项1.本产品仅供科研用途,不得用于药物生产或人体内使用。
2.使用前请阅读并理解本说明书,并根据实际情况合理操作。
3.建议在进行实验前进行充分的资料搜集和前期试验。
4.如有产品使用问题或其他疑问,请咨询相关领域的专业技术人员或即时联系供应商。
游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法)产品技术要求华宇亿康

游离脂肪酸测定试剂盒(ACS-ACOD法)适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸(NEFA)的含量。
1.1 产品型号/规格试剂1:1×8mL、试剂2:1×2mL;试剂1:1×16mL、试剂2:1×4mL;试剂1:1×20mL、试剂2:1×5mL;试剂1:1×32mL、试剂2:1×8mL;试剂1:1×40mL、试剂2:1×10mL;试剂1:2×40mL、试剂2:2×10mL;试剂1:4×40mL、试剂2:4×10mL;试剂1:2×40mL、试剂2:1×20mL;试剂1:4×40mL、试剂2:2×20mL;试剂1:8×40mL、试剂2:8×10mL;试剂1:1×80mL、试剂2:1×20mL;试剂1:2×80mL、试剂2:2×20mL;试剂1:4×80mL、试剂2:4×20mL;试剂1:8×80mL、试剂2:8×20mL;试剂1:1×60mL、试剂2:1×15mL;试剂1:2×60mL、试剂2:2×15mL;试剂1:3×60mL、试剂2:3×15mL;试剂1:8×50mL、试剂2:2×50mL;试剂1:6×70mL、试剂2:3×35mL;试剂1:5×40mL、试剂2:1×50mL;试剂1:4×50mL、试剂2:1×50mL;试剂1:3×60mL、试剂2:1×45mL;试剂1:8×20mL、试剂2:8×5mL;试剂1:1×20L、试剂2:1×5L;试剂1:1×10L、试剂2:1×2.5L;试剂1:1×4L、试剂2:1×1L;试剂1:1×1L、试剂2:1×250mL。
小鼠游离脂肪酸(FFA)酶联免疫分析 试剂盒 说明书

小鼠游离脂肪酸(FFA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:7.8ng/ml-500ng/ml最低检测限:1.95ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠FFA,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、尿液或其它相关生物液体中FFA含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
概述游离脂肪酸,即未脂化的脂肪酸(nonesterified fatty acid),是中性脂肪分解成的物质。
血浆中含量甚少,仅占总脂肪酸含量的5%~10%,在血浆中半衰期2~3分钟,主要与血清蛋白结合转运到全身组织利用。
当肌肉活动所需能源-肝醣耗尽时,脂肪组织会分解中性脂肪成为游离脂肪酸来充当能源使用。
所以,游离脂肪酸可说是进行持久活动所需的物质。
例如:马拉松赛跑。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗FFA抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗FFA抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的FFA呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
游离脂肪酸测定方法

游离脂肪酸检测(Fatty Acids Content)
游离脂肪酸检测试剂盒(FFA Assay Kit.Kit content Cu Reagent,Color reagent and standard)
实验准备
1.抽提剂配制:自备氯仿、正庚烷、甲醇,按照体积(氯仿:正庚烷:甲醇=28:21:1)配制抽提剂200ml,
4℃储存。
2.标准品配制:精确称取82.06mg标准品(Palmitic acid,分子量=256.44),溶于抽提剂中,终体积50ml,
终浓度64mM,密封4℃保存。
测定方案
1.用抽提剂将64mM标准品新鲜稀释为6.4、3.2、1.6、0.8、0.4、0.2、0.1mM。
现用现配。
2.取1.5mlAxygen进口离心管,加入50µl样品、标准品、空白对照。
3.向管中加1.2ml抽提剂,盖紧盖子,悬涡混合器振荡30秒。
4.加0.2ml铜试剂Cu Reagent,振荡30秒,各管混匀强度时间保持一致。
5.室温放置20min。
6.室温2000g离心5min。
7.取1ml上层相转移到新离心管。
8.向新管内加0.5ml显色试剂Color Reagent。
混匀,室温孵育5min。
9.用1-cm光径玻璃比色杯读取550nmOD值。
10.做标准曲线,计算FFA浓度。
索莱宝游离脂肪酸(FFA)含量检测试剂盒说明书

游离脂肪酸(FFA)含量检测试剂盒说明书微量法货号:BC0595规格:100T/96S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶4℃保存试剂一液体50 mL×1瓶(自备)常温保存试剂二液体20mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×2瓶4℃保存标准品粉剂×1支常温保存溶液的配制:1、试剂一:实验前一天,取一个玻璃瓶,按照正庚烷:无水甲醇:氯仿=24:1:25的比例配置(自备),盖紧后混匀;2、试剂三:临用前每瓶加入13 mL无水乙醇充分溶解,4℃可保存一周;3、标准品:临用前把试剂转移到10 mL玻璃瓶中,加入7.8 mL氯仿充分溶解,即为5μmol/mL的棕榈酸标准溶液,4℃保存。
产品说明:FFA既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。
血清中FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。
FFA与铜离子结合形成脂肪酸铜盐,并溶于氯仿;利用铜试剂法测定铜离子含量,即可推算出游离脂肪酸含量。
技术指标:检出限:0.0390 μmol/mL线性范围:0.05-2 μmol/mL注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:研钵/匀浆器、冰、台式离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、一个50mL 玻璃瓶、一个10mL玻璃瓶、正庚烷、无水甲醇、氯仿(三氯甲烷)、无水乙醇和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、血清中FFA测定:将所取血液,室温静置1 h 后,于4 ℃离心机3500 rpm离心15min,取上层血清置于4℃冰箱保存,待测。
第 1 页,共 3 页2、组织中FFA含量测定:组织用生理盐水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,称取约0.1g,加入1 mL提取液,匀浆后,8000rpm,4℃离心10min,取上清液,置冰上待测。
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货号:MS2400 规格:100管/48样游离脂肪酸(FFA)含量测定试剂盒说明书
微量法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
FFA既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。
FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关,也可反映食物贮藏中的品质变化。
测定原理:
在弱酸性条件下,FFA与铜盐反应生成铜皂,在715nm处有特征吸收峰,在一定范围内游离脂肪酸含量与显色程度呈线性关系。
自备实验用品及仪器:
研钵、台式离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制:
试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存。
样品中FFA提取:
1、血液:将所取血液,室温静置1 h 后,于4 ℃ 离心机3500 rpm离心15min,取上清0.1mL,
加1mL试剂一,震荡提取3h,8000g,4℃离心10min,取上清液待测。
2、组织:组织用蒸馏水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,捣碎后按照组织质量(g):提
取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)加入试剂一,震荡提取3h,8000g,4℃离心10min,取上清液待测。
3、细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500
万细胞加入1mL试剂一)加入试剂一,冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声2秒,间隔3秒,总时间3min);震荡提取3h,然后8000g,4℃,离心10min,取上清待测。
测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到715 nm。
2. 对照管:取上清液0.4mL,加0.2mL试剂二,充分震荡5min,室温静置5min,取上层200μL于微量石英比色皿/96孔板,调零。
3. 测定管:取上清液0.4mL,加0.2mL试剂三,充分震荡5min,室温静置5min,取上层200μL于微量石英比色皿/96孔板,测定吸光值,记为A。
FFA含量计算:
a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y=0.0075 x+ 0.0055,R2=0.994
1.血液中FFA含量计算
FFA(nmol/mL)=(A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V3×V1÷V2)=1333×(A-0.0055)
2. 组织、细菌或细胞中FFA含量计算
(1)按样本蛋白浓度计算
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FFA(nmol/mg prot)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1×Cpr)=133×(A-0.0055)÷Cpr
(2)按样本质量计算
FFA(nmol/g 鲜重)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×W)=133×(A-0.0055)÷W
(3)按细菌或细胞数量计算
FFA(nmol/104 cell)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×500)
=0.267×(A-0.0055)
V1:加入样本体积,0.4mL;V2:提取液体积,1mL;V3:加入血清(浆)体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y=0.0038 x+ 0.0055,R2=0.994
1.血液中FFA含量计算
FFA(nmol/mL)=(A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V3×V1÷V2)=2666×(A-0.0055)
2. 组织、细菌或细胞中FFA含量计算
(1)按样本蛋白浓度计算
FFA(nmol/mg prot)= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1×Cpr)=266×(A-0.0055)÷Cpr
(2)按样本质量计算
FFA(nmol/g 鲜重)= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1÷V2×W)=266×(A-0.0055)÷W
(3)按细菌或细胞数量计算
FFA(nmol/104 cell)= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1÷V2×500)
=0.534×(A-0.0055)
V1:加入样本体积,0.4mL;V2:提取液体积,1mL;V3:加入血清(浆)体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。
注意事项:
1.蛋白含量不可直接用提取的上清液直接测定,可用蒸馏水或缓冲液或生理盐水选用本公司
的BCA法蛋白含量测定试剂盒。
2.最低检出限为0.8 mmol/L。
第2页,共2页。