分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量
紫外分光光度法测定乌药中总生物碱含量
紫外分光光度法测定乌药中总生物碱含量作者：张剑等来源：《江苏农业科学》2014年第03期摘要：用紫外分光光度法测定乌药中的总生物碱含量。
先用索氏提取法提取乌药中的总生物碱，再以小檗碱为对照品，在pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中，以溴甲酚绿指示液为显色剂，在628 nm波长下利用分光光度法测定乌药中的总生物碱含量。
结果表明，小檗碱对照品在2.0～12.0 mg/L范围内呈线性关系，回归方程为D=0.008 2C+0167 1，r=0.999 1，乌药中的总生物碱含量为0.301 4%。
本方法操作简便、迅速，测定结果准确、可靠。
关键词：乌药；总生物碱；分光光度法中图分类号：R284.1；O657.32 文献标志码：A 文章编号：1002-1302（2014）03-0266-02乌药[Lindera aggregata （Sims）Kosterm]系樟科（Lauraceae）山胡椒属（Lindera）植物，为传统的理气止痛药[1]，具有温中散寒、理气止痛的功效，最早记载于唐代陈藏器《本草拾遗》。
现代药理学研究表明，乌药具有广泛的药理活性[2-3]。
乌药根的主要有效成分为异喹啉类生物碱及呋喃倍半萜[4]，其中生物碱和呋喃倍半萜及其内酯类成分是乌药的特征性成分[5-7]，具有较强的专属性，也具有一定的活性。
为了确保乌药的质量标准评价有具体的量化指标，根据乌药中所含成分的特点，本研究采用酸性染料比色法测定乌药中的生物碱含量。
1 材料与方法1.1 仪器与材料主要仪器：紫外可见分光光度计（尤尼柯UV-4802）；98-1-C数显控温电热套（天津泰斯特）；索式提取器；电子天平；三氯甲烷（AR）；溴甲酚绿（AR）；小檗碱标准品（成都领航者生物技术有限公司）；pH值45的醋酸-醋酸钠缓冲液；0.01 mol/L氢氧化钠溶液（用乙醇溶解）。
试验所用中药材乌药样品采自江西赣南。
1.2 试验方法本研究所用试验方法参照文献[8-10]的方法并加以改进。
癌痛规范化治疗中成药合理使用专家共识
doi:10.3969/j.issn.1006-9852.2021.01.003癌痛规范化治疗中成药合理使用专家共识北京市疼痛治疗质量控制和改进中心癌痛专家组癌性疼痛 (cancer pain) 是指由癌症引起或抗癌治疗所致的疼痛。
癌痛常表现为慢性疼痛，是肿瘤常见的主要症状之一。
据统计，约1/3 接受癌症治疗的病人和超过2/3的进展期癌症病人出现疼痛，约50%疼痛为中度至重度，其中约30%为重度疼痛。
癌痛给病人造成极大的身心负担，严重影响了病人的生活质量。
国家卫生健康委员会高度重视癌痛的管理工作，2011年卫生部办公厅印发了《癌症疼痛诊疗规范（2011年版）的通知》，启动了“癌痛规范化治疗示范病房创建”活动，癌痛规范化治疗得到了较为广泛的推广。
北京市疼痛治疗质量控制和改进中心癌痛专家组牵头制订了《北京市癌症疼痛管理规范》（2017 年版）[1]，并根据此规范开展疼痛督导检查工作，大大促进了北京市的癌痛规范化治疗工作，使更多癌痛病人得到了关心和治疗。
在推广癌痛规范化治疗中，我们发现中成药的使用较为普遍。
西药治疗癌痛疗效确切、起效快、但具有比较明显的不良反应。
中医药治疗疼痛历史悠久，古方众多，在中医理论指导下积累了丰富的临床经验。
近年大量文献报道了采用中医药内服、外用、针灸等方法对癌性疼痛的治疗，具有不良反应小、使用安全、无成瘾性和无戒断性等优势[2]。
但至今国内外尚无如何使用中成药规范治疗癌痛方面的共识或指南。
如何体现我国中西医结合的治疗特色，做到既发挥中医特长，又合理使用止痛中成药，是亟待解决的问题，也是制订癌痛规范化治疗中成药合理使用专家共识的目的。
中医理论对疼痛的认识早有记载，如《内经》中提出“不通则痛”“不荣则痛”等。
中医治疗疼痛的方法有中药内服、外用、针灸及中成药静脉注射等。
为了规范中成药在癌痛治疗中的合理使用，北京市疼痛治疗质量控制和改进中心癌痛专家组撰写了《癌痛规范化治疗中成药合理使用专家共识》。
延胡索的活性成分提取工艺
延胡索的活性成分提取工艺目的：探讨延胡索的活性成分最佳提取工艺。
方法：采用L9（34）正交试验，以浸膏得率和延胡索乙素质量分数作为考察指标，分析提取时间、乙醇体积分数及提取溶剂用量及对延胡索生物碱的提取效果影响，确定最佳的提取工艺。
结果：延胡索生物碱提取的最佳工艺为超声提取3次，45 min/次，加入7倍量的50%（体积分数）乙醇。
结论：优选得到的工艺合理、经济可行，适用于延胡索活性成分生物碱的提取。
标签：延胡索；活性成分；提取工艺延胡索为一种常用中草药，具有理气止痛、活血散瘀等功效[1-2]。
延胡索具有类似吗啡样镇痛功效，镇痛效价约为吗啡的一半，特别对持续性的镇痛效果比吗啡优，并且患者不存在欣快感，无成瘾性。
现代研究表明延胡索生物碱中延胡索乙素存在脑内多巴胺阻断剂的作用，效价仅居于吗啡之后，此外还能加强肾上腺皮质激素分泌。
延胡索主要活性成分于化学结构上和罂粟碱同属于苯异喹啉类，二者的作用非常相似，但延胡索不存在成瘾性，所有系理想镇痛药物[3]。
提取延胡索活性成分过程中，因大部分采用水作为溶媒，使其活性成分延胡索乙素的含量极低，进而使其止痛作用欠佳。
本文笔者探讨延胡索活性成分的最佳提取工艺，现报告如下。
1 仪器与试药洁康牌数码有限公司PS-20A超声波清洗仪，常州澳华仪器有限公司HH-Z 数显恒温水浴锅，上海精天电子仪器厂FA2104A 分析天平，上海精密科学仪器有限公司721分光光度计。
水为蒸馏水，其他试剂均为分析纯；延胡索乙素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110726-200610）；延胡索药材（亳州徐重道中药饮片厂，批号：11035）。
2 方法与结果2.1 对照品溶液的制备2.2 正交试验2.3供试品溶液的制备用粉碎机将延胡索药材粉碎，过60目筛。
取正交试验的各项下获得的延胡索生物碱提取液进行抽滤，将滤液合并，减压回收乙醇，定容于100 mL容量瓶。
精密各吸取0. 5 mL，分别置于50 mL 容量瓶，加入70%乙醇并定容至刻度，摇匀，即为供试品溶液。
第七讲 生物碱分析
第七讲生物碱分析生物碱分布■含生物碱较多的科有粗榧科、毛莨科、小檗科、防已科、罂含生物碱较多的科有粗榧科、毛莨科、小檗科、防已科、罂粟科、豆科、马钱科、夹竹桃科、茄科、菊科、百合科和石蒜粟科、豆科、马钱科、夹竹桃科、茄科、菊科、百合科和石蒜科等。
有些科几乎全科植物均含生物碱，如罂粟科。
同一科属或亲缘关系相近的植物中往往含有相同或相似的生物碱，如茄或亲缘关系相近的植物中往往含有相同或相似的生物碱，如茄科的颠茄属(Atropa Atropa)、曼陀罗属(Datura Datura)、莨菪属( Hyoscyamus Hyoscyamus)、东莨菪属(Scopolia Scopolia)等属的植物都含有莨菪碱(hyoscyamine hyoscyamine)。
■同一种生物碱也可分布于不同科中，如在毛莨科、小檗科、防已科与芸香科的一些植物中都有小檗碱。
已科与芸香科的一些植物中都有小檗碱。
■生物碱可存在于植物体内各个器官中，同种植物中所含生物碱常不止一种，有的可含数种至数十种，如罂粟约含25种生物碱，长春花中含70余种生物碱。
■生物碱在植物体内各部分中分布是不相等的，往往集中于某一器官或某一部分中。
如乌头（根）、黄连（根茎）、黄柏（树皮）、颠茄（叶）、麻黄（地上茎）、洋地黄（花）、吴茱萸皮）、颠茄（叶）、麻黄（地上茎）、洋地黄（花）、吴茱萸（果实）、马钱子（种子）等。
在同一植物的不同部分，不但生物碱的含量有差异，而且生物碱的种类也可能不同。
特点■生药中生物碱的含量大多低于1%，有少数含量特别低，如长春花中长春新碱含量为百万分之一，美登木中美登木素含量为千万分之一；也有些含量特别高，如黄连中小檗碱含量可达9%、金鸡纳皮中奎宁含量高达15%。
在植物体内，生物碱一般与有机酸（苹果酸、枸橼酸、酒石酸等酸和鞣酸等）结合成盐类，呈溶解状态存在于液泡中，有些是与糖结合成甙而存在，更有少数生物碱是呈游离状存在的，如咖啡碱(caffeine)与秋水仙碱(colchicine)等。
高效液相色谱法测定元胡止痛片中脱氢延胡索碱的含量
高效液相色谱法测定元胡止痛片中脱氢延胡索碱的含量姜舜尧【期刊名称】《中国中药杂志》【年(卷),期】2000(25)8【摘要】目的 :运用高效液相色谱法测定元胡止痛片中脱氢延胡索碱的含量。
方法 :Nova PakC18色谱柱 ,流动相0 .0 5mol·L-1磷酸盐溶液(0 .0 5mol·L-1磷酸二氢钾用0 .0 5mol·L-1磷酸调节 pH至 3.0 ) 乙腈(6 8∶32 ) ,检测波长 34 0nm。
结果 :样品中脱氢延胡索碱与其他成分达到基线分离 ;盐酸脱氢延胡索碱线性范围0 .15 72～2 .35 8μg ,相关系数r =0 .9999;样品平均回收率 99.96 % ,RSD 2 .2 % (n =6 )。
结论 :该方法简便、准确 ,具有实用性。
【总页数】3页(P479-480)【关键词】脱氢延胡索碱;元胡止痛片;高效液相色谱法【作者】姜舜尧【作者单位】浙江省药品检验所【正文语种】中文【中图分类】R286.11;R286.0【相关文献】1.高效液相色谱法测定延胡索总生物碱滴丸中巴马汀碱和脱氢紫堇碱含量 [J], 王红;田明;王一;孙思邈;王巧霜2.反相高效液相色谱法同时测定中药延胡索中延胡索乙素和原阿片碱的含量 [J],李红艳;廖锦红;陈爱青;李泽平3.高效液相色谱法测定元胡止痛片中延胡索乙素的含量 [J], 陈志桃;陈丽香;陈胜辉;林辉4.反相高效液相色谱法测定元胡止痛片中延胡索乙素含量 [J], 刘源;马双成5.高效液相色谱法同时测定元胡止痛片中欧前胡素、延胡索乙素与异欧前胡素的含量 [J], 王云龙;陈晓辉;许世伟;邵礼梅;李延雪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC测定元胡止痛滴丸中延胡索乙素含量
HPLC测定元胡止痛滴丸中延胡索乙素含量倪琳;杨锡;陈朝晖;朱宇【摘要】Objective To establish a method for determination of Tetrahydropalmatine in Yuanhu Zhitong Drop Pills. Methods Tetrahydropalmatine in Yuanhu Zhitong Drop Pills was determined by HPLC. CAPCELL PAK C18 (4.6 mm × 250 mm, 5 μm) column was used. The modbile phase was metanol : 0.02% potassium dihydrogen phosphate-0.96% potassium hydrogen phosphate (adjusted pH to 6.5 with phosphoric acid) = 55 : 45, with the flow rate of 1.0 mL/min. The column temperature was 40 °C and U V detection wavelength was at 280 nm. Results Tetrahydropalmatine was linear at the range of 0.110-0.825 ng. The average recovery was 97.39% and RSD was 2.02% (n=6). Conclusion The established method is accurate, reliable and specific. The results are stable with good reproducibility. The quality of Yuanhu Zhitong Drop Pills can be controlled by the method.%目的建立元胡止痛滴丸中延胡索乙素的含量测定方法.方法采用高效液相色谱法对制剂中主要成分延胡索乙素进行定量分析.色谱柱:CAPCELL PAK C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相:甲醇:0.02％磷酸二氢钾和0.96％磷酸氢二钾(用磷酸调pH值至6.5) =55:45;检测波长:280 nm;柱温:40℃；流速:1.0mL/min.结果延胡索乙素在0.110～0.825 μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为97.39％,RSD=2.02％(n=6).结论方法准确可靠,专属性强,结果稳定,重复性好,可有效控制制剂质量.【期刊名称】《中国中医药信息杂志》【年(卷),期】2011(018)012【总页数】2页(P64-65)【关键词】元胡止痛滴丸;延胡索乙素;高效液相色谱法【作者】倪琳;杨锡;陈朝晖;朱宇【作者单位】甘肃省食品药品检验所,甘肃省中药品质与安全评价工程技术研究中心,甘肃兰州730000;甘肃省食品药品检验所,甘肃省中药品质与安全评价工程技术研究中心,甘肃兰州730000;甘肃省食品药品检验所,甘肃省中药品质与安全评价工程技术研究中心,甘肃兰州730000;甘肃省食品药品检验所,甘肃省中药品质与安全评价工程技术研究中心,甘肃兰州730000【正文语种】中文【中图分类】R284.1元胡止痛滴丸由延胡索(醋制)、白芷2味药组成,具有理气、活血、止痛的功效,主要用于行经腹痛、胃痛、胁痛、头痛等症[1]。
高效液相色谱法测定元胡止痛片中延胡索乙素的含量
高效液相色谱法测定元胡止痛片中延胡索乙素的含量【关键词】元胡止痛片；，，延胡索乙素；，，高效液相色谱摘要：目的建立元胡止痛片中延胡索乙素的含量测定方法。
方法C18ODS 色谱柱(4.6 mm×250 mm，20 μm) ；流动相：甲醇0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至6.0）(55∶45)；检测波长：280 nm；流速：1.0 ml・min1。
结果延胡索乙素对照品在0.153 2~0.766 0 μg范围内，进样量与峰面积间呈良好的线性关系，r=0.999 99，平均回收率为99.53%。
结论该方法操作简便，结果准确，重现性好，可用于控制该制剂的质量。
关键词：元胡止痛片；延胡索乙素；高效液相色谱元胡止痛片是2005版《中国药典》［1］收载品种，由延胡索（醋制）、白芷2味中药组成。
具有理气、活血、止痛功能，用于气滞血淤的胃痛、胁痛、头痛及痛经等。
是中药止痛著名方剂。
现代研究表明，延胡索乙素具有较强的镇痛，镇静，催眠等药理作用［2］。
因此，该成分是元胡止痛片中的有效活性成分之一。
2005版《中国药典》［1］收载的元胡止痛片中延胡索乙素的含量测定方法为薄层色谱扫描法，操作比较复杂。
本实验采用HPLC法改进延胡索乙素的含量方法，并对测定方法学进行了研究。
1 仪器与试剂仪器：高效液相色谱仪(日本岛津CLASSVP 10AVP)；C18ODS色谱柱 (4.6 mm×250 mm，20μm) (大连依利特) ；HP1050/3D化学工作站；样品：元胡止痛片，自制；对照品：延胡索乙素对照品，批号：110726200208，供含量测定用（中国药品生物制品检定所提供）；试剂：所用试剂均为分析纯、色谱纯；水为重蒸馏水(自制)。
2 方法与结果2.1 色谱条件与系统适用性实验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至6.0）(55∶45)为流动相；流速1.0 ml・min1，检测波长280 nm；理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于3 000。
中药制剂分析实验指导
实验一中药制剂的理化定性鉴别一、目的要求熟悉中成药分析的理化定性方法。
二、实验内容1、复方丹参片（1）鉴别方法①分光光度法：取本品1片，研细，分次加水少量，搅拌，滤过，滤液移置100ml量瓶中，并加水至刻度，取溶液2ml，加水至25ml。
在283±2nm的波长处有最大吸收。
②取本品1片，研细，进行微量升华，所得白色升华物，加新制的1％香草醛的硫酸溶液1滴，液滴边缘渐湿玫瑰红色。
（3）思考题试述①②法的化学定性原理。
2、银黄口服液（1）本品为金银花提取物、黄芩提取物经加工制成的口服液。
（2）鉴别方法①取本品1ml，加5％硝酸钠溶液与10％硝酸铝溶液各0.3ml，生成黄色沉淀，再加5％氢氧化钠溶液使成碱性，沉淀即溶解，溶液显棕红色。
②取本品0.1ml，加水10ml，摇匀，取溶液2ml，加5％二氯氧化锆溶液1～2滴，溶液显黄色，再加盐酸1～2滴，黄色不褪。
（3）思考题试述①②法的化学定性原理。
实验二矿物药石膏与玄明粉中重金属的检查一、目的要求1.掌握重金属检查的方法与原理。
2.熟悉目视比色法的操作与判断。
二、基本原理目视比色法是以肉眼直接观察比较样品溶液与标准品溶液的颜色深浅，判断样品所含杂质是否超出规定限度。
重金属在实验条件下都能与硫代乙酰胺或硫化钠反应显色，生成黑色硫化物沉淀，标准溶液常以Pb2+为代表，其原理为：在酸性溶液中CH3CSNH2 + H2O→CH3CONH2 + H2S↑Pb2+ + H2S→pbS↓(黑色)在碱性溶液中Pb2+ + Na2S→pbS↓(黑色)+ 2Na+三、仪器与试药1.电炉、25mL纳氏比色管及比色管架。
2.万分之一分析天平。
3.量瓶、刻度吸管、烧杯、锥形瓶、量筒等。
4.其他试剂均为AR级。
5.石膏、玄明粉(市售品)。
四、操作步骤1.石膏重金属检查取样品16g，加冰醋酸4mL与水96mL,煮沸10分钟，放冷，滤过，用水洗涤并定容至100mL。
取25 mL纳氏比色管2支，甲管中加标准铅溶液2 mL与醋酸盐缓冲液(pH=3.5) 2 mL后加水使成25 mL。
高效液相色谱法同时测定元胡止痛片中欧前胡素＼延胡索乙素与异欧
高效液相色谱法同时测定元胡止痛片中欧前胡素＼延胡索乙素与异欧前胡素的含量目的:建立元胡止痛片中欧前胡素、延胡索乙素与异欧前胡素的HPLC含量测定方法。
方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(三乙胺调pH值至 6.5)(61∶39);检测波长:280 nm;流速:1.0 ml/min。
结果:欧前胡素在0.047 4～0.284 4 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9);延胡索乙素在0.020 5～0.123 0 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8),异欧前胡素在0.075 0～0.450 0 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=1.000 0),平均回收率分别为98.6%、97.5%、96.8%。
结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于元胡止痛片的质量控制。
[Abstract] Objective: To establish a method for the content determination of imperatorin, tetrahydropalmatine and isoimperatorin in Yuanhu Zhitong Tablets by HPLC. Methods: The Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm, 5 μm) column was used. The mobile phases consisted of methanol and phosphatic liquor Solution(triethylamine ajusted to pH=6.5) (61∶39), the flow rate was 1.0 ml/min and the detection wavelength was at 280 nm. Results: The linear ranges of imperatorin was at 0.047 4-0.284 4 μg (r=0.999 9), the linear ranges of tetrahydropalmatine was at 0.020 5-0.123 0 μg (r=0.999 8), the linear ranges of isoimperatorin w as at 0.075 0-0.450 0 μg (r=1.000 0), the average recoveries were 98.6%, 97.5% and 96.8%, respectively. Conclusion: The method is fast, reliable, accurate and can be used in the quality control of Yuanhu Zhitong Tablets.[Key words] HPLC; Yuanhu Zhitong Tablets; Imperatorin; Tetrahydropalmatine; Isoimperatorin; Content determination元胡止痛片为《中国药典》2005年版一部品种,由延胡索(醋制)与白芷两味中药组成,具有理气、活血、止痛的功效。
HPLC法同时测定复方元胡止痛片中6种成分
HPLC法同时测定复方元胡止痛片中6种成分 窦增花;杜连平 【期刊名称】《中成药》 【年(卷),期】2017(039)002 【摘 要】目的 建立HPLC法同时测定复方元胡止痛片(延胡索、香附、川楝子、徐长卿)中6种成分的含有量.方法 该药物70％乙醇提取液的分析采用依利特C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以[甲醇-乙腈(1∶1)]m.1％冰醋酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.2 mL/min;检测波长280 nm(原阿片碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、紫堇碱、四氢小檗碱)和242 nm(α-香附酮).结果 原阿片碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、紫堇碱、四氢小檗碱、α-香附酮分别在2.15 ～41.00 μg/mL (r=0.999 9)、2.74 ～ 54.80 μg/mL(r=0.999 8)、3.36～67.20 μg/mL(r=0.999 6)、2.67～53.40 μg/mL(r=0.999 5)、1.99～39.80 μg/mL(r=0.999 7)、5.13～102.60 μg/mL(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD)分别为97.98％ (1.13％)、99.12％ (1.58％)、98.33％(0.83％)、99.05％ (1.72％)、97.83％ (1.42％)、98.64％ (0.70％).结论 该方法准确可靠,专属性强,可用于复方元胡止痛片的质量控制.
【总页数】4页(P312-315) 【作 者】窦增花;杜连平 【作者单位】青海省第四人民医院药械科,青海西宁810000;青海省藏医药研究所,青海西宁810003
【正文语种】中 文 【中图分类】R927.2 【相关文献】 1.HPLC法同时测定复方金银花颗粒中10种成分的含量 [J], 何悦;王四旺;肖会敏 2.HPLC法测定复方感冒灵流膏中7种成分的含量 [J], 李柯; 陈丹; 李军; 侯茜; 戚建中; 李若存 3.HPLC法同时测定复方三维右旋泛酸钙糖浆中药流浸膏中10种成分的含量 [J], 喻喜华 4.用HPLC法同时测定自制复方特比萘酚软膏中3个主药成分的含量 [J], 严佳;宋洪涛;周欣 5.HPLC法同时测定复方黄藤洗液中3个有效成分及2种防腐剂的含量 [J], 黄慧;孙煜;何虹;卢日刚
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分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量
目的 采用分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量，确定最佳
的提取及测定方法。方法 用溴甲酚绿与生物碱结合成有机络合物，以定量的有
机溶剂提取，用分光光度法在波长413 nm处测定。结果 平均回收率为100.9%，
RSD为0.53%。结论 本方法准确、可靠、重复性好，可作为元胡止痛片的质量
控制标准。
[Abstract] Objective Determine the content of total corydalis alkaloid by
spectrophotometry in Yuanhuzhitong tablet， Identify the optimal extraction and
determination. Methods Use bromocresol green combined with alkaloids into organic
complex，extraction with a certain amount of organic solvent, measured at a
wavelength of 413nm by spectrophotometry.Results Average recovery was 100.9%,
RSD 0.53%. Conclusion This method is accurate， reliable， reproducible and can be
used as quality control standards of Yuan hu zhi tong Tablet.
[Key words] Yuanhuzhitong tablet; Total Corydalis Alkaloid; Spectrophotometry
元胡止痛片由延胡索与白芷两味药材组成，主治由气滞血瘀引起的胃痛、胁
痛、头痛及痛经，效果确切。药理实验证明，延胡索中所含的生物碱类物质为主
要的镇痛成分。处方中所用延胡索多经过醋制，因为游离的生物碱较难溶于水，
经醋制后生成醋酸盐而易溶于水。本研究通过分光光度法测定元胡止痛片中总生
物碱含量可有效控制元胡止痛片生产投料，确保药品质量。
1仪器与试药
梅特勒-托利多XS-43；TU-1800SPC紫外可见光分光光度计，SBC-100超声
波处理器（济宁市超声波仪器厂），所用试剂均为分析纯。元胡止痛片（市售品）；
延胡索乙素（中国药品生物制品检定所，批号：110726-200610）。
2方法与结果
2.1供试品溶液制备
取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取约1 g，精密称定，
用石油醚（60～90℃）脱脂1 h。取药渣，挥干溶剂后，加1.5%盐酸溶液50 mL，
超声处理30 min，滤过，取滤液2 mL，置于分液漏斗中，加醋酸-醋酸钠缓冲液
（pH=5.2）20 mL，加溴甲酚绿显色剂2.0 mL，用氯仿15 mL萃取，待静置分层
后，分取氯仿层作为供试品溶液。
2.2阴性供试品溶液制备
精密称取白芷细粉0.5 g，按供试品溶液制备方法制得阴性供试品溶液。
2.3对照品溶液制备
精密称取延胡索乙素对照品适量，加1.5%盐酸溶液溶解，配制成每1毫升
含0.234 mg的溶液。
2.4线性关系考察
精密吸取对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL，分别置于分液漏斗
中，加醋酸-醋酸钠缓冲液（pH=5.2）20 mL，加溴甲酚绿显色剂2.0 mL，用三
氯甲烷15 mL萃取，待静置分层后，分取三氯甲烷层，以三氯甲烷为空白，于
413 nm测定吸光度。以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，
回归方程为A=2.612 9C+0.001 952（r=0.999 7），线性范围为0～0.234 mg。结果
在线性范围内的对照品浓度与吸收度呈良好线性关系。
2.5精密度试验
对同一供试品（批号：070801），按照供试品的提取方法操作，连续测定6
次，测得吸光度值为0.553、0.553、0.553、0.552、0.552、0.552，RSD为0.10%
（n=6），表明该方法精密度良好。
2.6重复性试验
取同一供试品5份，每份约1 g，分别进行测定，结果平均含量为17.37 mg/
片，RSD为0.13%（n=5）。
2.7稳定性试验
取供试品溶液，在室温下放置不同时间（h），分别在0、0.5、1.0、2.0、4.0、
6.0定吸光度，观察放置时间对吸光度的影响。测定结果（A）分别为0.241、0.241、
0.242、0.243、0.243、0.245，RSD为0.63%（n=6），说明萃取液在6 h内吸光度
基本无变化。
2.8准确度测定
采用加样回收法，取已知含量的供试品（批号：071002），分别加入一定量
对照品，按上述方法测定，结果平均回收率为100.96%，RSD为0.53%。
表1 回收率试验结果
取样量
（mg） 样品含量（mg） 加入量（mg） 测得总量
（mg） 回收率
（%） 平均回收率（%） RSD（%）
511.2 4.348 2 2.512 5 6.897 5 100.536 4 100.96
0.53
504.8 4.861 9 2.512 5 7.452 1 101.053 6
521.9 4.860 4 2.512 5 7.492 7 101.624 9
519.2 5.001 7 2.512 5 7.610 4 101.280 2
505.4 4.894 7 2.512 5 7.431 5 100.328 1
2.9样品测定
取不同批次样品，按上述方法进行测定，计算样品中延胡索乙素的含量，结
果见表2。
表2 样品含量测定结果（n=2）
批号 070901 060920 080201 070818 090101 080401
含量（mg/片） 11.74 6.96 20.61 13.02 12.64 7.31
3讨论
3.1提取方法的选择
取供试品及阴性供试品各1 g，分别以石油醚（60～90℃）与乙醚脱脂，弃
去石油醚，取药渣， 结果表明以石油醚（60～90℃）脱脂可以去除白芷对试验
的干扰。
3.2不同酸度的影响
采用不同浓度（0.5%、1%、1.5%、2%）的盐酸溶液提取，对提取结果进行
比较，结果1.5%盐酸溶液提取效果更好。
3.3提取时间考察
取同一批号供试品（批号：080304）5份，每份约1 g，精密称定，分别以
石油醚（60～90℃）脱脂1 h，弃去石油醚，取药渣，挥干溶剂， 分别精密加入
1.5%盐酸溶液50 mL，再分别超声处理（功率300 W，频率40 kHz）10、30、60、
90、120 min，结果以超声处理30 min生物碱已经能够提取完全。
3.4显色剂的选择
参考有关文献[1-3]，选用溴甲酚绿显色剂与甲基橙进行试验，结果表明溴甲
酚绿测得的结果更稳定，采用溴甲酚绿为显色剂。
3.5缓冲溶液酸度的考察
分别取pH为5.6、5.4、5.2、5.0、4.8、4.2的醋酸-醋酸钠缓冲溶液进行试验，
结果证明pH=5.2的缓冲液更利于溴甲酚绿与生物碱结合成有机络合物。
3.6测定波长的确定
精密吸取对照品溶液1 mL，阴性供试品溶液和供试品溶液各2 mL，置分液
漏斗中，加醋酸-醋酸钠缓冲液（pH=5.2）20 mL和溴甲酚绿显色剂2 mL，用氯
仿15 mL萃取，待静置分层后，分取氯仿层，于255～550 nm之间进行波长扫
描，结果表明对照品溶液、供试品溶液在413 nm处吸收最强，而阴性供试品溶
液在此处无吸收，最终选定413 nm为检测波长。
采用本方法测定元胡止痛片中总生物碱含量，操作简便，精密度及回收试验
结果良好，阴性供试品对结果无干扰，且不同厂家生产的元胡止痛片中总生物碱
含量差异明显。因此，增加元胡止痛片中总生物碱含量测定方法可有效控制元胡
止痛片的生产投料。
[参考文献]
[1] 刘喜纲，刘翠哲，常金花. 应用酸性染料比色法测定总生物碱的含量[J].
中国药房，2007，18（11）：875.
[2] 曾常青，罗北亮. 酸性染料比色法测定钩藤的总生物碱含量[J].中药材，
2007，30（8）：1021-1024.
[3] 赵骏，齐喜红. 生物碱提取方法研究概述[J].天津中医学院学报，2003，
22（4）：43-44.