红细胞计数和血红蛋白测定
血常规各指标参考范围及临床意义
1、红细胞计数(RBC)[正常参考值]男：4.0～5.5 ×10的12次方/L(400万-550万个/mm3)。
女：3.5～5.0 ×10的12次方/L(350万-500万个/mm3)。
新生儿：6.0~7.0 ×10的12次方/L(600万-700万个/mm3)。
[临床意义]红细胞减少①红细胞生成减少，见于白血病等病：②破坏增多：急性大出血、严重的组织损伤及血细胞的破坏等③合成障碍：缺铁，维生素B12的缺乏等红细胞增多常见于身体缺氧、血液浓缩、真性红细胞增多症、肺气肿等。
2、血红蛋白测定(HB或HGB)[正常参考值] 男：120～160g/L(12-16g/dL)。
女：110～150g/L(11-15g/dL)。
儿童：120～140g/L(12-14g/dL)。
[临床意义] 血红蛋白减少多见于种贫血，如急性、慢性再生障碍性贫血、缺铁性贫血等。
血红蛋白增多常见于身体缺氧、血液浓缩、真性红细胞增多症、肺气肿等。
3、白细胞计数(WBC)[正常参考值]成人：4～10 ×10的9次方/L(4000-10000/mm3)。
新生儿：15～20 ×10的9次方/L(15000-20000/mm3)。
[临床意义]生理性白细胞增高多见于剧烈运动、进食后、妊娠、新生儿。
另外采血部位不同，也可使白细胞数有差异，如耳垂血比手指血的白细胞数平均要高一些。
病理性白细胞增高多见于急性化脓性感染、尿毒症、白血病、组织损伤、急性出血等。
病理性白细胞减少再生障碍性贫血、某些传染病、肝硬化、脾功能亢进、放疗化疗等。
4、白细胞分类计数(DC)[正常参考值]白细胞分类（DC）英文缩写占白细胞总数的百分比嗜中性粒细胞N 0.3 ～0.7中性秆状核粒细胞 0.01 ～0.05 (1%-5%)中性分叶核粒细胞0.50 ～0.70 (50%-70%)嗜酸性粒细胞E 0.005～0.05 (0.5%-5%)嗜碱性粒细胞B 0.00 ～0.01 (0～1%)淋巴细胞L 0.20 ～0.40 (20%-40%)单核细胞M 0.03 ～0.08 (3%-8%)[临床意义]中性杆状核粒细胞增高见于急性化脓性感染、大出血、严重组织损伤、慢性粒细胞膜性白血病及安眠药中毒等。
血常规检查及其意义医生解读
反映贫血的病理变化，对贫血的鉴别诊断有一
定的价值。
○诊断缺铁性贫血：IDA的病人95%以上RDW增
高，可与β-珠蛋白生成障碍性贫血（88%RDW正 常）鉴别。
贫血类型
大细胞均一性
大细胞不均一性 正细胞均一性 正细胞不均一性 小细胞均一性 小细胞不均一性
常见疾病
部分再障
2. 生理变化：
○年龄及性别 ○精神因素 ○剧烈体力劳动或运动
○生理性贫血
新生儿：红细胞明显增
高、两周后下降，6-7 岁最低 男性：25岁-35岁达高 峰 女性：13岁-15岁达高 值，21岁-35岁低水平， 以后渐渐增高
3．病理变化：
增多：
Male RBC＞6.0×1012/L Hb＞170g/L
3. 参考值：
RBC Hb
成年男性（4.0-5.5）×1012/L （120-160）g/L
成年女性（3.5-5.0）×1012/L （110-150）g/L
初生儿 （6.0-7.0）×1012/L （170-200）g/L
（二）临床意义：（多RBC和Hb一同观察）
1．影响因素：
○全身血液容量 ○全身血浆容量
（一）概述
定义：
RBC指单位体积（每升）血液内的红细胞数量。
Hb指单位体积血液中所含血红蛋白的量。
方法：
（1） 红细胞计数
手工法 ：取样 稀释
计数 计算
仪器法 阻抗分析或激光分析
（2）血红蛋白测定
氰化高铁血红蛋白法（HiCN法）：
取样 加转化液（溶血、转化） 比色
血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各血红 蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再 与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白， 通过比色根据吸光度得血红蛋白的浓度。
红细胞计数血红蛋白定量
四. 注意事项
1.KCN为剧毒药品，防污染。 2.HiCN转化液不能存于塑料瓶中。
否则CN-下降，结果偏低。 3.分光光度计应定期校正并使用
配套的比色杯。 4.标准曲线或K值应定期校正。
HiCN法 参考方法
优点：操作简便；显色快，结果稳定。 缺点：氰化钾有剧毒；
高白细胞或高球蛋白血症等可致浑浊； HbCO转化慢。
四. 方法 1.小试管加RBC稀释液2.0ml。 2.采血，取血10ul。 3.擦去管外的血，轻吹入试管底部，
再清洗吸管2~3次，立即混匀。 4.混匀后充入计数室，静置3~5 min，
高倍镜下计数。
充液位置 充液位置
为 红 细 胞 计 数 区 域
压线细胞的计数原则：数左不数右，数上不数下
( RBC )
二、应用
常用于白细胞分类计数、网织红细胞 计数和点彩红细胞计数等。
骨髓造血干细胞 Epo 红系祖细胞
原红 早幼红 中幼红 晚幼红 网织红 红细胞
erythrocyte red blood cell
红细胞形态检查 红细胞计数（RBC） 血红蛋白测定（Hb,HGB） 血细胞比容测定（Hct,HCT,Ht,PCV） 红细胞平均指数 红细胞体积分布宽度 网织红细胞计数（Ret,RET） 点彩红细胞计数 红细胞沉降率测定（ESR）
大量失血尚未补液前：
红细胞总量减少,但RBC和Hb测定值不能反映。
水潴留：
红细胞总量未减少,但RBC和Hb测定值显示减少。
脱水：
红细胞总量未减少，但RBC和Hb测定值显示其 增多，如贫血时则可掩盖贫血。
1.Hayem红细胞稀释液各成分有什么作用？ 2.改良Neubauer计数板中央大方格内每一中
红细胞计数和血红蛋白测定
红细胞计数和血红蛋白测定
【方法】
1.红细胞计数用显微镜计数法；光电比浊法；自动血细胞计数法。
2.血红蛋白测定用目测比色法；氰化高铁法；自动血细胞仪。
【临床意义】
参考值：
1.红细胞与血红蛋白增多指成年男性红细胞≥6.0×1012/L，血红蛋白>170g/L；成年女性红细胞>5.5×1012/L，血红蛋白>160g/L。
临床分相对性红细胞增多(多见于脱水血浓缩)和绝对性红细胞增多(心肺疾患、慢性缺氧、肿瘤或肾脏疾患所致的促红细胞生成素增加，真性红细胞增多症)。
2.红细胞及血红蛋白的减少①生理性减少(生理性贫血)：见于妊娠、婴幼儿、老年人；②病理性减少(贫血)：分轻、中、重、极度4级贫血；并分为红细胞生成减少，红细胞破坏过多，失血三大类。
3.红细胞形态学改变染色血涂片见红细胞大小、形态、胞浆着色及结构的异常改变，有助于推断贫血的病因。
红细胞计数及血红蛋白测定(预医)
肺静脉 回流
心脏 收缩
体循环
红细胞计数及血红蛋白测定
（二）红细胞及血红蛋白减少(轻、中、重、极重）
1、生理性减少
2、病理性减少 红细胞生成不足
红细胞破坏过多
骨髓造血障碍 细胞分化和成熟障碍 红细胞内在缺陷 红细胞外来因素
失血 急性失血 慢性失血
贫血程度 轻度贫血 中度贫血 重度贫血 极重度贫血
红细胞形态
红细胞的生理功能
红细胞的生成
骨髓 外周血
脾脏
造血干细胞
分化 红系祖细胞 分裂成熟
肾脏 红细胞生成素
红细胞
衰老分解 铁、珠蛋白、胆色素
红细胞计数及血红蛋白测定
[参考范围] 红细胞数
成年男性（4.0－5.5）×1012/L 成年女性（3.5－5.0）×1012/L 初生儿 （6.0－7.0）×1012/L
贫血的分度
血红蛋白浓度（g/L） 男性：90≤Hb＜120 女性：90 ≤Hb＜110 60 ≤Hb＜90
30 ≤Hb＜60
Hb＜30
网织红细胞（Reticulocyte，Ret）
网织红细胞为外周血内尚未完全成熟的红细胞。 参考值：百分率 0.005~0.015
绝对值(24~84) ×109/L 临床意义： ●增多：骨髓红细胞系增生旺盛 ●减少：骨髓造血功能减低或红系增生受抑
血红蛋白 120～160g/L 110～150g/L 170～200g/L
红细胞计数及血红蛋白测定
[临床意义] (一)红细胞及血红蛋白增多 1、相对性增多 2、绝对性增多 （1）继发性红细胞增多症 红细胞生成素代偿性增加 红细胞生成素非代偿性增加 （2）真性红细胞增多症（原发性）
测量红细胞血红蛋白的原理
测量红细胞血红蛋白的原理测量红细胞血红蛋白（Hb）的原理主要涉及到两个方面，即红细胞计数与血红蛋白测定。
下面将详细介绍这两个原理。
1. 红细胞计数原理：红细胞计数是指测定单位体积内的红细胞数量。
常常使用血液自动分析仪器来测量。
传统的红细胞计数方法是采用显微镜计数法。
首先，将一定体积的血液样本与盐水混合，并制备成血液涂片。
然后，通过显微镜观察样本中红细胞的数量，通过计数计算红细胞的浓度。
而现代的自动分析仪器则利用了电子计数原理。
这些仪器通常使用细胞计数室来放置血液样本。
当样本通过细胞计数室时，电子计数器会对通过的细胞进行计数。
这些仪器通常还可以通过检测细胞的大小、形状、透明度等参数，进一步分析红细胞的特征。
2. 血红蛋白测定原理：血红蛋白是一种载氧蛋白，它能够将氧气从肺部运输到全身组织。
血红蛋白的测定通常使用分光光度法。
在分光光度法中，通过使用特定的波长范围内的光源，可以使得样本中的某种物质吸收光的量与该物质的浓度成正比。
使用这个原理，可以测量样本中的血红蛋白浓度。
具体操作步骤如下：首先，将血液样本稀释或溶解，以保证测量时能够在合适的光吸收范围内进行。
然后，将样本放置在分光光度计中，利用特定的波长光照射样品，并通过光吸收的变化来确定样品中血红蛋白的浓度。
通常，分光光度法中使用的波长是在血红蛋白分子吸收最大的位置。
在常见的红细胞血红蛋白测定中，波长通常在540nm附近。
此外，还有一些新兴的测量红细胞血红蛋白方法。
例如，采用电化学生物传感器。
这种方法将引入一种特殊的生物分子，使得当血红蛋白与该分子相互作用时，会发生电化学反应。
通过测量反应电流等参数，可以推断出血红蛋白的浓度。
总结起来，测量红细胞血红蛋白的原理主要包括红细胞计数与血红蛋白测定。
红细胞计数可以通过显微镜计数法或血液自动分析仪器进行，而血红蛋白测定通常使用分光光度法来测量样品中血红蛋白的浓度。
不同的方法在测量原理与操作步骤上有所不同，可以根据具体需求选择合适的方法进行测量。
红细胞计数血红蛋白测定的原理
2.还原血红蛋白（reduced hemoglobin, Hbred）：未 与O2结合时的Hb。
3.高铁血红蛋白（hemiglo -bin, Hi）或正铁血红蛋白 （methemoglobin, Mhb）: Fe 2+被氧化成Fe 3+。
▪ 1%Hb的铁呈Fe3+状态，称为高铁血红蛋白 （Hi）。
Hb的合成受激素的调节：Epo和雄激素。
▪ 注意事项：1. 如α-链或β-链合成障碍，使三种正常 血红蛋白比例异常，即各型地中海贫血；如多肽 链发生氨基酸置换、丢失、加长，称为血红蛋白 病。
2.病理情况下可出现硫化血红蛋白（SHb）。
（二）血红蛋白衍生物及其吸收光谱
测定方法
显微镜计数法 血液分析仪法
（一）显微镜计数法
【检测原理】 采用等渗稀释液将血标本稀释一定倍数，滴入血 细胞计数室中，显微镜下计数一定区域内红细胞 数，经换算得每升血液中红细胞数量。
【器材】 微量吸管，采血针，小试管，计数板，盖片，棉球， 显微镜。 【试剂】红细胞稀释液：任选一种 1.Hayem稀释液：氯化钠1.0g、硫酸钠（含10个结晶 水）5.0g，氯化高汞0.5g，蒸馏水加至200mL，过 滤后使用。 氯化钠---调节渗透浓度 硫酸钠---提高比重防止红细胞粘连 氯化高汞---防腐剂，有毒
5个中方格内红细胞数
或= 100
×1012/L
【报告方式】
RBC（/L）= .
× 1012/L
【方法学评价】 1．手工显微镜法 2．血液分析仪法
为目前主要临床检验细胞计数方法 变异系数（coefficient of variation, CV ）小。
03[1].红细胞计数、血红蛋白定量
![03[1].红细胞计数、血红蛋白定量](https://img.taocdn.com/s3/m/805ad324af45b307e871973d.png)
计数误差
技术误差 固有误差：仪器误差 计数域误差
质量控制
1避免技术误差，纠正仪器偏差 2缩小计数域误差 3排除异常标本的干扰 4室内、室间质量评价
（Hemoglobin，Hb或HGB） Hemoglobin，Hb或HGB） （原卟啉、Fe2+） 原卟啉、 亚铁血红素 （原卟啉、Fe2+） 原卟啉、 亚铁血红素
相对缺氧， 三. 剧烈体力运动和劳动 相对缺氧，↑ 妊娠中、 血液稀释， 五. 妊娠中、后期 血液稀释，↓
一. 相对性增多 血液浓缩 二. 绝对性增多 1. 原发性红细胞增多 常见于真性红细胞增多症等 2. 继发性红细胞增多 常见于：心血管疾病、肺部疾病、 常见于：心血管疾病、肺部疾病、 异常血红蛋白病等
红细胞检验的意义
贫血的诊断和形态学分类 骨髓造血功能评价与疗效观察 动态观察疾病的变化 治疗监测与安全防护
( red blood cell count, RBC )
一. 原理 等渗稀释液将血液稀释一定倍数 将血液稀释一定倍数， 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充 入计数池中， 入计数池中，于显微镜下计数一定体积 内的红细胞数， 内的红细胞数，经过换算求得每升血液 中的红细胞数量。 中的红细胞数量。 二. 器材 1.显微镜 2.微量吸管 1.显微镜 2.微量吸管 3.计数板 改良Neubauer 计数板： Neubauer计数板 3.计数板：改良Neubauer计数板
1.红细胞手工显微镜计数法： 1.红细胞手工显微镜计数法： 红细胞手工显微镜计数法 原理、改良Neubauer计数板的结构、 Neubauer计数板的结构 原理、改良Neubauer计数板的结构、 操作方法、结果计算及注意事项。 操作方法、结果计算及注意事项。 2.血红蛋白测定 血红蛋白测定： 2.血红蛋白测定： 氰化高铁血红蛋白(HiCN) (HiCN)测定法 氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法 3.红细胞计数和血红蛋白测定的参考 3.红细胞计数和血红蛋白测定的参考 值及临床意义。 值及临床意义。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。
③HbCO转化慢 ①SDS-Hb消光系数未确定 ②SDS质量差异性大。 ③SDS溶血活力大，不适于同时 进行自动化分析
AHD575
同HiCN法，不用剧毒试剂
不便于自动检测、氯化血红素纯度 达不到标准
HiN3 CTAB
准确度和精密度高，试剂毒性低 溶血活力强，但不破坏白细胞， 适合自动化分析
红细胞检查
1
红细胞概述
2
72小时
48小时
3
血红蛋白概述
血红蛋白 (血色素， Hb 或 HGB) 是一种微红 色的胶体物质，分子量为 64 458。
是一种呼吸载体 ，每克血红蛋白可携带氧
1.34 毫升．成人红细胞总量约有 600 g 血红
蛋白，可携氧 800 毫升。
1.血红蛋白组成
FEP 血红素 Fe++ HP Hb
5
2.血红蛋白分子结构及成分
组成 Hb 的多肽链两大类：
①α类链：αζ和θ链；
②非α链：βδγε链。 α链由 141 个氨基酸组成， β链由 146 个氨基酸组成。
6
每个 Hb 分子由 2 条α类肽链和 2 条β类肽链 组成，每条珠蛋白肽链含有 1 个亚铁血红素。
7
在人体不同生长时期， Hb 种类与比例不同：
20
任务二 血红蛋白测定
定义：血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白 的总浓度，用g/l表示
21
检测原理
1．氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法
2．其他测定法
十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法
叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法
碱羟血红蛋白法
沙利(Sahli)酸化血红蛋白法
16
参考值
成年：男性（4～5.5）×1012/L 女性（3.5～5.0）×1012/L 新生儿： （6.0～7.0）×1012/L
17
临床意义
1．生理性变化
(1)年龄与性别的 差异 (2)精神因素 (3)剧烈体力运动 和劳动 (4)气压降低 (5)妊娠中、后期
18
临床意义
2．病理性变化
(2)红细胞增多
14
质量控制
1．手工法 误差来源：标本 、操作 、器材 、固有误差 2．仪器法 严格按照操作规程 、定期进行室内和室间质控
15
方法学评价
1.手工显微镜法
①血液分析仪的校正
②白细胞减少时的对照核实。
③血小板计数受小红细胞干扰时的校正
2．血液分析仪法
方法精确，且操作简便、快速，已广泛应用。
HbCO转化慢 精密度和准确性低
27
质量控制
28
溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法（CTAB）
22
高铁氰 化钾 血红蛋白 高铁血 红蛋白
CN氰化高铁 血红蛋白
540nm
吸光度 血红蛋 白浓度
HiCN转化液：即文齐氏液 540 nm 处有一吸收波峰，用分光光度计测定 换算成每升血液中的血红蛋白浓度，或制备标准曲线供查 阅。
23
24
血红蛋白浓度计算公式：
任务一 红细胞计数
检测方法
1.手工显微镜法： 2.血液分析仪法：
9
定义： 测定每升血液中所含红细胞数 目，用？.？X1012/L表示。
10
改良牛鲍计数板
计数板
11
12
13
【操作】 1.准备计数板 2.加稀释液：2ml 3.加血：10μl混匀 4.充池 5.计数 6.计算：红细胞数=N/5*25*10*200*106/L
Hb(g/L)=Aג540HiCN×64458/44000×251 =A×367.7
25
方法学评价
26
方法
HiCN
优点
操作简便、快速(5min)，结果稳
缺点
①KCN有剧毒
定靠， 试剂容易保存，便于
质控，为参考方法 SDS-Hb 不用剧毒试剂、无公害，操作简 便，呈色稳定，准确度和精度高
1)原发性红细胞增多
2)继发性红细胞增多
(1)红细胞和血红蛋 白量减少
1）红细胞生成障碍 2）造血原料缺乏 3）利用障碍红细胞 4）破坏过多和失血
3)相对性红细胞增多
19
临床意义
医学决定水平
指该项目结果如高 于或低于某一个值时 就应该采取一定的措 施，为患者处理起提 供依据的作用。
①高于6.8×l012/L，应采取相应 的治疗措施。 ②低于3.5×1012/L为诊断贫血 的界限，应继续寻找原因。 ③低于1.5×l012／L应考虑输血