D-Hanks平衡盐溶液(含酚红)

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平衡盐溶液

平衡盐溶液

平衡盐溶液平衡盐溶液(BSS)是从Ringer生理盐水进展起来的,主要由无机盐和葡萄糖组成。

BSS中的无机离子是细胞生命的须要成分,在维持渗透压、缓冲作用和调整溶液pH方面也起着重要作用。

另外,Ca2+、Mg2+能为酶系统的活化提供条件,也是细胞膜的重要组成成分。

等为细胞代谢提供能量。

作为核酸分子的合成也需要S,P等作为基质。

BSS内还含有少量的(酚红),作为pH变幻的指示剂,溶液变酸性时呈黄色,变碱性时呈紫红色,中性时呈桃红色,以此来观看和判定培养液pH的变幻。

在细胞培养中,BSS主要有如下用途:①作为配制培养基的基础溶液:如用Hanks液配制水解乳蛋白培养基等;②配制各种试液:如配“胰酶”消化液;③用于洗涤组织和细胞。

目前最常用的BSS是Hanks液、Earle 液和PBS等。

(一)BSS的配制要求 1.要防止钙的沉淀BSS配制时应将其中的CaCl2单独配制,并将平衡盐溶液配成浓缩液,使其在稀释前不让Ca2+与P042-和C032-接触,以免产生不溶解的CaP04和CaCO3。

避开产生CaC03的办法是将NaHC03单独配制,用法时现加。

2.要有良好的缓冲作用Hanks液和Earle液都需一定量的C02平衡。

因此应将瓶盖(橡皮塞)盖紧,以防瓶中CO2逃逸,致使溶液pH增高。

pH调整液单独灭菌时,亦应将瓶盖塞紧,临时不用的可冻存,否则NaHC03受热分解为NaOH和C02,失去其调整pH之功能。

(二)Hanks平衡盐溶液(Hanks balanced salt solutions, HBSS ) 为了便于保存和削减有关成分的化学反应,此液可配成20倍浓缩液(20×) ,10倍浓缩液(10×)和5倍浓缩液(5×)的储存液(母液)。

现以l0×为例,将其配制办法介绍如下: 1.l0×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列试剂 NaCl 80g KCl 4g MgS04·7H20 2g CaCl2 1.4g (含2H20者1.85g) 待彻低溶解后,补足三蒸水至500m1。

牛血清白蛋白溶液(1% BSA)

牛血清白蛋白溶液(1% BSA)

北京雷根生物技术有限公司
牛血清白蛋白溶液(1% BSA)
简介:
牛血清白蛋白溶液(1% BSA)是用于包被、蛋白添加剂等多种用途的试剂,主要由BSA(组分V)、去离子水组成。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 根据实验具体要求操作。

注意事项:
1、 小心操作,防止细菌污染。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:12个月有效。

相关:
编号 名称 R00910 Storage 牛血清白蛋白溶液(1% BSA) 100ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CC0022 D-Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红) CC0128
胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%,含酚红) CS0001
ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DC0032
Masson 三色染色液 OR0011
标准蛋白质溶液(BSA,1mg/ml) PE0018
SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 PT0001
BCA 蛋白定量试剂盒 TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。

乐氏液

乐氏液

北京雷根生物技术有限公司
乐氏液
简介:
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ,BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致,具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用,可满足体外实验中细胞生存并维持一定代谢的基本需要。

Leagene 乐氏液也属于平衡盐溶液的一种,主要由氯化钠、磷酸盐、氯化钙、葡萄糖等组成,不含HEPES 。

用于哺乳动物离体实验,肌体灌流、清洗组织,并维持离体组织的正常生理功能。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 根据实验具体要求,保存或清洗离体组织。

注意事项:
1、 由于乐氏液含钙离子,容易产生沉淀。

如果产生少许沉淀,可以加热溶解或过滤后使用,产生大量沉淀应弃用。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 6个月有效。

相关:
编号 名称 CZ0048 Storage 乐氏液 500ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CC0022 D-Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红) CC0032
Hanks 平衡盐溶液(1×HBSS,含酚红) CZ0047
任氏液 CZ0063
改良台氏液 DH0006
苏木素伊红(HE)染色液 R00228 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH8.0)。

D-Hanks溶液说明书-北京华越洋生物科技有限公司

D-Hanks溶液说明书-北京华越洋生物科技有限公司

D-Hanks溶液简介:D-hanks液是一种平衡盐溶液,是无钙镁离子的Hanks液。

主要用于洗涤细胞和组织的,也是合成培养基的基础液。

如果含有钙镁离子的话,当用消化液消化细胞时钙镁离子会破坏消化液的活力,影响消化作用.配方:Hank\'s配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14; NaHCO3 0.35;KH2PO 4 0.06;Glucose 0.34(g/l); 而D-Hank`s 则不含有Ca2+、Mg2+,D-Hanks液则是无钙镁离子的Hanks液。

BSS与细胞生长状态下的pH值、渗透压及无菌状态一致,且配方简单,是组织培养基本用液,常用于配制培养基及其他用液,或洗细胞等,细胞在BSS中可生存几个小时。

胰蛋白酶(胰酸)溶液是一种常用的细胞消化液,原代培养时用于处理组织块,使细胞分离下来。

传代时用胰蛋白酶使培养细胞离开所贴附的培养瓶表面,并分散成单个细胞。

胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏,呈白色粉末状,易潮解,应在低温干燥处保存。

胰酶的活力常用一份胰酶解离酪蛋白的份数表示,常用胰酶活力为1:125或1:250。

本实验室一般用1:250(GRC公司生产)。

胰蛋白酶对细胞的分离效果与细胞的类型、特性和瓶壁表面特性有关。

一般来说浓度大、温度高(勿高于37℃)、作用时间长,则对细胞分离能力大。

但超过一定程度会损伤细胞,导致细胞传代后不能贴壁或死亡。

胰酶在pH 8.0、37℃时消化能力最强。

溶液中的Ca2+、Mg2+和血清会降低胰酶活力,所以配制胰酶时须用无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液。

当消化结束时,可加入少量血清或含血清的培养基以终止胰酶作用。

细胞传代使用的胰酶浓度是0.25%或0.2%。

用于原代细胞培养消化组织块则为0.1%或0.125%。

运输及保存:常温运输,4℃保存,有效期一年。

DTT-PBS溶液(10mmolL)

DTT-PBS溶液(10mmolL)

北京雷根生物技术有限公司
DTT-PBS 溶液(10mmol/L)
简介:
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ,BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致,具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用,可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。

Leagene DTT-PBS 溶液(10mmol/L)是由PBS 和10mMDTT 组成,其中该PBS 由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾组成,不含Ca 2+、Mg 2+,经过高压灭菌。

该试剂为1×工作液,常用于细胞RNA 原位杂交。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 无需配制,直接使用。

注意事项:
1、 注意避免RNase 污染。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 6个月有效。

相关:
编号 名称 NH0024 Storage DTT-PBS 溶液(10mmol/L) 100ml RT 使用说明书 1份
编号 名称 CC0022 D-Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红) CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) CZ0061
台氏液(Tyrode's solution) DA0057
甲苯胺蓝染色液(1%,硼酸盐法) DH0005
Mayer 苏木素染色液 PS0009
Western 及IP 细胞裂解液 TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂比色法)。

hanks液的配制

hanks液的配制
Hanks 液的配制
Hanks 液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液(Balanced Salt Solutio, ),简称H。主要用于配制配制培养液,稀释剂和细胞清洗液,而不能单独作为细胞,组织培养液。
原液A
NaCl
160g
MgSO4·7H2O
2g
KCl
8g
Mg Cl2·6H2O
2g
CaCl2
溶于1000ml双蒸水
原液 B
(1)
Na2HPO4·12H2O
KH2PO4
葡萄糖
溶于800ml双蒸水
(2)
%酚红溶液:取酚红,置玻璃研钵中,逐滴加入 NaOH,并研磨,直至完全溶解,约加 NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中,用双蒸水洗下研钵中残留酚红液,并入量瓶中,最后补加双蒸水至100ml。
CaCL2
KH2PO4
NaHCO3
葡萄糖
酚红
加水至1L,用NaHCO3调PH至~
将(1)液和(2)液混合,补加双蒸水至1000ml,
双蒸水
18份
混合后,分装于200ml小瓶中,10磅高压蒸气灭菌15分钟,临用前用无菌的% NaHCO3调pH至~
Hank's液配方(g/L)------- 来自司徙镇强主编〈细胞培养〉(P41页)
NaCL
KCL

hanks液配方

hanks液配方
将(1)液和(2)液混合,补加双蒸水至1000ml,即为原液B。
应用液
原液A
1份
原液B
1份
双蒸水
18份
混合后,分装于200ml小瓶中,10磅高压蒸气灭菌15分钟,临用前用无菌的5.6% NaHCO3调pH至7.2~7.6
如有侵权请联系告知删除,感谢你们的配合!
2.8g
溶于1000ml双蒸水
原液 B
1
Na2HPO4・12H2O
3.04g
KH2PO4
1.2g
葡萄糖
20.0g
溶于800ml双蒸水
2
0.4%酚红溶液:取酚红0.4g,置玻璃研钵中,逐滴加入0.1N NaOH,并研磨,直至完全溶解,约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中,用双蒸水洗下研钵中残留酚红液,并入量瓶中,最后补加双蒸水至100ml。
Hanks液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液(Balanced Salt Solutions, BSS),简称HBSS。主要用于配制配制培养液,稀释剂和细胞清洗液,而不能单独作为细胞,组织培养液。
原 液A
NaCl
1பைடு நூலகம்0g
MgSO4・7H2O
2g
KCl
8g
Mg Cl2・6H2O
2g
CaCl2

成纤维细胞培养

成纤维细胞培养

人皮肤成纤维细胞库的构建试剂: 胶原酶(Sigma),优质胎牛血清(Gibco),胰蛋白酶(Sigma),中性蛋白酶(Sigma),DMEM培养基(Sigma),二甲基亚砜(Merck)。

配液 :成纤维细胞培养基配制:DMEM10g,NaHCO3 3.7g,HEPES 2.4g,优质胎牛血清100ml,青霉素100 000U,链霉素100 000U,超纯水加至1 000ml,用1N NaOH 调pH值至7-2~7.4,0.22pan孑L滤膜过滤除菌,9Om】/瓶分装,一2O℃贮存备用。

D—Hanks 平衡盐液:NaC1 8.0g,KC1 0.4g,Na2HPO4·12H:0 134.4mg,KH~PO4 0.06g,NaHCO3 0.35g,酚红O.O2g,青霉素100000U,链霉素100000U,超纯水加至1 o0Ornl,用1N NaOH调pH值至7.2-7A,0.22tun孔滤膜过滤除菌,90ml/瓶分装,一2O℃贮存备用。

方法:乙醇棉球将标本用力擦拭3遍;标本移至培养皿中,用D—Hanks平衡盐液反复用力彻底冲洗标本5遍,直至标本发白,轻度发胀;在培养皿中修剪皮下筋膜组织及多余的皮下脂肪,将标本剪成0.3cmx2.0em大小的皮条,置于培养皿中,加0.25%胰蛋白酶浸没组织,4℃冰箱中消化14~16h,以用眼科镊能轻轻揭下表皮为度;消化后的标本置于超净工作台上。

吸出胰蛋白酶,用DMEM漂洗2遍,中止胰蛋白酶消化作用;用眼科镊轻轻揭下表皮,置于另一培养皿中(用于培养角质形成细胞),真皮置于培养皿中,用眼科剪将真皮成分剪成糊状(组织大小约为0.1cmx0.1cmx0.1cm),加入0.2%胶原酶浸没组织,37℃孵箱中消化1~4h,以将组织基本上消化散开,看不到组织块为度;加D-Hanks平衡盐液1 500#min离心5min,5遍,以洗去胶原酶,沉淀即为成纤维细胞,弃上清,加DMEM制成细胞混悬液,接种至50ml培养瓶中,置37℃、5%CO:、湿度95%的CO 孵箱中培养131。

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D-Hanks平衡盐溶液(1×,含酚红)
产品简介:
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution,BSS)与细胞生长状态下的pH值、渗透压等环境状态一致,具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用,可满足体外实验中,细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。

平衡盐溶液(BSS)主要由无机离子组成,有时含有碳酸氢钠、葡萄糖、酚红等,如果有必要还可以加入HEPES,加入少量的HEPES后,可以减少氯化钠的加入量,以维持渗透压的平衡。

平衡盐溶液可以作为完全培养基的基液,亦可以用于稀释浓缩的氨基酸、维生素溶液以配制完全培养基。

BBS配方常有改动,如Hank’s BBS由不含钙镁或酚红的,也有含钙镁含酚红的等等, Dulbecco’s PBS由不含钙镁或含钙镁的等。

HBSS、EBSS、PBS等都是与较弱的磷酸盐缓冲液相关的盐溶液。

常见的平衡盐溶液有Eargle液,Hanks’液、低钙镁和无钙、镁平衡盐溶液及磷酸盐缓冲液 (PBS)等。

D-Hanks平衡盐溶液是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一,又称CMF-Hanks' Balanced Salt Solution、CMF-HBSS溶液或D-Hanks’ BSS, 主要由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、葡萄糖等组成,不含钙离子和镁离子,pH值一般为7.2~7.4。

Leagene D-Hanks平衡盐溶液(1×,含酚红),不含钙离子和镁离子,含酚红,用重蒸超纯水配制,pH值7.4,经严格过滤除菌处理,内毒素含量低,可用于胰蛋白酶和EDTA 细胞消化液等各种无或低钙镁细胞培养用液的配制,组织和细胞的漂洗等。

主要成分:主要由 KCl、KH2PO4、NaCl、NaHCO3、Na2HPO4、葡萄糖等组成,含少量酚红。

操作步骤(仅供参考):
1、无需配制,直接使用。

注意事项:
1、在进行细胞培养过程中细胞的洗涤时,应注意无菌操作,避免被微生物污染。

2、Leagene D-Hanks平衡盐溶液(1×,含酚红),由于不含有钙离子,不易产生沉淀,出现
该种情况后,一般置于温浴至沉淀溶解即可, 如果产生较多沉淀应弃用。

3、本产品经0.22μm滤器过滤除菌。

4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:3个月有效。

相关产品:
产品编号 产品名称
CC0004 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,含钙镁)
CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)
CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CC0033 Hanks平衡盐溶液(1×HBSS,无酚红)
CC0045Earle's平衡盐溶液(1×EBSS,无钙镁糖酚红)
CC0065 HEPES溶液(1mol/L,pH7.4)。

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