各类糖含量的测定
多糖含量测定的几种不同方法比较
多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要：本文综述了多糖含量测定的几种常用方法，主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。
并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。
这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考，并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。
关键词：多糖；含量；测定；方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words：polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides，PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。
多糖含量的测定方法
多糖含量的测定方法有多种，以下列举其中几种常用的方法： 1. 酚硫酸法：将样品与酚硫酸反应生成稳定的紫色化合物，通过测定紫色化合物的吸光度来确定多糖含量。
2. 蒽酮-硫酸法：样品经热水溶解后，乙醇沉淀，除去其他可溶性糖及杂质的干扰，用热水溶解沉淀物并稀释定容。
此法操作简便，测定速度快，可用于多糖的实时快速测定和定性分析。
3. 刚果红显色法：在一定条件下，刚果红显色剂能与乙酰甘露聚糖生成有色复合物，而不与麦芽糖糊精、蔗糖和葡萄糖等发生明显的显色反应。
由此可以建立定量分析芦荟多糖含量的刚果红显色分光光度法。
此外，还有其他方法如色谱法、光谱法等也可以用于多糖含量的测定。
具体使用哪种方法需要根据实验目的、样品性质和实验条件等因素进行选择。
四种糖的测定方法
4种糖的测定方法总结：1、直接滴定法。
原理为糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。
缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。
2、高锰酸钾滴定法。
所用原理同直接滴定法。
缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响，过程较为复杂，误差大。
3、硫酸苯酚法。
糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。
苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。
缺点：如果水样呈橙红色（大部分水样为黄色），会对比色法造成较大的干扰。
4、蒽酮法糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。
缺点：，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。
综合比较；采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。
（一）直接滴定法（本法是国家标准分析方法）中华人民共和国行业标准(果汁－总糖的测定－直接滴定法)SB/T 10203-199 4Ⅰ、原理一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用标液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。
根据样液消耗量可计算出还原糖含量。
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝做指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），根据样品溶液消耗体积计算还原糖量。
四种糖的测定方法
四种糖的测定方法
1. 莫尼酮试剂法（Benedict试剂法）
莫尼酮试剂法是测定还原性糖（如葡萄糖和果糖）的常用方法。
该方法利用莫尼酮试剂中的铜离子与还原性糖发生氧化还原反应，生成红色或黄色的沉淀。
根据沉淀的颜色来定量测定糖的含量。
2.酚硫酸法
酚硫酸法是测定非还原性糖（如蔗糖和乳糖）的一种方法。
该方法利用硫酸和酚的作用来将糖酸化，生成暗红色的化合物。
通过比色法来测定溶液的吸收值，然后通过标准曲线计算出糖的含量。
3.高效液相色谱法（HPLC）
高效液相色谱法是一种精确测定各种糖的含量和成分的方法。
该方法使用高效液相色谱仪来分离糖，并使用UV检测器来检测糖的吸收峰。
根据吸光度与浓度的关系，以及外部标准曲线，可以定量测定糖的含量。
4.旋光法
旋光法是一种测量光学活性糖（如葡萄糖和果糖）的方法。
光学活性糖分子可以使光线在通过时转动其振动平面。
旋光仪可以测量这种旋光现象，并根据旋转角度和样品底物的厚度来计算样品中的糖含量。
以上是四种常见的糖的测定方法。
根据不同的糖类和实验需求，可以选择适合的方法进行测定。
这些方法在食品工业、生化研究等领域起着重要作用，帮助人们更好地了解和利用糖的性质和功能。
糖含量的测定
、植物组织中糖含量的测定一、实验材料：苹果、梨、黄瓜等各种水果二、实验目的：糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。
不同栽培条件，不同成熟度可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。
因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定，可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。
三、实验原理：1.糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物。
糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生蓝绿色物质，其在可见光区 620 nm 波长处有最大吸收，且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比关系。
2. 酮糖在一定条件下和间苯二酚生成鲜红色物质，该物质在 480 nm 处有最大吸收，该方法可用来测定蔗糖。
测定时先用碱与样品共热，破坏其中的还原性糖，然后用间苯二酚测定蔗糖中的果糖部分。
3. 果糖与间苯二酚、盐酸共热生成的红色络合物在480 nm处吸收峰最高。
四、试剂配置：80 % 乙醇2 M NaOH30 % HCl：用36 %的浓HCl配置。
葡萄糖、蔗糖和果糖标准液（1mg/ml）：用蒸馏水配置。
蒽酮试剂：150 mg蒽酮溶于100 ml 稀硫酸(76 ml 浓硫酸加入到30 ml 水中)。
0.1 % 间苯二酚：0.1g间苯二酚溶于100 ml 95 %的乙醇，避光保存。
五、实验步骤1、提取取0.5 g 植物组织，于2 ml 80%的乙醇中研磨后，转入两个2 ml 离心管中，75℃温浴10 min，5000g离心5 min，收集上清于10ml离心管中。
沉淀用80 % 乙醇于75℃水浴重复抽提两次，合并上清液后，用80 % 的乙醇定容至10 ml。
提取液用于可溶性总糖、果糖与蔗糖含量的测定。
注：将苹果的提取液稀释一倍。
2、可溶性总糖取10 µl上述乙醇提取液，加入90 ul 80 % 的乙醇，加入3 ml 蒽酮试剂[150 mg 蒽酮溶于100 ml 稀硫酸(76 ml 浓硫酸加入到30 ml 水中)]，90℃保温15 min ，冷却后于620 nm处测吸光值。
多糖的测定
多糖的测定是一种常见的生物化学实验，旨在确定样品中多糖的含量。
多糖是由许多单糖单元组成的碳水化合物，包括淀粉、糖原、纤维素等。
以下是多糖测定的常见方法和步骤：
1.碘滴定法：这是测定淀粉含量的常用方法。
它利用碘对淀粉蓝色复合物形
成的特征进行测量。
样品首先与碘溶液反应，形成蓝色化合物，然后根据颜
色的深浅来测量淀粉的含量。
2.酚-硫酸法：该方法用于测定糖原的含量。
它涉及将样品与酚和硫酸混合，
形成特定颜色的复合物。
这种复合物的颜色可以通过光度计或比色计来测量，以确定糖原的含量。
3.酚硫酸法：这是一种用于测定纤维素含量的常见方法。
它包括将样品与酚
硫酸混合，生成一种具有特定吸光度的化合物。
吸光度可以用光度计或比色
计测量，从而确定纤维素的含量。
4.酚-硫酸-苯酚法：这是测定葡萄糖聚合物含量的方法。
它涉及将样品与酚、
硫酸和苯酚混合，产生特定颜色的复合物。
这种复合物的颜色可以通过光度
计或比色计来测量，以确定葡萄糖聚合物的含量。
这些方法提供了测定不同类型多糖含量的有效手段，可以通过定量分析来确定样品中多糖的含量。
在实际操作中，严格遵循实验室安全操作规程以及特定的实验步骤非常重要，以确保准确和可重复的测定结果。
食品中糖含量的测定方法研究
食品中糖含量的测定方法研究糖作为一种常见的食物成分，在食品中扮演着重要的角色。
然而，过多的糖摄入对健康有害。
因此，准确测定食品中糖的含量是非常重要的。
本文就食品中糖含量的测定方法进行研究。
一、高效液相色谱法高效液相色谱法是目前最常用的测定食品中糖含量的方法之一。
该方法通过将样品中的糖分离并使用色谱柱进行定性和定量分析。
高效液相色谱法有准确度高、分析速度快等优点，已经被广泛应用于食品质量检测。
二、酶法测定法酶法测定法是一种通过酶促反应来测定糖含量的方法。
该方法通过将样品与特定的酶底物反应生成可测定的产物来测定糖的含量。
酶法测定法具有反应性强、准确性高等优点，但需要较长的分析时间。
三、红外光谱法红外光谱法是一种基于糖分子对红外光的吸收和散射的特性来测定糖含量的方法。
该方法具有快速、非破坏性等特点，可以对样品进行迅速的分析。
然而，红外光谱法在某些食品样品中存在干扰物质的问题，因此需要进一步改进。
四、核磁共振法核磁共振法是一种通过测定磁共振信号来确定糖含量的方法。
该方法具有高分辨率、非破坏性等特点，可以对样品进行准确的定量分析。
然而，核磁共振法的设备昂贵且复杂，不易在所有实验室中广泛应用。
五、电化学法电化学法是一种基于糖分子在电化学反应中的电子转移特性来测定糖含量的方法。
该方法具有高灵敏度、准确性高等优点，已经成为一种常用的食品中糖含量测定方法。
然而，电化学法在某些食品样品中存在样品处理和电极选择的问题。
综上所述，食品中糖含量的测定方法有多种选择，每种方法都有其特点和局限性。
在实际应用中，我们可以根据具体情况选择合适的测定方法。
随着科学技术的不断进步，未来可能会出现更加准确和快速的测定方法，为食品质量检测提供更大的便利和贡献。
糖类测定方法大全
糖类测定方法大全（一）测定方法概述（二）可溶性糖类的提取和澄清1、提取液制备（1）常用提取剂——水、乙醇（2）提取液中含糖量控制0.5～3.5mg/mL（3）含脂肪食品先脱脂，然后用水提取（4）含淀粉及糊精食品（乙醇沉淀淀粉等）用70～75％乙醇溶液提取（5）含乙醇及CO2液态食品，蒸发至1/3～1/4原体积，以除去C2H5OH及CO2 （6）酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解（7）提取固体样品有时需要加热，以提高提取效果。
一般在40～50℃，防止多糖溶出（8）乙醇作提取剂加热时应安装回流装置2、提取液的澄清（1）影响测定的杂质色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁，可影响颜色、浑浊、过滤困难。
（2）澄清剂①醋酸铅（中性）Pb（CH3COO）2·3H2O，形成沉淀，吸附杂质，可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。
②乙酸锌和亚铁氰化钾二者生成氰亚铁酸锌↓吸附蛋白质等干扰物。
③硫酸铜和氢氧化钠Cu离子使蛋白质沉淀。
（3）澄清剂用量用量适宜，以无新沉淀为准，如2ml饱和醋酸铅（30％）、（4）除铅剂由于铅影响还原糖的测定，生成铅糖化合物。
常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠。
（三）蓝—爱农（Lane-Eynon）法测定还原糖（国际上常用的定量糖的方法）1、原理斐林试剂甲液（CuSO4·5H2O）斐林试剂乙液（酒石酸钾钠+NaOH）甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+ Cu2O↓（红棕）终点的确定：葡萄糖+亚甲基蓝（氧化态）→亚甲基蓝（还原态）过量兰色无色（兰色消失）终点时的颜色为：兰色消失了的红棕色2、测定①预测准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中，△至沸腾，再加入亚甲基蓝指示剂，在加热的条件下，用样液滴至蓝色褪尽。
（先快后慢，要求很快达到终点，因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色，且要求在加热的情况下以除去空气）②测定甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中，加入比上述预测量少0.5～1ml样液在2min 内沸腾，维持沸腾2min，加入3滴亚甲基蓝指示剂，再在3min内滴定至蓝色褪尽。
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糖的测定方法有很多，大致可分为三类1.物理法，（1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,）2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法,3.光度法,4.色谱法)3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法.4.铁氰化钾法.5.蒽铜比色法.6.咔唑比色法)共计三大种，在测定其他碳水化合物时，往往是使其水解为糖再进行测定。
一.总糖的测定食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖（水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖），麦芽糖（水解后为2分子葡萄糖）以及可能部分水解的淀粉（水解后为2分子葡萄糖）。
还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基（-CHO）或酮基(=C=O)。
测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。
这些方法中，以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法，蒽铜比色法，斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应复杂，影响因素较多，所以不如铁氰化钾法准确，但其操作简单迅速，试剂稳定，故被广泛采用。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内，但要求检测液澄清，此外，在大多数情况下，测定要求不包括淀粉和糊精，这就要在测定前将淀粉，糊精去掉，这样就使操作复杂化，限制了其广泛应用。
（一）铁氰化钾法1.原理：样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质，在碱性溶液中能将铁氰化钾还原，根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下：C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4·(COOH)2+ 6K4［Fe(CN)］+ 4H2O6滴定终了时，稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。
2，试剂1）1％的次甲基兰指示剂2)盐酸（水解作用）3）10％和30％的NaOH溶液4）1％铁氰化钾（贮存特色瓶，临用前标定）标定步骤称蔗糖1.0000g→定容500ml→取此液50ml→于100ml容量瓶→加hcl5ml→摇匀→65-70℃水裕15分钟→取出冷却→用30％NaOH中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取10ml1％铁氰化钾于锥形瓶中→加10％NaOH2.5ml加12.5 ml的水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止，记录用量。
正式滴定比较滴定时少0.5ml糖液，煮沸1分钟，加指示剂一滴，再用糖液滴定至兰色褪去，计算铁氰化钾溶液的浓度。
A=(W·V)/(1000×0.95)A：相当于10ml铁氰化钾溶液的转化糖的量（克）V：滴定时消耗的糖液的体积W：称取纯蔗糖的量1000：稀释比0.95：换算等数3．操作方法稀释10g→用100ml水作溶液→于250ml容量瓶→加20％醋酸铅10ml→至沉淀完为止→加10ml10％NA2HPO4→至不在产生沉淀为止→加水至刻度→过滤－取滤液50ml→于100ml容量瓶中→按铁氰化钾标定法进行转化，中和及滴定计算糖含量总糖（以转化糖计%）= (A ×1000)/(W·V)×100A：相当于10ml铁氰化钾溶液的转化糖的重量，W：样品的重量V：滴定时样液消耗的体积4．实验应注意（a）达终点时，过量的转化糖将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体，隐色体容量受空气中氧所氧化，很快又变成指示剂的颜色。
（b）整个过程应在低温电炉上进行，滴定要速度，否则终点不明显（c）糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛，生产物再与蒽铜缩合成兰色化合物，其颜色深浅与溶液中糖的浓度成正比，单、双糖等糖类都直接于试剂发生作用，因此不需要水解。
（二）蒽铜的比色法1.原理：糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛，生产物再与蒽铜缩合成兰色化合物，其颜色深浅与溶液中糖的浓度成正比，可比色定量。
2.试剂（1）硫酸锌溶液：溶解500g化学纯硫酸锌于500ml水中（2）亚铁氰化钾溶液：溶解10.6g化学纯亚铁氰化钾于100ml水中（3）0.2％蒽铜试剂：溶解蒽铜0.2g于100ml95％硫酸中，置棕色瓶中冷暗处保存（4）0.1％葡萄糖液：准确称干燥葡萄糖0.1000g 定容100ml3.操作方法（1）标准曲线绘制（2）100ml容量瓶编号沸水浴加热6分钟，取出冷却→用1cm比色杯→610nm测定吸光度→作出以吸光度为横坐标，糖液浓度为纵坐标的准曲线（3）样品测定称10g样品→于100ml热水加入500ml容量瓶中－加硫酸锌5ml→沸水浴5分钟→取出再摇动下加亚铁氰化钾5ml，→冷却→定容500ml→过滤→吸滤液25 ml→于250ml容量瓶→定容250ml→取稀释液1ml，于比色管中→加10ml蒽铜试剂→摇匀→水浴加热6分钟→冷却→比色试验注意1，样液必须清澈透明，加热后不应有蛋白质沉淀2，样品颜色较深时，可用活性炭脱色后再进行测定3，此法与所用的硫酸浓度和加热时间有关4，所取糖液浓度在1-2.5mg/100ml之间二.还原糖的测定方法还原糖包括葡萄糖、果糖、麦芽糖，在葡萄糖分子中含有淤青的醛茎，在果糖分子中含有淤青的酮茎，在乳糖中和麦芽糖中含有淤青的半缩羧茎，因此都有还原性。
在测定还原糖时一般测定总糖时所有将糖类水解为转化糖再测定的方法都可用来测定还原糖。
（一）斐林氏容量法1.此法的原理、试剂、方法与总糖的测定方法相同。
只是样品溶液不必以过转化，而是直接取滤液进行滴定，滤液进行滴定，滤液中的还原糖含量以在0.2-0.5%为好，又能通过增减样品量或改变稀释倍数来调节。
10毫升费林氏A、B液混合时理论上相当还原糖量如下：葡萄糖（无水）果糖或转化糖尿病0.0500克乳糖尿病0.0678克麦芽糖0.0807克2试剂（1）斐林氏A液，称69.8g cp硫酸铜于100ml水中，过滤备用（2）斐林氏B液，称34.6g.cp浓流锌钠和100gcp NaOH于1000ml水中，过滤备用3方法称取样品10-20g：制备与转化同铁氰化钾法。
将样液倒入滴管中，吸取A,B液准备预滴定预滴定：吸A、B液各5ml→从滴管中加15ml样液→加热至沸→继续滴加样液→至兰色变潜→加3滴次甲基兰→在1分钟内滴定到终点达到终点时，稍微过量的转化糖，将兰色的次甲基兰染色体还原为无色的隐色体，而显出氧化亚铜的红色，去碱性条件下加热糖的产物是复杂的。
去碱性中断裂是由于碱度不同，加热时间不同，生产不等的碎片，这种碎片给后面滴定带来误差，而且，这种碎片与糖没有化合量的关系，所以，Lanecrol-E ynon Method作出数据检索表正式滴定：吸A,B液各5ml→于三角瓶→加比预定量少0.5-1.0ml样液→2分钟内要求沸腾1分钟→加3滴指示剂→用样液滴定兰色消失总沸腾时间为3分钟，即滴定在3分钟完成。
计算：还原糖＝( F·V2)/(W·V1)×100F：转还糖回数，即与10ml斐林氏试液相当的转化糖毫克数，V1：样品试液总体积V2：样品试液滴定量W：样品重量在测量乳糖制品时，若蔗糖与乳糖的含量比超过3：1时，则应与滴定量中加上相关表中（课本中表9-8）校正值后在进行计算我们举例如下：如果标准果糖溶液度为每100ml溶液含糖262.5mg。
对于10ml斐林试液从9-5可以查得果糖液滴定应为20ml。
如果不是20ml，可先算出A,B液校正等数。
然后进行计算再如标准糖溶液浓度为每100ml溶液含糖199.3ml，对于10ml A,B液从9-4中查到，糖液滴定量应为25.00ml，若有出入可校正。
如果要求不高，可省略校正步骤但要求1％得测定误差，则省略校正。
另外有时候并未根据检索表计算样含糖量，但对A,B液进行标定，以使确定相当得还原糖量。
这种误差为0. 5％。
下面我们讲标定量A,B液准确准确称取烘干冷却得 A.R蔗糖1.5g→用水溶解称取250ml容量瓶中→定容→吸50ml于100ml 定量瓶中→加HCL5ml→再65-70摄氏度水裕15分钟→冷却→用30％NaOH中和→定容准确吸A,B液各5ml于三角瓶中→加水约50ml玻璃珠三粒→加热至沸→保持1分钟→加指示剂1滴→再煮1分钟→立即用糖液滴定至兰色褪去，红色出现即为终点正式滴定，先加入比预滴定时少0.5ml左右得糖液煮沸1分钟→加指示剂1滴→再煮沸1分钟→继续滴至终点计算：A＝W*V/500×0.95A：相当于10ml斐林氏A、B液的转化糖的量W：称取蔗糖的质量V ：滴定蔗糖的量500：稀释比0.95：换算等数最后计算：总糖（还原糖）以转化糖计%=（A*1000/W*V）*100A：同上W：制取样品的量V：滴定是时样品消耗量1000：是稀释倍数（100/50*500）1.预测定的目的：对样品溶液中还原糖浓度有一定要要求（0.1%左右），测定时样品溶液的消耗体积应该与标定葡萄糖标液的消耗体积相近，通过测定了解样品浓度是否合适，浓度过大或过小应该加以调整，使测定时消耗样品溶液量在1 0毫升左右；二是通过测定可知道此溶液的大概消耗量，以便在正式的滴定时，预先加入比实际用量少1毫升左右的样液，只留下1ml左右的样液在续滴定时加入，以便保证在1分钟内完成续滴定工作，提交预测定的准确度。
2.此实验影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度，煮沸时间和滴定速度一般煮沸时间短消耗糖多，反之，消耗糖液少，滴定速度过快，消耗糖量多，反之，消耗糖量少。
另外溶液碱度愈高，二价铜的还原愈快，因此必须严格控制反应的体积，使反应体系碱度一致。
热源一般采用800W电炉，反应液在2秒内沸腾。
（二）KMNO4（高锰酸钾法）1．原理，还原糖在碱性溶液中使铜盐还原成氧化亚铜，在酸性条件下，氧化亚铜能使硫酸铁还原为硫酸亚铁，再用KMNO4溶液滴定硫酸亚铁，即可标出还原糖的量。
2. 操作方法（1）样品处理a. 乳糖：包括乳制品以及含蛋白质的冷食类称样2-5g（液体样25~50ml）→于250ml容量瓶→加水50ml→加A液10m l+1N NaOH 4ml →定容→静置30秒→过滤→弃去初液→可测还原糖及蔗糖用。
b. 低酒度饮料：麦精露、各类汽酒等饮料。
先暴气除CO2→取100ml→于蒸发皿中→用1 N NaOH 中和→沸水浴蒸至原体积四分之→转入250ml容量瓶→加50ml水→摇匀→（加A液10ml→加1 N NaOH 4ml）→加水至刻度→静置30秒→过滤。
c. 含多量淀粉的食品：婴儿食品、糕干粉、宝宝乐、代乳粉、饼干、面包、糕点等称样10-20g→250ml容量瓶→加水200ml→45度水浴加热1小时→不停摇动→冷后加水至刻度→静置→吸出清夜200ml于另一容量瓶（250ml）→加A液10ml+1N NaOH 4ml→静置30秒→过滤。