不同受精方式对单原核胚胎发育潜能的影响
人体外受精低质量胚胎单卵裂球发育潜能研究
of t he bla s tom ere s coul d de velop t o e a rly bl a s tocyst of the bla st om eres cou ld ce ll l i ne.
d evelop t o trop hect od erm l i ke out g rowt h a nd t here wa s no d eri va ti on of hu m a n em bryoni c st em
2
P < 0. 05 为差异有统计学意义 � 检验 ，
一� 低质量胚胎单个卵裂球发育到囊胚阶段 7% ( 252 / 281 ) �卵裂球经体外培 共收集低质量胚胎 62 个 ， 获取正常形态卵裂球 252 个， 获取率为 89. 养后其继续卵裂率为 47. 6% ; 致密化率为 28. 6% ; 早期囊胚形成率为 20. 2% ; 晚期囊胚形成率为 13 .1% � 3 � 7 细胞期低质量胚胎单卵裂球未能发育到晚期囊胚阶段; 4 � 5� 6 细胞期低质量胚胎单卵裂球均能形 其中， 成晚期囊胚， 且它们之间各发育阶段的比率均无显著的统计学差异 ; 4 细胞期低质量胚胎单卵裂球致密化率 和早期囊胚形成率显著高于 3细胞期低质量胚胎单卵裂球， 5 细胞期低质量胚胎单卵裂球早期囊胚形成率 也显著高于 3细胞期低质量胚胎单卵裂球 ( 表 1 ) � 单个卵裂球在卵裂球培养液中培养 24 h 后出现卵裂现象; 48 h 后表现为致密化; 72 h 后形成早期囊胚 ; 96 h 后形成晚期囊胚� 少数卵裂球会延迟或提早出现上述现象� 培养后所形成的晚期囊胚在倒置显微镜 下未观察到明显的内细胞团 ( 图 1) �
n vi t ro f er ti l i zat i on， IVF) 中胚胎的质量评价标准主要依据胚胎形态及其发育速度 �本 目前， 体外受精( i 中心根据受精后第 3天的胚胎形态将胚胎分为以下 4 级: A 级 : 卵裂球对称， 胞质无异常 ， 无碎片; B 级: 卵裂 球对称或不对称， � 胞质无异常， 碎片 < 20% ; C 级: 卵裂球对称或不对称， 碎片 20% 50% ; D 级 : 卵裂球对称 或不对称， 碎片 > 50% � 受精后第 3天卵裂球数 �5 ， 且形态评级为 A 级或 B 级的胚胎为优质胚胎， 用于移 植或冷冻， 余为低质量胚胎 �
不同来源精子对体外受精患者胚胎和妊娠结局的影响
・
・２１ １ ・ 论著 ・ （ 临床 研 究 ）
不同来源精子对体外受精患者胚胎和妊娠结局的影响
蔡敏 生 ，邓 茹 （ 梅州 市 人 民医 院 生殖 医学 科 ， 检 验科 ，广东 梅 州 ５ １ ４ ０ ０ ０ ）
【 摘要 】 目的 探讨不 同来源精 子对体外受精 患者胚胎和妊娠 结局的影响。方法 回顾性 分行 卵胞浆 内单精子 注射 （ Ｉ Ｃ Ｓ Ｉ １技
术治疗的患者 ２ １ 例 ，依据精子来源分为三组各 ７ 例 。Ａ组患者给 予手 淫法取精 ，Ｂ组患者给予睾丸穿刺取 精术取精 ．Ｃ组给 予经
皮 附睾 穿刺取精 术取精 。结果 在 受精成功率 、卵裂 率、优质 胚胎率方 面，Ｃ组 明显 高于 Ａ组 、Ｂ组 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ，但 Ａ组 与 Ｂ组
ａ ｓ ｐ ｉ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ（ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ Ｃ ） ， ｗ ｉ ｔ ｈ ７ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｉ ｎ ｅ ａ ｃ ｈ ｒｏ ｇ ｕ ｐ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ Ｉ ｎ ｆ ｅ ｒ ｔ ｉ ｌ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｕ ｃ ｃ ｅ ｓ ｓ ｒ ａ ｔ ｅ ， ｃ ｌ ｅ ａ ｖ ａ ｇ ｅ ｒ ａ ｔ ｅ ， ｈ ｉ ｇ ｈ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｅ ｍ ｂ ｒ ｙ ｏ ｒ ａ ｔ ｅ ， ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ Ｃ ｗ ａ ｓ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｎ ｔ ｌ ｙ ｈ ｉ ｇ ｈ ｅ ｒ ｔ ｈ ａ ｎ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ Ａ ａ ｎ ｄ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ Ｂ（ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， ｗ ｈ ｉ ｌ ｅ ｎ ｏ ｓ ｔ ａ ｔ ｉ ｓ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｗ ａ ｓ ｆ ｏ ｕ ｎ ｄ ｂ ｅ ｔ ｗ ｅ ｅ ｎ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ Ａ ａ ｎ ｄ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ Ｂ ＞ ０ ． ｏ ５ ） ． Ｎ ｏ ｓ ｔ ａ ｔ ｉ ｓ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｗ ａ ｓ ｆ ｏ ｕ ｎ ｄ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｅ ｇ ｎ ａ ｎ ｃ ｙ ｒ ａ ｔ ｅ ａ ｎ ｄ ｅ ｍｂ ｙｏ ｒ ｉ ｍ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ａ ｔ ｅ ａ ｍｏ ｎ ｇ ３ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｓ ） ＞ ０ ． ０ ５ ） ． Ｃ ｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ｓ Ｐ ｅ ｒ ｃ ｕ ｔ ａ ｎ ｅ ｏ ｕ ｓ
体外受精中1PN及 0PN(2PB)胚胎发育替能及影响因素分析
体外受精中1PN及0PN(2PB)胚胎发育替能及影响因素分析张亚摘, 殷宝莉, 张翠蓮·, 韦多, 郝好英, 宋小兵, 谢娟珂(郑州大学人民医院生殖医学研究所/河商省人民医院生殖医学研究所,郑州450003)【摘要】目的初步探讨体外受精一胚胎移植周期中lPN及OPN(2PB)胚胎形成的影响因素和发育潜能,以探寻提高卵母细胞利用率的可行性方法,方法对787个IVF周期和298个ICSI周期患者授精后l8-20 h观察到的lPN及0PN (2PB)胚胎继续进行体外培养,观察其原核及卵裂情况,序贯培养至D6 ,观察囊胚形成情况;并回顾性分析这些患者的临床资料,研究lPN及OPN(2PB)胚胎形成的影响因素。
结果(l)lPN及OPN(2PB)胚胎可卵裂并形成囊胚,但卵裂率(分别为90.l6%和88.ll%)和囊胚形成率(l7.09%和30.03%)均显著低子2PN胚胎(分别为98.40%和45.7l%)(P均<0. 05);(2) lPN胚胎的形成随患者的年龄、体外受精方式及获卵数的不同而不同,而0PN(2PB)胚胎的形成只随患者年龄不同而异(P< 0.05);(3)经Logistic回归分析发现,lPN和0PN(2PB)胚胎的形成与患者选择的受精方式、MII卵数、2PN胚胎数相关(P< 0.05),而与患者的年龄、体重指数、基础内分泌水平及获卵数无关(P< 0.05)。
结论患者的体外受精方式、获得的MII卵数以及受精后的2PN胚胎数可能影响到1PN和0PN(2PB)胚胎的形成;lPN及0PN(2PB)胚胎有一定发育潜能,但较2PN胚胎低;在行補助生殖技术助孕过程中,应综合考虑各种影响因素,以降低lPN和0PN(2PB)胚胎的发生率,提高卵母细胞的临床利用率。
【关键词】体外受精; 单原核(1PN)胚胎; 胚囊; 发育潜能; Logistic回归在人类体外受精一胚胎移植(IVF-ET)技术中, 常于授精后16~20 h 内通过光学显微镜对胚胎原核数目进行观察及评分,正常受精的判断标准为观察到胚胎内存在明确的2PN(pronucleus)及2PB (polar body)。
不同受精方式对获卵数较少患者妊娠结局的影响
・
论
著 ・
不 同 受 方 式 对 获 卵 数 精 较 少 患 者 妊 娠 结 局 的 影 响
吴 昕 ， 艳 ， 罗 刘春 莲 ， 胡 蓉 ， 万红 景
［ 摘要 ］ 目的 比较获卵数少的患者采用不同受 精方式对其妊娠结 局的影响。方法 回顾性 分析 １７个周 ２
期 获 卵 数 少 于 ６个 的患 者 ， 用 体 外 受 精 （Ｖ ） 卵胞 浆 内 单 精 子 显 微 注 射 术 （Ｃ Ｉ ， 采 ＩＦ 或 ＩＳ） 比较 两 组 受 精 率 、 精 受 精 多
ｒｔ Ｐ＜００ ） Ｉ Ｓ ｏｐｏ ｍ ｎｃｉｃｌ ａｅｔ ｐｒ ｂｅｅ ｂｙｓ ｎ ｃｕ ｕａｖ ｔｌ ｒｇａｃ ｔ ｗ ｒ ｉ ｅ ａ ａ ａ ｅ（ ．５ ； ｎＩ Ｉ ｕ ｆ ｅ ｅ ｒｉ ｔ ｎｓ ｏｔ ｌ ｍ ｒｏ ｄａｃｍ ｌ ｉ ｔ ａ ｐｅｎｎｙｒ ｅ ｅ ｈｇ ｒｈｎｔ ｔ Ｃ ｇ ｒ ｓ ｔａｐ ｉ ａ ａ ｔｅｏ ａ ｅ ｈ ｔ ｈ ｉ ｏｐＩ Ｆ （ ０ ０ ） ｎ ｍ ｒ ａｓ ｒ ａｃｌｔ ｎｒ ｅｗ ｓ ｏ ｅ Ｐ＜ ．５ ．Ｔ ｏｇ ｅｆｒｌｙｒ ｅ ｈ ｕｌｙｅ ｂ ｏ ｎｇ ｕ ｒ Ｖ Ｐ＜ ．５ ，ａｄｅ ｂｙ ｔ ｎｆ ｎｅ ａｏ ｔ ａ ｗ ｒ（ ０ ０ ） ｈｕｈｔ ｔｉ ａ ，ｔ ｑａ ｔ ｍ ｒ ｓ ｏ ｒ ｅｃ ｌｉ ａ ｌ ｈ ｅ ｉｔ ｔ ｅ ｉ ｙ ｒｔ ａｄｐｅｎ ｎｙ ａ ｅ ｉ ｅ ｔａ Ｆｇ ｕ ｓ ｉｈｄｎ ｔｉｉａｓ ｎｆａｃ Ｐ＞ ．５ ． ｏ ｃ ｓ ｎ ＩＳ ｎｉｐｏｅ ｅ ｉ ａ ｎ ｒｇａｃ ｔ ｗ ｒ ｈ ｈｒｈｎＩ ｏｐ ，ｔ ａ ｏ ａ ｓｃｌ ｉ ｉｃｎｅ（ ０ ０ ）Ｃ ｎ ｌ ｉ Ｃ Ｉ ａ ｒｖ ｒｌ ｅ ｒｅ ｅ ｇ Ｖ ｒ ｓ ｔｔ ｇ ｉ ｕｏ ｃ ｍ ｆｔ —
IVF周期中单原核胚胎的形态学及体外发育潜能
第 35 卷 第 6 期 2014 年 11 月
大于 ICSI 组 （26．77 ± 2．29）μm （P ＜ 0．05）， 且 前 者 囊 胚 形 成 率 （IVF，50．96％；ICSI，31．67％；P ＜ 0．05） 和 优 质 囊 胚 率 （IVF，
24．38％；ICSI，10．53％；P ＞ 0．05）均 高 于 后 者 。 不 同 极 体 数 目 （不 确 定 、2PB、1PB）的 1PN 胚 胎 间 原 核 大 小 无 统 计 学 差 异 （P ＞
摘 要 ： 【目 的 】 探 讨 IVF－ET 周 期 中 单 原 核 （1PN）胚 胎 形 态 学 及 继 续 体 外 培 养 潜 能 ，指 导 其 临 床 利 用 价 值 。 【方 法 】 对 受
精 后 16 ～ 18 h 观 察 到 的 486 个 1PN 胚 胎 进 行 体 外 培 养 ，观 察 其 原 核 大 小 、极 体 及 卵 裂 情 况 ；通 过 囊 胚 序 贯 培 养 法 将 其 中 374
0．05），但 其 优 质 囊 胚 率 有 统 计 学 差 异 （39．39％，20．00％，17．65％；P ＜ 0．05）。 D3 评 分 级 别 越 优 、卵 裂 球 数 目 越 多 者 ，其 囊 胚 形
成 率 （P ＜ 0．05）和 优 质 囊 胚 率 （P ＜ 0．05）越 高 。 【结 论 】 对 于 IVF 来 源 的 1PN（2PB）胚 胎 ，可 通 过 对 其 形 态 学 和 胚 胎 发 育 潜 能 进
人卵母细胞的形态对受精及 早期胚胎发育的影响
(表 1) 。细胞质内容物包括折光体 、空泡 、囊泡 、多 泡体 、深色颗粒 、脂质颗粒和原纤维物质等 。
表 1 根据第一极体形态和卵周隙对卵母细胞分组 Table 1 Oocyte grouping according to first polar body
morp hology and perivitelline space
Effect of human metaphase Ⅱoocyte morphology on fertilization and early embryo development after intracytoplasmic sperm injection
CHEN J uan , FEN G Ting , DIN G Wei , QIAN Yun , L IU Jia2yin , CAI Ling2bo , MAO Yun2dong
2 结 果
2. 1 卵母细胞形态对受精率的影响 结果见表 2 ～表 4 。与 1 、2 组相比 ,卵周隙正常的卵母细胞正 常受精率较高 ,未受精率和异常受精率均略低 ,但差 异无显著意义 ( P = 0. 080 , P = 0. 090 , P = 0. 649) 。 第 4 组的正常受精率极显著地高于第 1 、2 、5 组 ( P = 0. 006 , P = 0. 009 , P = 0. 007) ;而第 3 、4 组的未受 精率显著低于第 1 、5 组 ( P < 0. 05) 。有细胞质内容 物的卵母细胞正常受精率稍低于无细胞质内容物的 卵母细胞 ,而未受精率和异常受精率前者高于后者 , 但差异均无显著意义 ( P = 0. 839 , P = 0. 360 , P = 0. 176) 。 2. 2 卵母细胞形态对早期胚胎发育的影响 如表 2～4 表所示 ,五组卵母细胞受精后的卵裂率和优质 胚胎率差异均无显著意义 ( P = 0. 856 , P = 0. 895) , 但随着卵周隙变大和第一极体形态逐渐破碎 ,受精 后的优质胚胎率有下降的趋势 。有细胞质内容物的 卵母细胞受精后的卵裂率低于无内容物的卵母细 胞 ,但差异无显著性意义 ( P = 0. 552) ,细胞质中无 内容物的卵母细胞受精后的优质胚胎率显著高于有
女性原发不孕3种体外受精方式效果比较
组和 Ｂ组 ， 差异有统计学意义（ ００ ０ ， ３组的受精率 、 Ｐ＝ ．０ ） 但 正常受精率差异无统计学意义。３组 ＞ ４
细胞胚胎 、 细胞碎片 ＜ ０ ２ ％的胚胎和优 良胚胎 比率 以及 妊娠率差异均无 统计学意 义 （ Ｐ＞０ ０ ） ．５ 。Ａ 组 的完全受精失败率为 ６ ７ ％ （／ １ ） 而另外两组均无完全受精失败发生 。结论 ： Ｓ 不能改善女 ．２ ８ １９ ， Ｉ Ｉ Ｃ 性原发不孕患者 的体外助孕 临床结局 ， Ｓ 的扩大应用应慎重 。 Ｉ Ｉ Ｃ
ｔａ ｒ ｐＢ ａｄ Ｃ， ｉ ｅｓ ｔ ｔ ａ ｓ ｉｃ ｎ ｅ（ ０ ０ ０ ， ｔｏ ｇ ｅ ｉｅ ｎ ｅ ｆ ｅｔｉ ａ ｓ ｈ ｎｇｏ ｎ ｗ ｔ ｔ ｔ ｉｉｌ ｉ ｆ ａ ｃ Ｐ＝ ．０ ） ａ ｈ ｕ ｈｔ ｆ ｒ ｃｓ ｆ ｉ ｒｔ ｕ ｈ ｈ ａ ｓｃ ｇ ｉ ｎ ｌ ｈ ｄ ｅ ｏ ｒｌ ｙ ｔ ｅ
关键词
体外受精 一胚胎移植术
卵细胞浆 内单精子注射
受精失败 妊娠率
Ｃｏ ａ ａ ｉｅ Ａｎ ｌ ｓｓｏ ｈ ｆ ｃｓ ｏ ｒ ｉ ｚ ｔ ｎ Ｍ ｅ ｈ ｄ ｏ ｍ ａｅ Ｐ ｉ ｒ ｎ ｅ ｔ ｉ Ｘｕ ｍｐ ｒ ｔ ａ ｙ ｉ ｎ ｔ ｅ Ｅｆ ｔ ｆ３ Ｆｅ ｔ ｉａ ｉ ｔ ｏ ｓ ｆ ｒ Ｆｅ ｌ ｒｍａ ｙ Ｉ ｆ ｒｉ ｔ ｖ ｅ ｌ ｏ ｌｙ
3种受精方式在辅助生殖助孕技术中的效果比较
64 中国卫生产业·第八卷·第（05-06）期合刊为了了解各种受精方式对临床结局的影响,本研究回顾性分析了本院生殖中心IVF、ICSI及half-ICSI的临床效果,以为将来的方案选择提供依据。
1 资料与方法1.1 一般资料回顾分析2006年10月至2008年11月沈阳市妇婴医院生殖医学中心的581例不孕症患者。
均为原发性不孕、不孕原因仅为输卵管因素不孕、男方精液常规检查正常,精子总数≥20×106/mL,a+b级精子>50%,形态正常精子>10%。
A组342个IVF周期,B组54个ICSI周期,C组half-ICSI 185周期。
1.2 方法1.2.1 超促排卵方案 患者均选用标准的长方案,即于Gn使用前1个月经周期的第21天开始用GnRH-a(达菲林,法国益普生制药有限公司),0.03～0.05mg/d,直至注射hCG日停止,达到垂体降调节效果后应用促性腺激素(Gn):Gonal-f,Sereno 或Puregon促排卵。
根据B超监测和血清E 2水平适当调整药物剂量,当2个主导卵泡直径达18mm时肌注hCG(瑞士Serono)10000IU,36～38h后经阴道B超引导下穿刺取卵。
采用密度梯度离心及上游法处理精液。
1.2.2 受精方式与培养 取卵后, A、B组按常规分别行IVF和ICSI,C组将所获得的卵子行half-ICSI,即一半IVF,一半ICSI(同一份精液)。
受精后16～18h 观察受精情况,第3d根据卵裂球的数目、大小、形状及对称性、有无碎片等将胚胎分级(Ⅰ～Ⅳ级),选择优质(Ⅰ～Ⅱ级)胚胎经阴道移植入宫腔。
剩余Ⅲ级以上胚胎冷冻保存。
14d测定血清绒毛膜促性腺激素(β-H CG),阳性者于移植后28dB超检查妊娠囊和心管搏动以确定临床妊娠。
1.2.3 计算方法 (1)正常受精率:2PN受精数/获卵数;(2)完全受精失败率:完全受精失败数/治疗周期数;(3)优胚率:优胚数/卵裂数;(4)临床妊娠率:临床妊娠数/治疗周期数。
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不同受精方式对单原核胚胎发育潜能的影响【第一作者简介】王珊珊(1986-)，女，实习研究员、硕士，主要从事生殖医学研究。
【摘要】目的:探讨常规体外受精（IVF）及卵胞浆内单精子注射（ICSI）后单原核胚胎的发育潜能，为提高卵子利用率探寻可行的方法。
方法:回顾性分析3614个IVF周期和1306个ICSI周期的患者资料。
按照年龄分为35岁3组，分析不同授精方式下女方年龄对单原核受精卵出现的影响，并进一步研究35岁以下患者中，不同授精方式对单原核胚胎发育潜能的影响。
结果:在IVF和ICSI周期中，>35岁组的单原核受精卵形成率显著高于<30岁组(P<0??05)。
35岁以下女性患者中，IVF组单原核胚胎的囊胚形成率及优质囊胚形成率显著高于ICSI组（28??97% vs 12??12%，11??90% vs 0），并具有统计学差异(P<0??05)。
结论:女方年龄、授精方式可能与异常受精的发生有关。
在行辅助生殖技术（ART）时应综合考虑这些因素，为临床提高卵子利用率提供新思路。
【关键词】体外受精；卵胞浆内单精子注射；单原核Influence of different fertilization modes on the developmental potential of monopronucleus embryosWANG Shanshan, ZENG Huiming, ZHANG Ningyuan, SUN Haixiang△. Reproductive Medicine Center, Drum-Tower Hospital Affiliated to Nanjing University Medical School, Nanjing 210008, China【Abstract】Objectives: To investigate the developmental potential of monopronucleus embryos in in-vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) to explore a feasible approach for improving the utilization rate of oocytes. Method: Data of 3614 patients in IVF cycles and 1306 patients in ICSI cycles were retrospectively analyzed respectively, and divided into three groups according to age of patients, 35 years group. The impact of age on monopronucleus zygotes was analyzed in different fertilization modes and the influence of different fertilization modes on the developmental potential of monopronucleus zygotes was further studied in group of patients under 35 years old. Results: The formation rate of monopronucleus zygotes for the group >35 years was substantially higher than that in group <30 years (P<0??05) in IVF and ICSI cycles. Among female patients under 35 years old, the blastocyst rate and high-quality blastocyst rate of embryos from monopronucleus zygotes in the IVF group were substantially higher than the ICSI group (28??97% vs 12??12%, 11??90% vs 0), with statistically significant differences(P<0??05). Conclusion: The age of female patients and fertilization modes may be related to the occurrence of abnormal fertilization. Multiple factors should be considered during assisted reproductive technology (ART), to provide new ideas for improving the utilization of oocytes.【Key words】In vitro fertilization; Intracytoplasmic sperm injection; Monopronuclear【中图分类号】R329.1【文献标志码】A在体外受精-胚胎移植（IVF-ET）过程中，卵子在常规体外受精（in vitro fertilization, IVF）或卵胞浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection, ICSI）后16~18h，显微镜下观察到两个原核（2PN），且在卵周隙内可见2个极体，该受精卵则被判断为正常受精，而出现单原核（monopronucleus zygotes,1PN）及多原核（≥3PN）则视为异常受精。
有研究报道，多核胚胎不仅使胚胎的着床失败率和自然流产率升高，还可导致葡萄胎的产生和染色体异常儿的出生，不能用于移植\[1\]。
对于单原核胚胎，是否有可利用价值，目前尚无定论。
因此，临床上通常选择正常受精而发育形成的优质胚胎进行移植。
细胞遗传学研究表明，发生卵裂的单原核卵子80%为二倍体，12%为单倍体，另有7%为三倍体\[2\]。
除了遗传学因素外，不同授精方式在卵裂的过程中也起着非常重要的影响，导致1PN胚胎的染色体组成不同。
Yan J等\[3\]研究显示，常规IVF周期中约54??35%的1PN胚胎为二倍体，而ICSI周期中只有约31??51%的1PN胚胎为二倍体，提示IVF周期中1PN受精卵发育形成的胚胎有一定可利用价值。
本研究通过回顾性分析4920个周期的患者资料，探讨不同年龄及不同授精方式下，单原核胚胎的发育潜能，为进一步提高卵子及胚胎的可利用率提供指导。
1材料与方法1??1研究对象选择2012年1月至2013年8月在南京大学附属鼓楼医院生殖医学中心治疗的3614个IVF周期和1306个ICSI周期的患者资料进行回顾性分析。
排除完全受精失败、部分受精失败及卵子发育异常的患者。
年龄分组以30岁和35岁为界点分为3组。
由于35岁以上女性的卵母细胞质量明显下降，所以仅研究年龄小于35岁患者的1PN胚胎的发育潜能。
其中IVF组1159枚1PN胚胎，ICSI组156枚1PN胚胎。
1??2人卵母细胞的采集与处理按常规方案超促排卵，卵泡生长发育充分后，在B超介导下经阴道穿刺取卵。
获取的卵丘-卵母细胞复合物（OCCs）经Gamete (Vitrolife, Sweden) 洗涤后，转入IVF(Vitrolife, Sweden)序贯培养微滴中，于37℃/6% CO2培养箱行3h的受精前培养。
1??3受精与卵裂观察1??3??1IVF采用短时受精方法，获卵3h后按10000条精子/卵母细胞的比例加精。
精卵共孵育4 h后机械剥离颗粒细胞，转入G1 (Vitrolife, Sweden)序贯培养液中培养。
通过观察第二极体是否形成判断受精，16~18h后将培养皿置于倒置显微镜下观察原核。
1??3??2ICSI孵育3h后的卵母细胞经透明质酸酶(Vitrolife, Sweden)消化后机械剥离颗粒细胞。
将卵子置于IVF 培养液预培养1 h后，挑选形态相对正常的精子对成熟卵母细胞行ICSI术。
注射后的卵母细胞转入G1培养液中培养，16~18h后将培养皿置于倒置显微镜下观察原核，判断是否受精。
若出现单个原核，则为1PN；行IVF或ICSI术后，正常受精卵出现2个原核(2PN)。
受精后分别于44 h及68 h在倒置显微镜下进行胚胎质量评估1??4囊胚培养及观察将Day3剩余的分裂期胚胎转入囊胚培养液G2 (Vitrolife, Sweden)微滴中，继续培养至Day6，观察囊胚发育情况。
根据Garnder囊胚分级法对囊胚进行分级\[4\]。
首先，根据囊胚的扩张及孵出程度将囊胚分成1~6级：1级，早期囊胚,囊胚腔体积囊胚总体积的1/2；3级，完全扩张囊胚，囊胚腔占据整个囊胚；4级，扩张后囊胚，囊胚腔体积较早期囊胚明显扩大，透明带变薄；5级，正在孵化的囊胚，囊胚正在从透明带破裂口孵出；6级，孵化出的囊胚,囊胚完全从透明带中脱出。
3~6级囊胚需要对滋养外胚层细胞(trophectoderm, TE)和内细胞团(inner cell mass, ICM)进行进一步评估。
TE评分：A级，细胞数目多，囊胚四周均有细胞分布；B级，细胞数目较少，上皮细胞较松散；C级，细胞数目极少。
ICM 评分：A级，细胞数目多，结合紧密；B级，细胞数目较少，结合较松散；C级，细胞数目极少。
本中心将评分≥3BC的囊胚定为优质囊胚。
1??5统计学分析结果以均数±标准差(±s)或率(%)表示，采用SPSS 17??0软件对数据进行统计分析。
率的比较采用χ2检验，多组间结果比较采用单因素方差分析（One-Way ANOV A），P<0??05为差异有统计学意义。
2结果2??1女方年龄对ICSI胚胎单原核形成的影响在ICSI周期中，女方不同年龄组间1PN形成率呈递增趋势，>35岁女性患者的1PN形成率为2??75%，显著高于<30岁组（1??59%），且有统计学差异（P<0??05）。
见表1。
表1ICSI周期女方年龄对1PN形成的影响年龄（周岁）获卵数1PN形成率（%）3511832.75±0.12*P 35岁组相比2??2女方年龄对IVF胚胎单原核形成的影响IVF短时受精后，女方不同年龄组间1PN形成率呈递增趋势，并且>35岁女性患者的1PN形成率最高，为4??24%，显著高于< 30岁组，两组间有统计学差异（P<0??05）。