实验鸡胚接种
鸡胚接种实验步骤
鸡胚接种实验步骤
鸡胚接种实验是一种常用于研究病毒感染和疫苗研发的方法。
以下是一般的鸡胚接种实验步骤：
1. 准备工作：
- 确保实验室卫生条件良好，并进行必要的消毒处理。
- 准备所需材料，包括鸡蛋（受精后的鸡蛋）、病毒样品或疫苗、适当的培养基等。
2. 取出鸡蛋：
- 使用无菌器具将鸡蛋从孵化器中取出。
- 用消毒剂擦拭鸡蛋表面，确保表面无菌。
3. 制备操作区域：
- 在实验室台面上准备一个无菌操作区域。
- 使用无菌器具将所需工具（如注射器、刀片）摆放在操作区域上。
4. 接种操作：
- 在无菌操作区域上，使用无菌器具在鸡蛋的空气室区域确定一个合适的接种点。
- 使用无菌注射器将病毒样品或疫苗注入鸡蛋内。
- 注意避免对鸡蛋内的胚胎造成机械损伤。
5. 封蛋：
- 使用无菌聚乙烯封膜或其它适当的封蛋材料将接种点封住，以防止污染和脱水。
6. 孵化：
- 将接种后的鸡蛋放回孵化器中，并根据所研究的病毒或疫苗的特性设定合适的温度和湿度。
- 根据实验需求，确定孵化时间，通常为数天至数周。
7. 结果观察：
- 在孵化结束后，取出鸡蛋，观察胚胎的发育情况。
- 根据研究的目的，可以进行进一步的分析、检测和测量。
需要注意的是，鸡胚接种实验需要在合适的实验室条件下进行，严格遵守实验室安全操作规范，并获得相关机构的许可和伦理审批。
此外，具体的实验步骤可能会因研究目的和病原体的不同而有所变化，所以在进行实验前最好参考相关的专业文献或咨询专业人士。
《鸡胚接种技术》课件
卫生管理
保持接种器具和操作区域的清 洁，防止细菌或病毒的污染。
鸡胚接种后的常见问题与处理方法
问题 鸡胚死亡 细菌感染 发育异常
处理方法
检查温度、湿度和操作技术是否合适，并调整相 应参数。
进行必要的消毒处理，更换培养基，增加卫生管 理措施。
观察并记录发育情况பைடு நூலகம்与预期结果进行对比，调 整相关因素。
总结与展望
鸡胚接种技术是一项重要的科研工具，通过研究鸡胚的发育过程，可以获得 对生命科学和医学领域的重要启示。未来，我们将继续探索和优化鸡胚接种 技术，为科学研究做出更大的贡献。
《鸡胚接种技术》PPT课件
鸡胚接种技术简介 影响鸡胚成活的因素 鸡胚接种前的准备工作 鸡胚接种过程详解 鸡胚接种后的管理要点 鸡胚接种后的常见问题与处理方法 总结与展望
鸡胚接种技术简介
鸡胚接种技术是一种重要的研究工具，用于研究鸡胚在发育过程中的变化。 研究人员可以通过接种不同物质来观察鸡胚的反应和发育情况，从而获得重 要的科学发现。
鸡胚接种前的准备工作
1 设备准备
确保接种所需的设备和材料已准备齐全，包括培养皿、接种针和培养基等。
2 培养基准备
根据实验需求制备适当的培养基，确保其成分和浓度符合实验要求。
3 消毒处理
对接种器具和操作区域进行彻底的消毒处理，以避免细菌或病毒的污染。
鸡胚接种过程详解
1
接种准备
2
将鸡胚放置在适当的接种器具中，准备
好需要使用的培养基和接种针。
3
鸡胚获取
选择具有良好质量的鸡胚，并在适当的 环境中进行保持，以避免其受到外界环 境的影响。
接种过程
使用接种针将所需物质接种到鸡胚中， 确保操作的准确性和稳定性。
禽胚接种方法实训报告
一、引言禽胚接种是兽医微生物学实验中常用的技术之一，主要用于分离、鉴定和研究禽类病原微生物。
通过禽胚接种，我们可以观察病原微生物在禽胚中的生长繁殖情况，进而为疾病的诊断和防治提供科学依据。
本次实训旨在通过禽胚接种方法的学习和实践，提高学生对禽类病原微生物的分离、鉴定及研究能力。
二、实训目的1. 掌握禽胚接种的基本原理和操作方法。
2. 学会使用禽胚进行病原微生物的分离和培养。
3. 了解病原微生物在禽胚中的生长繁殖规律。
4. 培养学生的实验操作技能和科学思维。
三、实训材料与设备1. 实验材料：鸡胚、鸭胚、鸽胚、病原微生物、培养基、生理盐水、酒精、无菌生理盐水等。
2. 实验设备：无菌操作台、接种环、接种针、恒温培养箱、显微镜、显微镜载玻片等。
四、实训步骤1. 准备工作（1）将鸡胚、鸭胚、鸽胚置于37℃恒温培养箱中孵化，待其发育至一定阶段。
（2）准备培养基，按照无菌操作规程进行。
（3）配制生理盐水，进行无菌处理。
2. 病原微生物接种（1）将病原微生物用生理盐水稀释至适当浓度。
（2）取无菌接种环，蘸取适量病原微生物。
（3）将接种环插入鸡胚、鸭胚、鸽胚的尿囊腔中，深度约为1cm。
（4）将接种环插入鸡胚、鸭胚、鸽胚的卵黄囊中，深度约为1cm。
3. 观察与记录（1）将接种后的禽胚置于37℃恒温培养箱中培养，每隔一定时间观察其生长情况。
（2）记录禽胚的生长变化，包括死亡、畸形、生长缓慢等现象。
（3）观察病原微生物在禽胚中的生长繁殖情况，记录其形态特征。
4. 结果分析（1）根据禽胚的生长变化和病原微生物的形态特征，对病原微生物进行鉴定。
（2）分析病原微生物的生长繁殖规律，为疾病诊断和防治提供依据。
五、实训结果与讨论1. 实训结果本次实训成功分离出多种禽类病原微生物，如新城疫病毒、禽流感病毒、禽霍乱菌等。
通过观察禽胚的生长变化和病原微生物的形态特征，对病原微生物进行了鉴定。
2. 讨论与分析（1）禽胚接种方法是一种有效的病原微生物分离和培养方法，具有操作简便、结果准确等优点。
实训八 病毒的鸡胚接种技术
实训八病毒的鸡胚接种技术目的要求掌握鸡胚培养病毒的接毒和收毒方法，明确鸡胚培养病毒的应用。
仪器及材料受精卵、恒温箱、照蛋器、接种箱、蛋架、一次性注射器（1～5ml）、中号镊子、眼科剪和镊子、毛细吸管、橡皮乳头、灭菌平皿、试管、吸管、酒精灯、试管架、胶布、蜡、锥子、锉、煮沸消毒器、消毒剂（5%碘酊棉、75%酒精棉、5%石炭酸或3%来苏儿）、新城疫Ⅰ系或Ⅳ系疫苗。
方法与步骤（实验视频六）（一）鸡胚的选择和和孵化应选择健康无病鸡群或SPF鸡群的新鲜受精蛋。
为便于照蛋观察，以来航鸡蛋或其他白壳蛋为好。
用孵化箱孵化，要注意温度、湿度和翻蛋。
孵化最低温度为36℃，一般为37.5℃，相对湿度为60%。
每日最少翻蛋3次。
发育正常的鸡胚照蛋时可见清晰的血管及鸡胚的活动。
不同的接种材料需不同的接种途径（见图2-4），不同的接种途径需选用不同日龄的鸡胚。
卵黄囊接种，用6～8日龄鸡胚；绒毛尿囊膜接种，用9～13日龄的鸡胚；绒毛尿囊腔接种，用9～12日龄的鸡胚；血管注射，用12～13日龄的鸡胚；羊膜腔和脑内注射，用10日龄的鸡胚。
（二）接种前的准备病毒材料的处理怀疑污染细菌的液体材料，加抗生素（青霉素1000IU和链霉素1000μg/ml）置室温1h或4℃冰箱12～24h，高速离心，取上清液，或经细菌滤器滤过除菌。
如为患病动物组织，应剪碎、匀浆、离心后取上清液，必要时加抗生素处理或过滤除菌。
若用新城疫Ⅰ系或Ⅳ系疫苗，则无菌操作用生理盐水将其稀释100倍。
照蛋以铅笔划出气室、胚胎位置及接种的位置，标明胚龄及日期气室朝上立于蛋架上。
尿囊腔接种选9～12日龄的鸡胚，接种部位可选择在气室中心或远离胚胎侧气室边缘，避开大血管。
（三）鸡胚的接种（以新城疫病毒的绒毛尿囊腔接种为例）在接种部位先后用5%碘酊棉及75%酒精棉消毒，然后用灭菌锥子打一小孔，一次性1ml注射器吸取新城疫病毒液垂直或稍斜插入气室,刺入尿囊，向尿囊腔内注入0.1～0.3ml。
实验八 病毒鸡胚接种与细培养
（动物医学本科专业）
动物医学系
实验八 病毒鸡胚接种与培养
目的要求：
1、了解不同日龄鸡胚接种的途径和应用。 2、掌握鸡新城疫病毒鸡胚尿囊腔接毒、收毒方法。 3、掌握鸡胚成纤维细胞培养和新城疫病毒接种、病变观察及收毒。
实验内容：
1、鸡胚的选择和接种途径：鸡胚发育正常时，可见清晰的血管和活 的鸡胚，血管及其主要分支均明显，呈鲜红色，鸡胚可以活动。 卵黄囊接种：6-8日龄的鸡胚； 绒毛尿囊腔接种：9-13日龄的鸡胚； 鸡胚血管注射：12-13日龄鸡胚； 羊膜腔和脑内注射：10日龄鸡胚。 2、鸡新城疫病毒接种液或接种病料的处理；照蛋、打孔；接种。接 种后的检查和收毒。 3、鸡胚成纤维细胞培养和新城疫病毒接种、病变观察及收毒。
病毒分离培养
分离培养：动物接种——原动物/实验动物 鸡胚接种——尿囊腔、卵黄囊、尿囊膜、羊膜腔等
细胞培养——原代细胞
二倍体细胞 传代细胞
cpe观察空斑
基因克隆/扩增
组织块培养——肠管、气管环等
鸡 胚 成 纤 维 细 胞 培 养 程 序 ：
在无菌条件下采取9－10日龄鸡胚 ↓ 除去头(或仅除去喙和眼)、爪和内脏，并剪成块 ↓ 用Hanks液等充分冲洗 ↓ 剪将其剪成lmm大小的碎块 ↓ 加入Hanks液或其他洗液，充分冲洗 ↓ 约4倍量的0.25％胰酶，并调整pH至7.6－7.8 ↓ 37℃水浴中感作30分钟，每10分钟轻轻摇动一次 ↓ 吸弃上层胰酶溶液 ↓ 用洗液轻洗2次后 ↓ 吸管充分吹打，直至形成均匀的细胞悬液 ↓ 准备细胞计数 ↓ 单层细胞培养
鸡胚成纤维细胞培养
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ胞培养的特点：
每个细胞的生理特性基本一致； 感染病毒的细胞可通过细胞病变观察结果； 免疫学和核酸技术检测细胞内有无培养病毒； 从感染的组织分离病毒和病毒克隆。
鸡胚接种实验报告
一、实验目的1. 掌握鸡胚接种病毒的方法和步骤。
2. 了解病毒在鸡胚中的生长和繁殖情况。
3. 学习病毒分离和培养的基本原理。
二、实验原理鸡胚接种是一种常用的病毒分离和培养方法。
病毒接种于鸡胚后，能够在鸡胚中繁殖，从而便于观察和分析病毒的生物学特性。
本实验主要采用尿囊腔接种法，将病毒接种于鸡胚尿囊腔内，观察病毒在鸡胚中的生长和繁殖情况。
三、实验材料1. 实验动物：9-11日龄的鸡胚。
2. 实验试剂：新城疫病毒悬液、生理盐水、碘酒、酒精、消毒棉球等。
3. 实验仪器：照蛋器、无菌手术刀、镊子、注射器、剪刀、平皿等。
四、实验方法1. 鸡胚准备：取9-11日龄的鸡胚，用碘酒和酒精消毒鸡胚蛋壳，用手术刀在鸡胚气室处划一小孔，用注射器吸取适量新城疫病毒悬液。
2. 尿囊腔接种：将鸡胚置于卵盘上，气室端向上，用注射器将病毒悬液注入鸡胚尿囊腔内，注入量约为0.1-0.2ml。
3. 孵育：将接种后的鸡胚放入37℃孵卵箱中孵育48-72小时。
4. 观察：定期观察鸡胚的生长发育情况，记录死亡、畸形等现象。
5. 病毒分离：取出死亡鸡胚，无菌操作下取出尿囊液，进行病毒分离和培养。
五、实验结果1. 接种后，部分鸡胚出现死亡现象，死亡时间集中在接种后24-48小时。
2. 死亡鸡胚的尿囊液中检测到新城疫病毒。
3. 成活鸡胚生长发育正常，未出现明显异常。
六、实验讨论1. 鸡胚接种是一种简单、有效的病毒分离和培养方法，适用于多种病毒的研究。
2. 尿囊腔接种法是一种常用的鸡胚接种方法，适用于新城疫病毒、流感病毒等多种病毒。
3. 本实验结果表明，新城疫病毒能够在鸡胚中繁殖，为新城疫病毒的研究提供了有力支持。
七、实验结论1. 鸡胚接种是一种简单、有效的病毒分离和培养方法。
2. 尿囊腔接种法适用于新城疫病毒等多种病毒的分离和培养。
3. 本实验成功分离和培养了新城疫病毒，为新城疫病毒的研究提供了有力支持。
八、实验心得1. 实验过程中，无菌操作至关重要，需严格按照无菌操作规程进行。
实验鸡胚接种
实验鸡胚接种
xx年xx月xx日
CATALOGUE
目录
实验准备实验步骤实验数据分析实验结论实验讨论与展望
01
实验准备
1
实验人员要求
2
3
了解微生物的种类、特点、致病性及检验方法等。
具备微生物学基础知识
熟悉接种、分离、培养、鉴定等实验操作规范，并能够熟练操作。
掌握实验操作技能
遵守实验室的各项安全规章制度，注意个人防护和实验室废弃物的处理。
培养时间
根据实验需要，确定鸡胚培养的时间，以便观察和记录实验结果。
鸡胚培养
03
实验数据分析
数据记录
记录实验进行的日期。
实验日期
记录所使用鸡胚的编号，方便追踪。
鸡胚编号
记录接种的病毒或细菌剂量。
接种剂量
记录鸡胚在实验过程中表现出的症状和时间。
症状表现
数据转换
将非数值型数据进行转换，以便进行数学分析。
多样性
根据实验需求，选择不同品种、来源的鸡胚，以满足实验的多样性和代表性。
鸡胚选取
选用精细、锋利的接种针，灭菌烘干后备用。
鸡胚接种
准备接种工具
将鸡胚固定在操作台上，用接种针在鸡胚的尿囊膜上选择适宜的位置，进行无菌接种。
接种操作
接种后对鸡胚进行密封处理，以防止外界微生物的侵入。
接种后处理
培养环境
为鸡胚提供适宜的温度、湿度和气体环境，以保证鸡胚的正常发育和繁殖。
数据清洗
去除异常值、缺失值和重复数据，确保数据准确性。
数据聚合
将多个数据源的数据聚合在一起，以便更全面地评估实验结果。
数据处理
03
结论提取
基于分析和解释，提取有关实验的结论，为后续研究提供参考。
鸡胚接种实验报告
鸡胚接种实验报告引言鸡胚接种实验是一种常见的生物学实验，通过将病毒或细菌接种于鸡胚中，我们可以观察到它们对胚胎发育的影响。
这种实验能够帮助我们了解病原体的传播途径、感染机制以及鸡胚对外界刺激的响应能力。
本文将就鸡胚接种实验的过程和观察结果展开论述，以期更好地了解和探索生命的奥秘。
实验材料和方法材料：新鲜鸡胚、病毒/细菌培养液方法：1. 准备培养基：将培养基配制好，并加热灭菌。
2. 取出鸡胚：在无菌条件下，取出新鲜的鸡胚，约为8-10天，保证胚胎仍处于发育阶段。
3. 接种病原体：在鸡胚卵黄囊的顶部，用无菌针缓慢注入病原体培养液。
4. 封胚：用胶带或蜡封好孔洞，保持接种处的无菌状态。
5. 孵化：将接种后的鸡胚放入孵化器中，保持适当的温度和湿度。
6. 观察：根据实验设计，每隔一段时间观察鸡胚的发育情况。
实验结果通过观察病原体接种后的鸡胚，我们可以得出一些有趣的结果。
1. 反应变化：不同病原体对鸡胚的反应变化具有差异。
一些病原体可能导致胚胎发育减缓或停滞，而另一些病原体可能导致胚胎畸形或死亡。
这些结果提供了关于病原体对于胚胎发育的影响的线索。
2. 免疫响应：鸡胚对病原体的接种可能会触发免疫响应。
我们可以观察到鸡胚的免疫系统是否能够有效地对抗病原体的入侵。
免疫细胞的增多、炎症反应的出现都可能是这一免疫响应的体现。
3. 病变形态：观察鸡胚的病变形态对于了解病原体的感染机制和病变过程非常重要。
我们可以观察到病原体在鸡胚中的定位、侵入细胞的方式以及细胞破坏的情况。
这些观察结果有助于研究病原体的致病机制，并为预防和治疗提供依据。
4. 实验变量：在鸡胚接种实验中，还可以引入一些实验变量，比如改变接种浓度、不同时间点的接种等，以观察这些变量对实验结果的影响。
通过对变量的控制和对比，可以更加准确地判断病原体对鸡胚的影响。
结论鸡胚接种实验是一种有效的方法，可以研究病原体与胚胎发育之间的关系。
通过观察鸡胚的发育情况和病变形态，我们可以了解病原体的感染机制以及胚胎对外界刺激的响应能力。
实验一-鸡新城疫疫苗一
胚胎：消毒、打开气室卵壳后，用镊子撕破卵壳膜和 绒毛尿囊膜，夹起胚胎，用剪刀剪断卵黄带，将胎儿 放灭菌容器内即可。
8.鸡胚接种注意事项
（1）接种材料一般都应按每毫升1000ＩＵ或μg加入 青、链霉素。
（2）接种位点应避开鸡胚、血管和胚头，以免针头 刺伤鸡胚而造成接种后的损伤性死亡。
羊水：吸完尿囊液后，可用镊子夹住羊膜，将巴氏吸 管直接插入羊膜腔吸取羊水，然后再用镊子提起羊膜 或压住胎儿，直至羊水收获干净。相当一部分病毒其 羊水和尿囊液可以混合，如新城疫，支气管炎、法氏 囊病毒等。有些不能混合，则应将两者单收、单放。
绒毛尿囊膜：如要收获整个尿囊膜，则在消毒、打开 蛋壳、撕去壳膜后，将整个卵内容物倒出，这时绒毛 尿囊膜贴在卵壳内壁上，用镊子夹住将其撕脱下来即 可。
7.收毒
接种鸡胚孵化到规定时间后，应从孵化器中取出 放4℃环境冷冻36h左右，或在-10℃以下速冻4h左 右，但不得使鸡胚冻结，否则易发生溶血。冷冻完 毕按下列步骤收毒：
（1）鸡胚放于蛋盘或蛋架上，气室向上，用碘酊、 酒精消毒后，以无菌镊子敲开气室蛋壳或去掉人工 卵窗的透明胶纸，暴露卵膜。注意不要让卵壳碎屑 掉入鸡胚内。
活胚可看到清晰的血管和鸡胚的暗影，比 较大一些的可以看见胚动，随后每日观察一次， 将胚动呆滞或没有运动的、血管昏暗模糊者，即 可能是已死或将死的鸡胚，要随时加以淘汰。生 长良好的蛋胚一直孵育到接种前，具体胚龄视所 拟培养的病毒种类和接种途径而定。
2.接种材料的制备 ：
将青霉素和链霉素分别注入注射用生理盐水 瓶中，使两种抗生素在生理盐水中的含量均达 到1000-2000 IU(μg)/ml。将注射用生理盐水 3-4ml注入一瓶新城疫Ⅳ系弱毒疫苗中，稀释。
目的和要求：
实验一 鸡胚接种 ppt课件
病毒培养的宿主系统： ✓ 本动物 ✓ 实验动物：家兔、小
白鼠、大白鼠、豚鼠、 鸡胚 ✓ 体外培养的器官、组 织细胞
实验一 鸡胚接种
实验一 鸡胚接种
实验一 鸡胚 接种
1. 鸡胚 10日龄 2. 病毒 鸡新城疫病毒（NDV） 3. 照蛋灯 4. 打孔器 5. 石蜡 6. 注射器 7. 蛋座 8. 酒精棉球、碘酊棉球
实验一 鸡胚接种 3. 将卵横放在卵座上，胚胎位置向下。在卵长
径的1/2处用碘酊和酒精消毒。 4. 用钢锥打一小孔，将针头刺入约1.5cm，注
入病毒液0.1-0.5ml。
5. 用熔化的石蜡封孔， 置孵卵箱内继续孵育， 24h内死亡者废弃。
实验一 鸡胚接种
1. 取10-12日龄鸡胚，画出气室部，消毒。 2. 在气室端的卵壳上开一1.5×1.5cm的口
32. 必相须对保湿证度具：有50充%-60% 分的新鲜空气流 通，特别是在孵 化5-6天以后。
4. 从孵育后第3天 开始，每天翻卵 一次。
六、 检卵
实验一 鸡胚接种 ➢ 未受精卵：只见模糊的卵黄阴影，不见
血管和鸡胚痕迹。 活胚：具有清晰的血管和鸡胚暗影，较 大鸡胚还可见到胚动，但孵育14、15天 以后胎动不明显，甚至无胎动。 死胚：血管昏暗模糊，没有胚动。
7. 卵黄 在胚胎发育早期供给鸡胚营养。 8. 卵白 在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。
实验一 鸡胚接种
四、பைடு நூலகம்精卵的选择
1. 最好是来自SPF鸡群，以降低母源抗体 的影响
2. 受精卵的壳最好是白色的 3. 受精卵必须新鲜，保存在5-20℃不要
超过10天，保存一个月的受精卵，孵 化率将近于零。
接种
1. 孵卵箱内的温度应保持在37.538.5℃
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（二）缺点
➢胚内可能污染细菌和病毒 沙门氏菌、禽白血病病毒、新城疫、禽脑脊
髓炎病毒 ➢母源抗体 ➢许多病毒在鸡胚中增殖缺乏特异性的感染指针
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十、接种途径 1、尿囊腔接种 2、绒毛尿囊膜接种 3、卵黄囊接种 4、眼球接种 5、羊膜腔接种 正粘病毒和副粘病毒 6、脑内接种 狂犬病毒 7、静脉接种 蓝舌病毒
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（三） 尿囊腔接种 主要用于正粘病毒和副粘病毒，如流感病
毒、新城疫病毒的分离和增殖。 1、选用10-11日龄的鸡胚，画出气室和胚位 2、在气室接近胚体处用碘酊和酒精进行消毒 3、用钢锥穿一小孔 4、将注射器沿小孔插入0.5-1.0cm，注入 0.1-0.2ml接种物 5、用石蜡封口，并置孵卵箱中孵育，每天翻 卵并检卵一次，24h内死亡者废弃。
化5-6天以后 ➢从孵育后第3天开始，每天翻卵一次。
七、检卵
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➢自孵育后的第4天开始检卵，每天一次。 ➢孵育4-5日于检卵灯上检查鸡胚受精与否及发育
情况。 ➢未受精卵：只见模糊的卵黄阴影，不见血管和
鸡胚痕迹 ➢活胚：具有清晰的血管和鸡胚暗影，较大鸡胚
还可见到胚动，但孵育14、15天以后胚动不明 显，甚至无胚动。 ➢死胚：血管昏暗模糊，没有胚动。
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二、实验目的
了解鸡胚的基本结构与功能，掌握常用的 鸡胚接种方法。
三、鸡胚的结构与功能 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
➢卵壳 ➢壳膜 ➢气室 ➢绒毛尿囊膜
➢尿囊腔 ➢羊膜与羊膜腔 ➢卵黄 ➢卵白
羊膜腔
卵壳 卵白 尿囊腔
卵壳膜 气室
绒毛尿囊膜
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（一）卵黄囊接种法
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主要用于虫媒披膜病毒以及鹦鹉热衣原体和立克次
氏体等的分离和增殖。
方法一：
1）取6-8日龄鸡胚，用检卵灯照视画出气室和胚胎位
置2）后用，碘垂酊直和放酒置精在消卵毒座气上(大头向上)
室端
3）用钢锥在气室中央锥
一
小孔
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5、用橡皮乳头紧贴于气室中央小孔上吸气，造 成气室内负压，使卵窗部位的绒毛尿囊膜下陷 而形成人工气室，此时可见滴于壳膜上的生理 盐水迅速渗入。 6、用1ml注射器滴2-3滴接种物于绒毛尿囊膜 上。
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7、用透明胶纸封住卵窗，或用玻璃纸盖于卵窗 中，周围涂上熔化的石蜡密封，气室中央的小 孔用石蜡密封。 8、胚横卧于卵箱中，不许翻动，保持卵窗向上。
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➢羊膜与羊膜腔 其中盛有羊水，胎体浸泡于其中 ➢卵黄 在胚胎发育早期供给鸡胚营养。 ➢卵白 在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。
四、材料
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1、鸡胚 10日龄
2、病毒 鸡新城疫病毒（NDV）
3、照蛋灯
4、打孔器
5、石蜡
6、注射器
7室） 1、在胚胎附近近气室处，选择血管较少的部位，用 电烙器在卵壳上烙一个直径约3-4mm的烤焦圈。
2、用碘酊和酒精消毒后， 小心用刀尖撬起卵壳，造 成卵窗。 3、在气室端中央钻一个 小孔。 4、用针尖挑破卵窗中心 的壳膜，切勿损伤其下的 绒毛尿囊膜，滴加生理盐 水于刺破处。
8、酒精棉球、碘酊棉球
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五、受精卵的选择
➢最好是来自SPF鸡群，以降低母源抗体的影响 ➢受精卵的壳最好是白色的 ➢受精卵必须新鲜，保存在5-20℃不要超过10天，
保存一个月的受精卵，孵化率将近于零。
六、孵育
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➢孵卵箱内的温度应保持在37.5-38.5℃ ➢相对湿度：50%-60% ➢必须保证有充分的新鲜空气流通，特别是在孵
➢卵壳 上有细孔，进行气体交换 ➢壳膜 使气体分子和液体分子在内外两方
面进行交换。
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➢气室 呼吸和调节压力
➢绒毛尿囊膜 起胚胎呼吸器官的功能，氧气的交换是
在膜的血管内通过卵壳孔而进行的。
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➢尿囊腔 胚胎的排泄器官，内含有尿囊液，初为透 明液体，是单纯生理盐溶液，以后尿囊液 中尿酸盐迅速增加，胚胎发育到第12-13 天后，尿囊液开始变得混浊。
4） 用注射器吸取病毒悬液，沿气室端所穿小 孔垂直刺入3cm，注入0.1-0.5ml病毒液。 5）用熔化的石蜡封孔，置孵卵箱内继续孵育， 每天翻卵1-2次，24h内死亡者废弃。
方法二：
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1）2）同一
3）将卵横放在卵座上，
胚胎位置向下。在卵长
径的1/2处用碘酊和酒
精消毒。
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十一、NDV接种鸡胚后对鸡胚的影响
NDV以尿囊腔接种于9-10日龄鸡胚，强毒株 在30-60h死亡，弱毒株3-6d死亡。死亡的鸡胚 以尿囊液含毒量最高，胚胎全身出血，以头部、 足趾、翅膀出血尤为明显。
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4）用钢锥打一小孔，将针头刺入约1.5cm， 注入病毒液0.1-0.5ml 5）用熔化的石蜡封孔，置孵卵箱内继续孵 育，24h内死亡者废弃
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（二）绒毛尿囊膜接种 主要用于痘病毒和疱疹病毒的分离和增殖。
方法一： 1）取10-12日龄鸡胚，画出气室部，消毒 2）在气室端的卵壳上开一1.5×1.5cm的口 3）用灭菌眼科镊子撕去一小片内壳膜 4）滴入接种物 5）用胶布或透明胶纸封闭切口
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八、接种前处理
➢用检卵灯再次检查鸡胚活力，用铅笔画出气室 和胚胎的位置，并在将要接种的部位做好记号。
➢对鸡胚进行消毒。
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九、鸡胚用于病毒培养的优缺点 （一）优点
➢组织分化程度低，病毒易于增殖 ➢可选择不同的日龄和接种途径 ➢感染病毒的组织和液体中含大量病毒 ➢容易采集和处理 ➢来源充足 ➢设备和操作简便易行