药品无菌检查ppt参考课件

2020/5/3
15
药品无菌检查法
• 供试品的无菌检查
检验数量：一次试验所用供试品最小包装容器的数量 出厂产品按表1，上市产品监督检验按表2 最少检验数量不包括阳性对照用的。
检验量：按表3，采用薄膜过滤法时，只要供试品特性允 许，应将所有容器内的全部内容物过滤。
2020/5/3
16
2020/5/3
• 2012年10月，美国新英格兰合成制药中心生产的注 射用类固醇霉菌污染，造成数百人感染真菌脑炎， 至年底统计死亡39人。
• 这些事故促使无菌制剂GMP监管的进步，同时也对 无菌检验提出更高更严的要求。
2020/5/3
5
药品无菌检查法
• 特点
• 无菌检验结论为一次性，药典规定为不得复 试，为什么不得复试，菌落的分布具有不均 匀性，检验过程是破坏性的，不具有重复性。 ---------------对操作过程的要求非常高。
结果判断：
与对照管比较，试验组的试验菌生长良好，则说明供 试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或抑菌 作用可以忽略不计； 如含供试品的任一容器中的试验菌生长微弱、缓慢 或不生长----供试品的该检验量在该检验条件下有抑 菌作用-----增加冲洗量、培养基用量、中和剂或灭 活剂、更换滤膜品种，重新进行方法适用性试验。
用含0.1-1%吐温80的冲洗液冲洗，培养基中可加入吐温80 • 可溶于十四烷酸异丙酯的膏剂和黏性油性供试品-----溶解于适量无菌
十四烷酸异丙酯中，过滤，加热仍然没法过滤的，萃取，静置，取水 层过滤 • 无菌气雾剂----在-20℃冷冻1小时，取出在容器上钻一小孔释放抛射剂 后再无菌开启容器，转移至无菌容器中。 • 装有药物的注射器供试品——注意应采用适宜的方法进行包装中所配 带的无菌针头的无菌检查 • 带有导管的医疗器具（输血、输液袋等）---每个最小包装用50-100ml 冲洗液分别冲洗内壁，过滤冲洗液。同时注意应采用直接接种法对配 带的无菌针头做无菌检查
9
药品无菌检查法
• 培养基适用性检查
• 无菌性—每批次培养基取不少于5瓶（支），培养14天， 应无菌生长。
• 灵敏度 6种菌（<100cfu）
金、铜绿、生孢---------流乙醇酸盐流体
7支，12ml/支，每种菌接种2支，阴性一支，
枯草、白念、黑曲----------胰酪大豆胨液体 7支，每种菌接 种2支，9ml/ 支，一支阴性
172020/5/3182020/5/3
19
药品无菌检查法
• 1、薄膜过滤法
• 封闭式薄膜过滤器
• 只要供试品性状允许，应采用薄膜过滤
• 抗生素样品选用低吸附的滤膜
• 水溶性供试品过滤前先将少量冲洗液过滤 以润湿滤膜
• 油类供试品的滤膜和滤器在使用前应充分 干燥
• 冲洗量一次一般为100ml，总冲洗量不得超
2020/5/3
4
药品无菌检查法
• 无菌制剂比非无菌制剂存在更高的风险 • 一系列的药品不良事件 • 2006年的“欣弗事件”---安徽华源生产的“克林霉
素磷酸酯葡萄糖注射液”引起了11人死亡，93人感 染，企业倒闭，总经理自杀。未按批准的工艺参数 灭菌，降低灭菌温度、缩短灭菌时间，增加灭菌柜 装载量，影响了灭菌效果，经中检所检验，发现无 菌不合格。
• 对照组：另取一装有同体积培养基的容器， 加入等量试验菌，培养时间不得超过5天。
2020/5/3
13
2020/5/3
14
药品无菌检查法
• 直接接种法
取流乙醇酸盐流体培养基（不少于15ml）6管，分别加 入金葡、大肠、生孢各2管，其中一管接入供试品， 另一管作为对照，TSB（不少于10ml）6管，分别加入 枯草、白念、黑曲各2管，其中一管加入供试品，另 一管作为对照，培养时间不得超过5天。
药品无菌检查及相关知识
2020/4/9
1
主要内容
1、药品无菌检查法基础 2、2015年版药典无菌检查法的变动 3、洁净实验室微生物的监测和控制 4、菌种的管理 5、二级生物安全实验室
2020/5/3
2
药品无菌检查法
• 定义及特点 • 培养基、冲洗液 • 方法学验证 • 供试品的无菌检查 • 无菌检查的要点
• 方法适用性试验
证明所采用的方法适合于该产品的无菌检查。 若检验程序或产品发生变化可能影响检验 结果时，应重新进行方法适用性试验。
菌种：金葡、大肠、枯草、生孢、白念、黑 曲
方法：1、薄膜过滤 2、直接接种
2020/5/3
12
药品无菌检查法
• 薄膜过滤法 • 试验组：取每种培养基规定接种的供试品
总量按薄膜过滤法过滤，冲洗，在最后一 次冲洗液中加入小于100cfu的试验菌，过滤。 将培养基加至滤筒内。
• 过程的控制----------1、环境控制；2、操作影 响，人员、物流是否引入外源性污染？
2020/5/3
6
过程控制
环境保证
培养基保证
无菌性检查 灵敏度检查
SOP操作
有效的方法
方法学验证
有效的结果 可靠的结论
结果判断
2020/5/3
7
药品无菌检查法
• 培养基
配制后采用验证合格的灭菌程序灭菌。
什么是验证合格的？
保存条件：2-25℃、避光，非密闭容器在3周内使用， 密闭容器一般在1年内使用。
流乙醇酸盐流体：供试品接种前，培养基氧化层不 超过深度的1/5，否则100℃水浴加热至粉红色消 失（不超过20分钟），只能加热一次，培养结束 后氧化层不超过1/2
2020/5/3
8
药品无菌检查法
2020/5/3
过1000ml，以免膜上的微生物受损。总冲
2020/洗5/3 量特别大时应尽量减小流速。
20
药品无菌检查法
• 水溶性的液体-----直接过滤或混合至含不少于100ml适宜稀释液的无菌 容器中，混匀，立即过滤，如供试品有抑菌作用，须冲洗一般不少于 三次。
• 水溶性的固体----溶取规定量，加适宜的稀释液溶解或按标签复溶。 • 非水溶性供试品-----直接过滤，或乳化后（加吐温80等）立即过滤，
2020/5/3
3
药品无菌检查法
• 无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药 品、生物制品、医疗器具、原料、辅料、 及其他品种是否无菌的一种方法。
• 若供试品符合无菌检查法的规定,仅表明了 供试品在该检验条件下未发现微生物污染。 也并不表示所有的产品都是无菌的。
• 反之，当供试品中检出微生物污染，则可 以认为批产品的微生物污染风险相当高。
流乙醇酸盐流体培养3天，胰酪大豆胨液体 5天， 空白对 照管应无菌生长，若加菌的培养基管均生长良好，判断该 培养基的灵敏度符合规定
2020/5/3
10
药品无菌检查法
• 冲洗液 • 0.1%蛋白胨水溶液 • pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 • 可选用其他经验证过的适宜的溶液
2020/5/3
11
药品无菌检查法