病毒载量检测方法及其意义
输血前8项感染性指标的检测以及临床意义

输血前8项感染性指标的检测以及临床意义随着医疗技术的不断发展,输血已经成为了治疗各种疾病和创伤的重要手段之一。
尽管输血可以挽救生命,但由于输血涉及到供血者与受血者的血液接触,存在着潜在的传染性疾病的风险。
为了最大程度地减少输血引起的感染风险,医生们在进行输血前往往会对受血者进行一系列的感染性指标的检测。
本文将重点介绍输血前8项感染性指标的检测以及其临床意义。
1. HIV感染标志物HIV(Human Immunodeficiency Virus),即人类免疫缺陷病毒,是导致艾滋病的病原体。
HIV感染的受血者在接受输血之前必须接受HIV感染标志物的检测。
这项检测主要通过检测血液中的HIV抗体或者核酸进行。
如果受血者的检测结果为阳性,那么这个受血者是HIV感染者,他在接受输血时就可能会传染HIV给其他人。
临床意义:HIV是一种会损害人体免疫系统的病毒,一旦被感染,人体的免疫力将急剧下降,容易感染各种其他的疾病。
输血前的HIV感染标志物检测可以有效避免HIV通过输血传播。
2. 丙型肝炎病毒标志物丙型肝炎病毒(HCV)是一种通过血液传播的病毒,会导致丙型肝炎。
输血前的HCV标志物检测是非常重要的,可以通过检测血清中的丙型肝炎病毒抗体或者RNA进行。
临床意义:丙型肝炎是一种慢性肝炎,如果患者长期未得到治疗,会导致肝硬化和肝癌等严重后果。
在输血前进行丙型肝炎病毒标志物检测可以避免通过输血传播丙型肝炎。
4. 梅毒抗体检测梅毒是一种通过性传播和血液传播的疾病,由梅毒螺旋体引起。
输血前的梅毒抗体检测可以通过血清中的梅毒抗体检测进行。
临床意义:梅毒是一种慢性传染病,如果长期不得到治疗,会导致多种器官的损害,甚至死亡。
进行梅毒抗体检测可以避免通过输血传播梅毒。
5. 梭菌毒素检测梭菌毒素是一种由厌氧梭菌产生的毒素,可以引起肠胃道感染,导致肠炎。
输血前的梭菌毒素检测通过采集粪便样本进行。
临床意义:如果接受输血的患者在体内携带有梭菌毒素,那么在输血后有可能会引起肠炎,严重时甚至有生命危险。
甲型肝炎的病毒载量和临床意义

甲型肝炎的病毒载量和临床意义甲型肝炎是由甲型肝炎病毒(HAV)引起的急性肝炎,是全球最常见的肝炎类型之一。
病毒载量是指在患者体内的病毒数量,对于甲型肝炎的临床意义具有重要的影响。
本文将探讨甲型肝炎的病毒载量与临床意义之间的关系。
一、病毒载量的测定方法甲型肝炎病毒的病毒载量可以通过实时荧光定量PCR等分子生物学技术来测定。
这些方法可以准确地测量患者体内的病毒数量,并提供一个可靠的指标来评估感染的严重程度和预后。
二、病毒载量与临床表现的关系甲型肝炎病毒的病毒载量与患者的临床表现密切相关。
一般来说,病毒载量较高的患者往往表现出更严重的症状和疾病进展,包括肝功能异常、黄疸、肝脏炎症等。
相反,病毒载量较低的患者通常症状较轻或无症状,甚至可能自愈。
三、病毒载量与传播风险的关系高病毒载量的患者通常在体液(如血液、唾液、粪便等)中含有更多的病毒,因此更容易传播给其他人。
这也是甲型肝炎在一些密集人群中传播迅速的原因之一。
因此,对于高病毒载量的患者,特别是在食品、饮水等环境中,应采取相应的预防措施,以减少病毒的传播风险。
四、病毒载量与预后的关系病毒载量对甲型肝炎的预后也具有重要的意义。
一般来说,病毒载量较高的患者更容易出现并发症,如急性肝衰竭、肝硬化等。
此外,高病毒载量还与甲型肝炎的复发率和慢性化的风险增加相关。
因此,对于高病毒载量的患者,应密切监测其肝功能和病毒载量,及时采取相应的治疗措施,以降低并发症的发生和疾病的进展。
综上所述,甲型肝炎的病毒载量对该疾病的临床意义不可忽视。
病毒载量的测定可以帮助医生评估患者的感染程度和预后,指导治疗决策,并采取相应的预防措施以减少传播风险。
因此,在甲型肝炎的诊断和治疗中,病毒载量的监测应得到重视,以提高患者的治疗效果和预后。
hiv补充试验名词解释

hiv补充试验名词解释HIV补充试验,也称为病毒载量试验或病毒核酸试验,是一种检测艾滋病病毒(HIV) RNA或DNA在患者体内的含量的实验方法。
通过补充试验,医生可以评估患者体内的病毒复制程度,进而确定病情严重程度、制定治疗方案和监测治疗效果。
HIV是一种引起艾滋病的病毒,它通过攻击人体免疫系统中的T淋巴细胞,破坏免疫系统的功能,使患者容易受到各种传染病的侵袭。
病毒复制过程中的病毒载量是衡量病情严重程度的重要指标,也是判断治疗方案有效性的关键因素。
在HIV补充试验中,主要的试剂是核酸分析试剂盒,它们通常包含有针对HIV RNA或DNA的探针和引物。
试剂盒中的试剂会与患者血液样本中的病毒核酸结合,形成一种特定的反应物。
通过核酸分析仪器的检测和分析,可以确定血液中病毒核酸的含量,并以数字化形式报告给医生。
HIV补充试验的结果通常用“病毒载量”(viral load)表示,它是血液中HIV RNA或DNA的分子数量。
病毒载量数值越高,表示病情越严重,免疫系统受损的程度也更高。
反之,病毒载量数值越低,说明病情相对较轻或治疗效果良好。
根据病毒载量的不同数值,医生可以作出相应的判断和决策。
当病毒载量高时,表示病情严重,需要积极进行抗病毒治疗以抑制病毒复制。
当病毒载量降低到低于检测限值时,即称为“病毒载量低于检测限值”(viral load below detectable limits),这通常是治疗效果良好的指标之一。
HIV补充试验通常与其他检测方法(如CD4+ T细胞计数)结合使用,以全面评估病情和监测治疗的效果。
CD4+ T细胞是免疫系统中的重要细胞,HIV病毒主要攻击和破坏这种细胞,导致免疫系统功能受损。
通过病毒载量和CD4+ T细胞计数的联合检测,医生可以了解病情的进展和指导治疗方案的调整。
总之,HIV补充试验是一种用于测量艾滋病病毒RNA或DNA 含量,评估病情和指导治疗的重要实验方法。
通过检测病毒载量的变化,医生可以估计病情的严重程度,并基于这些信息进行治疗策略的制定和调整。
艾滋病检测技术HIV-1核酸检测规范

艾滋病检测技术HIV-1核酸检测规范1 范围本章规定了HIV-1核酸定性和定量检测(病毒载量)的意义、实验室要求、检测方法、质量控制及结果判定标准,适用于HIV-1核酸的定性检测和定量的测定。
2 核酸检测的意义核酸检测可用于HIV感染诊断、血液筛查、病程评估及抗病毒治疗效果监测。
2.1 感染诊断2.1.1 作为补充试验:用于筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性样本的判定;对筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性的疑似艾滋病晚期患者需将核酸检测、临床病史和CD4+T淋巴细胞计数检测结果综合判断。
对于抗体筛查试验阴性但免疫功能低下者,也可进行核酸检测,结合临床综合判断。
2.1.2 急性期诊断:对近期有明确流行病学史的个体,包括患有性病或有性病史,有同性和异性性接触不安全性行为,有共用注射器吸毒史,有医源性暴露史,有职业暴露史,HIV/AIDS 患者的配偶或性伴侣,HIV/AIDS 母亲所生子女等,如抗体筛查试验无反应,可通过核酸检测判定是否为急性期感染。
核酸检测结果阴性或低于最低检测限不能排除HIV-1感染。
2.1.3 HIV-1暴露婴儿感染早期诊断HIV-1感染母亲所生小于18个月龄的婴儿,不同时间的两次HIV-1核酸检测均为阳性即可作出诊断。
18个月龄以上儿童诊断与成人相同。
2.2 血液筛查:对献血者及采供血机构的原料血浆进行核酸检测,可及时发现窗口期感染,降低输血的“残余危险度”,减少二代传播。
2.3 抗病毒治疗效果监测HIV感染者和艾滋病病人经抗病毒药物治疗后,定期进行HIV-1病毒载量检测,可判断抗病毒药物治疗的疗效。
病毒载量结果动态分析,对决定是否继续使用原定的治疗方案以及是否需要更改治疗方案起到重要作用。
一般启动抗病毒治疗6个月后应进行病毒载量检测,以监测治疗效果,每年应检测一次。
治疗前进行检测可了解病人的病毒载量基线,有助于评价治疗后效果。
如适时重复检测病毒载量,没有低于检测限,需要考虑治疗是否失败。
艾滋病毒感染与病毒载量与复制率

艾滋病毒感染与病毒载量与复制率艾滋病毒(HIV)是一种致命的病毒,它主要通过性接触、血液传播和母婴传播途径传播给人类。
感染艾滋病毒后,人体免疫系统受到严重破坏,导致免疫功能下降,易于感染其他疾病和恶性肿瘤。
在艾滋病病毒感染的过程中,病毒载量和复制率是重要的指标,对了解病毒感染的程度、疾病进展和治疗效果具有重要意义。
病毒载量是指在病毒感染者的体液中,一定体积内病毒颗粒的数量。
常见的病毒载量检测包括血液中的病毒载量和生殖道分泌物的病毒载量。
通过测量病毒载量,可以评估艾滋病病毒在感染者体内的复制活动程度。
病毒载量高表示病毒复制活跃,疾病进展快,而病毒载量低则表示病毒复制相对较少,疾病进展较慢。
艾滋病毒的复制率是指病毒在感染者体内的复制速度。
艾滋病毒的复制过程非常迅速和高效。
病毒进入人体后,它会通过感染宿主免疫细胞,特别是T淋巴细胞,进而释放新的病毒颗粒,感染更多的宿主细胞。
在感染过程中,病毒以指数方式增加。
复制率高表示病毒在感染者体内复制速度快,疾病进展迅速,而复制率低则表示病毒复制较为缓慢,疾病进展相对较慢。
病毒载量和复制率对于艾滋病毒感染者的管理和治疗至关重要。
通过定期检测病毒载量和复制率,医生可以监测病毒感染者的疾病进展情况,并根据测试结果制定相应的治疗方案。
对于已经接受抗逆转录病毒治疗(ART)的患者,监测病毒载量和复制率可评估治疗效果。
如果病毒载量和复制率经过一段时间后仍然高于预期水平,可能意味着治疗方案需要调整或更换。
此外,病毒载量和复制率还对预防艾滋病毒传播具有重要意义。
高病毒载量和复制率的人容易在性行为、共享注射器等活动中传播病毒给其他人。
因此,定期测试并及早发现感染者的病毒载量和复制率是防止艾滋病毒传播的重要措施之一。
要准确测量艾滋病毒的载量和复制率,需要使用高度敏感的实验室技术,如聚合酶链反应(PCR)。
PCR技术可以从血液或其他体液中扩增病毒的核酸并定量检测。
通过这种方法,医生可以获得病毒的数量,并计算出病毒载量和复制率。
新城疫弱毒疫苗病毒载量的比较检测

新城疫弱毒疫苗病毒载量的比较检测新城疫弱毒疫苗是一种预防新城疫的疫苗,通常由鸟类新城疫病毒的弱毒株制成。
由于疫苗中的病毒是弱毒株,因此在生产过程中需要进行病毒载量的比较检测,以确保疫苗的质量和安全性。
病毒载量的比较检测是通过比较不同疫苗样品中的病毒量来评估它们的相对浓度。
这一过程通常使用定量PCR(聚合酶链反应)或滴度测定法进行。
下面将详细介绍这两种方法。
首先是定量PCR(Quantitative PCR)法。
这是一种用于测定DNA或RNA的数量的分子生物学技术。
在病毒载量的比较检测中,研究人员通常会选择合适的引物和探针,用于特异性地扩增和定量新城疫病毒的DNA或RNA。
通过测定扩增产物的数量,可以得出病毒的相对浓度。
这种方法的优点是操作简单、灵敏度高,并且可以快速得出结果。
需要准备标准曲线来进行定量,同时也需要先知道病毒基因组的序列信息。
另一种常用的病毒载量比较检测方法是滴度测定法(Titer determination)。
这是一种通过稀释和感染指定细胞系或动物来检测病毒活性的方法。
在新城疫病毒疫苗的生产过程中,研究人员将不同的样品进行逐渐稀释后,用于感染适当的宿主细胞。
之后,在一定时间内观察细胞的病毒感染情况,并进行计数。
通过比较不同样品的病毒感染率和病毒滴度,可以得出病毒的相对浓度。
这种方法的优点是结果直观,不需要知道病毒基因组的序列信息。
操作过程相对复杂,需要较长的时间。
除了上述两种常用方法外,还有其他一些检测方法可以用于新城疫弱毒疫苗病毒载量的比较检测,如Western blot、传统PCR等。
不同的方法具有不同的优缺点,研究人员需要根据实际需求选择合适的方法。
新城疫弱毒疫苗病毒载量的比较检测是确保疫苗质量和安全性的重要步骤。
通过定量PCR法或滴度测定法等方法,可以对疫苗中的病毒量进行可靠的比较,从而确保疫苗的效果和安全性。
这些方法为疫苗研制和生产提供了重要的技术支持,也为人们预防新城疫提供了重要的保障。
新城疫弱毒疫苗病毒载量的比较检测

新城疫弱毒疫苗病毒载量的比较检测
新城疫弱毒疫苗是预防禽流感的重要武器之一。
疫苗的病毒载量是影响疫苗效果的一
个重要因素。
因此,比较不同新城疫弱毒疫苗的病毒载量是非常必要的。
常用的比较病毒载量的方法有两种:实时荧光定量PCR(qPCR)和细胞培养法。
qPCR
是通过测量荧光信号的数量,来测定病毒RNA的数量。
细胞培养法是将病毒注入细胞培养中,用来测定病毒在细胞中的增殖情况。
本研究采用了这两种方法,对不同新城疫弱毒疫苗的病毒载量进行了比较。
结果显示,不同疫苗的病毒载量存在较大差异,其中病毒载量高的疫苗在预防感染方面表现更为突出。
我们进一步将疫苗按不同批次进行分组比较,发现不同批次之间的病毒载量也存在差异。
这可能与生产工艺、存储温度等因素有关。
此外,我们还进行了病毒复制率的测定,发现病毒载量高的疫苗在细胞中的增殖速度
更快,复制率更高。
这表明,病毒载量高的疫苗在免疫过程中的效果更佳。
综合上述结果,我们认为在选购新城疫弱毒疫苗时,应注意选择病毒载量高、复制率
快的疫苗,以提高预防感染的效果。
同时,在生产和存储过程中也应注意控制疫苗的质量,避免病毒载量的波动。
hiv-wb检测的判定标准

hiv wb检测的判定标准
一、确定病毒载量
HIV WB检测主要用于确定患者体内病毒载量。
病毒载量是指患者体内病毒的数量,对于疾病的进展和治疗效果具有重要意义。
通过HIV WB检测,可以了解患者体内病毒载量的水平,从而为临床治疗提供依据。
二、确定病毒类型
HIV病毒有多种亚型,不同亚型对药物的敏感性不同。
通过HIV WB检测,可以确定患者感染的病毒类型,从而为选择合适的治疗方案提供参考。
三、确定免疫状态
HIV感染会导致患者免疫系统受损,免疫状态的变化与疾病的进展和治疗效果密切相关。
通过HIV WB检测,可以了解患者免疫状态的变化,从而为临床治疗提供依据。
四、确定治疗反应
HIV治疗需要长期坚持,治疗效果的评估对于调整治疗方案具有重要意义。
通过HIV WB检测,可以了解患者治疗后的病毒载量变化,从而评估治疗效果,为调整治疗方案提供依据。
总之,HIV WB检测是HIV诊断和治疗的重要手段,通过对病毒载量、病毒类型、免疫状态和治疗反应的判定,可以为临床治疗提供全面、准确的依据。
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6.5小时48份标本
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二、病毒载量检测的意义
早期诊断 婴儿的早期诊断:感染HIV的母亲所生婴儿小 于18个月时,不能按照常规检测程序进行抗体检测 来确证是否感染了HIV。这种情况下,采集婴儿不 同时间的样本进行HIV核酸检测。 也可使用集合法对采供血机构的原料血浆及 HIV抗体阴性的高危人群样品进行核酸检测,及时 发现窗口期感染者,降低“残余危险度”,预防传 播。
指导抗病毒治疗及疗效判定
通常在病毒载量达到一定水平后(如>3500050000拷贝/毫升)抗病毒治疗才显示良好的 治疗效果。治疗后通过病毒水平的检测能够 确定治疗是否有效。理想的结果是治疗24周 后,病毒水平会控制在检测线以下。
.耐药性监测
可用于HIV耐药性检测和监测。治疗后病毒载 量得不到有效控制时被认为治疗失败。引起 治疗失败的原因之一是病毒对治疗药物的敏 感性降低或不敏感,也就是产生了耐药。对 病毒载量>1000拷贝/毫升的样本进行耐药性 检测对临床医生修改治疗方案有一定的帮助。
Roche
Simens(Bayer)
RT-PCR bDNA 产物为DNA,易发生污染,不对目标进行扩增,只进 对实验室区域划分严格 行信号放大
检测
辣根过氧化物酶标记检测 探针,TMB底物显色 用样品OD值和定标物OD 值的比值计算结果,需要 稀释扩增产物,检测范围 小,并且受酶活性、底物 氧化显色的影响 每次检测12或24个标本 需要设一个阴性、一个弱 阳性和一个强阳性对照 48人份/盒 每次试验12人份分装 一旦打开试剂盒,需要在 1个月内使用完48人份, 否则试剂失效 8小时24份标本
标记的探针与该复合体杂交结合。与化学发光底物共同孵育,所产生的光强度与
样品中HIV-1RNA的量成正比,以相对光强度单位(RLUs)表示的光度值被分 析系统记录下来,试剂盒中含有已知浓度的经β-丙内酯(BPL)处理的HIV18E5/LAV病毒液作为标准品,根据标准品的光吸收值绘制标准曲线,样品中
HIV-1 RNA的量可对照标准曲线求得。
三种病毒载量检测技术比较
厂家 商品名 扩增和检测原理 bioMerieux Nuclisens Easy Q 扩增:NASBA 检测:Real Time. Molecular Beacon 实时扩增检测 50-3,000,000IU/ml(v1.1) 线性范围广,无需稀释标本重复检测, 报告国际单位,易于统一标准 25-10,000,000IU/ml(v2.0) Roche COBAS Amplicor HIV-1 Monitor 1.5 扩增:RT-PCR 检测:底物显色 先扩增再检测 普通方法:400-750,000 Copies/ml 超敏方法:50-75,000 Copies/ml 线性范围有限,高浓度 样本需稀释检测,超敏 方法需要用低温超速离 心机离心1个小时 异丙醇沉淀 •异硫氰酸胍裂解,沉淀 物不可见,易引起操作 误差,异丙醇化学毒性 •标本只使用EDTA抗凝 血浆 Simens(Bayer) Versant 3.0 无需扩增:bDNA分枝 信号放大系统 检测:化学发光 先杂交,再检测 50-500,000Copies/ml
各级探针与被检物核酸杂 交,检测发光信号强弱 杂交孵育时间长,需要16 个小时
标本数量
每次检测8的整数倍标本 直至48个 不需要阴阳性对照 48人份/盒 每次试验8人份分装 独立包装,长期稳定
每次检测12的整数倍标本 需设一个阴性、一个弱阳 性和一个强阳性对照 192人份/盒 每次试验12人份分装
试剂盒包装
标准试验:能够定量400-750000拷贝/毫升的
HIV RNA,需要0.2毫升血浆。
超敏试验:能够定量50-75000拷贝/毫升的
HIV RNA,需要0.5毫升血浆。
NucliSens EasyQ HIV-1实验 是使用NASBA技术的靶扩增试验。NASBA技术选 择性地直接扩增RNA而没有PCR步骤,用2个寡核苷酸引物、3个酶、三磷酸脱 氧核苷和合适的缓冲液进行一步夹心杂交。首先用异硫氰酸胍和氧化硅颗粒提取 高纯度RNA,RNA通过重复的合成和转录双链DNA中间体得到扩增。在AMVRT的作用下,HIV-1gag区的引物P1介导由标本RNA合成cDNA,RNA链被 RNAse降解。引物P2结合启动第二条DNA链合成,反义RNA通过T7多聚酶启动 双链DNA合成,这个循环不断重复,使得靶RNA在等温条件下大量扩增100万到 1000万倍,然后直接用化学发光法确定核酸量,通过HIV特异的gag和pol区的3 个内标同时扩增而达到定量目的。它具有高度敏感性和广阔的动态范围。 最近
四、病毒载量测定结果的分析和解释
分析一个病人不同时间病毒载量测定的结果时,首先要考虑
测定结果的变化是真实的生物学改变还是方法本身的变异或 误差。 病毒载量的变化超过0.5log(大约是3倍)就超过了实验和每 日的正常变化,应被视为有生物学意义的变化,而0.5log以 内的变化就很难与随机的变异相区分。特别需要注意的是在 接近检测下限的时候,实验的变异对于解释病毒载量变化的 意义有更大的影响。例如,病毒载量从50cp/ml增加到 150cp/ml,虽然变化的幅度达到0.5log,但真正反映的可能 是实验的变异而不是抗病毒治疗的失败,因此对于接近检测 下限的测定结果需要进行认真分析。
三、影响病毒载量测定结果的因素
样本类型: 血浆和血清标本都可用来测定病毒载量, 但是血清的检测结果大约是血浆的50%( 30-
80% ),可能是因为血液凝固的过程中HIV颗粒被
包裹在纤维蛋白网络中,导致血清中病毒的浓度下
降。因此,测定病毒载量应该首选血浆标本,血浆
也是临床使用的唯一标本。血清标本对于研究也是 可以接受的,重要的是每位病人使用的标本类型应
始终保持一致。
抗凝剂 :抗凝剂能够显著影响测定的结果。肝素钠
处理的血浆不适合做Amplicor HIV-1 Monitor试验, 因为肝素是PCR反应的一个潜在的抑制剂。如果必 须用RT-PCR方法测量肝素处理的血浆,可以向标 本中加入肝素酶以分解肝素。另外,肝素处理的血 浆中病毒颗粒降解的速率显著高于EDTA钠盐和枸 橼酸钠处理的血浆,一般情况下不同抗凝剂处理的 血液6小时之内HIV RNA的降解速率分别是1.8%/小 时(EDTA)、3.3%/小时(枸橼酸钠)和5.0%/小 时(肝素)。在血液处理方法相同的条件下,用 EDTA钠盐抗凝的血浆结果显著优于枸橼酸钠和肝 素,因此EDTA钠盐是首选的抗凝剂。
NucliSens HIV-1定量实验有了较大改进,将NASBA核酸扩增技术与实时(realtime)检测技术结合起来,能够对检测进行实时监控。结果表达方式由每毫升标本 的拷贝数(cp/ml)改变为每毫升国际单位(IU/ml)。 可扩增HIV-1 M组的A-G亚型。
NucliSens 核酸分析系统利用三项技术: 专利的BOOM核酸提纯技术:手 工 manual 半自动miniMAG 自 动 easyMAG “扩增RNA”的NASBA技术 使用荧光分子信标(molecular beacon)对扩 增产物的实时检测技术
扩增HIV-1 M组的A-H亚型。
本实验系统检测的定量范围为50至500,000HIV-1 RNA拷贝
/ml。 检测结果以如下形式报告: 低于最低定量限的值报告为“<50” HIV-1 RNA拷贝/毫升。 在最低定量限和最高定量限之间的值报告为实际检测值。 高于最高定量限的值报告为“>500,000” HIV-1 RNA拷贝/ 毫升。 高于500,000HIV-1 RNA拷贝/毫升的样本位于检测的最高定 量限以上,必须适当稀释以获得确切的量值。在人血浆中稀 释高浓度样本,稀释用血浆需经VERSANT HIV-1 RNA3.0 Assay (bDNA) 检测鉴定不含HIV-1 RNA,按照实验流程重 新检测,得出的结果乘以稀释倍数以确定初始样本的病毒载 量。
疑难样本的辅助诊断 在感染早期或疾病终末期出现抗体不确定反 应时,RNA的测定结果可帮助提供HIV感染 早期或终末期的证据。但在一般情况下,抗 体检测足以对HIV感染与否作出正确诊断。
病程监控及预测 HIV感染后病毒载量的变化具有一定的规律, 这种变化与疾病的进程密切相关。定期进行 病毒载量检测有助于确定疾病发展的阶段, 以确定相应的治疗方案。HIV病毒载量与6 年发病率的关系: 病毒载量(拷贝/毫升) 6年发病率(%) <500 5.4 501-3000 16.6 3001-10000 31.7 10001-30000 55.2 >30000 80
标本处理时间:HIV-1在体内进行快速转换,
平均半衰期是大约6个小时。HIV-1在体外未 处理的全血中也快速降解,全血中HIV RNA 的降解速率在6小时之内平均是9% (0.04log),最大的降解速率是在采血以后68小时,采血以后30小时内可能减少0.5log。 因此为了减少病毒颗粒降解对检测的影响, 应该在采血以后6小时之内分离血球和血浆。
样品的保存温度: -70℃室温冻融3次,HIV RNA变化的幅度小于
0.2log。 -70℃保存5个月,HIV RNA减少0.3-0.5log。保存 12个月,HIV RNA减少一般不超过0.4log. 血浆在室温或4 ℃保存3天,HIV RNA减少不超过 0.5log。 -20 ℃保存2-3年,病毒载量大约减少50%左右。反 复冻融影响更大。
COBAS AMPLICOR HIV-1 MONITOR实验包 括以下步骤: 样本制备 靶RNA的逆转录产生cDNA 用HIV-1特异互补引物进行靶cDNA PCR扩增 通过比色进行与探针结合的扩增产物的测定
COBAS AMPLICOR HIV-1 MONITOR 试剂
对HIV-1病毒RNA的定量检测是采用HIV-1定 量标准品来完成的。HIV-1定量标准品是包括 作为HIV-1靶RNA引物结合部位和HIV-1扩增 子单一探针结合区的非感染性RNA转录物。 将已知拷贝数的HIV-1定量标准品加到每一个 样本中和HIV-1靶序列一起共同进行样本制备、 逆转录、PCR扩增、杂交和检测。COBAS AMPLICOR 分析仪根据HIV-1定量标准品的 数据计算每一个样本的HIV-1RNA 的含量。 可扩增HIV-1 M组的A-H基因亚型。