凋亡相关基因Bax表达产物的检测
口腔黏膜白斑凋亡相关蛋白 Bcl－2和 Bax 的表达及意义
口腔黏膜白斑凋亡相关蛋白 Bcl－2和 Bax 的表达及意义满一;钟良军;徐巍巍【摘要】目的：通过探讨凋亡相关蛋白在口腔白斑病变过程中细胞凋亡状况和凋亡蛋白 Bcl－2、Bax 的表达的研究，探讨白斑发病机制及恶变机理。
方法采用免疫组织化学检测法，与正常口腔粘膜对照，观察分析29例口腔白斑中 Bcl－2、Bax 蛋白的表达水平。
结果上皮异常增生各组的凋亡指数均高于正常，Bcl－2、Bax 在上皮单纯增生、异常增生显过度表达，表达强度、分布也发生了改变。
结论癌前病变中，上皮细胞凋亡状况发生了改变，Bcl－2可能对增生组织向恶变的转化发挥阶段性的促进作用，促凋亡因子 Bax 作用加强；凋亡因子的发挥即相互协同又相互制约。
%Objective To investigate the expression and significance of apoptosis -related protein Bcl-2,Bax in oral leukoplakia (OLK),and to explore the mechanism of pathogenesis and cancerization of oral leukoplakia.Methods The expression levels of Bcl-2 and Bax were detected by immunohistochemistry in 29 cases OLK and 25 cases of healthy oral mucosa.Results The apoptosis indexes (AI) of OLK epithelial cells in simple hyperplasia, dysplasia ( mild,moderate, severe degrees ) were significantly increased, as compared with those in normal mucosa.In OLK epithelium, the overexpressions of Bcl-2,Bax in positive cells were observed,and the intensity and distribution of apoptosis-related protein were significantly changed.Conclusion In precancerous lesions,Bcl-2 may promote the progression of canceration of hyperplastic tissue, enhance the effects of Bax in inducing cell apoptosis,moreover,the effects of apoptosis-related proteins are not only cooperative but also restrict each other.【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2015(000)009【总页数】4页(P1297-1300)【关键词】白斑;凋亡蛋白;Bcl-2;Bax【作者】满一;钟良军;徐巍巍【作者单位】065000 河北省廊坊市，中国石油天然气集团公司中心医院口腔科;杭州师范大学医学院口腔医学系;065000 河北省廊坊市，中国石油天然气集团公司中心医院口腔科【正文语种】中文【中图分类】R780.2口腔黏膜白斑是最常见癌前病损，处于向恶性转化的不稳定状态，以不同程度的上皮增殖和不典型上皮增生为基本特征，在细胞异常增殖中，凋亡相关蛋白都有质与量的变化。
免疫组化染色bax位置
免疫组化染色bax位置1.引言【1.1 概述】免疫组化染色是一种广泛应用于生物医学研究领域的技术，它可以帮助我们了解细胞和组织中特定蛋白质的表达情况和定位。
在这篇长文中，我们将关注于免疫组化染色中Bax位置的研究。
Bax是一种重要的蛋白质，属于Bcl-2家族中的一员。
它在细胞凋亡中发挥着重要的作用，通过调控线粒体的膜通透性来促进细胞凋亡的发生。
Bax的异常表达或定位会导致细胞凋亡的紊乱，进而引发多种疾病的发生，包括肿瘤和神经系统疾病等。
因此，准确地确定Bax在细胞和组织中的位置对于研究其功能和相关疾病的机制至关重要。
免疫组化染色技术通过利用抗体的高度特异性，能够在细胞和组织中检测目标蛋白质的表达和定位信息。
该技术的原理是在细胞或组织切片上添加特异性的抗体，使其与目标蛋白质发生特异性结合，然后通过染色反应显示出目标蛋白质的位置和分布。
利用免疫组化染色技术，我们可以在细胞和组织水平上直观地观察Bax的位置和表达水平，从而深入了解其功能和作用机制。
本文将重点探讨Bax在免疫组化染色中的位置。
通过文献研究，我们将介绍已有的关于Bax定位的发现，并探讨不同组织和细胞类型中Bax定位的差异和特点。
同时，我们还将探讨免疫组化染色结果的意义，包括Bax定位异常与疾病的关联、Bax定位在肿瘤治疗中的潜在应用等。
综上所述，本文将从概述Bax的功能和免疫组化染色技术入手，详细讨论Bax在免疫组化染色中的位置和其意义。
通过对相关研究的综合分析，我们希望能够为深入理解Bax的功能和相关疾病的机制提供有益的启示，为未来相关研究和临床治疗提供参考依据。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以包括以下内容：本文共分为引言、正文和结论三个部分。
1. 引言部分引言部分主要包括概述、文章结构和目的三个方面的内容。
首先，概述部分可以介绍一下免疫组化染色技术在研究中的重要性和应用范围。
然后，文章结构部分可以简要说明本文的整体结构，包括引言、正文和结论三个部分。
肝细胞性肝癌中p28GANK基因的表达与凋亡基因bax、bcl-2表达的关系
肝细胞性肝癌中p28GANK基因的表达与凋亡基因bax、bcl-2表达的关系莫瑞祥;杨威;李西融;廖文胜;张慧明;陈泽峰;黄芳【摘要】目的探讨p28GANK基因在肝细胞性肝癌组织中的表达及其与细胞凋亡的关系.方法收集肝细胞性肝癌组织68例、正常肝组织30例,采用免疫组化法检测标本中p28GANK基因、凋亡基因Bcl-2和Bax的表达情况.结果 p28GANK在肝细胞性肝癌和正常肝组织中的阳性表达率分别为73.5％和6.7％,肝细胞性肝癌中p28GANK基因的表达高于正常肝组织(P＜0.01).肝细胞性肝癌组织Bax的表达明显低于正常肝组织(P＜0.05),而Bcl-2的表达明显高于正常肝组织(P＜0.05).肝细胞性肝癌组织p28GANK的表达与Bcl-2的表达呈正相关(P＜0.05),但与Bax的表达无明显相关性(P＞0.05).结论 p28GANK蛋白表达与肝细胞性肝癌的发生发展可能相关,p28GANK和凋亡抑制基因Bcl2的共同表达可能在肝细胞性肝癌中起协同作用.【期刊名称】《微创医学》【年(卷),期】2016(011)006【总页数】3页(P823-825)【关键词】肝肿瘤;p28GANK;Bcl-2;Bax;免疫组织化学【作者】莫瑞祥;杨威;李西融;廖文胜;张慧明;陈泽峰;黄芳【作者单位】广西壮族自治区南溪山医院外一科,桂林市541002;广西壮族自治区南溪山医院外一科,桂林市541002;广西壮族自治区南溪山医院病理科,桂林市541002;广西壮族自治区南溪山医院外一科,桂林市541002;广西壮族自治区南溪山医院外一科,桂林市541002;广西壮族自治区南溪山医院外一科,桂林市541002;广西壮族自治区南溪山医院外一科,桂林市541002【正文语种】中文【中图分类】R735.7研究表明,p28GANK基因主要参与了Rb、MDM2-p53等重要信号途径的调控,调控细胞周期进程、促进细胞增殖并抑制细胞凋亡[1～3]。
功能失调性子宫出血和细胞凋亡与bcl-2及bax基因表达的关系
（ ｅａｔ ｅｔ ｆＯ ｓ ｔ ｃ ａ ｄＧ ｎｃｌ ｙ Ｔ ｅ２ １Ｈ ｓｉ ｌｆＰ Ａ Ｈ ｒｉ ５ ０ ６ Ｃ ｉ Ｄ ｐ ｒ ｎ ｂｔ ｒ ｓ ｎ ｙ ｅｏ ｇ ， ｈ １ ｏ ｔ Ｌ Ｍ， ａｂ １０ ８ ， ｈｎ ｍ ｏ ｅ ｉ ｏ ｐ ａｏ ｎ ａ）
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第 ３ 卷 １ ７ ４ ２Ｏ 年第 １ 期 ２ Ｏ７ Ｏ
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ＨＥ Ｏ Ｇ ＩＶ １３ ． ． ０ ０ ． １ Ｎｏ １ Ｏ ｔ２ ０ ｃ．０ ｒ ７
Ｇ ＭＥ Ｉ Ａ Ｏ Ｒ Ａ Ｄ Ｃ ＬＪ Ｕ Ｎ Ｌ
论著・
摘要 ： 研 究功能失调 性子 宫 出血 与细胞 凋亡及其相 关基 因表 达产物 的关 系。 方 珐 应 用 Ｔ Ｎ Ｌ 目的 Ｕ Ｅ 技 术检 测 ３ 正常 月经周期 的 增 生期 子 宫 内膜 ，８ 简单 增 生 ， 复 杂增 生子 宫 内膜标 本 的 凋亡 指 数 ０例 ２例 ２例 （ Ｉ。应 用免 疫组化 方 法检 测 ｂｌ Ａ） ｅ 一２及 ｂｘ基 因在子 宫 内膜 的表 达 。 结果 简单增 生 和 复杂 增 生子 宫 内 ａ 膜 Ａ 比正常增 生期 Ａ Ｉ Ｊ高（Ｐ ＜００ ）ｂｌ ．５ ； 一２基 因在 正 常增 生期 表 达 比在 简单 增 生和 复 杂增 生表 达 略 高， ｅ 差异 无显著 性 （Ｐ ＞ ．５ ；ａ 因在 简单 增生和 复杂增 生表达 比在 正常增 生期 表 达 高（Ｐ ＜００ ） 结论 ００ ）ｂｘ基 ．５ 。 功 能失调 性子 宫 出血 的发病 与细胞 凋亡有 关 ， 与 ｂｌ ，ａ 表 达相 关 。 且 ｃ一２ ｂｘ 关键词 ： 能失调 性子 宫 出血 ； 功 细胞 凋亡 ； 亡指 数 ； 因表达 凋 基 学科分 类代码 ：３０ ３ ２ ．４ 中图分类 号 ：Ｒ １ ．２ ７ １５ 文献标 识码 ：Ａ
克银Ⅰ号方对银屑病患者促细胞凋亡相关基因Fas、bax表达的影响
9202. 2012. 07. 027 〔文章编号〕 10059202 （ 2012 ） 07138502 ；doi：10. 3969 / j. issn. 1005-
银屑病是一种临床常见的皮肤病 ， 发病率高、 易复发， 目前 尚无从根本上治疗本病的方法 。 随着对该病发病机制研究的 逐渐深入， 已证实银屑病患者除了具有多基因遗传背景外 ， 异 常 T 细胞导致的免疫失调与本病也高度相关 ， 尤其与细胞凋亡 的关系极为密切
bax 的表达变化。 结果 组（ 克银Ⅰ号方组） 和对照组（ 阿维 A 胶囊组） ， 比较两组临床疗效及治疗前后患处蜡块包埋表皮中促凋亡基因 Fas、 bax 的转阴率比较有显著性差异 （ P ＜ 0. 05 ） 。 结论 床治疗的总有效率比较无统计学意义 （ P ＞ 0. 05 ） ， 两组治疗后促凋亡相关基因 Fas、 bax 的表达。 对银屑病治疗有效； 可影响银屑病患者促细胞凋亡相关基因 Fas、 〔关键词〕 银屑病； 克银Ⅰ号方； 细胞凋亡； Fas； bax 〔中图分类号〕 R758. 63 〔文献标识码〕 A
bax 表达的影响 克银 Ⅰ 号方对银屑病患者促细胞凋亡相关基因 Fas、
马学伟
〔摘
孙国强
要〕 目的
陈
虎
张培红
云雅卿
1
王家颖
2
（ 河北省中医药研究院， 河北
石家庄 050031 ）
bax 表达的影响。 方法 观察克银Ⅰ号方对银屑病患者促细胞凋亡相关基因 Fas、
将 40 例寻常型银屑病患者随机分为治疗 两组临 克银 Ⅰ 号方
· 1386·
中国老年学杂志 2012 年 4 月第 32 卷
一系列凋亡信息的传递 ， 最终到达细胞表面受体 ， 使细胞存活 日期缩短
壳寡糖对S180肉瘤细胞凋亡、细胞周期以及凋亡相关蛋白Bcl2、Bax的影响
壳寡糖对S180肉瘤细胞凋亡、细胞周期以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响【关键词】壳寡糖;S180肉瘤;细胞周期;凋亡;小鼠摘要 :目的探讨壳寡糖对S180肉瘤细胞的生物学效应，为其治疗肿瘤提供新的理论基础。
方法体外实验:用流式细胞仪测壳寡糖作用下S180肉瘤细胞周期、细胞凋亡情况。
体内实验:建立S180肉瘤小鼠皮下移植瘤模型，给予壳寡糖后，测瘤体积，并用免疫组化法测瘤组织Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。
结果体外实验:高浓度壳寡糖作用后S180肉瘤细胞阻滞于G 0 .G 1 期，同时S180肉瘤细胞凋亡增加。
体内实验:壳寡糖对小鼠S180肉瘤有明显的抑制作用并能提高促凋亡基因Bax的表达，降低抑凋亡基因Bcl-2的表达。
结论壳寡糖可抑制S180肉瘤细胞的生长，使S180细胞阻滞于G0 .G 1 期并诱导其发生凋亡，其机制可能与Bcl-2蛋白下调而Bax蛋白上调有关。
关键词 :壳寡糖;S180肉瘤;细胞周期;凋亡;小鼠Abstract:Objective To investigate the biological effect of chito-oligosaccharide on Sarcoma180（S180）cells to assess the possibility and potential value of chito-oligosaccharide in tumor therapy.Methods In the experiment in vitro，suspended S180cells were treated with chito-oligosaccharide.Flow cytometry was used to study the changes in tumor cell apoptosis and cell cycle consequential to the treatment.For experiment in vivo，Kunming mice bearing S180in groups were given varied dosesof chito-oligosaccharide for7days.The mice were then killed to determine the tumor volume and to determine the expression of apoptosis-related proteins（Bcl-2and Bax）by immunohistochemistry.Results Experiment in vitro showed relatively high concentration of chito-oligosacharride arrested the growth of S180cells at G 0 .G1 phase and increased the apoptotic rate of tumor cells.Experiment in vivo showed the growth of S180cells was inhibited by chito-oligosaccharide（in a concentration-depen-dent manner）.The expression of antiapoptotic protein Bcl-2was decreased and the expression of proapoptotic protein Bax was increased.Conclusion Chito-oligosaccharide can inhibit the growth of S180cells，arresting them at G0 .G 1 -phase and stim-ulating an increase of their apoptosis，possibly through downregulation of Bcl-2and upregulation of Bax.Key words:chito-oligosaccharide;sarcoma180cell;cell cycle;apoptosis;mice肿瘤是危害人类健康最重要的疾病之一。
第3讲基因指导蛋白质的合成-备战2025年高考生物一轮复习考点帮(全国通用)
第3讲基因指导蛋白质的合成一、单选题1．关于复制、转录和翻译的叙述，正确的是（）A．转录过程需要RNA聚合酶的参与B．真核细胞DNA的复制发生在有丝分裂前期C．翻译时一条mRNA上只能结合一个核糖体D．细胞中有多种tRNA，一种tRNA能转运多种氨基酸【答案】A【分析】RNA是在细胞核中，以DNA的一条链为模板合成的，这一过程称为转录。
mRNA合成以后，就通过核孔进入细胞质中。
游离在细胞质中的各种氨基酸，就以mRNA为模板合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质，这一过程叫做翻译。
【详解】A、RNA聚合酶能催化DNA转录形成RNA，A正确；B、真核细胞DNA的复制发生在有丝分裂前的间期或减数第一次分裂前的间期，B错误；C、翻译时一条mRNA上可相继结合多个核糖体，C错误；D、细胞中有多种tRNA，一种tRNA只能转运一种氨基酸，由于密码子的简并性，一种氨基酸对应一种或多种密码子，因此一种氨基酸可以由多种tRNA转运，D错误。
故选A。
2．内质网分子伴侣（Bip）可与内质网膜上的PERK蛋白结合，使PERK蛋白失去活性，Bip还能辅助内质网腔中的未折叠蛋白完成折叠。
细胞受到病毒侵染时，内质网腔内未折叠蛋白大量增加，PERK蛋白恢复活性，通过调节相关基因的表达并最终引发被感染细胞凋亡，其机理如图。
下列说法错误的是（）A．Bip参与内质网腔中肽链的盘曲和折叠B．Bip结构异常可导致未折叠蛋白在内质网腔大量积累C．内质网腔内未折叠蛋白大量增加后细胞内翻译过程受抑制D．推测最可能是通过促进BCL-2基因表达来促进细胞凋亡【答案】D【分析】细胞凋亡是由基因所决定的细胞自动结束生命的过程，在成熟的生物体中，细胞的自然更新、被病原体感染的细胞清除，也是通过细胞凋亡完成的；细胞凋亡对于多细胞生物体完成正常发育，维持内部环境的稳定，以及抵御外界各种因素的干扰都起着非常关键的作用。
【详解】A、Bip能辅助内质网腔中的未折叠蛋白完成折叠，因此Bip参与内质网腔中肽链的盘曲和折叠，A正确；B、Bip能辅助内质网腔中的未折叠蛋白完成折叠，Bip结构异常，内质网中的蛋白质不能完成加工，会导致未折叠蛋白在内质网腔大量积累，B正确；C、由图可知，未折叠蛋白与Bip结合后，会导致Bip无法与PERK蛋白结合，PERK蛋白恢复活性，PERK 蛋白发生磷酸化，从而使相关基因的翻译过程受到抑制，因此内质网腔内未折叠蛋白大量增加后细胞内翻译过程受抑制，C正确；D、内质网腔内未折叠蛋白大量增加，PERK蛋白恢复活性，抑制BCL-2基因表达，促进Bax基因表达，因此Bax基因的表达产物能促进细胞凋亡，而BCL-2基因的表达产物会抑制细胞凋亡，D错误。
长期递增负荷运动对大鼠脾淋巴细胞增殖活性、凋亡及凋亡相关基因表达的影响
长期递增负荷运动对大鼠脾淋巴细胞增殖活性、凋亡及凋亡相关基因表达的影响王雪芹;郝选明【摘要】目的:观察6周递增负荷运动对大鼠脾脏淋巴细胞增殖能力(SI)、线粒体膜电位(△Ψm)及Bax和Bcl-2 mRNA的影响.方法:将64只8周龄SPF级雄性SD 大鼠随机分为0周组(WK0)、2周组(WK2)、4周组(WK4)和6周组(WK6),进行递增负荷跑台训练6周,分别于第0、2、4、6周周末,利用JC-1染色流式细胞术检测脾脏淋巴细胞形成的单体(J-aggregate)和聚合体(J-monomer)的平均荧光强度(FL2,FL1),并计算线粒体膜电位(FL2/FL1,△Ψm),MTT法检测淋巴细胞刺激指数(SI),FQ-RT-PCR技术测定Bax mRNA和Bcl-2mRNA表达水平.结果:6周递增负荷运动过程中,WK2、WK4、WK6组大鼠的脾系数显著低于WK0;WK4、WK6组大鼠的脾脏淋巴细胞SI显著低于WK0和WK2;WK2、WK4、WK6组大鼠的线粒体膜电位显著低于WK0;WK4、WK6组大鼠的Bax mRNA表达明显增加,WK2、WK4、WK6组大鼠的Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2/Bax比值明显降低.结论:6周递增负荷运动使大鼠脾脏淋巴细胞的增殖活性降低,凋亡增加,其机制可能是6周递增负荷运动改变了调控基因Bax mRNA和Bcl-2 mRNA的表达.【期刊名称】《中国体育科技》【年(卷),期】2013(049)006【总页数】5页(P100-104)【关键词】运动;运动免疫;脾脏;凋亡;刺激指数;膜电位;Bcl-2相关X蛋白;B细胞淋巴瘤基因-2;鼠;动物实验【作者】王雪芹;郝选明【作者单位】临沂大学体育学院,山东临沂276005;华南师范大学体育科学学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】G804.5运动免疫学研究业已证实，长期从事长时间大强度运动对免疫机能有非常强烈的负性影响［2］，表现为淋巴细胞数量减少，亚群改变；细胞毒性降低，细胞免疫功能受损；主要免疫球蛋白及补体含量降低；中性粒细胞吞噬作用降低；大负荷运动降低巨噬细胞的抗原提呈及MHC的表达等，说明长期大强度运动训练对细胞和体液免疫都有明显的负性作用。
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SABC大约可以形成一百万个左右的过氧化物酶 和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物
SABC具有很高的敏感性、低背景和操作简便的 优点。
(avidinbiotinperoxidase complex )
37 ℃，1h PBS洗，3次
实验步骤
加0.3％ H2O2-PBS（30-50µl），37 ℃，30min PBS洗，3次 SABC工作液（即用型）25µl，37 ℃，30min PBS洗，3次 DAB显色：
DAB显色工作液配制（现配）：用三蒸馏水稀释 DAB显色液（20倍），混匀后加至96孔板（2530µl/孔），镜下控制，以蒸馏水终止反应。 观察结果
实验结果
缺糖前 HeLa 细胞
缺糖 24h HeLa细胞
缺糖 48h HeLa 细胞
缺糖前 PC 12细胞
缺糖 24 h PC 12细胞
缺糖 48 h PC 12细胞
注意事项
吸弃及加液时要注意不要将细胞吹起 一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强
度有直接关系。 染色时间要控制好，及时以蒸馏水终止反
实验步骤
培养细胞（96孔板，每组正常、缺糖损伤、两个浓度药物 损伤各2孔）
吸弃培养液，PBS洗，3次 (轻轻摇动后吸弃，小心) 甲醇固定5min PBS洗，3次（同上）（加时用吸管，吸时用枪，以后同） 加入封闭液25µl，37 ℃，30min，吸去上清液 加一抗25µl，37 ℃，1-2h后置4℃冰箱过夜(每组各3孔) PBS洗，3次 加二抗（1ml PBS加入生物素化山羊抗小鼠IgG 10µl）25µl，
实验（三)
凋亡相关基因－Bax的表达产物的检测
实验原理
免疫细胞化学（免疫组化）是将抗原、抗体 间的免疫反应引入细胞标本，并通过对其 所带有的特殊标记物的显示，籍以对细胞 内某抗原或抗体作定性、定位以及定量检 测。
链霉亲和素—生物素—过氧化酶复合物技 术（SABC技术）
其特点是利用链霉亲和素分别连接生物素标记 的第二抗体和生物素标记的酶。
链酶亲和素—生物素—过氧化物酶复合物 DAB(diaminobenzidine)显色液试剂盒：
（ 3,3´-二氨基联苯胺、TBS、 H2O2 ）
课前操作
周二下午接种细胞 96孔板（每组8孔） 正常、缺糖损伤、两浓度药物损伤各2孔
周三中午损伤（6孔） 周四中午固定、加封闭液（正常、缺糖
损伤、两浓度药物损伤各1孔，共4孔）， 30分钟后加一抗 周五中午加二抗
应，以免染色太深影响观察
下次实验内容
家系分析、传代细胞染色体标本的 制备
SABC
antigen
器材与试剂
仪器：移液枪、枪头、滴管、显微镜、湿盒 材料：培养细胞 试剂：甲醇、PBS、封闭液、一 抗、 二抗、
SABC、DAB 、0.3％H2O2-PBS DMEM培养液（10%小牛血清的高糖、无糖） 顺铂（20、 40umol/l ）
试 说明
PBS： 磷酸盐缓冲液（0.01M，PH7.2） 封闭液：5% 牛血清白蛋白（BSA，即用型） 一 抗： 小鼠IgG（抗小鼠、抗大鼠、抗人），用 时PBS稀释 二抗： 山羊抗小鼠IgG(生物素化) SABC (avidin-biotin-peroxidase complex ) ：