111高灵敏度病毒载量检测
⑹ 只有HBV-DNA阳性
隐匿性慢性乙型肝炎 约有20%血清除HBV-DNA阳性外,其余HBV 标志物 均阴性,但首先要排除其他病毒和非病毒 引起的肝损伤。 所以,未查明原因临床久治不愈肝损伤者,要 排除HBV感染。
▲ 需要应用高灵敏度方法测HBV-DNA
⑺ 乳汁HBV-DNA HBV感染者哺乳期母亲,可能血及乳汁都需要用 高灵敏度检测,或者乳汁需要用高灵敏度方法检 测HBV-DNA ▲以上几种类型高灵敏度检测HBV-DNAHBe
抗-HBc 抗-HBc 抗-HBs 抗-HBe 抗-HBc
(三抗体) (双抗体) (单抗体) (单抗体) (单抗体)
S基因突变时可出现HBsAg 阴性乙型肝炎
隐匿性慢性乙型肝炎 大部分只显示以上抗体, 伴有慢乙肝的临床表现。
血清HBV-DNA 阳性,但数量少
2.0 test
<20 IU/mL
222例(51.6%)>20 IU/mL
64/222 (28.38%) E+02 copies/mL
107/222 (48.20%) E+03 copies/mL
35/222 (15.77%) E+04 copies/mL
7/222 (3.15%) E+05 copies/mL
观察,如ALT升高, 或肝组织炎症坏死 ≥G2,或纤维化≥S2
口服核苷(酸) 类似物或 干扰素
口服核苷(酸)类似物
慢性乙型肝炎治疗流程图
中国慢性乙型肝炎防治指南(2010版)
cobas 高灵敏度HBV DNA检测能更准确判断应答情况
启动治疗 Week 12: 鉴别原发性无应答
Week 24: 疗效早期预测
检测灵敏度 普通试剂
0
6 Months
12
16
18
cobas高精准 HBV DNA检测能更准确预测耐药发生
GLOBE研究
50 45 40
HBeAg(+)
HBeAg(–)
39%
1年耐药(%)
35 30 25 20 15 10 7%
替比夫定 拉米夫定
25% 20% 13% 10% 5% 7% 0% 1% >4 log <LOQ LOQ–3 log 3–4 log >4 log 6% 13% 7%
其他:唾液、痰液、汗液 CSF、浆膜腔液、阴道分泌物、羊水……
HBV基因分型
根据HBV全基因序列差异≥8%或S区基因序列差异
≥4%, HBV已发现A~I 9个基因型。 A型主要见于美国和北欧; B、C型主要在亚洲及远东地区; D型世界各地均有,主要在地中海地区; E型仅限于非洲; G、H、I型尚不明。 我国以C和B型为主,偶见D型,B与C基因型感染者相 比,B型对干扰素a治疗较敏感,较早出现HBeAg血清 转换,较少进展为慢性乙肝、肝硬化和HCC。
7/222 (3.15%) E+06 copies/mL
2/222(0.9%) E+07 copies/mL
经cobas TaqMan HBV 检测后,共有158/430(36.7%)病毒载量> 1000 copies/mL
Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan HBV病毒载量系统对慢性乙型肝炎抗病毒治疗监测的意义 李敏伟 沃健儿 倪淑君 王 静 李兰娟 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室 Data on file
高灵敏度病毒载量检测在肝炎诊疗中的意义
新乡医学院第三附属医院 郑桂兰
高灵敏度病毒检测在乙型肝炎 诊疗中的意义
慢性乙型肝炎治疗的总体目标
最大限度地长期抑制HBV,减轻肝细胞炎症坏死, 延缓和减少肝脏失代偿、肝硬化、HCC及其并发 症的发生,从而改善生活质量和延长存活时间。 治疗:包括抗病毒、免疫调节、抗炎、抗氧化、 抗纤维化和对症治疗。其中抗病毒治疗是关键。 只要是适应症,且条件允许,应进行规范的抗病 毒治疗。
3.判断传染性强弱;
4.指导疗效评价; 5.用于注射疫苗后,阻断垂直传播的效果评价。
HBV-DNA存在哪里 (哪里哪些情况下可以检测到HBVDNA)?
HBV感染者: 证实:血液、唾液、汗液、精液、 尿液、阴道分泌物、乳汁、羊水、 CSF、肝组织、肾组织、浆膜腔液 ……
高灵敏度检测HBV-DNA临床意义
▲ 需要应用高灵敏度方法
但 乙肝病毒 前C区基本核心启动子(BCP)变异, 可使前基因组RNA转录增强,病毒复制能力增 加 。 此时,虽然“小三阳”,病毒数量较大。
⑶ HBsAg 抗-HBc (“小二阳”)
部分HBV感染者可能由于C基因变异,导致不能 形成HBeAg,也无抗-HBe
▲ 需要应用高灵敏度方法检测
5
0
1% 2%
<LOQ
0% LOQ–3 log 3–4 log
24 周 HBV DNA
Lai CL, et al. Hepatology 2005; 42(suppl 1):232A–233A (Abstract 92)
例 华西医院采用国产普通试剂和高灵敏度试剂比较
20例 10例大三阳 8例小三阳 2例 小二阳 9例服用ETV 11服ADV (48周) 普通试剂 均﹤1000拷贝/ml 高灵敏度 11例 阴性 8例 103~ 104拷贝/ml 1例 105拷贝/ml 普通试剂假阴性率高达45%(9/20) ∴ 高灵敏度试剂检测帮助临床医生更准确检测疗效 及判断治疗终点。
有肝硬化
HBeAg+ HBV DNA≥20000 IU/mL
HBeAgHBV DNA≥2000 IU/mL
代偿期
失代偿期
ALT≥2ULN
ALT<2ULN
ALT≥2ULN
HBeAg+ HBV DNA≥ 2000 IU/mL
HBeAgHBV DNA≥ 200 IU/mL
HBV DNA 可检测到
干扰素或 口服核苷(酸) 类似物
≤QL
300–3 log
3–4 log
>4 log
20
24周HBV DNA, copies/mL
QL=检测下限 (聚合酶链反应 (PCR)-检测不到 †从锁定数据库来的初步数据 <300 copies/mL 用 COBAS® Amplicor™) Di Bisceglie et al. 2006
HBV DNA检测能比生化检测更早发现病毒学突破
cobas高灵敏度HBV DNA检测能更准确判断治疗终点,有效防 漏检(实例1)
南方医院67例治疗前为HBV DNA强阳性样本,治疗24周后 用高灵敏度与普通检测试剂结果对比 67例患者: HBeAg(+),ALT≥2ULN,HBV DNA> 6.0 log10 IU/mL
检测试剂 普通HBV 病例数 34例 33例 HBV DNA分布范围 未检测到,<100 IU/ml 300-105 IU/ml Target Not Detected 27~4.5E3 IU/ml 104~106 IU/ml
8例 CAP/CTM HBV 26例 33例
普通PCR法 “ 假阴性”率 高达44% (26/59)
cobas高灵敏度HBV DNA检测能更准确判断治疗终点 ,有效防漏检(实例 2) 208/430(48.4%)
430例血浆 Realtime PCR HBV<1000 copies/mL
COBAS HBV
有以下优势: ①高灵敏:本方法检测限度可达20IU/ml; ②高特异性:对HCV、HIV、HGV、HEV、输血传 播病毒均保持阴性结果; ③准确度高 与目前常用普通方法(PCR)和分子杂交技术等 相比。
临床应用
⑴ HBsAg
HBeAg 抗-HBc (“大三阳”)
一般不需要应用高灵敏度方法检测(因HBeAg 和DNA几乎同时存在于血液中,此时HBV-DNA多 是最高)。但在HBeAg出现血清转换之前用普通 试剂多测不出HBV-DNA
单一 抗-HBcIgG (+)可以是过去感染,也可以 是低水平HBV感染者。
▲ 此时需要高灵敏度HBV-DNA 技术检测
⑸ 抗-HBC(-): HBsAg HBeAg HBsAg 抗-HBe HBsAg 抗-HBs 抗-HBe HBcAg有很强的免疫原性,HBV感染者几乎均可 检出抗-HBc,但C基因序列发生极少见的变异后 或感染者有免疫缺陷,抗-HBc也查不出,可致抗HBc阴性的乙型肝炎。大多病毒数量少
HBV DNA定量检测贯穿整个诊疗过程
诊 断
HBV DNA
启动 治疗
鉴别 初始 应答
预测 治疗 应答
监测 耐药
证明 持续 应答
Modified from Pawlotsky et al. Gastroenterol 2008
cobas 高灵敏度HBV DNA检测能更准确判断治疗起点
慢性乙型肝炎
无肝硬化
以上免疫学指标为乙型肝炎的检测和临床诊断提 供了敏感、特异、简便、快速的方法,但主要是 免疫学检测的表型指标,且只能提供HBV存在的 间接证据。
并且免疫学指标的出现晚于HBV-DNA。
HBV-DNA检测的临床意义
1.是HBV最直接、特异和灵敏的指标; 2.反映HBV存在的状态:整合的或(和)游离的;
<60 IU/mL 完全应答
60-2000 IU/mL 部分应答
>2000 IU/mL 不充分应答
Keeffe et al Clin Gastroenterol Hepatol 2007
cobas高精准HBV DNA检测能更准确预测远期疗效
替比夫定 拉米夫定
100 82
2 年 60 时 PCR 阴 40 性 (%) 20
《慢性乙型肝炎防治指南》 中华医学会肝病学和感染病学分会 2010年12月10日
小三阳dna定量的标准是
小三阳dna定量的标准是小三阳DNA定量的标准是什么?小三阳是指乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝病毒核心抗体(HBcAb)三项指标中,HBsAg、HBeAg阳性,HBcAb阴性的状态。
小三阳患者是指乙肝病毒携带者中,血清HBV-DNA定量>10^4~10^5拷贝/ml的患者。
那么,小三阳DNA定量的标准是什么呢?小三阳DNA定量的标准主要是通过实验室检测乙肝病毒DNA的数量,来确定患者的病情和治疗方案。
根据国际上的共识,小三阳DNA定量的标准一般是指血清HBV-DNA定量>10^4~10^5拷贝/ml。
这个标准是根据临床研究和实践经验得出的,对于小三阳患者的治疗和管理具有重要的指导意义。
HBV-DNA定量是通过PCR技术来检测乙肝病毒DNA的数量,PCR技术是一种高灵敏度和高特异性的方法,可以准确地检测出血清中的乙肝病毒DNA。
根据检测结果,可以确定患者的病毒载量,从而指导治疗方案的制定和调整。
小三阳患者的DNA定量结果在一定程度上反映了病毒的活跃程度和病情的严重程度。
一般来说,DNA定量>10^4~10^5拷贝/ml的患者病毒活跃度较高,需要及时进行治疗和管理,以防止病情的进一步恶化。
而对于DNA定量<10^4拷贝/ml的患者,可以采取观察和监测的策略,定期进行血清HBV-DNA的检测,以及肝功能和肝脏影像学的检查,及时发现病情的变化。
除了DNA定量,对于小三阳患者来说,还需要进行肝功能、肝脏影像学和肝纤维化程度的评估,综合判断患者的病情和治疗方案。
对于DNA定量>10^4~10^5拷贝/ml的患者,一般建议进行抗病毒治疗,以减少病毒载量,控制病情发展。
而对于DNA定量<10^4拷贝/ml的患者,可以采取规范化管理和监测的策略,定期进行血清HBV-DNA的检测,及时调整治疗方案。
在治疗过程中,需要密切监测患者的DNA定量和肝功能指标的变化,及时调整治疗方案,以达到控制病情、减少病毒载量、保护肝脏功能的目的。
乙型肝炎病毒核苷(酸)类似物耐药的检测
利用错配引物使 PCR产物中产生 特异的酶切位点
结果: 酶切片段长、短变化和多、少变化
限制性内切核酸酶的作用
PCR-RFLP检测HBV YMDD变异
PCR 错配引物设计
PCR-RFLP检测HBV YMDD变异
PCR-RFLP检测HBV YMDD变异
日本Kobayashi等检测18例无症状HBV携带者,发现5例YMDD变异,占27.78%。
YMDD自然变异的几组数据
1
196例CHB患者中,检出存在YMDD变异毒株者共21例,检出率为10.7%。其中YVDD阳性20例,YIDD阳性1例,YVDD和YIDD同时阳性者0例。
2
183例CHB患者中,检出存在YMDD突变毒株者共40例,检出率为21.86%。其中YVDD阳性36例,YIDD阳性3例,YVDD和YIDD同时阳性者1例。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)原理
MALDI-TOF MS检测 HBV YMDD变异的原理
酶切分子量.JPG
优点:
01
高灵敏度、准确度、分辨率
02
能发现相对比例小于1%的变异株。
03
局限性:
04
设备昂贵,目前国内难以用于临床检测。
05
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALD I-TOF MS)
三、需要重视的几个问题
Akarsu M等采用InnoLipa 法检测71例未经抗病毒的成年慢性乙肝携带者,结果有13例检测到YMDD变异株。
Lee CZ等采用引物末端碱基定点突变扩增技术对28例拉米夫定治疗前的CHB患者血清进行了YMDD变异毒株检测,发现有16例(57.1%)存在YMDD自然变异毒株。
直接测序法
甲型肝炎的肝炎病毒核酸检测方法
甲型肝炎的肝炎病毒核酸检测方法甲型肝炎(Hepatitis A)是一种由甲型肝炎病毒(HAV)引起的急性肝炎疾病。
HAV主要通过食物或水源传播,感染者的粪便中含有病毒,当人们摄入被污染的食物或水时,病毒就会进入体内,导致感染。
甲型肝炎的临床表现多样,从无症状感染到轻度疾病,再到重度肝炎,甚至急性肝衰竭。
肝炎病毒核酸检测是甲型肝炎的确诊和病毒携带者的筛查方法之一。
核酸检测通过检测患者体液中的病毒核酸,来确定是否存在病毒感染。
以下是一些常用的甲型肝炎病毒核酸检测方法。
1. 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实时荧光定量PCR是一种高灵敏度和高特异性的核酸检测方法,它可以检测到非常低浓度的病毒核酸。
该方法通过特定引物和探针与病毒核酸结合,产生荧光信号来检测病毒的存在。
RT-qPCR可以快速、准确地确定感染者的病毒载量,并监测病情的变化。
2. 反转录PCR(RT-PCR)反转录PCR是一种将RNA转录成DNA,然后进行PCR扩增的方法。
在甲型肝炎的检测中,RT-PCR可以将患者体液中的HAV RNA转录成HAV DNA,并进行扩增和检测。
这种方法对病毒的检测灵敏度高,可以用于早期感染的诊断。
3. 病毒载量测定病毒载量测定是通过定量检测患者体液中的病毒核酸来评估病情和治疗效果的方法。
常用的方法包括实时荧光定量PCR和RT-PCR。
病毒载量测定可以帮助医生判断感染的程度和预测病情的发展,对指导治疗和预后评估具有重要意义。
4. 其他检测方法除了核酸检测,甲型肝炎的诊断还可以通过检测血清中的抗HAV IgM抗体来确定。
这种方法可以检测到早期感染的抗体产生,但相对于核酸检测来说,其敏感度和特异性较低。
总结起来,甲型肝炎的肝炎病毒核酸检测方法包括实时荧光定量PCR、反转录PCR和病毒载量测定。
这些方法可以快速、准确地确定感染者的病毒载量和病情,对指导治疗和预后评估非常重要。
此外,抗HAV IgM抗体检测也可以用于早期感染的诊断,但其敏感度和特异性相对较低。
国产高精度乙肝病毒载量检测的临床应用评价
浩源
阴性(未检出) 临界阳性(<20 IU/ ml)
阳性(≥20 IU/ ml) 合计
表 1 浩源与罗氏检测结果一致性分析表
Bland-Altman 图。 乙肝病毒载量≥2×101IU/ml 且两 种试剂都有定量 值 时 , 浩 源 与 罗 氏 结 果 偏 差 ≤± 0.4Log 范围内, 一致性为 73%; 病毒载量高于 1× 103IU/ml 时, 浩源与 罗氏结果偏差≤±0.4Log 范 围 内, 一致性为 79.5%。
(四川绵阳四○四医院检验科, 四川绵阳 621000)
[摘要]目的: 比较国产上海浩源高精度乙肝病毒定量系统与罗氏 COBAS Ampliprep/ COBAS TaqMan 48 定量系 统检测乙肝病毒载量的一致性, 评价国产乙肝病毒定量系统的临床适用性。 方法: 收集 2019 年 3 月~5 月在我院检 测高精度 HBV-DNA 的患者血清样本, 采用国产浩源和罗氏高精度乙肝定量系统分别测量样本浓度, 通过 Kappa 值、 R2 值和临床可接受范围评价两种检测系统的相关性。 结果: 以罗氏结果为标准, 浩源结果的阳性符合率 95%, 阴性符合率 75%, 总符合率 93%, Kappa 值为 0.794, 与罗氏结果一致性良好; 两种检测系统结果呈线性相关 (y= 0.954x + 0.185, R2= 0.951, P<0.01); 乙肝病毒载量≥2×101IU/ml 且两种试剂都有定量值时, 浩源与罗氏结果偏 差≤±0.4Log 范围内, 一致性为 73%; 病毒载量高于 1×103IU/ml 时, 浩源与罗氏结果偏差≤±0.4Log 范围内, 一 致性为 79.5%。 结论: 浩源与罗氏高精度乙肝定量检测系统具有较好的一致性, 国产高精度乙肝定量系统可满足临床 需要。
荧光定量试题
荧光定量PCR是一种在PCR反应体系中加入荧光物质,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
荧光定量PCR的主要特点如下:
1. **实时监测**:在整个PCR过程中,可以实时监测到DNA的合成,从最初的模板加入到最后的目的基因扩增产物,都可以通过荧光信号来检测。
2. **定量分析**:通过荧光信号的积累,可以确定反应体系中目的基因的初始浓度,从而进行定量分析。
3. **高灵敏度**:荧光定量PCR的灵敏度远高于常规的PCR,可以检测到极低浓度的目的基因。
4. **特异性**:由于引物和探针的设计更为精确,荧光定量PCR 具有更高的特异性,可以准确地区分不同的基因型或突变型。
5. **自动化**:荧光定量PCR仪器已经实现了全自动化,可以自动完成加样、扩增和检测等步骤,大大提高了检测效率。
荧光定量PCR在许多领域都有广泛的应用,如医学诊断、生物研究、农业检测等。
例如,在病毒检测中,可以通过荧光定量PCR 来快速准确地检测病毒载量;在遗传病研究中,可以用于基因突变位点的筛查和基因表达水平的分析;在农业领域,可以用于转基因食品的检测和农产品中病原微生物的检测等。
病毒高通量测序与生物信息学技术读书札记
《病毒高通量测序与生物信息学技术》读书札记一、病毒高通量测序技术概述在当今生物学研究领域中,病毒高通量测序技术已经成为探究病毒基因组结构、变异及进化等方面不可或缺的工具。
该技术基于大规模平行测序原理,可对大量病毒序列进行快速、高效的测序和分析。
病毒高通量测序技术的主要流程包括样本准备、文库构建、序列捕获、数据生成及生物信息学分析等环节。
样本准备:对采集的病毒样本进行质量控制,确保样本的纯净度和病毒载量满足测序要求。
文库构建:利用特定的酶和试剂,将病毒RNA或DNA转化为适合测序的文库。
在此过程中,需要确保文库的均一性和复杂性,以便后续测序的准确性。
序列捕获:通过高通量测序平台,如Illumina、Thermo Fisher 等,对构建的文库进行大规模平行测序,捕获大量的病毒序列信息。
数据生成:测序过程中产生大量的原始数据,这些数据需要经过初步的质量控制和数据处理,以去除低质量序列和可能的宿主背景噪声。
生物信息学分析:利用生物信息学方法和工具,对处理后的数据进行深入分析,包括病毒基因组的组装、注释、变异检测、进化分析等方面。
通过这些分析,我们可以了解病毒的基因组结构特点、进化历程、变异趋势等重要信息。
病毒高通量测序技术的优势在于其高灵敏度、高分辨率和高通量。
该技术能够快速准确地鉴定病毒种类和亚型,对于病毒溯源、疫情防控、疫苗研发等方面具有极其重要的应用价值。
该技术也为深入研究病毒的生物学特性、致病机制和进化提供了宝贵的数据资源。
在本书的后续章节中,我们将详细介绍病毒高通量测序技术的各个环节,以及与之相关的生物信息学方法和工具。
通过学习和掌握这些内容,将有助于我们更好地理解和应用病毒高通量测序技术,为病毒学研究做出更大的贡献。
1. 高通量测序技术的引入和发展随着生物科学的飞速发展,高通量测序技术已成为现代生物学研究的重要工具,特别是在病毒学领域,其应用更是日益广泛。
本书的第一章节重点介绍了高通量测序技术的引入和发展。
两种全自动核酸检测系统对乙肝核酸检测性能的比较
两种全自动核酸检测系统对乙肝核酸检测性能的比较乙肝病毒(HBV)是世界上一种十分常见的病毒,经常导致慢性肝炎、肝硬化和肝癌等严重疾病。
HBV感染率在不同地区和不同人群中存在着相当大的差异,而其感染率与年龄、性别、教育水平、接种疫苗状况等因素有关。
尽管目前已有各种先进的检出和预防方法,但仍有很大的需求以便更准确地分析HBV感染情况和病程进展情况,从而更好地进行疾病预防和治疗。
在这种情况下,乙肝核酸检测就显得尤为重要。
与血清学检测和HBsAg检测相比,核酸检测更为敏感,能够更早地检测出HBV感染并及时诊断患者的病情。
设备高速、准确度高、样品处理自动化程度高的全自动核酸检测系统已被广泛地应用于乙肝核酸检测。
接下来将对两种全自动核酸检测系统——ABI 7500和Cobas Taqman进行比较。
I. 核酸检测系统的简介ABI 7500和 Cobas Taqman是两个常用的核酸检测系统,具有高灵敏度、可靠性、自动化程度高等特点。
在HBV核酸检测中,两者均可以检测出HBV病毒载量,区分HBsAg阳性和阴性,前者可以在进一步检测后检测出HBV DNA含量和基因型,而后者不仅可以检测HBV DNA含量,还可以通过检测HBV基因型来分析病原体的变异及对抗病毒药物的应用。
二、ABI 7500和 Cobas Taqman 的性能比较A、检测灵敏度在检测灵敏度方面,两者都能检测出极低的HBV病毒载量。
大量文献报道,两种设备检测的灵敏度均能达到10 IU/ml。
但是,有些研究结果显示,在低复制水平中, Cobas Taqman系统的灵敏度比ABI7500略高。
B、可靠性在检测可靠性方面, Cobas Taqman系统具有更高的可靠性。
Cobas Taqman对于血样等复杂样本具有良好的适应性,也能够自动进行至少4800组不同样本的检测来验证系统的可靠性。
同时,Cobas Taqman系统内部使用的核酸大片也有助于确保检测的可靠性。
怎么查艾滋病检测方法
怎么查艾滋病检测方法艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的慢性传染病。
检测艾滋病是非常重要的,因为早期发现可以帮助我们采取适当的措施来管理疾病。
在本文中,我将详细介绍艾滋病的检测方法。
艾滋病的检测一般可以分为两个主要阶段:初筛检测和确诊检测。
接下来,我们将详细讨论每个阶段的检测方法。
1. 初筛检测:初筛检测主要是为了筛查HIV感染可能性高的个体。
常用的初筛检测方法有以下几种:1.1 抗体检测法:这是最常用的初筛方法之一,通过检测血液中的艾滋病毒抗体来确定感染状况。
常见的抗体检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。
这些检测方法简单、准确,并且可以在实验室或临床设置中进行。
1.2 家庭自测:现在市场上也有一些自测艾滋病的产品。
这些产品通常是基于抗体检测原理设计的。
你可以通过在家中使用一个简单的测试工具,在几分钟内得到结果。
然而,家庭自测的准确性可能会稍低于实验室级别的检测方法。
因此,如果家庭自测结果呈阳性,我建议您尽快到医院进行进一步的确认。
1.3 快速检测法:快速检测法通常使用口腔黏膜或指尖血液作为样本。
这些检测方法快速、简便,并可以提供结果。
常见的快速检测方法包括流行病学学调查(EIA)和基质接触式传感器(MATS)。
需注意的是,这些快速检测方法的准确性也可能稍低于实验室级别的检测方法。
2. 确诊检测:如果初筛检测结果呈阳性,将需要进行确诊检测来确认是否感染了HIV。
以下是一些常见的确诊检测方法:2.1 PCR检测法:聚合酶链式反应(PCR)是一种高灵敏度的分子生物学方法,可以检测出很小剂量的艾滋病毒RNA或DNA。
这种方法是诊断HIV感染的“黄金标准”,因为它可以提供高度准确的结果。
2.2 免疫学测定法:免疫学测定法是通过检测血液中的病毒抗原和抗体来诊断HIV感染。
这些检测方法包括免疫荧光抗体法(IFA)、免疫印迹法(Western Blot)和免疫球蛋白M(IgM)测定等。
高灵敏乙肝病毒检测的临床意义
·临床论著·高灵敏度HBV DNA 检测指导慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗的临床意义邵国辉 闫香芹 陈合民 张雷 孙敏 孙瑜【摘要】 目的 探讨高灵敏度HBV DNA 检测对于指导HBV DNA 低载量慢性乙型肝炎(CHB )患者抗病毒治疗的临床意义。
方法 收集应用国产试剂检测结果低于检测下限(< 103 IU/ml )的拟停药组112例患者和拟用药组48例患者共160份血清标本采用COBAS Amplicor 系统再次进行检测,并与HBsAg 定量结果进行对照分析。
结果 经国产试剂检测结果低于检测下限(<103 IU/ml )的160份血清经COBAS Amplicor 系统再次检测有52例(32.50%)标本HBV DNA > 103 IU/ml ,高于高灵敏度HBV DNA 检测下限(20 IU/ml )的标本共115份(占71.88%)。
拟停药组患者HBV DNA ≥ 20 IU/ml 者有72例(占64.29%);拟用药组患者中有19例HBV DNA > 103 IU/ml ,43例≥ 20 IU/ml (占89.58%)。
应用COBAS 试剂检测HBV DNA 不同载量组别与HBsAg 浓度对数值均呈显著正相关(P < 0.01)。
结论 对国产试剂检测HBV DNA 低载量患者应进一步做高灵敏的定量PCR 试剂检测,可更好地指导患者初始应用或停用核苷(酸)类药物。
【关键词】肝炎病毒,乙型;荧光定量PCR ;COBAS Amplicor 系统;临床应用The clinical significance of high sensitivity HBV DNA detection for the treatment of antiviral therapy in patients with chronic hepatitis B Shao Guohui, Yan Xiangqin, Chen Hemin, Zhang Lei, Sun Min, Sun Yu. The First Inpatient Area of the Infectious Diseases Hospital of Jining, Shandong Province, Jining 272031, China Corresponding author: Shao Guohui, Email: 1652564281@【Abstract 】 Objective To investigate the clinical significance of the high sensitive HBV DNA detection for the antiviral treatment of the chronic hepatitis B (CHB) patients with HBV DNA low viral load. Methods Total of 160 sera specimens separated from 112 cases of quasi discontinuation group which were detected lower than the detection line (< 103 IU/ml) and 48 cases of quasi treatment group detected by domestic reagent were tested again using COBAS Amplicor system and compared with the results of quantitative HBsAg. Results There were 52 (32.5%) cases with HBV DNA quantitative value > 103 IU/ml by Amplicor COBAS system out of 160 serum samples lower than the detection line (103 IU/ml) detected by domestic reagent, 115 (71.88%) samples were detected higher than the high sensitive HBV DNA detection line (20 IU/ml). And 72 (64.29%) cases of the withdrawal group were detected than 20 IU/ml; in the treatment group, 19 cases were detected higher than 103 IU/ml, 43 (89.58%) cases were detected ≥ 20 IU/ml in quasi treatment group. There was a significant positive correlation between different HBV DNA load groups by COBAS reagent detection and HBsAg concentration logarithm value (P < 0.01). Conclusions High sensitive quantitative PCR should be furtherly conducted for HBV DNA low load patients to guide the initial application or discontinuation of nucleos(t)ide drugs.【Key words 】Hepatitis B virus; Fluorescence quantitative PCR; COBAS Amplicor system; Clinical applicationDOI :10.3877/cma.j.issn.1674-1358. 2016. 01. 010基金项目:山东省济宁市科技项目编号(No. 2013jnnk09)作者单位:272031 济宁市,山东省济宁市传染病医院一病区通讯作者:邵国辉,Email :1652564281@ 为探求核苷(酸)类药物安全停药的相关指标,本研究对于国产试剂HBV DNA 低于检测下限的慢性乙型肝炎(chronic hepatitisB ,CHB )患者在停药前进行了高灵敏HBV DNA 检测。
高危型HPV病毒载量与宫颈癌及癌前分型的相关性分析
高危型HPV病毒载量与宫颈癌及癌前分型的相关性分析谢春;朱海东【摘要】目的探讨感染高危型人乳头瘤病毒(HPV)的载量与宫颈癌及癌前分型的相关性.方法回归性分析2013年3月至2015年3月在该院妇科初诊筛查 HPV 病毒阴性的2287例患者的临床资料,采用 HC-Ⅱ进行 HR-HPV DNA的载量测试与反向膜杂交技术检查.所有患者均行宫颈活检,根据病理结果将病毒阳性组分为5组.采用 Logistic回归分析法分析病毒载量与子宫颈癌及癌前分型的相关性.结果与病毒阴性组相比,病毒阳性组患者发生CIN Ⅲ或宫颈癌变的概率均较高,差异有统计学意义(P<0.05);病毒阳性组患者感染HPV病毒的载量越高,CIN程度越高,两者呈正相关(r=0.743,P<0.05).病毒低、中和高载量组分别与病毒阴性组比较,发生CINⅢ或子宫颈癌的危险性相应增加.HPV 16和18与非 HPV 16和18患者发生CINⅢ或宫颈癌的危险性相应增加.结论 HR-HPV DNA的载量与宫颈癌变程度相关,对 HR-HPV DNA定性及定量检测对预判宫颈病变的发展具有重要指导意义.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2018(047)009【总页数】3页(P1287-1289)【关键词】人乳头瘤病毒16;人乳头瘤病毒18;宫颈肿瘤;宫颈上皮内瘤样病变;宫颈炎【作者】谢春;朱海东【作者单位】商丘医学高等专科学校,河南商丘476000;商丘医学高等专科学校,河南商丘476000【正文语种】中文【中图分类】R737.3临床发现,人乳头瘤病毒(HPV)有诱发乳头状瘤转化为鳞状上皮细胞癌的倾向。
文献报道,全球大约有80%的女性查出HPV阳性,其中大部分可以自限性的消除,少部分会持续性进展,最终只有1%左右进展成为子宫颈癌[1]。
因此,检测出其中的危险人群,研究出一个有效的分流依据成为筛查的最终目的。
高危型HPV(HR-HPV)主要是指感染HPV 16或HPV 18型病毒[2]。
