RP-HPLC内标法测定牡丹皮中丹皮酚的含量

进 行 了细 菌 学 检 验 及 抗 茵药 物 敏 感 性 分 析 。 【 键 词 】 烧 伤 感 染 耐 药 敏 感 性 关
烧 伤 后 创 面 及 全 身 感 染 是 病 人 致 死 的 主 要 原 因 ， 制 感 控 染 是 烧 伤 治疗 过 程 中极 其 重 要 的 环 节 。近 年 来 ， 于 新 型 抗 由 菌药 物 的 广 泛 使 用 ， 药 菌 株 不 断 增 加 ， 面 菌 种 分 布 及 细 菌 耐 创
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预 防 医 学
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２ ０ ￣２ ０ ０ ２ ０ ６年 烧 伤 感 染 创 面菌 群 分 布 及 其 药 物 敏 感 性 分 析
钟 书强 朴宏 鹰 于景 臣
【 要 】 分 析 烧 伤 感 染 创 面 菌群 分 布 及 细 菌耐 药性 变 迁 ， 对 我 院烧 伤 病 人 创 面 分 泌 物 作 细 菌培 摘 针 养 与 鉴 定 ， 时进 行 体 外 药物 敏 感 试验 ， 文对 我 院 ２０ ～ ２ ０ 同 本 ０ ２ ０ ６年 间 收 住 的 ２ ０例 住 院 病 人 烧 伤 创 面 ５
率。
表 １ 回收 率 试 验 结 果 （ ＿６ ”一 ）
配 制 成 ０ ９ ８ ／ 的溶 液 ， 为 内标 储 备 液 。 ． ８ ｍｌ ｍｇ 作 １２ ２ ２ 对 照 品 溶 液 。．． 精 密 称 取 丹 皮 酚对 照 品 适 量 ， 流 动 加
相 配 制 成 ０ ５ ８ｍｇ ｍｌ 溶 液 ， 为 对 照 品储 备 液 。 精 密 吸 ． ０ ／ 的 作
作 者 单 位 ： 齐 哈尔 医学 院 ： 齐 邮 编 １ １０ ６０６ 收 稿 日期 ２ ０ …１ １ ０８ ２ ９
】 ２ ７ 精 密度 试 验 ．．
法精密度较好 。
取 １ ２ ２ ２项 下 对 照 品 溶 液 １ 注 入 ．．． Ｏ， ｌ
高 效 液 相 色 谱 仪 ， 续 测 定 ６次 ， 算 Ｒ Ｄ 为 ０ ４ ， 明 本 连 计 Ｓ ． 表
】 Ｏ ２ ， Ｄ为 ２ ５ （ 一 ６ ， 明 本 方 法 有 良好 的 回 收 ０ ． ＲＳ ． ） 表
样 量 ： ０ ，。 １／ １ １ ２ ２ 溶 液 配 制 ．． １ ２ ２ １ 内标 溶 液 ． ． ． 精 密 称 取 醋 酸地 塞 米 松 适 量 ， 流 动 相 加
岁 ， 均 ３． 平 ２ １岁 ； 伤 面 积 平 均 ５ ． ， 烧 伤 面 积 平 均 烧 ２ ５ Ⅲ。
２． ％ 。 ５２
１２ 检 测 方 法 ．
所 有 病 人 均 分 别 于 住 院 不 同 阶 段 用 无 菌 棉
拭 子 在 创 面采 集 标 本 ， 用 美 国 Ｂ 应 Ｄ公 司 Ｂ Ｃ ９ ２细 菌 Ａ ＴＥＣ １ 培养 仪做 细 菌 培 养 ， 同时 用 该 公 司 ａ ｔ ｓｃ ｔｒ 自动 细 菌 鉴 ｕｏ ｅｐｏ 全 定仪 及 相 配套 的 反 应 板 做 细 菌 鉴 定 和 药 敏 试 验 ， 选 用 抗 生 共
重 量 ， 匀 ， 过 ， 密 量 取 续 滤 液 １ｍｌ置 １ 容 量 瓶 中 ， 摇 滤 精 ， ｏｍｌ
加 内 标溶 液 １ ， 甲 醇 稀 释 至 刻 度 ， 匀 ， 加 ｍｌ 摇 即得 。 １２ ３ 系统 适 应 性 试 验 ．． 取 上述对照 品 、 丹皮药材 溶液 ， 牡 照 １２ １ 下 的 色 谱 条 件 注 入 高 效 液 相 色 谱 仪 ， 录 色谱 图 ， ．． 项 记
４ ＞ ／ 的 系列 溶 液 ， 样 。 以 丹 皮 酚 峰 面 积 与 醋 酸 地 塞 米 ０ ｇ ｍｌ 进
松 峰 面 积 的 比值 作 为 纵 坐 标 （ ， Ａ） 以丹 皮 酚 浓 度 （ ｇ ｍ１ 为 横 ／／ ） ，
所 提 供 ， 丹 皮 药 材 为 市 售 ， 动 相 所 用 甲 醇 为 色 谱 纯 ， 它 牡 流 其
高 效 液 相 色 谱 仪 ， 行 测定 ５次 ， 校 正 因 子 计 算 公 式 计 算 校 平 按
正 因子 为 ０ ５ ５ ， Ｄ为 ０ ２ 。 ． ４ １ ＲＳ ．
１２ ５ 线 性 试 验 ．．
分 别 取 ２ ２ ２项 下 对 照 品储 备 液 ０ ５ １ ．． ．，，
１ １ 仪 器 与 试 药 Ｓ ｉ ｄ ｕ高 效 液 相 色 谱 仪 （ ． ｈｍａ ｚ Ｉ Ｃ一 １ Ａ ０Ｔ
现 代 药 理 研 究 表 明 具 有 抗 动 脉 粥 样 硬 化 ， 强 对 缺 血 组 织 的 加
． １
０ ４ ８
＾ ｉ ／ 尺 ＼
１ ２ １ ０ ６ ４ ８
』 Ｕ ｉ Ｌ
１ ２ １ ６
பைடு நூலகம்
保 护 ， 进 微 循 环 ， 强 免 疫 力 ， 肿 瘤 ， 菌 以及 抑 制 皮 肤 色 促 增 抗 抗 素 生 成 等 多 种 药 理 作 用 ， 已 被 广 泛 应 用 于 心 绞 痛 、 心 病 以 现 冠 及 湿 疹 、 麻 疹 、 皮 癣 、 屑 病 等 多 种 常 见 的 皮 肤 疾 病 的 治 荨 牛 银 疗 ， 效 确 切 ｌ 。为 了提 高 中药 牡 丹 皮 及 其 制 剂 质 量 控 制 的 疗 ２ 】 技术 和水 平 ， 文 首 次 以 醋 酸 地 塞 米 松 为 内 标 测 定 了 牡 丹 皮 本
（ ５：５ ）； 测 波 长 ： ５ ｉ 流 速 ： ／ ｎ； 温 ： 温 ； ４ ５ 检 ２ ４ｒ ｍ； １ｍｌｍｉ 柱 室 进
对 照 品 适 量 ， 样 品 溶 液 制 备 项 下 制 备 ， 定 含 量 ， 算 回 收 按 测 计
率 和 Ｒ Ｄ， 果 见 表 】 Ｓ 结 。从 表 中可 以看 出 ， 组 平 均 回 收 率 为 各
药材 中 的 丹皮 酚 含 量 。 １ 材 料 与 方 法
Ａ． 照 品 ； ． 丹 皮 药 材 ；． 皮 酚 ；． 酸 地 塞 米 松 对 Ｂ牡 １丹 ２醋 图 １ 高 效 液 相 色谱 图
１ ２ ４ 校 正 因 子 测 定 取 １ ２ ２ ２ 下 的 对 照 品溶 液 注 入 ．． ． ．． 项
齐 齐 哈 尔 医学 院学 报 ２ ０ ０ ８年 第 ３ Ｏ卷 第 ３期
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ＲＰ ＨＰ 内标 法 测 定 牡 丹 皮 中丹 皮 酚 的含 量 — Ｉ Ｃ
张 琪 蔡德 富
【 要 】 目的 建 立 一 种 测 定 牡 丹 皮 原 药 材 中主 要 成 分 丹 皮 酚 含 量 的 新 方 法 ， 新 方 法 中 以醋 酸 摘 在 地 塞 米 松 为 内标 准 确 测 定 了 牡 丹 皮 药 材 中 的 丹 皮 酚 。 方 法 采 用 Ｗ ｅ ｈ ｏ — Ｃ ８柱 （ ５ ｌ ｒｍ ｅ １ ２ ０ｍｍ ×４ ６ ． ｍｍ， ｍ） 甲醇 一 １ 冰 醋 酸 （ ５： ５ 为 流 动 相 ， 测 波 长 ２ ４ｎ 流 速 １ ／ ｉ ， 温 为 室 温 。结 果 ５ ， ％ ４ ５） 检 ５ ｍ， ｍｎ柱 ｍｌ 当丹 皮 酚 的 浓 度 在 ２ ． Ｏ ２ ０ ４ ｇ ｍｌ 围 时 ， 峰 面 积 与 浓度 的 线 性 关 系 良好 （ 一０ ９ ９ ） 平 ５ ４ ～ ５ ． ０“ ／ 范 其 ｒ ．９９ ；
ＶＰ液 相 泵 、 Ｐ Ｓ Ｄ一 １ Ａ ＶＰ紫 外 检 测 器 ） Ｎ２ ０色 谱 工 作 ０ ， ０１ 站 。丹 皮 酚 、 酸 地 塞 米 松 对 照 品 由 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 醋
２ ３ ４ ５ｍｌ １ 量 瓶 ， 加 内标 溶 液 １ｍｌ加 入 流 动 相 稀 ，，， 于 ０ｍｌ 各 ， 释 成 浓 度 分 别 为 ２ ． Ｏ ５ ． ０ １ ０ １ ， ５． ４ ２ ０ ３ ，５ ． ５ ４ ，Ｏ ８ ，０ ． ６ 】 Ｏ ２ ， ０． ２ ２ ０
见图 １ 。从 图 中 可 见 ， 丹 皮 药 材 中无 特 殊 干 扰 成 分 存 在 ， 牡 主 峰 位 置 与 对 照 品 的色 谱 图基 本 一致 。
干 燥 根 皮 ， 有 清 热 凉 血 、 血 化 瘀 的作 用 ， 一 种 常 用 的 传 具 活 是 统 中 药 ［ 。 丹 皮 酚 （ ａｏ ｏ） 牡 丹 皮 中 的 最 主 要 有 效 成 分 ， １ ］ ＿ ｐ ｅｎ １是
试 剂 均 为 分 析 纯 ， 验 用 水 为 二次 重 蒸 水 。 实
１ ２ 方 法 ．
坐标 （ ） 制 标准 曲线 ， 行 回归 计 算 ， 回归 方 程 ： ｃ绘 进 得 Ａ一 ０ ． ０ ８ ０ －０ ０ ５ ， 一 ０ ９ ９ ， 果 表 明 丹 皮 酚 在 ２ ． Ｏ １６ Ｃ－ ． ０ １ ｒ ． ９ ９ 结 ５ ４ ～ ２ ０ ４ ｇ ｍｌ 度 范 围 内线 性 关 系 良好 。 ５ ． ０￣ ／ 浓
素 ２ ２种 。
２ 结 果
２ １ 烧 伤 创 面 感 染 茵 的 菌种 分 布及 变化 ．
对抗 菌 药 物 的 敏 感 性 亦 发 生 了很 大 变 化 。 １ 材 料 与 方 法
肺 炎 克 雷 伯 菌 Ｅ Ｂ Ｓ Ｉ Ｓ阳性 菌 株 出 现 率 分 别 为 １ ． ５ 及 ２ ． ８ ９ ７
４ 。革 兰 阳性 球 菌 和革 兰 阴性 杆 菌 主 要 分 离 菌 种 对 临 床 常
用 药 物 的敏 感 性 见 表 ２ ３ ～ 。
表 １ ５ ２株 烧 伤 创 面 分 离 菌 的 菌 群 分 布 ７
１ １ 临 床 资 料 ２ ０ ～ ２ ０ ． ０ ２ ０ ６年 间 Ⅱ 、 烧 伤 ３ 以上 住 院 Ⅲ。 Ｏ 病 人 ２ ０例 ， 中 男 １０例 ， １ ０ ； 龄 最 大 ６ ５ 其 ５ 女 ０例 年 ７岁 ， 最小 １
１２ ８ 重 复 性 试 验 照 ２ ２ ３项 下 方 法 制 备 牡 丹 皮 样 品 溶 ．． ．．
液 ５份 ， 取 １ ｌ 各 Ｏ 注入 高效 液 相 色 谱 仪 ， 算 Ｒ Ｄ为 １ ５ ， 计 Ｓ ．％
表 明本 法 重 复 性 较 好 。