盐酸小檗碱的分离纯化论文
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
摘要：黄连是一种广泛应用于中药和食品添加剂的植物材料，其主要活性成分之一为
盐酸小檗碱。
本研究旨在通过提取和纯化的方法获得高纯度的盐酸小檗碱，并对其抑菌活
性进行研究。
实验结果表明，通过硅胶柱层析法可以达到较高的纯化效果，所得盐酸小檗
碱的纯度超过98%。
进一步的抑菌活性研究表明，盐酸小檗碱对多种细菌具有较强的抑制
作用，尤其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制效果最明显。
方法：采集新鲜的黄连植株，将其晒干并粉碎。
然后，采用乙醇提取法提取黄连中的
活性成分。
提取液经过浓缩后，使用硅胶柱层析法进行纯化，以获得高纯度的盐酸小檗碱。
通过红外光谱和高效液相色谱分析对提取物和纯化后的产物进行鉴定和分析。
采用平板法
和微量稀释法研究盐酸小檗碱的抑菌活性。
结论：本研究通过提取和纯化的方法成功获得高纯度的盐酸小檗碱，并对其抑菌活性
进行了研究。
结果表明盐酸小檗碱对多种细菌具有较强的抑制作用。
这为进一步开发和利
用盐酸小檗碱作为抗菌药物提供了重要的理论和实践基础。
黄连中的盐酸小檗碱的提取、分离及分离物的含量测定研究
黄连中的盐酸小檗碱的提取、分离及分离物的含量测定研究冀满丰
【期刊名称】《国际医药卫生导报》
【年(卷),期】2006(12)24
【摘要】目的探讨高纯度盐酸小檗碱的可行性.方法先将存在于黄连中的盐酸小檗碱转化为溶解性较大的硫酸小檗碱提取出来,然后再将其转化为盐酸小檗碱粗品,进一步用薄层色谱法分离得到纯度相对较高的盐酸小檗碱,再用柱层析法分离纯化,经乙醇反复多次重结晶,得到高纯度的盐酸小檗碱,采用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱含量.结果本方法提纯得到的盐酸小檗碱纯度达97%以上.结论本方法操作简单、实用、重现性好,可用于大批量生产及合理利用资源提供科学依据.
【总页数】3页(P75-77)
【作者】冀满丰
【作者单位】深圳市宝安区龙华人民医院药剂科,广东深圳,518109
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.黄酮类化合物的提取·分离纯化和含量测定方法的研究进展 [J], 郭雪峰;岳永德
2.反萃分散液膜分离提取黄连中生物碱研究 [J], 欧阳丽;何鼎胜;苏孝礼;谢青季;马铭;姚守拙
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4.三颗针中盐酸小檗碱的提取分离工艺研究 [J], 肖道安;罗小凤
5.可乐饮料中咖啡因含量测定——有机物提取分离研究性学习案例 [J], 吉祖筠;夏心悦;郑子谅;周天昊;孙翼远;姚姝婉;张滨淇;张羡旸;赵顺懿
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关于小檗碱提取工艺分析论文
关于小檗碱提取工艺分析论文关于小檗碱提取工艺分析论文【摘要】小檗碱作为临床上常用的药材成分应用广泛，为提高小檗碱的提取得率，近年来对小檗碱提取的工艺研究很多。
该文主要综述了近些年来对小檗碱提取工艺的研究进展。
【关键词】小檗碱提取工艺黄连黄柏三颗针正交实验小檗碱又称黄连素，广泛分布在植物界，大约有4个科10个属植物都已发现有小檗碱存在。
小檗碱是黄色针状晶体，表现为季铵型、醇型3种互变异构体，其中以季铵碱型最稳定。
小檗碱能缓慢溶解于冷水（1∶20）或冷乙醇（1∶100），在热水或热乙醇中溶解度比较大，难溶于丙醇、氯仿或苯，盐类的溶解度都比较小，硫酸盐在水中的溶解度约为1∶30，盐酸盐微溶于冷水。
小檗碱可从三颗针、黄连、黄柏等植物中提取。
由于黄连生长缓慢，价格较高，黄柏来源也较少，现我国主要应用三颗针作为提取原料。
小檗碱是临床上一种常用的广谱抗菌药，主要用于菌痢、胃肠炎、痈肿等细菌性感染。
现代研究证明小檗碱有抗肿瘤、抗心率失常、降压、降血糖等作用，在临床上有越来越广泛的应用，需求量日益增加。
为提高小檗碱提取效率，近些年来对小檗碱提取工艺的研究很多，本文对这一方面作一综述。
1酸水法提取小檗碱酸水法是目前工业生产提取小檗碱常用的方法。
从三颗针中提取小檗碱,常用多倍量的0.3%硫酸水溶液浸泡24h，滤液用石灰乳调pH 值至12，过滤，滤液用盐酸调pH值到2～3,再加入6%左右的精制食盐,使食盐完全溶解,放置过夜,抽滤得盐酸小檗碱粗品［1］。
或用0.5%的硫酸水溶液冷浸提取,酸水液用石灰乳调pH值到7左右,滤液浓缩用盐酸调pH值到2～3，再加入6%左右的精制食盐,使食盐完全溶解,过滤，沉淀溶于热水，加石灰乳调pH值到8.5～9趁热过滤,滤液再用盐酸调pH值到2～3，放冷过滤得盐酸小檗碱粗品［2］。
廖志新等［3］以产于青海等地的三颗针为原料，采用正交实验法，对酸水法提取盐酸小檗碱的生产工艺进行研究，找出了最佳的提取工艺。
黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
收稿日期#&$2 &$ $$修订日期#&$2 &* $! 基金项目北方民族大学校级科研项目'#&$2l];?a&#(+北方民族大学引进人员科研启动项目'!!&&0&#*&&(+北方民族大学植物性农产
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黄连中盐酸小檗碱的提取纯化及抑菌活性研究
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'$'北方民族大学生物科学与工程学院#银川)*&&#$+ #'宁夏特殊生境微生物资源开发与利用重点实验室#银川)*&&#$(
由真菌和细菌引起的植物病害严重影响作物的 产量和 品 质#是 造 成 巨 大 经 济 损 失 的 主 要 原 因 之 一)$#*%喷施化学 抑 菌 剂 是 目 前 控 制 病 害 采 取 的 主 要手段#但存在食品安全$环境污染以及易诱导病原 物产生ห้องสมุดไป่ตู้性等问题%因此#开发新型$安全$环保的 农业病 害 防 控 技 术 是 当 前 生 产 中 亟 待 解 决 的 问 题)0*%已有研究证实植物多种次生代谢产物对病害 具有良好的抑制作用)!**#通过植物获取抑菌成分用 于预防和控制农业病害的发生#具有低毒$安全$环
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天然药物盐酸小檗碱的分离提取
实训一天然药物盐酸小檗碱的分离提取小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。
主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。
黄连中小檗碱含量最高，可达10%左右，以盐酸盐的形式存在于黄连中。
小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
小檗碱属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色，45℃-160℃即分解。
其中以季铵碱式结构状态最稳定，可以离子化呈强碱性，用过量的氢氧化钾处理小檗碱盐类时，可转变为醇式叔胺碱和醛式仲铵碱，季铵碱式小檗碱可离子化，故有一定亲水性，因此，游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。
醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。
小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。
如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小檗碱，就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。
黄连素被硝酸等氧化剂氧化，转变为樱红色的氧化黄连素。
黄连素在强碱中部分转化为醛式黄连素，在此条件下，再加几滴丙酮，即可发生缩合反应，生成丙酮与醛式黄连素缩合产物的黄色沉淀。
一、实验目的1、掌握从中草药中提取、精制生物碱的方法；2、熟悉盐酸小檗碱的化学性质与鉴定方法。
3、熟悉用层析色谱法检识天然药物的基本操作。
二、实验原理根据小檗碱的盐酸盐在在水中的溶解度小（1：500，微溶于冷水，易溶于沸水，几乎不溶于冷乙醇、氯仿、石油醚），而小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度大（1:30溶于冷水，溶于乙醇）。
因此，从植物原料中提取小檗碱时常用稀硫酸水溶液浸泡或渗漉，先将药材中的小檗碱转变为硫酸盐用热水提出；然后向提取液中加入氯化钠盐析，再加盐酸，使其由硫酸盐转化为盐酸盐，结合氯化钠的盐析作用降低其在冷水中的溶解度，此时，盐酸小檗碱从溶液中析出，从而制得盐酸小檗碱。
盐酸小檗碱提取工艺的研究
盐酸小檗碱提取工艺的研究
盐酸小檗碱是一种广泛应用于医药工业的药物原料，主要用于治疗胃病和黄疸等疾病。
因此，研究盐酸小檗碱的提取工艺对于提高其产量和质量具有重要意义。
盐酸小檗碱的提取工艺主要包括以下几个步骤：
1. 原料选取：选择含有丰富盐酸小檗碱的植物材料作为原料，常用的有小檗树根、茎、叶等。
2. 粉碎和筛选：将选取的植物材料进行粉碎和筛选，获得适当粒度的粉末。
3. 固液提取：将粉碎和筛选后的植物材料与适量溶剂进行混合浸泡，经过一段时间后，进行过滤分离植物材料与溶液。
4. 浓缩和结晶：将得到的溶液进行浓缩，使溶液中的溶剂蒸发；然后通过冷却结晶使得盐酸小檗碱从溶液中结晶出来。
5. 滤饼漂洗：将结晶滤饼进行漂洗，去除杂质，并提高盐酸小檗碱的纯度。
6. 干燥和粉碎：将漂洗后的盐酸小檗碱滤饼进行干燥，去除水分；然后进行粉碎，得到细粉末状的盐酸小檗碱。
7. 包装和储存：将得到的盐酸小檗碱进行包装，并储存在适宜的环境中，以保证其质量和稳定性。
上述工艺中的每个步骤都需要进行条件的优化和控制，以提高盐酸小檗碱的产量和纯度。
同时，还需进行相关的分析和检测，以确保提取过程的质量和安全性。
中药小檗碱的提取与纯化工艺研究
中药小檗碱的提取与纯化工艺研究中药是一种源远流长的传统医学，在中国几千年的医学发展历程中，中药一直扮演着重要的角色，而小檗碱作为一种常用中草药的主要有效成分之一，被广泛应用于中药领域，特别是在治疗炎症和肝胆疾病方面，其功效被广泛认可。
小檗碱的化学结构与药理活性已经有了很详细的研究，而小檗碱的提取与纯化技术也是当前研究的热点之一。
本文将围绕小檗碱的提取与纯化工艺展开深入的探讨。
一、小檗碱的提取方法小檗碱的提取方法主要有煎煮提取法、超声波提取法、微生物法等多种，其中煎煮提取法是目前广泛应用的一种方法。
煎煮提取法是从小檗树干、叶子中提取小檗碱的一种方法，具体操作步骤如下：1.将干燥的小檗树干、叶子粉碎成小颗粒。
2.将粉碎后的小檗树干、叶子装入提取器中。
3.倒入足够的水，与植物原料的比例是1:10。
4.开始加热，加热时间一般为1-2小时，煎煮温度控制在100℃左右。
5.将提取液过滤，并将提取液中的小檗碱进行测定。
尽管煎煮提取法对于小檗碱的提取有较好的效果，但该方法有一定缺点，如提取时间过长，提取率低，会导致部分有效成分的流失等问题。
因此，研究人员不断尝试寻找更加高效、优质的提取方法。
二、小檗碱的纯化方法小檗碱的纯化方法主要分为溶剂沉淀、柱层析、高效液相色谱等方法，其中，溶剂沉淀法是用最为广泛的一种方法。
溶剂沉淀法是利用有机溶剂将混合物中小檗碱选择性地溶解，然后对溶液进行加热蒸发，使其缓慢冷却，在此过程中，小檗碱分子会重新排列，逐渐凝结形成晶体，从而实现对小檗碱的纯化。
溶剂沉淀法的操作步骤如下：1.将小檗碱提取液进行浓缩，获得浓缩提取液。
2.在浓缩提取液中，加入约2倍的醋酸乙酯，用过量的溶剂使得小檗碱选择性地溶解。
3.加热溶液，用一定量的醋酸盐水稍加冷却，然后加入特定的醇类溶剂，使得小檗碱动态平衡，从而排列得更加紧凑。
4.将溶液慢慢冷却，在此过程中，小檗碱分子逐渐凝结形成晶体。
5.将晶体过滤、洗净、干燥，最终获得小檗碱。
(完整word版)黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定
实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连(coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连(coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎.黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效.黄连的有效成分主要是生物碱,已分离出的主要生物碱有小檗碱(berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱(jatrorrhizine)等.其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求］1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法.2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。
[实验原理］小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂,其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125,酸性硫酸盐1:100，硫酸盐l:30，但在热水中都比较容易溶解.小檗碱常以季铵碱形式存在,碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式.OO33NHCHOOOOCH3OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色)N+OOOCH3OCH3小檗碱（黄连素)掌叶防己碱又称巴马亭,为黄色结晶,溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶,并有强烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇,在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
N+H3COH3COOCH3OCH3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质.再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。
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黄连中盐酸小蘖碱的提取分离与鉴定姓名：***系别：信息工程系班级：13级生物二班****：**日期：2014年11月30日摘要 (2)第1章前言 (3)1.1小檗碱特性 (3)1.2小檗碱作用 (3)1.3小檗碱提取纯化鉴定方法 (3)1.4本项目研究的意义 (4)1.5 研究内容 (4)第2章黄连中小檗碱的提取 (4)2.1实验材料与方法 (4)2.2 结果与分析 (5)第3章盐酸小檗碱的分离纯化 (5)3.1实验材料与方法 (5)3.2 结果与分析 (6)第4章盐酸小檗碱的鉴定 (6)4.1实验材料与方法 (6)4.2 结果与分析 (7)第5章结论 (7)参考文献 (8)摘要生物碱是植物中含氮的碱性有机化合物,大都有明显的生理活性,是许多中草药中的有效成分。
小檗碱是一种季铵碱,其游离碱为黄色针晶,Mp.145℃(乙醚),微溶于水,能溶于热水和乙醇中，难溶于苯、丙酮、氯仿，几乎不溶于石油醚。
小檗碱与氯仿、丙酮、苯在碱性条件下均能形成加成物。
小檗碱盐酸盐难溶于冷水，易溶于热水；硫酸盐易溶于水。
溶解度分别为:小檗碱,1∶２０（冷水）,1∶100(冷乙醇);盐酸盐,1∶500(冷水);硫酸盐,1∶30(冷水),利用这些特性提取盐酸小檗碱。
主要研究结果为:1.盐酸小檗碱精制2.氧化铝柱层析分离纯化盐酸小檗碱。
3.盐酸小檗碱的鉴定。
关键字:盐酸小檗碱提取分离第1章前言1.1小檗碱特性小檗碱是一种季铵碱,其游离碱为黄色针晶,Mp.145℃(乙醚),微溶于水,能溶于热水和乙醇中，难溶于苯、丙酮、氯仿，几乎不溶于石油醚。
小檗碱与氯仿、丙酮、苯在碱性条件下均能形成加成物。
小檗碱盐酸盐难溶于冷水，易溶于热水；硫酸盐易溶于水。
溶解度分别为:小檗碱,1∶２０（冷水）,1∶100(冷乙醇);盐酸盐,1∶500(冷水);硫酸盐,1∶30(冷水),利用这些特性提取盐酸小檗碱。
1.2小檗碱作用小檗碱是一种常用的广谱抗菌药，抵抗多种原因引起的腹泻，并具有抗病原体作用，通常用于治疗原发性高血压、心律失常、高脂血症、消化性溃疡和2型糖尿病等疾病。
常用的小檗碱提取方法有：醇提、酸水、石灰乳、酶解和酸性乙醇等。
本实验以黄柏为原料，分别用以上5种方法提取其中的小檗碱，并对各种方法的得率进行了比较，以期筛选出适于黄檗中小檗碱提取的最佳方法1.3小檗碱提取纯化鉴定方法掌叶防己碱本实验是利用小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大。
而它们的盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解度则更小。
利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱。
再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。
1.4本项目研究的意义2014年中国小檗碱市场研究报告依托多年对小檗碱行业的研究，结合小檗碱行业历年供需关系变化规律，立足国内市场，兼顾全球市场环境，对小檗碱行业内企业群体进行了深入的调查与研究。
同时，2014年中国小檗碱市场研究报告也针对小檗碱行业及其上下游行业的特点，从不同角度切入行业，为小檗碱行业企业提供了强大的数据支持与专业级的市场导向。
并为企业制定发展战略、进行投资决策和企业经营管理提供权威、充分、可靠的决策参考。
1.5 研究内容1.5.1黄连中盐酸小檗碱的提取1.5.2 小檗碱的分离纯化1.5.2 小檗碱的鉴定第2章黄连中小檗碱的提取2.1实验材料与方法2.1.1实验材料黄连粗粉2.1.2实验试剂2%硫酸溶液、石灰乳、Hcl、Nacl.2.1.3实验仪器粉碎机，渗漉筒，烧杯2.1.4实验方法取黄连粗粉，放入粉碎机，称重约50g加0.3％硫酸500ml（超过药材0.2cm）浸渍20分钟，装入渗漉筒30分钟，滤过药渣滤液加石灰乳调PH值至中性放置10分钟抽滤滤液加HCl调PH2～3，加滤液体积10％的NaCl，放置过夜，抽滤盐酸小檗碱粗品2.2 结果与分析通过以上操作，制得盐酸小檗碱的粗品，由于操作过程中试剂配制微小误差，使得提取的盐酸小檗碱的粗品比预计的少。
第3章盐酸小檗碱的分离纯化3.1实验材料与方法3.1.1实验材料盐酸小檗碱的粗品，3.1.2实验试剂黄连根粉,0.5%硫酸，石英砂，脱脂棉，石灰乳，10%盐酸，浓盐酸，氧化铝，95%乙醇，无水乙醇，10％氢氧化钠溶液,滤纸，硅胶，氯仿-氨-甲醇(30∶1∶8),氯仿-乙醇-0.1mol.L－1盐酸 (1∶1∶1，下层)3.1.3实验仪器层析柱、研钵、烧杯、硅胶薄层板、滤纸、抽滤装置、紫外灯、层析缸等3.1.4实验方法3.1.4．1盐酸小檗碱精制取所得粗品(未干燥)放入20倍量沸水中，搅拌溶解后，继续加热数分钟，趁热过滤[4]。
滤液滴加一滴浓盐酸，静置(过夜),滤取结晶，用蒸馏水洗数次,抽干，50℃以下真空干燥，即为精制盐酸小檗碱1氧化铝柱层析分离纯化盐酸小檗碱[5]a 氧化铝层析柱制备:取一支2.0cm×30cm层析柱,柱底覆盖少许脱脂棉,柱内加入一定体积95%乙醇,打开活塞,让溶液慢慢流出。
此时将已搅拌混均的氧化铝95%乙醇悬液(层析氧化铝120-140目,25-30g)不断加入层析柱内,至加完后,轻敲柱体,使各部分氧化铝均匀紧密一致。
待氧化铝沉降稳定(表面应平整),表面保持有少量溶剂(0.5cm左右)，关闭活塞。
b 进样:取约50 mg左右的盐酸小檗碱粗品，用尽量少的无水乙醇溶解制成溶液。
用吸管吸取样液沿柱壁四周小心加入,打开层析柱活塞使有溶剂滴下,待液面近与氧化铝表面相平,迅速用少量无水乙醇将柱壁样液洗下,待液面下降后再洗,反复多次,直至表面溶剂无色,让样品完全持留于氧化铝中,并保留有1cm左右溶剂,此时加入少许石英砂覆盖氧化铝表面,并沿管壁加入足量洗脱剂。
在此过程中要准确迅速,洗涤溶剂尽量少并尽可能不要扰动,氧化铝表面平整。
c 洗脱:使溶剂继续滴下,(注意向柱内添加无水乙醇,保持柱体湿润),洗脱样品。
按每流分5-10 mL收集洗脱液,并着重收集各个色段(从下至上):鲜黄色、桔红色(棕色段可不再洗脱),收集到的洗脱液经浓缩后进行检测鉴定。
d 氧化铝再生回收:层析后弃去氧化铝柱上端带深色部分,取出剩余氧化铝,依次用10％氢氧化钠溶液和水洗涤,晾干后经400℃烘4-6小时活化再生即可备用。
3.2 结果与分析通过以上操作，得到一定纯度的盐酸小檗碱纯品。
第4章盐酸小檗碱的鉴定4.1实验材料与方法（1）取自制精制盐酸小檗碱0.05g溶于50ml热水中，加入10%NaOH溶液2ml混合均匀后，于水浴上加热至50℃，加入丙酮5ml，放置，即有柠檬色丙酮小檗碱结晶析出。
抽滤，水洗后，干燥，测mp。
（2）取自制精制盐酸小檗碱少许，加稀盐酸2ml待溶解后，加漂白粉少许，即显樱红色。
（3）取自制精制盐酸小檗碱少许，加水1ml待溶解后，加1~2滴，即产生绿色硝酸小檗碱沉淀。
（4）取自制精制盐酸小檗碱少许，加1ml待溶解后，加锌粉少许，再分数次加入浓硫酸数滴，每隔10min加1次，观察其黄色是否消退。
薄层色谱检识吸附剂：硅胶G-CMC-Na薄层板对照品：盐酸小檗碱甲醇溶液样品：不同色带的甲醇溶液展开剂： CHCl3-MeOH-冰醋酸（7：1：2）检视：先在紫外灯光（365nm）下观察荧光，再喷改良碘化铋钾试剂。
记录图谱并计算Rf值4.1.1实验材料盐酸小檗碱纯品4.1.2实验试剂NaOH溶液、稀盐酸、漂白粉、浓硝酸、锌粉、浓硫酸、盐酸小檗碱甲醇溶液、 CHCl3-MeOH-冰醋酸、改良碘化铋钾试剂。
4.1.3实验仪器紫外可见分光光度计、烧杯，硅胶G-CMA-Na薄层板，真空干燥箱。
4.1.4实验方法1.取自制精制盐酸小檗碱0.05g溶于50ml热水中，加入10%NaOH溶液2ml混合均匀后，于水浴上加热至50℃，加入丙酮5ml，放置，即有柠檬色丙酮小檗碱结晶析出。
抽滤，水洗后，干燥，测mp。
2.取自制精制盐酸小檗碱少许，加稀盐酸2ml待溶解后，加漂白粉少许，即显樱红色。
3.取自制精制盐酸小檗碱少许，加水1ml待溶解后，加1~2滴，即产生绿色硝酸小檗碱沉淀。
4.取自制精制盐酸小檗碱少许，加1ml待溶解后，加锌粉少许，再分数次加入浓硫酸数滴，每隔10min加1次，观察其黄色是否消退。
5.薄层色谱检识吸附剂：硅胶G-CMC-Na薄层板对照品：盐酸小檗碱甲醇溶液样品：不同色带的甲醇溶液展开剂： CHCl3-MeOH-冰醋酸（7：1：2）检视：先在紫外灯光（365nm）下观察荧光，再喷改良碘化铋钾试剂。
记录图谱并计算Rf值4.2结果与分析通过颜色与RF值分析，得出薄层色谱检验后纯度大大提高，但收率降低。
第5章结论小檗碱是一种常用的广谱抗菌药，抵抗多种原因引起的腹泻，并具有抗病原体作用，通常用于治疗原发性高血压、心律失常、高脂血症、消化性溃疡和2型糖尿病等疾病。
本项目以黄连作为试验材料，从黄连中提取盐酸小檗碱，通过氧化铝层析柱的方法进一步纯化，进而得到纯度较高的盐酸小檗碱。
主要研究结果为:1．通过硫酸酸化水、石灰乳沉淀的方法，高效简便的提取得到了一定量的盐酸小檗碱粗品。
2 通过盐析和氧化铝层析柱的方法，对盐酸小檗碱粗品进行了纯化。
3 对盐酸小檗碱粗品和纯品进行纸层析和薄层层析测定，得知盐酸小檗碱纯度提高，但收率降低。
注释1．各地产黄连根茎小檗碱及总生物碱含量分别为4.2-6.7%，6.6-9.6%；栽培种比野生种含量少20％左右。
黄连除根茎作药材外，各部位均含小檗碱，黄连须根0.8-5.5％，叶为1.49％，老叶为2.5-2.8％，花为0.56％，种子为0.23％.2．浸泡药材粗粉的硫酸水溶液，浓度不宜过高，一般为0．2-0．3％为宜。
若硫酸水溶液浓度过高，小檗碱可成为硫酸氢小檗碱，其溶解度（1：100）明显较硫酸小檗碱（1：30）为小，降低提取效率。
硫酸水溶液浸出效果与浸泡时间有关，浸泡12小时约可浸出小檗碱80％，浸泡24小时，可浸出92％。
常规浸出应浸泡多次，使小檗碱提取完全，本实验中浸出液只收集第1次的浸泡液。
3．盐析时，加入氯化钠的量，以提取液量的10％计算，即可达到析出盐酸小檗碱的目的。
氯化钠的用量不宜过多，否则溶液的相对密度增大，造成盐酸小檗碱微细结晶呈悬浮态难以下沉。
4．在精制盐酸小檗碱过程中，因盐酸小檗碱放冷极易析出结晶，所以加热煮沸后，应迅速抽滤或保温过滤，防止溶液在过滤过程中冷却，析出盐酸小檗碱结晶，过滤困难，降低收率。
5．进行柱层析分离时,洗脱过程中需及时补加洗脱剂保持柱体润湿均匀;若柱体干裂,则分离无法进行。
6．纸层析检测时需预先要将层析纸在展开剂气氛中饱和15-30分钟,否则分离效果不佳。
),1030(C-O-C)。
7．红外光谱数据:IR.νKBrmaxcm-11505（芳环）,1471(Ar-O-C),1360(CH３参考文献[1] 俞建瑛、蒋宇、王善利编.生物化学实验技术.化学工业出版社[M].2005[2]于文国，卞进发.生化分离技术.北京：化学工业出版社[M].2006[3]孙彦.生物分离工程.第二版.北京: 化学工业出版社[M].2005。