PCR分子诊断技术
动物疾病的分子诊断方法
动物疾病的分子诊断方法动物疾病的分子诊断方法是一种近年来快速发展的技术手段，它通过检测和分析动物体内的分子标志物，例如DNA、RNA、蛋白质等，来识别和鉴定动物身体内发生的疾病变化。
与传统的诊断方法相比，分子诊断方法具有高效、准确、敏感、特异性强的优势，已经在动物健康管理和预防控制等方面得到广泛应用。
一、PCR技术在动物疾病诊断中的应用PCR（聚合酶链反应）是一种通过体外扩增DNA分子的技术。
在动物疾病的分子诊断中，PCR技术可以快速检测、鉴定和定量动物体内的病原体DNA，如病毒、细菌等。
通过PCR技术，可以有效地诊断动物疾病，例如口蹄疫、禽流感等，并进行病原体的溯源研究。
二、核酸杂交技术在动物疾病诊断中的应用核酸杂交技术是一种通过将标记有放射性同位素或荧光标记的探针与待测物的特定序列进行杂交，从而检测和分析目标序列的方法。
在动物疾病分子诊断中，核酸杂交技术可以用来检测和鉴定动物体内的病原体DNA或RNA，并能够定量分析病原体的数量。
例如，通过核酸杂交技术可以检测出乳牛体内是否存在布鲁氏菌，从而及时采取相应的控制措施。
三、免疫荧光技术在动物疾病诊断中的应用免疫荧光技术是一种通过标记荧光物质的抗体与待测物进行特异性结合，然后观察荧光信号以识别和检测分子的方法。
在动物疾病的分子诊断中，免疫荧光技术可以用来检测和鉴定动物体内抗原或抗体的存在，从而确定动物是否感染某种病原体或产生了相应的免疫应答。
例如，免疫荧光技术可以检测动物体内的犬瘟热病毒抗原，帮助兽医及早做出诊断和治疗。
四、质谱技术在动物疾病诊断中的应用质谱技术是一种通过将待测样品的分子分解为离子，并利用质量-荷质比来分析和鉴定分子的方法。
在动物疾病分子诊断中，质谱技术可以通过分析动物体内蛋白质或代谢产物的质谱图谱，来鉴定和确认动物是否患有某种疾病。
例如，质谱技术可以鉴定并定量动物体内的草履虫蛋白质，既能够进行疾病诊断，又可以评估动物的治疗效果。
综上所述，动物疾病的分子诊断方法是一种准确、敏感、快速的诊断手段，可以帮助兽医及时发现和诊断动物体内的病变，并采取相应的治疗措施。
分子诊断技术分析
分子诊断技术分析分子诊断技术是一种通过检测个体的DNA、RNA或蛋白质等分子水平的方法，用来诊断和预测疾病。
随着生物技术的飞速发展，分子诊断技术已经成为医学领域的重要研究方向。
本文将介绍分子诊断技术的原理、应用和前景。
一、分子诊断技术的原理分子诊断技术通过检测和分析个体的遗传物质来判断健康状况和病理状态。
它使用了一系列的技术手段，如聚合酶链反应（PCR）、芯片技术、基因测序等。
其中，PCR技术是分子诊断技术的核心和基础。
它通过扩增个体的DNA序列，从而使其能够被检测和分析。
二、分子诊断技术的应用1. 遗传性疾病诊断：分子诊断技术可以检测和分析个体的基因组，从而判断是否患有遗传性疾病。
例如，通过检测染色体异常，可以诊断唐氏综合征、血友病等疾病。
2. 肿瘤诊断：分子诊断技术在肿瘤的早期筛查和诊断中发挥着重要作用。
它可以检测肿瘤相关基因的突变，并进行肿瘤的分型和分级，指导临床治疗。
3. 感染病诊断：分子诊断技术可用于检测和鉴定病原体，如病毒、细菌和真菌等，快速诊断感染性疾病，提供针对性的治疗方案。
4. 精准医学：分子诊断技术可以根据患者的基因组信息，个性化制定治疗方案。
例如，根据患者的基因型判断特定药物的疗效和副作用，以实现精准医疗。
三、分子诊断技术的发展前景分子诊断技术在医学领域具有广阔的应用前景。
随着基因测序技术的不断进步和降低成本，分子诊断技术将更加普及和便捷，为疾病的预防、筛查、诊断和治疗提供更加有效和精准的手段。
此外，分子诊断技术的发展还将推动疾病的分型和个体化治疗。
通过深入研究基因组信息，我们可以更好地理解疾病的发生机制，寻找新的治疗靶点，并开发相应的靶向药物。
同时，随着人工智能和大数据等技术的融合，分子诊断技术的数据处理和分析能力将大大提高，为疾病的早期预警和精准预测提供更高效和可靠的支持。
综上所述，分子诊断技术作为一种新兴的医学技术，具有巨大的应用前景。
随着技术的不断进步和创新，相信分子诊断技术将在疾病诊断和治疗中发挥越来越重要的作用，为人类的健康事业做出更大的贡献。
分子诊断技术在遗传病诊断中的应用
分子诊断技术在遗传病诊断中的应用遗传病是由基因突变或遗传异常引起的一类疾病，它们对人类健康产生了严重的威胁。
传统的遗传病诊断方式通常是基于临床症状、家族史和一系列实验室检测，但这种方法存在着许多局限性。
近年来，随着分子生物学技术的飞速发展，分子诊断技术在遗传病诊断中得到了广泛应用。
1. Polymerase Chain Reaction技术（PCR技术）PCR技术是一种在遗传病诊断中常用的分子生物学技术，它能够在短时间内扩增特定DNA序列，从而使得目标序列的数量达到可以被检测的范围。
通过PCR技术，医生可以对遗传病相关基因进行定性和定量检测，进行疾病的早期诊断和监测。
例如，PCR技术可用于检测常见遗传病如囊肿纤维化和地中海贫血等。
2. 基因测序技术基因测序技术是一种高通量的分子诊断技术，它能够解读个体基因组的全部或部分DNA序列。
通过对患者基因组的测序，医生可以发现患者是否存在潜在的遗传突变或变异，从而进行病因的明确诊断。
这种技术在罕见遗传病的诊断中尤为重要，因为这些病种通常具有高度异质性，临床症状难以确诊。
3. 即时聚合酶链反应技术（LAMP技术）LAMP技术是一种在遗传病诊断中应用广泛的分子检测技术，它能够在恒温条件下，通过酶的协同作用，迅速扩增并检测目标DNA序列。
与PCR技术相比，LAMP技术不需要复杂的设备和条件，更适用于基层医疗机构和资源匮乏地区的遗传病诊断。
LAMP技术可以快速、准确地检测多种遗传病，如新冠病毒、艾滋病和乙肝等。
4. 高通量基因检测技术高通量基因检测技术是一种在遗传病诊断中应用广泛的分子筛查技术，它能够同时检测数千个基因，用于快速筛查潜在的遗传病风险。
这种技术通过基因芯片或测序平台，将患者的基因样本与已知的遗传病相关基因进行比对，从而确定患者的遗传风险。
高通量基因检测技术可以大大提高遗传病的筛查效率，有助于早期发现并干预遗传病。
5. 引物扩增反应技术（Ligase Chain Reaction技术）Ligase Chain Reaction技术是一种在遗传病诊断中具有高灵敏度和特异性的分子诊断技术，它能够通过酶的催化作用，将特定引物与目标DNA序列连接起来。
甲型流感的分子诊断技术与实验室检测方法
甲型流感的分子诊断技术与实验室检测方法甲型流感是一种由甲型流感病毒引起的急性呼吸道传染病，其传播迅速且易感染大量人群。
为了准确诊断和及时干预，科学家们开发出了多种分子诊断技术和实验室检测方法。
本文将介绍几种常用的技术与方法，以提高对甲型流感的检测效率和诊断准确性。
一、聚合酶链式反应（PCR）技术PCR技术是一种灵敏度高、特异性强的分子诊断技术，已被广泛应用于甲型流感的检测中。
该技术通过放大甲型流感病毒基因组中特定的DNA片段，从而使其能够被检测到。
PCR技术可在短时间内，从患者的样本中检测到甲型流感病毒的存在，并确定其亚型。
此外，PCR 技术还能够对病毒的基因组进行序列分析，从而确定其突变情况和传播途径。
二、实时荧光定量PCR（qPCR）技术实时荧光定量PCR技术是PCR技术的一种改进版本，其主要优势在于可实现对病毒数量的精确测量和即时定量。
该技术结合了PCR和荧光探针技术，使得可以在PCR反应过程中实时监测目标序列的扩增情况。
实时荧光定量PCR技术能够快速检测出甲型流感病毒的数量，并对病毒载量进行准确测量，帮助医生判断病情的严重程度，指导治疗决策。
三、免疫荧光技术免疫荧光技术是一种通过特定的抗体和荧光探针对病毒进行检测的技术。
在甲型流感的实验室检测中，科学家们通常采用免疫荧光技术检测病毒的抗原。
该技术的原理是将含有甲型流感病毒的标本与特异性荧光标记的抗体结合，然后通过荧光显微镜观察是否有荧光信号出现。
免疫荧光技术能够准确、快速地检测出甲型流感病毒的存在，并且可以对其亚型进行鉴定。
四、核酸测序技术核酸测序技术是一种可以解析病毒基因组序列的方法，可以帮助科学家们了解甲型流感病毒的基因组结构和功能。
通过高通量测序技术，科学家们可以在较短的时间内获取大量的病毒基因组序列信息。
这些信息有助于了解甲型流感病毒的变异情况，筛选药物治疗靶点，并指导疫苗的设计与开发。
五、免疫学检测方法除了分子诊断技术，免疫学检测方法也发挥着重要作用。
分子诊断技术在临床检验中的应用
分子诊断技术在临床检验中的应用第一章引言随着科技的不断发展，分子诊断技术在临床检验中的应用变得越来越广泛。
分子诊断技术是利用分子生物学、遗传学等原理和方法，通过检测和分析人体体液、组织或细胞中的分子信息，以达到疾病的早期诊断、预防和治疗的目的。
本文将详细介绍分子诊断技术在临床检验中的应用，并探讨其未来的发展趋势。
第二章 PCR技术在临床检验中的应用PCR（聚合酶链反应）是一种基于DNA模板的体外扩增技术。
PCR技术已被广泛应用于临床检验领域，如病毒感染、遗传性疾病和肿瘤等的诊断。
例如，利用PCR可以检测到患者体内存在的病毒DNA或RNA，从而判断病毒感染的种类和程度。
此外，PCR还可以用于检测某些基因突变，从而提供遗传性疾病的诊断和遗传咨询。
第三章基因测序技术在临床检验中的应用基因测序技术是指通过测定DNA序列，确定基因组中特定基因的序列信息的技术。
近年来，随着高通量测序技术的发展，基因测序已成为临床检验中不可或缺的工具。
基因测序技术可以用于检测遗传性疾病、肿瘤等的突变，帮助临床医生制定个体化的治疗方案。
此外，基因测序技术还可以用于预测个体的药物代谢能力，从而优化药物治疗的效果。
第四章微阵列技术在临床检验中的应用微阵列技术是一种高通量的基因表达分析技术，能够同时检测成千上万个基因的表达水平。
微阵列技术已被广泛应用于肿瘤分型、药物敏感性预测等临床研究中。
通过对肿瘤样本进行基因表达谱的分析，可以根据基因的表达模式判断肿瘤类型，从而指导治疗方案的选择。
此外，在药物研发领域，微阵列技术可以用于筛选潜在药物靶点和预测药物的效果。
第五章荧光定量PCR技术在临床检验中的应用荧光定量PCR技术是PCR技术的一种改进，通过引入荧光探针可以实现对PCR产物的定量检测。
荧光定量PCR技术已被广泛用于临床检验中，如病毒感染的早期诊断和监测，基因表达水平的定量分析等。
利用荧光定量PCR技术，可以实现对DNA、RNA等分子的高灵敏度和高特异性的定量检测，从而提高疾病的诊断准确性和监测效果。
医学中的分子诊断技术
医学中的分子诊断技术是一种在分子水平上进行疾病诊断和治疗的技术。
随着现代医学和生物科技的发展，分子诊断技术已成为医学领域中的重要组成部分。
目前，分子诊断技术包括PCR、ELISA、基因芯片、蛋白芯片、DNA测序、质谱和电化学传感器等。
PCR技术是一种常用的分子诊断技术，主要用于检测DNA或RNA。
PCR技术的基本原理是在一系列特定的温度下进行DNA复制和扩增。
PCR技术可以快速、准确地检测出微量的核酸序列，其检测灵敏度可以达到1个拷贝。
PCR技术的应用非常广泛，比如可以用于检测肿瘤标志物、病毒核酸和染色体异常等。
ELISA技术又称酶联免疫吸附法，主要用于检测蛋白质和抗原。
ELISA技术的基本原理是把样本中的蛋白质或抗原与特异性抗体结合，然后用酶标记的二抗来检测结合情况。
这种技术可以迅速、准确地检测出微量的蛋白质或抗原，其检测灵敏度可以达到10^-16 mol/L。
ELISA技术的应用范围非常广泛，包括检测肿瘤标志物、感染性疾病和自身免疫疾病等。
基因芯片技术是一种高通量的分子诊断技术，主要用于检测基因表达谱和DNA序列变异。
基因芯片技术的基本原理是利用特定的探针序列在芯片上固定目标序列，然后通过标记的样本来检测目标序列的信号强度。
基因芯片技术可以同时检测上万个基因的表达谱和数千个基因的DNA序列变异，其检测灵敏度可以达到10^-18 mol/L。
基因芯片技术的应用范围非常广泛，比如可以用于癌症的分型、药物疗效预测和个性化用药等。
蛋白芯片技术是一种高通量的分子诊断技术，主要用于检测蛋白质的表达谱和相互作用关系。
蛋白芯片技术的基本原理是把大量的蛋白质固定在芯片上，并用标记的样本来检测蛋白质的信号强度和相互作用关系。
蛋白芯片技术可以同时检测上万种蛋白质的表达谱和相互作用关系，其检测灵敏度可以达到10^-18 mol/L。
蛋白芯片技术的应用范围非常广泛，比如可以用于癌症的诊断、蛋白质组学和药物筛选等。
DNA测序技术是一种高精度的分子诊断技术，主要用于分析DNA序列和基因表达谱。
布鲁氏菌感染的分子诊断技术研究
布鲁氏菌感染的分子诊断技术研究布鲁氏菌感染是一种由布鲁氏菌引起的人畜共患传染病，其临床表现多样化，包括发热、关节炎、淋巴结肿大等症状。
为了准确快速诊断布鲁氏菌感染，研究人员们不断努力探索新的分子诊断技术。
本文将介绍目前在布鲁氏菌感染的分子诊断技术研究方面所取得的进展。
一、PCR技术在布鲁氏菌感染的诊断中的应用PCR技术（聚合酶链式反应）是一种基于DNA复制的技术，能够快速、敏感地检测布鲁氏菌的DNA。
研究人员使用PCR技术可以在患者的血液、尿液、关节液等样本中检测到布鲁氏菌的存在。
此外，研究人员还通过PCR技术鉴定了布鲁氏菌不同菌株之间的遗传变异，从而为疫情监测和菌株溯源提供了重要依据。
二、基因芯片技术在布鲁氏菌感染的诊断中的应用基因芯片技术是一种高通量并行检测方法，可以同时检测成千上万个靶基因。
研究人员通过设计布鲁氏菌相关基因的探针，运用基因芯片技术可以快速、高效地筛选出布鲁氏菌感染的标志性基因。
利用这些标志性基因，检测人员可以快速鉴定布鲁氏菌感染患者，并区分其感染类型和菌株特征。
三、下一代测序技术在布鲁氏菌感染的诊断中的应用下一代测序技术是一种高通量测序技术，可以在较短的时间内获取大量的DNA或RNA序列。
研究人员利用下一代测序技术对布鲁氏菌的基因组进行测序和分析，从中鉴定出与布鲁氏菌感染相关的基因和代谢途径。
这些信息将有助于理解布鲁氏菌的致病机制，并为研制新的靶向治疗和预防措施提供理论依据。
四、蛋白质芯片技术在布鲁氏菌感染的诊断中的应用蛋白质芯片技术是一种快速筛选和定量大规模蛋白质的方法，能够帮助研究人员发现与布鲁氏菌感染相关的蛋白质标志物。
这些标志物可以作为诊断试剂盒中的生物标记物，用于布鲁氏菌感染的快速诊断。
此外，蛋白质芯片技术还可用于研究感染机制、药物筛选和疫苗研发等方面。
总结：布鲁氏菌感染的分子诊断技术研究已经取得了显著进展。
PCR技术、基因芯片技术、下一代测序技术和蛋白质芯片技术的应用为布鲁氏菌感染的准确快速诊断提供了有力支持。
临床医学中的分子诊断技术的研究与应用
临床医学中的分子诊断技术的研究与应用近年来，随着生物技术的不断发展和突破，分子诊断技术在临床医学中的应用越来越广泛。
相对于传统的诊断方法，分子诊断技术具有更高的准确性和灵敏度，可以大大提高疾病的早期诊断率和治疗效果，对于患者的健康和生命安全具有极为重要的意义。
分子诊断技术是利用DNA、RNA、蛋白质等分子的特异性作用，通过检测这些分子在疾病发生过程中的异常表达和变化，辅助诊断、预测和评估疾病的发展和治疗效果的一种方法。
其中，最常见的分子诊断技术包括PCR技术、基因芯片技术和分子生物学检测技术等。
PCR技术是一种常用的分子诊断技术，主要用于检测和定量核酸分子的存在与数量。
它利用DNA聚合酶扩增技术，可以在较短的时间内扩增并检测出极微量的特定DNA序列，从而实现病原体的检测和定量。
PCR技术不仅可以用于传染性疾病的检测，还可以在遗传疾病、肿瘤等多种疾病的诊断和治疗中得到广泛应用。
基因芯片技术是一种高通量的分子诊断技术，能够同时检测多个基因或蛋白质的表达水平，从而实现对疾病的分型和预测。
它采用高密度的基因芯片作为检测平台，可以分析复杂的分子信号和疾病相关的遗传变异，在个体水平上评估疾病的风险，为个性化治疗提供有力的依据。
分子生物学检测技术是一种目前广泛应用于临床的分子诊断技术，它利用细胞、组织和体液中的遗传物质，识别和测量对疾病发生和发展具有重要作用的分子标志物。
其中，最常用的分子标志物包括肿瘤标志物、病原体核酸和RNA序列等。
分子生物学检测技术可以在一定程度上帮助医生确定疾病的类型和严重程度，从而指导治疗方案的制定和实施。
在日常临床实践中，分子诊断技术已经被广泛应用于疾病的诊断、治疗和预防等方面。
例如，PCR技术在传染病的防控中发挥了重要作用，如新冠肺炎、艾滋病、结核病等，可以快速且准确地检测出感染者的病原体。
基因芯片技术可以对某些遗传性疾病进行预测和筛查，例如遗传性癌症、遗传性心脏病等。
而分子生物学检测技术则广泛应用于病原体检测、癌症诊断、移植免疫监测等多个领域。
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实时荧光定量PCR法
概念
指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号出现的 先后顺序以及信号强弱的变化来及时分析目的基因的拷贝 数目，通过与已知量的标准品进行比较，实现实时定量的 方法。 反应过程 在实时荧光定量PCR反应过程中，对整个过程进行了实 时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号，随着反应时 间的进行，监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。 产生的DNA拷贝数是呈指数方式“S”增加的，随着反应循 环数的增加，最终不再以指数方式生产模板，而进入“平 台期”。
PCR分子诊断技术
2016.12.27
内容
PCR技术的概念及发展简史
Байду номын сангаас
PCR反应的基本成分
PCR基本原理和反应过程 实时荧光定量PCR检测基本原理和方法 PCR技术的应用、临床意义及发展趋向 临床PCR检验的实验室管理
PCR技术的概念及发展简史
PCR概念 PCR的由来是Polymerase chain reaction的首个字母 的组合，是聚合酶链式反应的简称，是一项体外扩增DNA 序列的技术。 PCR发展简史 1985年美国科学家Kary Mullis在Science杂志上发 表了第一篇PCR的学术论文，从此PCR技术得到了生命科 学界的认同，并与1993年获得了诺贝尔化学奖。 1
PCR临床意义：
快速确诊是否有病毒、细菌等致病性微生物感染；
了解体内感染的数量、复制程度，是否具有传染性； 对临床治疗的用药监测，有无好转或耐药情况，如 产生耐药，如何指导用药种类及计量等。 PCR的发展趋势
随着临床分子生物学的不断发展，DNA测序技术 已逐渐成熟，可为临床疾病的分子诊断提供更精确的 判定依据，现由一代测序技术已发展至三代测序技术， 为医疗领域带来更方便、快捷的检测手段。
延伸：在Taq DNA聚合酶的作用下，DNA模板上的引 物以dNTP为原料，按A－T、C－G碱基配对与半保留复制 原则，合成一条新的与模板DNA链互补的链。
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重复上述变性－退火－延伸的循环过程，每一循 环获得的“半保留半复制”链继续成为下次循环的模 板。通常一个完整的循环时间需要2-4min，2-3h就能 将靶核酸放大几百万倍。 一般临床扩增目的核酸将循环次数设定在40-50 个循环之间，以此达到扩增目的。
脱氧核甘三磷酸（dNTP）
标准PCR反应体系中包含4种等物质的量浓度的脱氧核甘三 磷酸，即dATP、dTTP、dCTP和dGTP。
二价阳离子 所有的热稳定DNA聚合酶都要求有游离的二价阳离子，常 用的是Mg2＋，Mn2+ 缓冲液 维持PCR反应体系中的PH，使用Tris－Cl缓冲液。 一价阳离子 标准的PCR缓冲液中包含50mmol／L的KCl，有益于 DNA片段的扩增。
临床PCR检验的实验室管理
PCR实验室的布局设计 临床PCR检验标本的采集、运送 PCR核酸检测的工作流程 PCR污染的产生及预防措施 实时荧光PCR扩增仪简介 临床PCR检验的质量控制 实验室质量管理体系的建立
1988年saiki 从水生嗜热杆菌中提取到一种耐热 DNA聚合酶，此酶能耐高温，在热变性中不会失活， 从而解决了PCR操作技术中酶钝化为实际操作而带来 的困扰，极好的提高了PCR的扩增效率，从此，此酶 被命名为 Taq DNA聚合酶。 自PCR方法不断改进后，现PCR方法已衍生几十 种之多，目前实时荧光定量PCR方法已被临床广泛应 用，不仅可以用于定性检测而且可以确定原始样品含 量。广泛应用于遗传学、微生物学乃至整个生命科学 研究中，由于PCR方法有着极强的实用性，因此仍会 被不断完善，进一步在生命科学研究中发挥更好的作 用。
PCR的特点
特异性高 包括：引物的特异性及延伸时，碱基配对的正确性； Taq DNA聚合酶的稳定性。 灵敏度高 PCR扩增产物的量以指数方式增长，能在2-3h内，将1 个靶分子DNA扩增至10亿个分子，因此一个反应体系中如 有2-3个靶分子，则可成功检测出目的基因。 简便快速
通过PCR技术可在2-4小时之内获得目的基因，为临床患 者提供快速准确的确诊检测。
特点 操作简便、快速、高效、较高的灵敏性及特异性、 污染性低。
PCR技术的临床应用、意义 及发展趋向
PCR临床应用 感染性疾病的诊断与治疗 包括：病毒：肝炎病毒、HIV、HPV、流感病毒等 细菌：结核杆菌、TP、UU、CT、NG等 寄生虫：弓形虫、疟原虫等 遗传性疾病的诊断及预防 包括：染色体疾病、血红蛋白病、血友病、遗传性耳聋、糖尿病等 肿瘤标志物的监测与诊断 包括：乳腺癌、肠癌、白血病等 个体化用药的临床指导 包括：药物作用靶点相关基因、药物代谢酶基因、药物副作用相关基因等
PCR反应的基本成分
模板 是待扩增序列的核酸，包括基因组DNA、质粒DNA、噬 菌体DNA、cDNA、mRNA和细胞等都可以作为PCR反应的模板。 特异性引物 是与靶DNA 3’和 5’端特异性结合的寡核苷酸片段， 是决定PCR特异性的关键。当每条引物都能特异性地与模板 DNA中的靶序列复性形成稳定的结构，才能保证其特异性。 热稳定DNA聚合酶 是PCR技术实现自动化的关键，是从嗜热古细菌中最 早分离出的，最常用的DNA聚合酶。 2
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实时荧光定量PCR法
荧光阈值和循环阈值
荧光阈值（threshold） 概念：是在荧光扩增曲线指数增长期设定的一个荧光强度标准， 即PCR扩增产物量的标准。
循环阈值（cycle threshold value，Ct）
概念：PCR扩增过程中扩增产物的荧光信号达到设 定的荧光阈值时所经过的扩增循环次数。
PCR的基本反应原理和特点
PCR原理 PCR基本过程类似于DNA的天然复制，特异性依赖于 靶序列两端互补的寡核苷酸引物。整个过程由变性－退火 －延伸三个基本反应步骤构成。 变性：模版DNA经加热至94℃左右，双链之间的氢键 断裂，双股螺旋解链，变成两条单链，为与引物结合做准 备。 退火：DNA加热变性成单链后，当温度降至一定程度 （55℃左右）时，引物即与模板DNA单链的互补序列配对 结合。