实验一 鸡胚接种
鸡胚接种实验步骤
鸡胚接种实验步骤
鸡胚接种实验是一种常用于研究病毒感染和疫苗研发的方法。
以下是一般的鸡胚接种实验步骤：
1. 准备工作：
- 确保实验室卫生条件良好，并进行必要的消毒处理。
- 准备所需材料，包括鸡蛋（受精后的鸡蛋）、病毒样品或疫苗、适当的培养基等。
2. 取出鸡蛋：
- 使用无菌器具将鸡蛋从孵化器中取出。
- 用消毒剂擦拭鸡蛋表面，确保表面无菌。
3. 制备操作区域：
- 在实验室台面上准备一个无菌操作区域。
- 使用无菌器具将所需工具（如注射器、刀片）摆放在操作区域上。
4. 接种操作：
- 在无菌操作区域上，使用无菌器具在鸡蛋的空气室区域确定一个合适的接种点。
- 使用无菌注射器将病毒样品或疫苗注入鸡蛋内。
- 注意避免对鸡蛋内的胚胎造成机械损伤。
5. 封蛋：
- 使用无菌聚乙烯封膜或其它适当的封蛋材料将接种点封住，以防止污染和脱水。
6. 孵化：
- 将接种后的鸡蛋放回孵化器中，并根据所研究的病毒或疫苗的特性设定合适的温度和湿度。
- 根据实验需求，确定孵化时间，通常为数天至数周。
7. 结果观察：
- 在孵化结束后，取出鸡蛋，观察胚胎的发育情况。
- 根据研究的目的，可以进行进一步的分析、检测和测量。
需要注意的是，鸡胚接种实验需要在合适的实验室条件下进行，严格遵守实验室安全操作规范，并获得相关机构的许可和伦理审批。
此外，具体的实验步骤可能会因研究目的和病原体的不同而有所变化，所以在进行实验前最好参考相关的专业文献或咨询专业人士。
《鸡胚接种技术》课件
卫生管理
保持接种器具和操作区域的清 洁，防止细菌或病毒的污染。
鸡胚接种后的常见问题与处理方法
问题 鸡胚死亡 细菌感染 发育异常
处理方法
检查温度、湿度和操作技术是否合适，并调整相 应参数。
进行必要的消毒处理，更换培养基，增加卫生管 理措施。
观察并记录发育情况பைடு நூலகம்与预期结果进行对比，调 整相关因素。
总结与展望
鸡胚接种技术是一项重要的科研工具，通过研究鸡胚的发育过程，可以获得 对生命科学和医学领域的重要启示。未来，我们将继续探索和优化鸡胚接种 技术，为科学研究做出更大的贡献。
《鸡胚接种技术》PPT课件
鸡胚接种技术简介 影响鸡胚成活的因素 鸡胚接种前的准备工作 鸡胚接种过程详解 鸡胚接种后的管理要点 鸡胚接种后的常见问题与处理方法 总结与展望
鸡胚接种技术简介
鸡胚接种技术是一种重要的研究工具，用于研究鸡胚在发育过程中的变化。 研究人员可以通过接种不同物质来观察鸡胚的反应和发育情况，从而获得重 要的科学发现。
鸡胚接种前的准备工作
1 设备准备
确保接种所需的设备和材料已准备齐全，包括培养皿、接种针和培养基等。
2 培养基准备
根据实验需求制备适当的培养基，确保其成分和浓度符合实验要求。
3 消毒处理
对接种器具和操作区域进行彻底的消毒处理，以避免细菌或病毒的污染。
鸡胚接种过程详解
1
接种准备
2
将鸡胚放置在适当的接种器具中，准备
好需要使用的培养基和接种针。
3
鸡胚获取
选择具有良好质量的鸡胚，并在适当的 环境中进行保持，以避免其受到外界环 境的影响。
接种过程
使用接种针将所需物质接种到鸡胚中， 确保操作的准确性和稳定性。
鸡胚接种技术ppt课件.ppt
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
接种步骤与方法
取9~11日龄的鸡胚，标记气室与胚胎位置，并在胚胎面 与气室交界之边缘上约1mm处避开血管作一标记，此即为 注射点。
将鸡胚竖放在卵杯上，钝端向上。消毒气室的蛋壳，用 开孔器钻开一长约2mm小口。
第三节 鸡胚接种途径及方法
（一）羊膜腔接种
应用于从临床材料中分离流感病毒等，病 毒感染后可收集羊水和尿囊液。
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
接种步骤与方法
将10~12日龄的鸡胚在检卵灯上照视，标记气室及胚胎的位置。 消毒气室部位的蛋壳，在气室顶端钻出一约10mm×6mm的长方
接种步骤与方法
取5～8日龄鸡胚，标记气室和胚胎位置，垂直放置在卵 架上，钝端朝上，消毒气室端。
用开孔器在气室中央的卵壳上钻一小孔，用带有6号针头 的1m1注射器将样品从小孔处沿胚的纵轴迅速刺入约3cm， 注入0.2～0.5ml待接种的病毒于卵黄囊内，随后用胶带 或溶化的石蜡封孔。
置孵化箱内继续孵育3～8d，时间长短应根据病毒或立克 次体的种类而定，每天翻卵2次，弃掉24h内死亡的鸡胚 (但东方型和西方型马脑炎可能在接种后15～24h内死亡)。
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
（四）卵黄囊接种
主要用于虫媒病毒、衣原体及立克次体 等的分离和繁殖。这些大的病原体主要 在卵黄囊的内皮细胞生长，且生长速度 很快，立克次体染色后也可看到。
抗酸染色鸡胚接种
2. 消毒
• 气室向上放置鸡胚于卵架上； • 先后用碘酊和酒精棉球消毒蛋壳所标记的位置。
距气室底边0.5cm
3. 打孔
• 在所标记注射部位用剪刀尖端打孔； • 注意用力要稳，恰好使蛋壳打通而不伤及壳膜。
3、油镜观察
三、抗酸染色结果
抗酸菌呈红色， 常堆积成团， 排列无序， 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。
注意事项：
1、无菌操作 2、菌种管摇匀后取菌 3、涂片均匀 4、初染加热维持3~5分钟，勿沸腾烧干 5、冷却后冲洗 6、油镜下从视野中找红色抗酸菌
鸡胚培养与病毒滴度检测
一、目的要求
2. 新城疫病毒
① 副粘病毒科/副粘病毒亚科/禽腮腺炎病毒属。 ② 新城疫的病原体。 ③ 形态：
• 病毒子多呈球形； • 单股负股RNA； • 核衣壳螺旋形对称； • 有囊膜； • 囊膜表面有纤突。
④ 血凝性：可凝集人、鸡、豚鼠和小白鼠的红细胞。 ⑤ 病毒分离培养：9~11日龄鸡胚尿囊腔接种。
三、实验材料
⑤ 取出鸡胚胎，于平皿内观察胚胎有无病 理变化，如出血、蜷缩、侏儒胚等。
8. 新城疫病毒滴度的检测 血凝试验（HA）
编码
NS
病毒液
RBC
效价
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0.4 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
0.1
倍比稀释
0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
④ 鸡胚接种的方法：
• 尿囊腔接种 • 绒毛尿囊膜接种 • 卵黄囊接种： • 羊膜腔接种 • 静脉接种
鸡胚接种实验报告
一、实验目的1. 掌握鸡胚接种病毒的方法和步骤。
2. 了解病毒在鸡胚中的生长和繁殖情况。
3. 学习病毒分离和培养的基本原理。
二、实验原理鸡胚接种是一种常用的病毒分离和培养方法。
病毒接种于鸡胚后，能够在鸡胚中繁殖，从而便于观察和分析病毒的生物学特性。
本实验主要采用尿囊腔接种法，将病毒接种于鸡胚尿囊腔内，观察病毒在鸡胚中的生长和繁殖情况。
三、实验材料1. 实验动物：9-11日龄的鸡胚。
2. 实验试剂：新城疫病毒悬液、生理盐水、碘酒、酒精、消毒棉球等。
3. 实验仪器：照蛋器、无菌手术刀、镊子、注射器、剪刀、平皿等。
四、实验方法1. 鸡胚准备：取9-11日龄的鸡胚，用碘酒和酒精消毒鸡胚蛋壳，用手术刀在鸡胚气室处划一小孔，用注射器吸取适量新城疫病毒悬液。
2. 尿囊腔接种：将鸡胚置于卵盘上，气室端向上，用注射器将病毒悬液注入鸡胚尿囊腔内，注入量约为0.1-0.2ml。
3. 孵育：将接种后的鸡胚放入37℃孵卵箱中孵育48-72小时。
4. 观察：定期观察鸡胚的生长发育情况，记录死亡、畸形等现象。
5. 病毒分离：取出死亡鸡胚，无菌操作下取出尿囊液，进行病毒分离和培养。
五、实验结果1. 接种后，部分鸡胚出现死亡现象，死亡时间集中在接种后24-48小时。
2. 死亡鸡胚的尿囊液中检测到新城疫病毒。
3. 成活鸡胚生长发育正常，未出现明显异常。
六、实验讨论1. 鸡胚接种是一种简单、有效的病毒分离和培养方法，适用于多种病毒的研究。
2. 尿囊腔接种法是一种常用的鸡胚接种方法，适用于新城疫病毒、流感病毒等多种病毒。
3. 本实验结果表明，新城疫病毒能够在鸡胚中繁殖，为新城疫病毒的研究提供了有力支持。
七、实验结论1. 鸡胚接种是一种简单、有效的病毒分离和培养方法。
2. 尿囊腔接种法适用于新城疫病毒等多种病毒的分离和培养。
3. 本实验成功分离和培养了新城疫病毒，为新城疫病毒的研究提供了有力支持。
八、实验心得1. 实验过程中，无菌操作至关重要，需严格按照无菌操作规程进行。
实验鸡胚接种
实验鸡胚接种
xx年xx月xx日
CATALOGUE
目录
实验准备实验步骤实验数据分析实验结论实验讨论与展望
01
实验准备
1
实验人员要求
2
3
了解微生物的种类、特点、致病性及检验方法等。
具备微生物学基础知识
熟悉接种、分离、培养、鉴定等实验操作规范，并能够熟练操作。
掌握实验操作技能
遵守实验室的各项安全规章制度，注意个人防护和实验室废弃物的处理。
培养时间
根据实验需要，确定鸡胚培养的时间，以便观察和记录实验结果。
鸡胚培养
03
实验数据分析
数据记录
记录实验进行的日期。
实验日期
记录所使用鸡胚的编号，方便追踪。
鸡胚编号
记录接种的病毒或细菌剂量。
接种剂量
记录鸡胚在实验过程中表现出的症状和时间。
症状表现
数据转换
将非数值型数据进行转换，以便进行数学分析。
多样性
根据实验需求，选择不同品种、来源的鸡胚，以满足实验的多样性和代表性。
鸡胚选取
选用精细、锋利的接种针，灭菌烘干后备用。
鸡胚接种
准备接种工具
将鸡胚固定在操作台上，用接种针在鸡胚的尿囊膜上选择适宜的位置，进行无菌接种。
接种操作
接种后对鸡胚进行密封处理，以防止外界微生物的侵入。
接种后处理
培养环境
为鸡胚提供适宜的温度、湿度和气体环境，以保证鸡胚的正常发育和繁殖。
数据清洗
去除异常值、缺失值和重复数据，确保数据准确性。
数据聚合
将多个数据源的数据聚合在一起，以便更全面地评估实验结果。
数据处理
03
结论提取
基于分析和解释，提取有关实验的结论，为后续研究提供参考。
实验一 鸡新城疫疫苗(一)
尿囊膜贴在卵壳内壁上，用镊子夹住将其撕脱下来即
可。
胚胎：消毒、打开气室卵壳后，用镊子撕破卵壳膜和
绒毛尿囊膜，夹起胚胎，用剪刀剪断卵黄带，将胎儿
放灭菌容器内即可。
8.鸡胚接种注意事项
（1）接种材料一般都应按每毫升1000ＩＵ或μg加入 青、链霉素。
（2）接种位点应避开鸡胚、血管和胚头，以免针头 刺伤鸡胚而造成接种后的损伤性死亡。
实验一 鸡新城疫油乳剂灭活苗的制备技术（一）
新城疫病毒可以在鸡胚中大量增殖，收获的鸡胚
尿囊液中即含有新城疫活病毒，将收获的尿囊液经过
灭活，并加入佐剂，便制成了新城疫灭活疫苗。
目的和要求：
1.掌握鸡胚的孵化过程和鸡胚的接种途径、接 种方法； 2.掌握新城疫病毒在鸡胚尿囊腔的增殖过程， 掌握接毒和收毒的方法。
头约1cm左右。
4.病料接种：
若用鸡胚分离、培养病毒，则应选9～12日龄之
间的发育鸡胚。许多病毒，特别是大多数禽病毒都能
在鸡胚或鸭胚中生长繁殖。接种时应先在照蛋器下检 查鸡胚是否健康、活泼，并划出气室和接种部位。然 后严格消毒接种部位和气室（先用碘酊消毒，再用 70%酒精消毒），用打孔器打孔后，每胚接种处理好
水瓶中，使两种抗生素在生理盐水中的含量均
达到1000-2000 IU(μg)/ml。将注射用生理盐
水3-4ml注入一瓶新城疫Ⅳ系弱毒疫苗中，稀释。
3.照蛋定位 ： 接种前应在照蛋器下检查鸡胚，挑出死胚 和弱胚。对所有健康胚应先用红铅笔画出气室 位臵，再于胚胎侧画出接种位点（进针点）， 接种点应避开大血管，靠近气室边缘处，离胚
此法适用于马立克氏病毒、披膜病毒、衣
原体及立克次氏体的分离、培养。接种方法：
气室端蛋壳消毒后，在气室中央打一小孔，用
鸡胚接种实验报告
鸡胚接种实验报告引言鸡胚接种实验是一种常见的生物学实验，通过将病毒或细菌接种于鸡胚中，我们可以观察到它们对胚胎发育的影响。
这种实验能够帮助我们了解病原体的传播途径、感染机制以及鸡胚对外界刺激的响应能力。
本文将就鸡胚接种实验的过程和观察结果展开论述，以期更好地了解和探索生命的奥秘。
实验材料和方法材料：新鲜鸡胚、病毒/细菌培养液方法：1. 准备培养基：将培养基配制好，并加热灭菌。
2. 取出鸡胚：在无菌条件下，取出新鲜的鸡胚，约为8-10天，保证胚胎仍处于发育阶段。
3. 接种病原体：在鸡胚卵黄囊的顶部，用无菌针缓慢注入病原体培养液。
4. 封胚：用胶带或蜡封好孔洞，保持接种处的无菌状态。
5. 孵化：将接种后的鸡胚放入孵化器中，保持适当的温度和湿度。
6. 观察：根据实验设计，每隔一段时间观察鸡胚的发育情况。
实验结果通过观察病原体接种后的鸡胚，我们可以得出一些有趣的结果。
1. 反应变化：不同病原体对鸡胚的反应变化具有差异。
一些病原体可能导致胚胎发育减缓或停滞，而另一些病原体可能导致胚胎畸形或死亡。
这些结果提供了关于病原体对于胚胎发育的影响的线索。
2. 免疫响应：鸡胚对病原体的接种可能会触发免疫响应。
我们可以观察到鸡胚的免疫系统是否能够有效地对抗病原体的入侵。
免疫细胞的增多、炎症反应的出现都可能是这一免疫响应的体现。
3. 病变形态：观察鸡胚的病变形态对于了解病原体的感染机制和病变过程非常重要。
我们可以观察到病原体在鸡胚中的定位、侵入细胞的方式以及细胞破坏的情况。
这些观察结果有助于研究病原体的致病机制，并为预防和治疗提供依据。
4. 实验变量：在鸡胚接种实验中，还可以引入一些实验变量，比如改变接种浓度、不同时间点的接种等，以观察这些变量对实验结果的影响。
通过对变量的控制和对比，可以更加准确地判断病原体对鸡胚的影响。
结论鸡胚接种实验是一种有效的方法，可以研究病原体与胚胎发育之间的关系。
通过观察鸡胚的发育情况和病变形态，我们可以了解病原体的感染机制以及胚胎对外界刺激的响应能力。
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造成气室内负压，使卵窗部位的绒毛尿囊
膜下陷而形成人工气室，此时可见滴于壳
膜上的生理盐水迅速渗入。
6、用1ml注射器滴2-3滴接种物于绒毛尿囊
膜上。
7、用透明胶纸封住卵窗，或用玻璃纸盖 于卵窗中，周围涂上熔化的石蜡密封，气 室中央的小孔用石蜡密封。
8、胚横卧于卵箱中，不许翻动，保持卵
窗向上。
（三） 尿囊腔接种 主要用于正粘V和副粘V，如流感V、新城 疫V的分离和增殖。
三、实验材料
1、鸡胚 9-11日龄
2、病毒 新城疫病毒
3、照蛋灯
4、打孔器
5、石蜡
6、注射器
7、蛋座
8、酒精棉球、碘酊棉球
四、鸡胚接种方法
实验前准备
1、用检卵灯检查鸡胚活力。 2、用铅笔画出气室和胚胎的位置，并在 将要接种的部位做好记号。 3、对鸡胚进行消毒。
（一）卵黄囊接种法
主要用于虫媒披膜病毒以及 鹦鹉热衣原体和立克次氏体等 的分离和增殖。 方法一： 1）取6-8日龄鸡胚，用检卵灯 照视画出气室和胚胎位置后， 垂直放置在卵座上(大头向上) 2）用碘酊和酒精消毒气室端 3）用钢锥在气室中央锥一小孔 4）用注射器吸取病毒悬液，沿 气室端所穿小孔垂直刺入3cm， 注入0.1-0.5ml病毒液。 5）用熔化的石蜡封孔，置孵卵 箱内继续孵育，每天翻卵1-2次， 24h内死亡者废弃。
5、尿囊腔
胚胎的排泄器官，内含有尿囊液，
初为透明液体，是单纯生理盐溶液，以后尿
囊液中尿酸盐迅速增加，胚胎发育到第12-13
天后，尿囊液开始变得混浊。
6、羊膜与羊膜腔 其中盛有羊水，胎体浸泡于
其中
7、卵黄 在胚胎发育早期供给鸡胚营养。
8、卵白 在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。
接种途径
1、绒毛尿囊膜接种 2、尿囊腔接种 3、卵黄囊接种 4、静脉接种 蓝舌病毒 5、羊膜腔接种 正粘病毒和副粘病毒 6、脑内接种 狂犬病毒 7、眼球接种
1、胚内可能污染细菌和病毒 沙门氏菌、禽白血病病毒、新城疫、 禽脑脊髓炎病毒 2、母源抗体 3、许多病毒在鸡胚中增殖缺乏特异性的 感染指针
二、鸡胚的结构与功能
1、卵壳 2、壳膜
上有细孔，进行气体交换
使气体分子和液体分子在内外两方面进行交换。
3、气室
呼吸和调节压力
4、绒毛尿囊膜 起胚胎呼吸器官的功能， 氧气的交换是在膜的血管内通过卵壳孔 而进行的。
方法二： 1）2）同一 3）将卵横放在卵座上，胚 胎位置向下。在卵长径的 1/2处用碘酊和酒精消毒。 4）用钢锥打一小孔，将针 头刺入约1.5cm，注入病毒 液0.1-0.5ml。 5）用熔化的石蜡封孔，置 孵卵箱内继续孵育，24h内 死亡者废弃。
（二）绒毛尿囊膜接种
主要用于痘V和疱疹V的分 离和增殖。 方法一： 1）取10-12日龄鸡胚， 画出气室部，消毒 2）在气室端的卵壳上开 一1.5×1.5cm的口 3）用灭菌眼科镊子撕去 一小片内壳膜。 4）滴入接种物。 5）用胶布或透明胶纸封 闭切口。
六、收毒
收毒前将鸡胚直立放置于4冰箱半小 时以上，冻死胚胎，防止出血。 根据接种途径的不同，收获相应的材 料
1、绒毛尿囊膜接种 收获接种部位绒毛尿 囊膜 2、尿囊腔接种 收获尿囊液（5~8ml） 3、卵黄囊接种 收获卵黄囊或胚体 4、羊膜腔接种 收获羊水（0.5~1ml）
七、实验报告
（一）、实验目的 （二）、主要实验步骤 （三）、实验结果 （四）、讨论与分析
1、选用10-11日龄的鸡胚，画出气室和胚位
2、在气室接近胚体处用碘酊和酒精进行消毒
3、用钢锥穿一小孔
4、将注射器沿小孔插入0.5-1.0cm，注入0.1-
0.2ml接种物
5、用石蜡封口，并置孵卵箱中孵育，每天翻卵
并检卵一次，24h内死亡者废弃。
五、新城疫病毒接种鸡 胚后病变
1、鸡胚停止生长。 2、全身出血（头颈部，背部等）。 3、尿囊液增量。 4、病毒经尿囊腔接种后36h，最高滴度可 达107个鸡胚致死量。 5、鸡胚死亡（病毒接种量大）。
实验一 鸡胚接种
一、实验目的
了解鸡胚接种的优缺点。 掌握鸡胚接种病毒操作方法。
鸡胚用于病毒培养的优缺点
（一）优点
1、组织分化程度低 2、可选择不同的日龄和接种途径 3、病毒易于增殖 4、感染病毒的组织和液体中含大量病毒 5、容易采集和处理 6、来源充足 7、设备和操作简便易行
（二）缺点
方法二：（要做人工气室） 1、在胚胎附近近气室处，选择 血管较少的部位，用电烙器在卵 壳上烙一个直径约3-4mm的烤焦 圈。 2、用碘酊和酒精消毒后，小心 用刀尖撬起卵壳，造成卵窗。 3、在气室端中央钻一个小孔。 4、用针尖挑破卵窗中心的壳膜，
切勿损伤其下的绒毛尿囊膜，滴
加生理盐水于刺破处。
5、用橡皮乳头紧贴于气室中央小孔上吸气，