酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量 (1)
酸性染料比色法测定白芥子中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定白芥子中总生物碱的含量吕伟;田实民【摘要】目的:建立自芥子中总生物碱含量测定的方法.方法:采用酸性染料比色法测定白芥子中总生物碱含量.结果:酸性染料比色法显色的条件为pH 4.2的缓冲液10 mL,0.04%的溴甲酚绿溶液2.0 mL,三氯甲烷萃取4次,每次5 mL,检测波长332 nm.芥子碱硫氰酸盐在1.696～16.960μg·mL-1与吸光度呈良好的线性关系,平均回收率99.75%,RSD=1.16%(n=6).结论:该方法灵敏度高,准确性,重现性好.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2011(013)004【总页数】3页(P18-20)【关键词】酸性染料比色法;白芥子;总生物碱;含量测定【作者】吕伟;田实民【作者单位】枣庄市药品检验所,山东,枣庄,277102;枣庄市药品检验所,山东,枣庄,277102【正文语种】中文白芥子为十字花科植物白芥Sinapis alba L.的干燥成熟种子，具有温肺豁痰利气、散结通络止痛的功能[1]。
化学成分与药理研究表明，以芥子碱为代表的生物碱类成分是其有效部位之一[2-4]，《中国药典》采用HPLC对芥子碱含量进行控制[1]。
本文首次采用酸性染料比色法，以主要有效成分芥子碱硫氰酸盐为对照品，建立白芥子中总生物碱的含量测定方法，为进一步全面控制白芥子药材质量提供实验依据。
UV-2401PC紫外-可见分光光度计(日本岛津)，超声波药品处理机(济宁金百特电子有限公司)。
芥子碱硫氰酸盐对照品(中国药品生物制品检定所，批号111702-200501)。
所用试剂均为分析纯。
白芥子样品，购自不同产地，经山东中医药大学石俊英教授鉴定为十字花科植物白芥Sinapis alba L.的种子。
2.1 对照品贮备液制备精密称取芥子碱硫氰酸盐对照品10.6 mg，用pH 4.2的醋酸-醋酸钠缓冲液溶解并定容至25 mL，作为芥子碱硫氰酸盐对照品贮备液(浓度424 μg·mL-1)。
酸性染料比色法测定巴豆中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定巴豆中总生物碱的含量曾宝;李生梅;古俊辉;唐君苹;林吉;赖小平【摘要】目的建立巴豆中总生物碱含量的测定方法,对不同产地的巴豆总生物碱质量分数进行比较研究.方法以木兰花碱作为对照品,采用酸性染料比色法测定巴豆中总生物碱质量分数.结果酸性染料法的显色条件为加pH 6.0缓冲液至8 mL,加溴麝香草酚蓝3.5 mL,振摇3min,静置40 min,三氯甲烷8mL萃取,测定波长为420 nm,在0.024 6～0.147 3 mg范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率99.0％,RSD为2.75％.结论本含量测定方法操作简单,灵敏度高,准确性、重复性好,可用于巴豆中总生物碱的含量测定.%Objective To establish a method for the assay of the total alkaloids in Croton tiglium, and investigate the contents from different origins. Methods Acidic dye colorimetry was used for the determination of total alkaloids in Croton tiglium with magnoflorine as reference substance. Results Acid dye colorimetric conditions were as follows; pH6.0 buffer to 8.0 mL, adding 3. 5 mL bromothymol blue, extracting with 8 mL chloroform, shaking out for 3 minutes, stewing for at least 40 min, then determining at the wavelength of 420 nm. The concentration of magnoflorine showed good linearity within the range of 0. 024 6-0. 147 3 mg, r = 0. 999 5, and the average recovery ratio was 99. 0% with RSD of 2. 75%. Conclusion This method is simple, highly sensitive, accurate and reproducible, which can be used for determination of the total alkaloids in Croton tiglium.【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2012(028)002【总页数】3页(P170-172)【关键词】酸性染料比色法;巴豆;木兰花碱;总生物碱【作者】曾宝;李生梅;古俊辉;唐君苹;林吉;赖小平【作者单位】广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808【正文语种】中文【中图分类】R927.2巴豆为大戟科植物巴豆(Croton tiglium L.)的干燥成熟种子，主产于我国西南及福建、湖北、湖南、广东、广西等地。
生物碱
2．极性溶剂 极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸性甲 醇、乙醇、酸水（常用0.1%-1%盐酸、硫酸、乙酸 、酒石酸等）以及缓冲液等进行提取，这方法较 简便，但提出的杂质较多，需进一步净化。 3．混合溶剂
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生物碱的提取方法，常用的有冷浸、渗漉、 超声波振荡、索氏提取、热回流提取。 在含量测定中常用的提取方法为超声波振荡提 取，大部分待测的有效成分能够被提出。
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3）比色法测定总碱含量是最重要的方法之一，它是 根据生物碱的颜色、官能团与特定试剂发生反应产生的 颜色，或生物碱与酸性染料在一定条件所成的复合物颜 色等，按比色法完成总碱的测定的。 4）大多数生物碱分子结构中含有双键，在紫外区有吸 收，因此，可按紫外分光光度法于特定波长处测定吸收 系数相近的总碱含量。同理，有荧光的生物碱也可用荧 光分光光度法测定。 以上均属测定总碱的好方法，但测定指定成分的含量， 就有一定的困难。
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5．沉淀反应
生物碱在酸性水溶液或酸性稀醇（＜50%）中能与生物 碱沉淀试剂生成难溶性沉淀。 沉淀反应的阳性结果，往往并不可靠，但阴性反应却 可以证实其不含生物碱。检查时常需用3种以上灵敏的沉 淀试剂对照观察。 生物碱沉淀一般都是试剂分子的阴离子，与生物碱阳 离子形成难溶络盐而产生沉淀（沉淀剂多为重金属盐类 或分子量较大的复盐）。 常用的生物碱试剂有：碘-碘化钾（Wagner试剂）、碘 化铋钾（Dragendorff试剂）、碘化汞钾（Mayer试剂）、 硅钨酸（Bertrand试剂）等。
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生物碱类型
序号 类型 1 吡咯啶衍生物类 2 吡啶衍生物类 3 喹啉衍生物类 4 异喹啉衍生物类 5 吲哚衍生物类 6 咪唑衍生物类 7 喹唑酮衍生物类 8 嘌呤衍生物类 9 甾体生物碱类 10 莨菪烷衍生物类 11 无环生物碱类 12 其它
酸性染料比色法测定乌头属不同药材中乌头生物碱含量
酸性染料比色法测定乌头属不同药材中乌头生物碱含量
张敏敏;蔡晓丹;李耿;肖日平;阮永队;马春玲;陈长青;赖小平
【期刊名称】《中医药导报》
【年(卷),期】2012(18)8
【摘要】目的:测定毒性中药附子、川乌、草乌、雪上一枝蒿的乌头生物碱含量,对这4种药材的临床用量进行控制。
方法:用酸性染料比色法,测定制附子、川乌、草乌中雪上一枝蒿的乌头生物碱含量。
结果:附子中生物碱含量为0.2403 mg/g,川乌为1.0412 mg/g,草乌为2.1149 mg/g,雪上一枝蒿为0.6702 mg/g。
结论:本实验中建立的酸性染料比色法测定乌头生物碱含量,可作为评价毒性药材质量的根据。
【总页数】3页(P78-79)
【关键词】酸性染料比色法;乌头属;生物碱;附子;川乌;草乌;雪上一枝蒿
【作者】张敏敏;蔡晓丹;李耿;肖日平;阮永队;马春玲;陈长青;赖小平
【作者单位】广州中医药大学;塘厦医院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.酸性染料比色法测定呼和嘎日迪-9总乌头碱含量 [J], 萨仁格日乐;陈红梅
2.酸性染料比色法测定川乌、草乌中总乌头生物碱的含量 [J], 李云霞;孙照;郭艳玲
3.液相色谱/质谱/质谱联用法测定乌头属药材及中成药中乌头类生物硷含量 [J], 王兆基;何绍基;徐树棋
4.酸性染料比色法测定痛血康胶囊总乌头碱含量 [J], 陈美川
5.酸性染料比色法测定痹痛消膏中乌头生物碱的含量 [J], 蔡大可;李耿;彭绍忠;何耀慧;林忠泽;古挺威;苏子仁
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生物碱类药物分析 酸性染料比色法
02
影响因素
1、最佳PH值的选择
能使有机碱全部以盐的形式存在，酸性 染料能够解离成离子，以便它们定量地结合成 离子对而转溶于有机相，且又能将剩余的染料 完全保留在水相。
02
影响因素
2、酸性染料的选择
溴麝香草酚蓝
甲基橙
溴甲酚绿
增加染料的浓度可提高测定灵敏度
02
影响因素
3 有机溶剂的选择
常用的有机溶剂有三 氯甲烷、二氯甲烷、 二氯乙烷、苯、甲苯、 四氯化碳等。
4 水分的影响
测定时用脱水剂或干燥 滤纸过滤
5 有色杂质的影响
测定时缓冲液与酸性染料 混合液先用有机溶剂提取
03
小结
01
酸性染料比色法的原理
02
常用的酸性染料
03
影响因素
04
思考题
常用的酸性染料有哪些？
酸性染料比色法
目录
01 02 03
基本原理 常用酸性染料
影响因素
01
基本原理
BH+ + In
[BH+·In-]
水相 有机相
[BH性染料
磺酞类指示剂
溴麝香草酚蓝(BTB)
pH 6.0-7.6（黄-蓝）
溴甲酚绿(BCG)
pH 3.6-5.2（黄-蓝）
溴酚蓝(BPB)
pH 3.8-4.6（黄-紫）
延胡索2种炮制品煎液中的生物碱含量测定
安徽农业科学 ,Journal of Anhui Agri. Sci. 2009 ,37 (15) :6984 - 6985 责任编辑 熊章琴 责任校对 汪伟
延胡索 2 种炮制品煎液中的生物碱含量测定
梁晓华 , 徐成东 3 , 张志星 (楚雄师范学院化学与生命科学系 ,云南楚雄 675000)
(3) 醋制延胡索。先将延胡索洗净后水浸润一下 ,直至 透心为止。放入锅中炒热 ,按质量比延胡索∶醋为 10∶1 拌炒 , 至醋干后取出 ,冷却后用粉碎机粉碎备用。 1. 1. 2 仪器与试剂。PHS23C 型数字酸度计 (上海鹏顺科学 仪器有限公司) ;DFY2500 型 500 g 摇摆式高速中药粉碎机(温 岭市林大机械有限公司) ; EL204 型电子天平 (梅特勒2托利多 仪器(上海) 有限公司) 。试验中所用试剂硫酸、醋酸、氨水、 氯仿均为分析纯 。 1. 2 方法 1. 2. 1 样品液的制备[2 - 3] 。精密称取延胡索生品 、醋制延胡 索和米泔水制延胡索粉各 10 g ,分别置于 500 ml 烧杯中 ,加 水 200、100 ml 煎煮 2 次 ,每次微沸 20 min ,用脱脂棉过滤 ,加 氨水调 pH 值至 10 以上 ,移入 250 ml 分液漏斗中 ,用氯仿萃 取至无生物碱反应 ,合并萃取液 ,加 20 ml 蒸馏水洗涤 ,再用 5 ml 氯仿洗涤水层 ,合并氯仿。加无水硫酸钠 3 g 脱水后 ,回 收氯仿至小体积 ,转入 10 ml 容量瓶中 ,加氯仿至刻度 ,备用。 1. 2. 2 总生物碱含量的测定。 1. 2. 2. 1 酸碱滴定法。精密吸取上述样品液各 5 ml ,分别置 于 100 ml 锥形瓶中水浴挥去氯仿 ,加氯仿 2 ml 溶解残渣 ,加 0. 0l mol/ L 硫酸 20 ml ,水浴挥去氯仿 ,加甲基红 - 溴甲酚绿 指示剂 2 滴 ,用 0. 02 mol/ L 氢氧化钠液滴定 ,终点由红色变 为绿色 。
分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量
分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量刘琳琳;李正国;刘丽芳【摘要】目的采用分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量,确定最佳的提取及测定方法.方法用溴甲酚绿与生物碱结合成有机络合物,以定量的有机溶剂提取,用分光光度法在波长413 nm 处测定.结果平均回收率为100.9%,RSD 为0.53%.结论本方法准确、可靠、重复性好,可作为元胡止痛片的质量控制标准.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2012(002)003【总页数】2页(P141-142)【关键词】元胡止痛片;延胡索总生物碱;分光光度法【作者】刘琳琳;李正国;刘丽芳【作者单位】中国药科大学中药分析教研室,江苏,南京,211198;山东省济宁市药品检验所,山东,济宁,272025;山东省济宁市药品检验所,山东,济宁,272025;中国药科大学中药分析教研室,江苏,南京,211198【正文语种】中文【中图分类】R284元胡止痛片由延胡索与白芷两味药材组成，主治由气滞血瘀引起的胃痛、胁痛、头痛及痛经，效果确切。
药理实验证明，延胡索中所含的生物碱类物质为主要的镇痛成分。
处方中所用延胡索多经过醋制，因为游离的生物碱较难溶于水，经醋制后生成醋酸盐而易溶于水。
本研究通过分光光度法测定元胡止痛片中总生物碱含量可有效控制元胡止痛片生产投料，确保药品质量。
梅特勒-托利多XS-43；TU-1800SPC紫外可见光分光光度计，SBC-100超声波处理器（济宁市超声波仪器厂），所用试剂均为分析纯。
元胡止痛片（市售品）；延胡索乙素（中国药品生物制品检定所，批号：110726-200610）。
取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取约1 g，精密称定，用石油醚（60～90℃）脱脂1 h。
取药渣，挥干溶剂后，加1.5%盐酸溶液50 mL，超声处理30 min，滤过，取滤液2 mL，置于分液漏斗中，加醋酸-醋酸钠缓冲液（pH=5.2）20 mL，加溴甲酚绿显色剂2.0 mL，用氯仿15 mL萃取，待静置分层后，分取氯仿层作为供试品溶液。
中药制剂分析模拟试题
模拟试卷(一)一、选择题(一)A型题(每题的5个备选答案中，只有一个最佳答案)(20分)1.中药制剂分析的任务是A.对中药制剂的原料进行质量分析B.对中药制剂的半成品进行质量分析C.对中药制剂的成品进行质量分析D.对中药制剂的各个环节进行质量分析E.对中药制剂的体内代谢过程进行质量检测2.中药制剂化学成分的多样性是指A.含有多种类型的有机物质B.含有多种类型的无机元素C.含有多种中药材D.含有多种类型的有机和无机化合物E.含有多种的同系化合物3.在牛黄解毒片的显微化学反应中，取本品研细，加乙醇10mL,温热10分钟，滤过，取滤液5mL，加镁粉少量与盐酸0.5mL，加热，即显红色，为鉴别方中哪味药材的反应。
A.大黄B.牛黄C.黄芩D.冰片E.雄黄4.杂质限量的表示方法常用A.ppmB.百万分之几C.μgD.mgE.ppb5.砷盐限量检查中，醋酸铅棉花的作用是A.将As5+还原为As3+B.过滤空气C.除H2SD.抑制锑化氢的产生E.除AsH36.农药残留量分析中最常用的提取溶剂为A.丙酮B.甲醇C.乙醇D.正丁醇E.水7.样品粉碎时，不正确的操作是A.样品不宜粉碎得过细B.尽量避免粉碎过程中设备玷污样品C.防止粉尘飞散D.防止挥发性成分损失E.粉碎颗粒不必全部通过筛孔，只要过筛的样品够用即可8.回收率试验是在已知被测物含量(A)的试样中加入一定量(B)的被测物对照品进行测定，得总量(C)，则A.回收率(%)=(C-B)/A×100%B.回收率(%)=(C-A)/B×100%C.回收率(%)=B/(C-A)×100%D.回收率(%)=A/(C-B)×100%E.回收率(%)=(A+B)/C×100%9.薄层扫描定量时均采用随行标准法，即标准溶液与供试品溶液交叉点在同一块薄层板上，这是为了A.防止边缘效应B.消除点样量不准的影响C.克服薄层板厚薄不均匀而带来的影响D.消除展开剂挥发的影响E.调整点样量10.分析中药制剂中生物碱成分常用于纯化样品的担体是A.中性氧化铝B.凝胶C.SiO2D.聚酰胺E.硅藻土11.用C18柱进行生物碱HPLC测定时，为克服游离硅醇基影响可采用A.调整流速B.改变流动相极性C.调整检测波长D.调整进样量E.流动相中加入隐蔽试剂12.可从水提液中提取皂苷的溶剂是A.氯仿B.苯C.甲醇D.乙醇E.正丁醇13.木脂素成分可用紫外光检测是因为A.分子量较小B.亲脂性较小C.结构中有芳香核D.结构中有亚甲二氧基E.本身有颜色14.对麝香的含量测定下列说法不正确者A.主要用色谱法B.色谱法都是用麝香酮为对照品C.气相色谱法是以麝香酮为对照品D.高效薄层扫描可测多种化合物E.高效液相色谱可测麝香中多种甾体成分15.合剂与口服液最常用的净化方法为A.液—固萃取B.液—液萃取C.蒸馏法D.沉淀法E.升华法16. 分析栓剂时除去基质的方法下列哪项是错误的?A.用硅藻土吸附B.亲水性基质用水提取C.油脂性基质用水提取D.油脂性基质用熔融冰浴凝固法E.亲水性基质用有机溶剂提取17.唾液药浓一般比血浆药浓A.高B.低C.相等D.不一定E.以上均不是18.在含量测定方法建立过程中，以回收率估计方法的A.重复性B.线性C.可靠性D.选择性E.灵敏度19.含量测定限度低于多少，可增加一个浸出物测定A.百分之一B.千分之一C.万分之一D.十万分之一E.均需20. 对于HRGC的主要色谱条件进行选择时，下列说法中不正确的是A.柱内径和容量因子增加均使柱效降低B.柱内径小的开管柱，载气的最佳线速大，更适于快速分析C.开管柱内径小，可用高载气线速度，使用热导检测器时，可减小系统的最小检测限D.柱内径的选择要兼顾柱效、分析速度和柱容量E.柱温的选择也要多方面兼顾，而且开管柱十分有利于作程序升温气相色谱(二)B型题(备选答案在前，试题在后，每组若干题，每组题均对应同一组备选答案，每题只有一个正确答案。
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酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量
一、目的要求
掌握酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱含量的原理和方法。
二、基本原理
在适当的介质中，生物碱（B ）可与氢离子（H +）结合成阳离子（BH +），一些酸性染料，如溴百里酚蓝、溴酚蓝、溴甲酚紫或溴甲酚绿等，在此条件下可解离成阴离子（In -）。
上述阳离子与阴离子定量地结合成有色配位物（BH +In -）离子对，可以定量地溶于某些有机溶剂，在一定波长处测定该溶液有色离子对的吸光度，即可计算出生物碱含量。
++−→←+BH H B
-++−→←In H HIn
有机相水相)()(__In BH In BH In BH ⋅−→←⋅−→←+++-+
三、实验方法
对照品溶液的配制 取延胡索乙素对照品约2mg ，精密称定，置25ml 量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的配制 取延胡索粉末约0.5g ，精密称定，置50ml 具塞锥形瓶中，加少量氨水湿润（约20滴），密塞放置15分钟，精密加乙醚-三氯甲烷-甲醇（25：8：2.5）混合溶剂25ml ，轻轻摇匀，称重，冷浸一周，称重，补足重量，滤过，精密吸取续滤液10ml ，置25ml 具塞锥形瓶中，水浴加热挥干溶剂，精密加入三氯甲烷10ml ，使完全溶解，摇匀，即得。
测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液1ml ，分别置分液漏斗中，各精密加三氯甲烷9ml ，再分别加溴甲酚绿溶液5ml ，振摇3分钟后，静置使分层；同法制备空白溶液。
分取上述三种溶液的三氯甲烷液，在410nm 的波长处测定吸光度，按下式计算，即得。
%100%)
1(25(%)⨯-⨯⨯=水分含量样对对样W C A A
式中 A 样与A 对分别为供试品溶液与对照品溶液吸光度；C 对为对照品溶液中延胡索浓
度，g/ml ；W 样为取样量，g 。
四、思考题
1．酸性染料比色法的影响因素有哪些？
2．本法中使用的溶剂均有挥发性，操作中应注意哪些事项？。