不同加工方法对延胡索3种生物碱含量的影响

合集下载

不同炮制方法对中药延胡索中有效成分含量的影响

不同炮制方法对中药延胡索中有效成分含量的影响
中图分类号 : R 2 8 4 文献标识码 : A 文章 编 号 : 1 6 7 2 - 8 3 5 1 ( 2 0 1 6 ) 1 1 - 0 0 0 5 一 O 2
瓶∞ 0

延胡索 ( c o r y d a l i s R h i z o m a ) 为多年生 罂粟科草本 植物延胡 索( C o r y d a l i s v a n h u s u o W. T . Wa n g ) 的干燥 块 茎Ⅲ , 因有 活 血 、 止 痛、 利气 的功效 , 临床上多用 于治疗脘腹疼痛 、 经闭痛经 、 产后瘀 阻日 。生 物碱是 中药延胡索 中的主要有效成分 , 其 中药材 中含有 的大部分为结合态的生物碱 ,只有碱性较弱 的成分 以游离态的 形式存在E ] 5 。 延胡索多以炮制后入药治疗疾病 , 醋煮 、 醋烘 、 醋炙 、 酒炙均为 2 0 1 5年版《 中国药典 ( 一部 ) 》 收载的炮制延胡索 饮片
摘要 : 目的 : 比较醋 炙、 醋煮、 酒炙 、 醋烘等 炮制 方法对延胡 索中有效成分含 量的影响 。方法 : 将延 胡索生品分别经醋炙、 醋煮 、 醋烘 、 酒炙后 , 以水超 声法对不 同炮制品提取 , 高效液相 色谱法测定去 氢紫堇碱 、 延胡 索乙素成分的含量 , 乙腈 : O . 1 %磷 酸溶液= 7 2 : 2 8作 为试验 的流动相 , 色谱 柱 A g i l e n t C 色谱 柱 , 柱温为 室温 , 检测波 长为 2 8 2 n m。结果 : 延 胡索经不 同炮制后 生物碱去 氢紫堇碱含量均 有所升高 , 醋烘、 醋炙、 酒炙延胡索 中延 胡索 乙素 的含量有所上升 , 差异有统计 学意义( P < 0 . 0 5 o结论 : 高效液相 色谱 法测定 中药延 胡索不 同炮制 品 中的 2种有效成分 , 操作 步骤 简单 、 重复性好 , 根据药材的治疗需要 , 采 用醋烘、 醋 炙、 酒炙等炮制方法可以增加延 胡索有效成分的含 量。 关键 词 : 延胡 索 去氢紫堇碱 延胡索 乙素 不 同炮制 高效液相色谱 法

养肝颗粒中延胡索提取工艺探讨

养肝颗粒中延胡索提取工艺探讨

养肝颗粒处方为江苏省中西医结合医院名老中医徐长桂主任医师的经验方,由党参、黄芪、 延胡索、丹参等9味中药组成,具有舒肝健脾、活血化瘀之功效,临床用于治疗慢性病毒性 肝炎,疗效显著。现代研究表明延胡索生物碱,丹参脂溶性成分均为该制剂的有效成分。由 于这两类成分难溶于水,为了使活性成分更多的被提出,提高疗效,我们选择乙醇为浸出溶 媒,以生物碱为含量测定指标,探讨了延胡索的3种提取法,为养肝颗粒中延胡索选择最佳 的制备工艺提供实验依据。
2 测定方法[1]与结果
分别取上述浸膏各加20%盐酸溶液20 ml使溶解,过滤,滤液加NaOH溶液,调 pH 至11,置分液漏斗中,加氯仿萃取4次,10 ml/次。合并氯仿液,水浴蒸干,残渣精 确加入0.01 M硫酸溶液10 ml使溶解,过量的酸以0.02 M NaOH溶液回滴,以甲基红为指示剂 ,每 ml 0.01 M的硫酸溶液相当于7.1084 mg延胡索乙素。结果列于表1。
表1 延胡索3种提取法对生物碱提取效果比较
制备方法 NaOH消耗量(ml) H2SO4量(ml) 总生物碱(mg)
合并醇提 9.84 0.06 0.43
单独醇提 8.05 1.95 13.86
合并煎煮 9.83 0.17 1.20
3 讨论
3.1 测定结果表明,延胡索单独醇回流提取,总生物碱含量最 高,而与丹参合并醇提或与其它药材合并煎煮,生物碱的含量均较低。建议养肝颗粒中延胡 索的提取采用单独醇回流制备工艺。
3.2 从含量测定结果显示,延胡索与丹参合并醇提 或与其它药材合并煎煮,生物碱的含量偏低,说明延胡索在与丹参或其它药材在提取过程中 ,可能存在化学配伍禁忌,即生物碱与其它成分结合生成难溶性成分而除去,从而影响疗效 ,这有待于以后的工作中作进一步研究。

不同的炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的影响

不同的炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的影响

《当代医药论丛》Contemporary Medical Symposium2019年第17卷第18期•中医中药•167 3讨论原发性痛经是妇科临床上最为常见的病症之一。

此病患者在行经前、月经期间或行经后可出现下腹部疼痛、坠胀,或伴有腰酸及其他不适症状。

原发性痛经会严重影响患者正常的工作和生活,可明显降低其生活质量冈。

中医认为,原发性痛经属于“经行腹痛”的范畴,多因气滞血瘀、肾阳不足所致,其病机是气血运行不畅、不通则痛,在治疗上当以散寒止痛为主刊。

原发性痛经的中医辨证特点不外乎"瘀”、“滞”和“虚”。

其中,“瘀”指血瘀,即瘀血内阻、不通则痛,该类型痛经患者的临床表现主要是疼痛剧烈(多为行经前疼痛),经色紫暗,有血凝块;“滞”指气滞,即气机阻滞、不通则痛,该类型痛经患者的临床表现主要是平素喜好生闷气,经期前后情绪不佳,胀痛;“虚”指血虚、阳虚或肝肾亏虚,临床表现主要是经色浅淡、月经量少、痛经患者的临床表现主要是浮肿冷痛、小腹胀痛,伴乳房血虚型痛经患者的面色淡白,阳虚型畏寒肢冷、经色紫暗有血凝块,肝肾亏虚型痛经患者的临床表现主要是腰膝酸软、齿摇发脱、头晕耳鸣⑷。

中医认为,三阴交穴是足太阴脾经、足少阴肾经和足厥阴肝经的交会之穴,刺激该穴可起到健脾益血、调肝补肾及安神助眠的功效;关元穴和次醪穴主治痛经、少腹疼痛,刺激这两个穴位可起到通经活络、活血止痛、健脾除湿的功效;子宫穴主治痛经,刺激该穴可起到调经止带、理气和血的功效;合谷穴是阳明经之原穴,乃调理人体气机之大穴,刺激该穴可起到理血活血、通经止痛的功效⑼。

对上述穴位进行针灸,能起到通经活络、活血止痛的作用。

依据国家中医药管理局颁布的《中医病症诊断疗效标准》对两组患者的临床疗效进行判定的结果显示,研究组患者治疗的总有效率高达96.8%,明显高于对照组患者的77.4%。

综上所述,用针灸疗法治疗原发性痛经的临床效果显著,此法值得在临床上推广应用。

参考文献[1]杨东云.原发性痛经患者利用中医针炎治疗的价值探析[J].临床医药文献电子杂志,2017,4(43):8373-8374.[2]李翠萍.针炎治疗原发性痛经的临床研究[J].世界临床医学,2016,10⑵:27-27.[3]唐英.中医针炎治疗原发性痛经的研究进展[J].大家健康(中旬版),2017,11(2):38-39.[4]宋明明,毕明昌.中医针炎治疗原发性痛经的临床分析[J].实用妇科内分滂电子杂志,2017,4(22):32,34.[5]刘美章.中医针炎治疗原发性痛经的疗效观察[J],tt床医药文献电子杂志,2017,4(13):2413-2414.不同的炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的影响黄小平(重庆市梁平区中医医院药剂科,重庆405200)[摘要]目的:研究并分析不同的炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的彩响。

不同醋炙延胡索中延胡索乙素的含量变化_魏良兵

不同醋炙延胡索中延胡索乙素的含量变化_魏良兵
2 方法与结果 211 醋炙延胡索制备工艺
供试品 ( 1): 取 延胡索药材 生片 500g, 加 100g 米醋搅拌, 放置闷润。待米醋被药材吸收后, 置锅内 用文火炒至微干, 取出放凉, 即得。
供试品 ( 2): 取 延胡索药材 颗粒 500g, 加 100g 米醋搅拌, 放置闷润。待米醋被药材吸收后, 置锅内 用文火炒至微干, 取出放凉, 即得。
供试品 ( 5): 取延胡索药材 500g, 加 200g 米醋 搅拌, 放置闷润。待米醋被药材吸至内无白心后, 切 片晒干, 置锅内用文火炒至略焦干, 取出放凉, 即得。
供试品 ( 6) : 即生延胡索。 其中供试品 ( 1) 、( 2) 为安徽省炮制规范收载炮 制品种152, 供试品 ( 3)、( 4) 为中国药典收载炮制品 种122, 供试品 ( 5) 为本院炮制品种, 供试品 ( 6) 为延 胡索生品。 212 色谱条 件 吸附剂: 硅胶 G 板, 展开剂: 甲 苯-丙酮 ( 9: 2) 122, 饱和 30m in, 展开, 取出, 晾干, 置 碘缸中约 3分钟后取出, 挥尽板上吸附的碘。光谱 扫描确定最大吸收波长: 照薄层色谱法 ( 中国药典 2005年版一部附录 V IB ) 试验, 吸取对照品溶液、6 种供试品溶液各 1L,l 点于 10 m @ 10 m 的硅胶 G 薄 层板上, 依法展开; 在 200~ 700 nm 的波长范围内扫 描延 胡 索乙 素 斑点, 选 定 280nm 为检 测 波 长, 在 650nm 处均无吸收, 选定 650nm 为参比波长。 213 对照品溶液的制备 精密称取延胡索乙素对 照品, 加甲醇制成每 1 m l含 0110 m g的溶液, 即得。 214 供试品溶液的制备 精密称取供试品 ( 1) 2g, 置圆底烧瓶中, 精密加入浓氨试液-甲醇 ( 1B20)混合 溶液 100 m ,l 称定重量, 冷浸 1 h, 加热回流 1 h, 放 冷, 再称定重量, 用浓氨试液-甲醇 ( 1B20) 补足减失 的重量, 摇匀, 滤过, 取续滤液 25 m l蒸干, 残渣加甲 醇溶解, 转移至 10 m l容量瓶中, 并稀释到刻度, 摇 匀, 滤过, 取续滤液, 即得供试品溶液 ( 1) 162。同法

醋制对延胡索主要活性成分含量及药效学影响研究

醋制对延胡索主要活性成分含量及药效学影响研究

醋制对延胡索主要活性成分含量及药效学影响研究醋制对延胡索主要活性成分含量及药效学影响研究延胡索是一种常用于中医药理疗的药材,具有药效显著、安全无毒的特点。

与此同时,醋制延胡索也是一种常见的制剂方法,通过醋的作用能够改变延胡索的活性成分含量,发挥出不同的药效。

本文重点研究了醋制对延胡索主要活性成分含量及药效学的影响。

首先,我们需要了解延胡索的化学成分。

延胡索中含有多种生物碱,如紫锥菊碱、紫锥菊苷、单宁酸和黄酮类等。

这些成分都是延胡索发挥药效的重要组成部分。

醋制延胡索后,这些活性成分的含量会发生一定的变化,这样就影响了其药效。

研究表明,醋制延胡索主要活性成分的含量会有所增加。

例如,紫锥菊碱是延胡索的一种主要活性成分,其抗炎、镇静、抗氧化等药理作用广泛应用于临床。

醋制延胡索后,紫锥菊碱的含量明显增加,进一步增强了其药效。

这与醋中醋酸乙酯等成分的化学反应有关,能够改变延胡索中活性成分的结构和含量。

此外,醋制延胡索对其药效学也有一定的影响。

醋制延胡索具有温中行气、行血活血、舒筋止痛等作用。

相比未经醋制的延胡索,醋制延胡索通过增加活性成分的含量,进一步增强了其药效。

醋制延胡索还能够改变其口感,使其更易于吸收和利用,同时也提高了患者的服药依从性。

在临床应用中,醋制延胡索常用于治疗风湿病、痛经、痛风等疾病。

其主要通过活血化瘀、活络止痛的药理作用发挥治疗效果。

例如,醋制延胡索可以改善风湿病患者的关节肿痛症状,减轻痉挛,促进身体康复;对于痛经患者,醋制延胡索可以缓解子宫痉挛,改善经血排出,从而减轻痛经症状。

这些临床研究结果表明,醋制延胡索可有效发挥其药效,对于一些常见病痛症状具有明显疗效。

总的来说,醋制对延胡索主要活性成分含量及药效学有着明显的影响。

醋制延胡索不仅能够增加活性成分的含量,进一步增强药效,还能够改变其口感,提高患者的服药依从性。

临床应用中,醋制延胡索广泛应用于多种疾病的治疗,发挥出显著的药效。

但需要注意的是,在使用过程中仍需遵医嘱,合理使用,以免出现不良反应综上所述,醋制延胡索通过改变活性成分的结构和含量,以及提高口感和服药依从性,对延胡索的药效学产生了明显的影响。

延胡索不同炮制品镇痛抗炎作用研究

延胡索不同炮制品镇痛抗炎作用研究

延胡索不同炮制品镇痛抗炎作用研究【摘要】目的通过不同的致痛、致炎模型观察延胡索不同炮制品的镇痛抗炎作用。

方法采用小鼠热板法和扭体法,观察延胡索不同炮制品镇痛作用;采用耳肿法及毛细血管通透性法观察药物的抗炎作用。

结果延胡索不同饮片对二甲苯所致的耳廓肿胀及醋酸所致的毛细血管通透性增加都有明显的抑制作用,其中以醋煮延胡索作用较强。

延胡索不同炮制品对醋酸所致的扭体也有明显的抑制作用。

热板法显示各样品均能明显提高小鼠的痛阈值,其中以醋煮延胡索作用较为明显。

结论延胡索的不同炮制品均有显著的镇痛抗炎作用,其中以醋煮延胡索作用较强。

【关键词】延胡索;镇痛;抗炎;炮制Abstract:ObjectiveTo study analgesic and anti-inflammatory effects of different kinds of Corydalis yanhusuo.MethodsThe analgesic effect was tested by hot plate method and writhing body method in mice. The anti-inflammatory effect was tested by ear swollen method and capillary penetration method in mice. ResultsThe action of Corydalis yanhusuo Aeruginosae was more intensives. ConclusionCorydalis yanhusuo and its different processed products have marked analgesic and anti-inflammatory effects, of which the vinegar-product is more intensive.Key words:Corydalis yanhusuo; Analgesia; Anti-inflammation延胡索具活血化淤,行气止痛功效,临床常用于胸胁、脘腹疼痛,经闭痛经,产后淤阻,跌扑肿痛等证。

不同炮制方法对中药延胡索中有效成分含量的影响


样品含量测定:各炮制品供试品溶液,按照“2.2” 项下的色谱条件进样测定峰面积,按照线性回归方 程对含量进行计算,见表 2。
结论
• 中药延胡索作为临床上经常用于治疗疾病的药物,多数均 以炮制品的形式应用于临床,经酒炙后的延胡索有效成分生 物碱会生成易溶性的醋酸盐,提高了溶出率[6]。从上述表格 中的数据可见,延胡索生品与延胡索炮制后的水煎液含有的 成分性质完全一致,生物碱的含量经醋炙后的延胡索水煎液 中含量最高,而不经过任何炮制的延胡索生物碱的含量最低, 酒炙品的含量居中。
不同炮制方法对中药延胡索中 有效成分含量的影响
沈阳药科大学
延胡索介绍
• 延胡索(Corydalis Rhizoma)为多年生罂粟科草本植物 延胡索(Corydalis yanhusuo W.T.Wang)的干燥块茎[1], 因有活血、止痛、利气的功效,临床上多用于治疗脘腹疼 痛、经闭痛经、产后瘀阻[2]。生物碱是中药延胡索中的主 要有效成分,其中药材中含有的大部分为结合态的生物碱, 只有碱性较弱的成分以游离态的形式存在[3]。
色谱条件的选择
• AgilentC1(8 250mm×4.6mm,2.5μm)为实验过程中 的色谱柱,乙腈:0.1%磷酸溶液(三乙胺调节 pH 为 5.2~5.4)=72∶28 为流动相,柱温为室温,检测波长为 282nm,进样量为 10μL,流速为 1.0mL/min。延胡索乙 素、去氢紫堇碱有较好的分离,按照延胡索乙素色谱峰进 行计算理论塔板数>3000。如下图。
• 2.6 精密度考察:吸取延胡索乙素对照品溶液,按照“2.2”项下的色谱条件 重复进样 5 次,峰面积的 RSD 值为 0.21%,表明高效液相色谱仪的精密度 好。
• 2.7 稳定性考察:取“2.3”项下的供试品溶液,分别在 0、2、4、8、12、 24h 按照色谱条件进样 10μL,测定峰面积值,其 RSD 值为1.95%,表明供 试品溶液在 24h 内有较好的稳定性。

炮制方法对延胡索生物碱含量及其镇痛作用的影响

炮制方法对延胡索生物碱含量及其镇痛作用的影响综合一体化实验林亲雄陈旅翼编写一、实验项目拟达到的学生训练目的或目标1.掌握延胡索炮制方法、要点及原料;2.掌握延胡索生物碱成分及镇痛药理作用测定的方法;3.了解炮制前后延胡索生物碱含量与镇痛药理作用变化的意义。

二、实验项目涉及的主要科学原理1.延胡索的炮制及增效原理:按照2010年版《中华人民共和国药典》延胡索项下的炮制方法、采用醋炙法炮制延胡索,增强其行气止痛作用。

其有效成分为难溶于水的生物碱,醋炙后可使生物碱成盐,易于溶出。

而生物碱又为其镇痛有效成分。

故醋炙后,延胡索的生物碱提取率和镇痛作用均能增加。

2. 延胡索生物碱成分的HPLC测定:延胡索的主要活性成分是生物碱类成分,具有显著的镇痛、镇静和催眠作用,对心律失常、胃溃疡等多种疾病有较好的临床效果。

通过HPLC方法比较分析醋炙前后延胡索主要生物碱成分的变化,可为阐明醋炙增效理论提供科学依据。

3.镇痛实验原理:采用小鼠腹腔注射0.4%的醋酸溶液,引起扭体反应;采用热板法,引起舔后足反应;设置空白组,阳性组、给药组,以反映延胡索的镇痛作用。

三、实验项目需要的主要器材1.实验器具炒锅、锅铲、煤气灶、搪瓷盘、切药刀、标准筛(50目,即三号筛)、高效液相色谱仪、分析天平(1/100000)、水浴锅、容量瓶(10ml、5ml)、圆底烧瓶(50ml)、平底烧瓶(100ml)、移液管(25ml、50ml)、回流及回收装置、烧杯、玻璃漏斗、锥形瓶、量筒、注射器、微孔滤膜、微量进样器、流动相过滤装置、 HPLC仪。

台式天平、烧杯(1000ml)、秒表、小鼠笼。

2.实验材料:延胡索、米醋、甲醇(分析纯和色谱纯)、浓氨水、0.1%磷酸、三乙胺、蒸馏水、生理盐水、0.6%醋酸溶液、苦味酸(动物标号用)延胡索乙素对照品。

3.实验动物:健康成年ICR雄性小鼠(18~22g)。

四、实验内容与方法1.延胡索的炮制(1)延胡索预处理:取原药材,除去杂质,大小分开,洗净,稍浸,润透,切厚片,干燥,筛去碎屑,或洗净、干燥后捣碎。

不同炮制方法对中药延胡索中有效成分含量的影响

不同炮制方法对中药延胡索中有效成分含量的影响中药延胡索,又称白蔹、胡索,是一种常用的中药材,其根茎入药,具有活血化瘀、祛风痹、止痛等功效。

延胡索在传统中药学中有着广泛的应用,但其药材经过不同的炮制处理方法后,会对其中的有效成分产生一定的影响。

本文将就不同炮制方法对中药延胡索中有效成分含量的影响进行阐述。

1.炒制:炒制是目前常用的一种炮制方法,延胡索经过炒制后,其有效成分含量相对保持较稳定,能够维持一定的药效。

炒制可降低延胡索中的挥发性成分含量,减少其对人体的刺激性。

2.曝晒:曝晒是一种将延胡索暴晒在阳光下进行炮制的方法。

曝晒后,延胡索中的一些挥发性成分可能会被阳光直接照射而流失,导致有效成分含量下降。

此外,曝晒也会导致延胡索受到一定的颜色和气味变化。

3.浸泡:浸泡是将延胡索浸泡在水中或其他溶剂中进行炮制的方法。

浸泡能够促使延胡索中的有效成分溶解到溶剂中,最大限度地提取药材中的有效成分。

但是,浸泡时间过长或者浸泡温度过高都会导致溶剂中的有效成分含量减少,甚至部分成分被破坏。

4.熏制:熏制是将延胡索置于熏炉中进行炮制的方法。

熏制过程中,药材受到高温、烟熏等因素的作用,可以使延胡索中的有效成分相对稳定,并有一定的增加。

熏制后的延胡索在颜色和气味上也会有所变化。

综上所述,不同的炮制方法对中药延胡索中有效成分含量会产生一定的影响。

炒制能够稳定有效成分含量,减少刺激性;曝晒会导致有效成分含量下降,以及颜色和气味的变化;浸泡能够最大限度地提取有效成分,但过程中需掌握好时间和温度;熏制能够稳定有效成分的含量,并有一定程度的增加。

因此,根据药材的实际需要和药效要求选择合适的炮制方法对延胡索进行处理,从而达到最佳的药效效果。

同时,在炮制过程中需要严格控制炮制条件和掌握好时间,以确保有效成分的保留和药效的发挥。

延胡索与不同药物配伍中总生物碱含量的测定_罗彦龙


薄层扫描法、紫外分光光度法、酸碱滴定法等,相比较各有特点和不足。
本文选择了以延胡索,延胡索与白芷、当归配伍为研究对象,采用
水煎煮提取总生物碱,利用生物碱盐类易溶于水的原理提取出游离的
生物碱和生物碱盐类,再调节 pH 值,在碱性条件下用有机溶剂萃取,提
取出生物碱。 采用酸碱滴定法测定总生物碱,按消耗的硫酸计算出总
科技信息
职教与成教
延胡索与不同药物配伍中总生物碱含量的测定
杨凌职业技术学院 罗彦龙 陕西交通职业技术学院 李婷婷
[摘 要]为有效指导临床用药和中药新产品的研发,采用酸碱滴定法测定延胡索、延胡索与白芷、延胡索与当归不同配伍中总生物 碱的含量,得出延胡索与白芷配伍中总生物碱含量最高,其次是延胡索与当归配伍中总生物碱的含量,延胡索中总生物碱的含量在 三者中最少。 [关键词]延胡索 白芷 当归 配伍 水煎煮法 酸碱滴定法
硫酸、甲基红 - 溴甲酚绿指示剂为兰州大学药物分析教研室提供。
1.2 氢氧化钠溶液的标定
用分析天平精密称取 0.2g 固体氢氧化钠置于 100mL 的烧杯中,加
少量蒸馏水溶解,转置 250mL 的容量瓶中,加蒸馏 水 置 刻 度 ,用
0.049mol/L 的硫酸溶液标定,其氢氧化钠溶液浓度为 0.019089mol/L。
7.1084mg 的延胡
索乙素,单位:mg.mol/L
1—— —指其是在 1g 延胡索中,单位:g
2.2 元胡不同配伍中生物碱的提取
水煎煮法提取生物碱:精密称取未粉碎的延胡索颗粒 10g(延胡索
10g 与白芷 5g,延胡索 10g 与当归 10g)置于 1000mL 烧杯中,加水(第一
次 400mL,第二次 300mL)煎煮两次,每次微沸 30 分钟,合并两次水煮
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

不同加工方法对延胡索3种生物碱含量的影响目的比较不同加工方法对延胡索药材中有效成分的影响。

方法采用HPLC 测定延胡索中原阿片碱、去氢紫堇碱、延胡索乙素的含量。

色谱柱:Agilent HC-C18(2)柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:乙腈∶0.1%磷酸水溶液(三乙胺调pH 5.3)=26∶74;流速:1.0 mL/min;柱温:35 ℃;检测波长:280 nm;进样量:10 μL。

在上述色谱条件下,3种成分均得到很好分离,各成分质量与峰面积在相应范围内线性关系良好(r2≥0.999 6),平均加样回收率分别为100.31%、99.34%、99.34%(RSD≤2.70%)。

结果大号规格(鲜品直径2.0~3.0 cm)煮制时间5~6 min、中号规格(鲜品直径1.5~1.9 cm)煮制时间2~4 min、小号规格(鲜品直径0.7~1.4 cm)煮制时间1~2 min者中原阿片碱、去氢紫堇碱、延胡索乙素的含量及3种生物碱总含量比各组其他样品高,经煮制加工的延胡索药材样品中3种生物碱的含量总体低于蒸制加工所得的延胡索药材。

结论本研究为延胡索药材产地加工工艺的确定提供了依据。

Abstract:Objective To explore the effects of different processes on the contents of three alkaloid ingredients in Coridalis Rhizoma. Methods The contents of three alkaloid ingredients (protopine,dehydrocorydaline,tetrahydropalmatine)were determined by HPLC. Agilent HC-C18(2)column (4.6 mm × 250 mm,5 μm)was set at 35 ℃;acetonitrile-0.1% phosphoric acid solution (triethylamine adjusted pH 5.3)(26:74)was set as mobile phase;the flow rate was 1.0 mL/min and detection wavelength was set at 280 nm;the inje ction volume was 10 μL. The three components were separated well under these chromatographic conditions. The linear relationship between the mass of each component and the peak area was good (r2≥0.999 6). The average recoveries were 100.31%,99.34%,and 99.34%,respectively (RSD≤2.70%). Results The contents of protopine,dehydrocorydaline,tetrahydropalmatine and the total contents of three alkaloids were higher than other groups in large size samples (diameter of fresh products was 2.0–3.0 cm)which were boiled 5–6 minutes,the medium size samples (diameter of fresh products was 1.5–1.9 cm)which were boiled 2–4 minutes and the small size samples (diameter of fresh products was 0.7–1.4 cm)which were boiled 1–2 minutes. The contents of alkaloid in boiled process were lower than steamed process. Conclusion The results of study provide an experimental basis for origin processing of Coridalis Rhizoma.Key words:Coridalis Rhizoma;steaming process;boiling process;alkaloids;HPLC延胡索為罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥块茎,具有显著的镇痛、镇静、催眠作用,对冠心病、心律失常、胃溃疡等多种疾病有较好的治疗效果[1]。

《中华人民共和国药典》收载的产地加工方法为“置沸水中煮至恰无白心时,取出,晒干”[2]。

延胡索主产于浙江东阳、磐安等地,陕西、安徽、江苏、湖北、湖南等地也产[3]。

产地加工传统习惯上主要依据药材大小掌握不同的煮制时间,煮至中心有一小白点时即可[4]。

查阅文献发现,有研究者以延胡索乙素为考察指标,分析了不同采收期及不同加工方法对延胡索药材的影响,结果以蒸制加工延胡索乙素含量高[5];张丽宏等[6]以延胡索乙素、原阿片碱为指标的研究,认为微波法比煮法为好;孙乙铭等[7]同样以延胡索乙素、原阿片碱为指标对产地加工工艺进行研究。

中药以多成分起效为其作用特点,延胡索中所含延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索丙素(原阿片碱)等生物碱类化学成分[8-9]具有很强的镇痛、镇静和抗心律失常等多种生理活性[1]。

本研究在对延胡索产地加工方法进行实地调研的基础上,结合生产实际情况,通过测定不同加工方法的延胡索药材中去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱3种生物碱成分的含量,对其产地加工方法进行全面考察和探讨,更加客观、全面地评价产地不同加工方法对延胡索药材质量的影响。

1 仪器与试药Agilent 1260高效液相色谱检测仪(包括G1322A在线脱气机、G1312B二元梯度泵、G1329B自动进样器、G1316A柱温箱、G4212B DAD检测器、Agilent 1260色谱工作站),Agilent HC-C18(2)色谱柱(5 μm,4.6 mm×250 mm,NO.588905-902),DV215CD十万分之一电子分析天平(美国OHAUS),JK-250DB 型超声波清洗器(合肥金尼机械制造有限公司)。

延胡索乙素对照品(批号CFN99553,纯度98%)、去氢紫堇碱对照品(批号CFN90330,纯度98%)、原阿片碱对照品(批号CFN99399,纯度98%),武汉天植生物技术有限公司;乙腈(色谱纯),天津市大茂化学试剂厂,娃哈哈纯净水,其余试剂均为分析纯。

2 样品采集与制备延胡索鲜药材于2014年5月5日采自安徽省芜湖县花桥镇,不同大小规格的样品均采自同一块药田,全部样品经本校中药生药教研室汪荣斌副教授鉴定为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的块茎。

延胡索鲜药材经淘洗,净选,除去外皮等非药用部分,略晾干多余水分,按大小对药材进行分档,大、中、小规格分别编号为A、B、C,依据传统经验,鲜品直径大号为2.0~3.0 cm,中号为1.5~1.9 cm,小号为0.7~1.4 cm。

根据传统加工方法调研情况,取不同档样品(每份500 g)分别进行蒸、煮制备,取出,继续晒至干。

晒干的成品呈不规则扁球形,表面黄色或黄褐色,具不规则网状皱纹。

晒至药材不再減失质量,判断为药材已晒干,计算折干率。

折干率(%)=晒干后成品质量÷鲜药材质量×100%。

样品加工方法、加工后性状、折干率、含水量见表1(f为加工前放置2周样品)。

3 方法与结果3.1 色谱条件色谱柱:Agilent HC-C18(2)柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:乙腈∶0.1%磷酸水溶液(三乙胺调pH 5.3)=26∶74;流速:1.0 mL/min;柱温:35 ℃;检测波长:280 nm;自动进样,进样量10 μL。

在此条件下,理论塔板数按延胡索乙素峰、原阿片碱峰和去氢紫堇碱峰计算均不低于3000[10]。

空白溶剂色谱图中在与延胡索乙素、去氢紫堇碱、原阿片碱色谱峰相应位置上无峰,说明此系统条件无干扰。

色谱图见图1。

3.2 对照品溶液制备精密称取原阿片碱对照品1.46 mg、去氢紫堇碱对照品2.09 mg、延胡索乙素对照品3.36 mg,置于1000 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,溶解,即得对照品溶液。

3.3 供试品溶液制备精密称取样品粉末0.5 g,加水25 mL,超声提取2次,30 min/次,过滤,合并滤液,定容至100 mL容量瓶中,过0.45 μm微孔滤膜,取续滤液,即得。

3.4 线性关系考察取3种对照品溶液,按“3.1”项下色谱条件分别依次进样2.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、30.0 μL,测定峰面积。

以对照品进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,进行线性回归,得回归方程。

原阿片碱Y=1270.8X+0.004 3,r2=0.999 9,在0.002 92~0.043 8 μg范围内线性关系良好;去氢紫堇碱Y=2108.2X-1.847 2,r2=0.999 6,在0.004 18~0.062 7 μg范围内线性关系良好;延胡索乙素Y=906.56X-1.421 2,r2=0.999 6,在0.006 72~0.100 8 μg范围内线性关系良好。

3.5 精密度试验精密吸取同一供试品溶液,重复进样6次,结果原阿片碱峰面积RSD=2.71%,去氢紫堇碱峰面积RSD=1.70%,延胡索乙素峰面积RSD=2.70%,表明精密度良好。

3.6 重复性试验取同一批号样品,按“3.3”项下方法分别制备6份供试品溶液,原阿片碱、去氢紫堇碱和延胡索乙素平均含量分别为1.87、0.33、0.56 mg/g,RSD分别为2.19%、2.17%、2.18%,表明方法重复性良好。

3.7 稳定性试验取同一供试品溶液,在0、1、2、3、4、5、6、7、8 h进样测定,原阿片碱峰面积RSD=4.04%,去氢紫堇碱峰面积RSD=1.56%,延胡索乙素峰面积RSD=1.79%,表明供试品溶液在8 h内稳定。

3.8 加样回收率试验精密称取6份已知含量的样品各0.25 g,添加各对照品溶液适量,按样品含量测定项下方法操作,测得原阿片碱、去氢紫堇碱和延胡索乙素平均加样回收率分别为100.31%、99.34%、99.34%,RSD分别为1.60%、2.27%、2.70%,见表2。

相关文档
最新文档