食品中转基因成分检测
食品中转基因含量检测与标记方法
食品中转基因含量检测与标记方法随着人们对食品安全和健康的关注增加，对转基因食品的检测与标记方法也变得尤为重要。
转基因食品是指通过基因工程技术改变了食品中原有基因的组成，使其获得某种特定性状或产生特定功能的食品。
对转基因食品的检测与标记，对保障公众的选择权、监督食品质量与安全具有重要作用。
一、转基因食品检测方法1.1 PCR法（聚合酶链式反应法）PCR法是一种常见的转基因食品检测方法，其基本原理是通过特殊引物和DNA聚合酶的作用，使得基因的特定片段以指数级数繁殖。
该技术可以检测食品中转基因成分的存在与否，鉴定出转基因物质及其比例。
1.2 基于ELISA法ELISA（酶联免疫吸附法）是一种常用的生物化学分析方法，通过抗体与抗原的特异性结合，定量或定性测定目标物质。
对于转基因食品的检测，可以采用基于ELISA法的检测方法，利用特异性抗体与目标物质结合，通过比色或荧光等方式检测出转基因成分的存在。
1.3 残留DNA定性与定量检测传统的分子生物学方法可以通过提取食品中的DNA，利用PCR或实时荧光定量PCR技术进行定性与定量分析。
该方法的优势在于高灵敏度、高特异性和高准确性，可以检测低浓度的转基因成分。
二、转基因食品标记方法2.1 成分标记转基因食品标记的基本原则是明确食品中是否包含转基因成分，并在食品标签上进行清晰而准确的标注。
对于转基因农产品，标签上应标明是否“含转基因成分”。
对于转基因食品的配料，应清楚地标注其转基因成分含量。
这种方法通过提供相关信息，使消费者能够有意识地选择是否购买转基因食品。
2.2 标准化标志一些国家和地区通过制定相应的标准，规定食品标识中的转基因食品的标志。
例如，欧盟标准规定在食品包装上必须使用特定的转基因标签，以明确表示食品是否包含转基因成分。
2.3 二维码标记随着科技的发展，一些企业采用二维码标记的方式来提供更丰富的信息。
消费者可以通过手机扫描二维码，获取有关该产品的详细信息，包括是否含有转基因成分、遵从的标准、生产过程等。
食品中转基因成分检测与控制技术
食品中转基因成分检测与控制技术食品安全一直是人们关注的焦点问题之一，而转基因食品作为近年来引发争议较多的一项科技成果，更是备受关注。
为了确保食品安全，各国纷纷制定了一系列的检测与控制技术，其中之一就是食品中转基因成分的检测与控制技术。
本文将以该技术为主题，探讨其原理和应用。
一、转基因食品及其风险转基因食品是通过改变植物或动物的基因组，将外源基因导入目标物种，使其具有特定性状或功能的食品。
尽管转基因食品在农业生产和食品供应上带来了许多便利和效益，但也引发了一系列的争议和担忧。
首先，对转基因食品安全性的担忧是主要原因之一。
由于转基因食品的生产方式与传统食品不同，其中的外源基因可能会引起新的毒理学和食品过敏原问题，给消费者的健康带来潜在风险。
其次，转基因食品的不可追溯性也成为问题。
原材料的转基因成分未能准确标识，使得消费者难以辨别食物中是否存在转基因成分，从而影响了他们对食品的选择和信任。
二、食品中转基因成分检测技术为了解决转基因食品引发的安全性和不可追溯性问题，科学家们研发了一系列的食品中转基因成分检测技术。
这些技术可以对食品中的转基因成分进行定性和定量分析，从而确保食品的安全和可追溯性。
1. PCR技术PCR（聚合酶链式反应）是目前应用最广泛的转基因成分检测技术之一。
该技术通过复制和扩增DNA序列，使得转基因片段在样本中的含量变得可检测。
通过将特定引物与待测食品中DNA序列互补结合，PCR技术可以扩增特定的转基因片段，从而确认食品中是否含有转基因成分。
2. 基因芯片技术基因芯片技术是一种快速高通量的检测技术，可以同时监测大量基因的表达水平。
在转基因成分检测中，基因芯片技术可以通过对已知众多转基因片段进行检测，从而确定待测食品中是否存在这些转基因成分。
3. 下一代测序技术下一代测序技术是近年来发展起来的一种高通量测序方法，通过快速测序大量DNA片段，可以对食品样品中的转基因成分进行全面检测。
该技术不仅可以实现对已知转基因成分的定性和定量分析，还可以发现未知的转基因成分，提高检测的准确性和可靠性。
食品中转基因成分的检测方法与限量标准研究
食品中转基因成分的检测方法与限量标准研究引言：随着人们对食品安全的关注度不断提高，转基因食品备受争议。
为了保护消费者权益，监管部门一直致力于开发食品中转基因成分的检测方法，并制定相应的限量标准。
本文将对现有的检测方法及限量标准进行研究。
一、食品中转基因成分检测方法1. PCR检测方法PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的检测转基因成分的方法。
通过匹配转基因重要基因的DNA序列，PCR可以检测到极低浓度的转基因成分。
然而，由于PCR方法对样品的处理过程较为繁琐，且存在较高的假阳性率，因此在实际应用中需要进一步改进。
2. 实时荧光PCR检测方法实时荧光PCR是基于PCR技术的一种改进方法。
它可以实时监测PCR过程中的荧光信号，准确判断转基因成分的存在与否。
相比传统PCR方法，实时荧光PCR具有高灵敏度和高特异性的优势，然而其设备和试剂的成本较高，限制了其在实际应用中的推广。
3. 基因测序方法基因测序方法是一种直接检测转基因成分的手段。
通过对食品中所有DNA序列的测序，可以准确判断是否存在转基因成分。
基因测序方法在理论上能够提供最准确的结果，但由于其高昂的费用和时间成本，目前在大规模应用中还存在一定的困难。
二、食品中转基因成分的限量标准1. 限量标准的制定依据食品中转基因成分的限量标准制定依据包括食品安全评估、转基因成分检测方法的可行性和社会公众意见等。
在制定限量标准时，应综合考虑科学研究和实际情况，确保转基因食品不会对人体健康产生不良影响。
2. 不同国家的限量标准差异不同国家对转基因成分的限量标准存在一定的差异。
例如，欧盟规定，食品中转基因成分的含量超过0.9%时，必须标示出来。
而美国则没有明确的限量标准，而是采取了一种“合理衡量”的方式，需要食品生产者自行决定是否标识转基因成分。
3. 限量标准的争议与改进转基因食品的限量标准一直备受争议。
一方面，部分人认为限量标准过于宽松，难以真正保护消费者权益；另一方面，也有人认为限量标准过于严苛，对农业发展造成不利影响。
食品安全如何判断食品中的转基因成分与非转基因证明
食品安全如何判断食品中的转基因成分与非转基因证明在当今社会中，食品安全成为了人们关注的焦点之一。
人们越来越关注食品原材料的质量和安全性，特别是对于转基因食品这一争议性领域更是格外关注。
那么，我们如何准确判断食品中的转基因成分呢？有哪些方法和证明可以用来识别非转基因食品呢？本文将围绕这个问题展开讨论。
一、转基因食品的定义和背景转基因食品是指通过人为手段，将外源基因嵌入食品作物的基因组中，使得该作物获得新的特性或品质。
转基因技术自问世以来，一直备受争议。
有些人认为转基因食品对人体健康具有潜在风险，而另一些人则认为这是满足人类需求的一种科技进步。
二、食品中转基因成分的判断方法1. 成分检测方法目前主要的判断食品中是否存在转基因成分的方法之一是基于成分检测。
通过检测食品样本中的DNA或蛋白质等成分，可以判断其是否经过转基因技术改造。
常用的方法包括PCR（聚合酶链反应）和ELISA（酶联免疫吸附法）等。
2. 标签标识方法另一种常见的判断食品是否含有转基因成分的方法是通过标签或标识。
在一些国家和地区，生产商会在包装上明确标注“转基因食品”或“非转基因食品”，从而让消费者清楚地知道食品的成分。
然而，这并不是普遍存在的规定，因此，需要消费者自己进行调查和了解。
三、非转基因食品的证明方法1. 市场认证一些生产商会通过市场认证来证明其产品是非转基因食品。
他们将产品送至第三方机构进行检测和认证，获得相应的非转基因食品认证标识。
这种方法相对较为可靠，因为第三方机构会有一定的专业性和权威性。
2. 原材料供应链追溯追溯原材料供应链是另一种证明食品为非转基因的方法。
生产商可以向原材料供应商索要相关证明文件，包括供应商所提供的原材料来源以及该原材料的转基因状态。
通过追溯供应链，生产商可以清楚地掌握食品的转基因情况，从而确保其为非转基因食品。
四、食品安全管理的重要性不论是转基因还是非转基因食品，保障食品安全是至关重要的。
食品生产商和监管机构应该加强合作，建立和完善食品安全管理的制度和机制。
食品中的转基因成分检测技术
食品中的转基因成分检测技术随着科学技术的不断发展，转基因食品的出现引起了广泛关注。
作为一种新型食品，转基因食品是否安全成为了公众关注的焦点。
而食品中的转基因成分检测技术则成为了确保食品安全的重要手段。
本文将介绍食品中的转基因成分检测技术及其应用。
一、转基因食品的定义及特点转基因食品是通过人工手段将外源基因导入食品中的生物体，使其具有特定的性质。
转基因技术的出现给食品生产带来了许多优势，如提高产量、抗病虫害等。
然而，由于食品中的转基因成分可能对人体健康产生影响，因此转基因食品的检测成为了食品安全的重要环节。
二、食品中的转基因成分检测技术分类食品中的转基因成分检测技术主要分为两大类：基于DNA的检测技术和基于蛋白质的检测技术。
基于DNA的检测技术主要包括聚合酶链反应（PCR）技术、半定量PCR技术和实时定量PCR技术等。
这些技术可以通过扩增特定基因片段或序列来判断食品中是否存在转基因成分。
而基于蛋白质的检测技术主要包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）等。
这些技术可以通过检测特定蛋白质来判断食品中是否存在转基因成分。
三、食品中的转基因成分检测技术的应用食品中的转基因成分检测技术主要应用于以下几个方面：1.食品安全监管转基因食品作为一种新型食品，其安全性备受关注。
食品安全监管部门可以利用转基因成分检测技术对市场上的食品进行抽检，确保食品中的转基因成分符合规定的标准。
2.产品溯源转基因成分检测技术可以帮助生产企业实现对产品的溯源。
通过对原料和成品中的转基因成分进行检测，可以掌握产品生产过程中是否存在转基因成分，并追溯其来源，为企业的产品质量管理提供参考依据。
3.行业竞争力提升一些国家和地区对转基因食品有着不同的标准和要求。
通过转基因成分检测技术，食品企业可以对产品进行筛选，确保其符合市场要求，提升企业的竞争力。
四、食品中的转基因成分检测技术的挑战与展望尽管食品中的转基因成分检测技术存在许多优势，但也面临着一些挑战。
转基因食品PCR定性检测
评估方法
采用科学的方法和程序，结合国 际标准和国内实际情况，进行综 合评估。
04
转基因食品PCR定性检测的应用
在生产中的应用
原料筛选
在食品生产过程中，对原料进行转基因检测 ，确保原料不含有转基因成分，保证产品的 非转基因属性。
生产过程监控
在生产过程中对产品进行转基因检测，确保产品在 整个生产过程中不受到转基因成分的污染。
转基因食品PCR定性检测的方法
设计特异性引物
根据转基因食品中插入的特定基 因序列，设计特异性引物。
电泳分析
对扩增产物进行凝胶电泳分析， 观察是否有预期大小的DNA片段 出现。
01
02
提取DNA
从转基因食品样品中提取出基因 组DNA。
03
04
扩增反应
将提取的DNA与引物进行PCR扩 增反应。
检测过程中的注意事项
02
PCR定性检测技术概述
PCR技术原理
聚合酶链式反应（PCR）是一 种在体外快速、特异地扩增特 定DNA片段的分子生物学技术。
通过DNA双链复制，在短时 间内将DNA片段数量增加数 百万倍，以便于后续分析。
通常使用一对特定的引物，与 待扩增DNA片段两端的互补序 列结合，在DNA聚合酶的作用
下进行链式反应。
确保样品的代表性
取样应具有代表性，能够反映整体样品的真 实情况。
避免交叉污染
设计的引物应具有高特异性，避免与非目标 序列发生非特异性结合。
引物特异性
在操作过程中，应严格遵守无菌操作原则， 避免交叉污染。
结果解读
对电泳结果进行准确解读，避免假阳性或假 阴性结果的出现。
03
转基因食品的标识与监管
转基因食品的标识规定
食品中转基因成分的检测与评估
食品中转基因成分的检测与评估随着科技的不断进步和人们对食品安全的关注不断增强，食品中转基因成分的检测与评估问题变得日益重要。
转基因技术是一种将外源基因导入食品作物中的技术，以改变其某些性状，提高产量、耐病虫害等。
然而，转基因食品的安全性和对人体健康的影响成为公众关注的焦点。
因此，食品中转基因成分的检测与评估是确保食品安全的重要环节。
食品中转基因成分的检测是为了了解食物中是否存在转基因成分以及其含量。
转基因成分的检测可以通过分子生物学技术和化学分析方法进行。
分子生物学技术可以检测转基因成分的特定DNA序列，常用的方法包括PCR和Southern blotting 等。
化学分析方法则可以检测转基因成分的特定蛋白质或其他化学物质。
这些方法的应用可以帮助监管部门和食品生产商确定食品中是否含有转基因成分，从而保障消费者的饮食安全。
食品中转基因成分的评估则是基于食品安全风险评估的原则进行的。
安全性评估是对转基因食品进行全面评估的过程，以确定其对人体健康的潜在风险。
评估包括转基因成分的遗传毒性、过敏原性和潜在生物活性等方面的研究。
通过动物试验和临床研究等方法，可以评估出转基因成分对人体健康的潜在危害。
此外，评估还需要考虑不同人群的敏感性和暴露程度等因素，以确定转基因食品的安全性。
食品中转基因成分的检测与评估在实践中面临着一些挑战。
首先，转基因成分的检测技术需要不断改进和完善，以提高准确性和敏感性。
其次，转基因食品的评估需要进行长期的临床研究，以获得更准确的结果。
还有，不同国家和地区对转基因食品的监管标准和方法存在差异，这给转基因食品的国际贸易带来了一定的困扰。
然而，尽管存在一些挑战，食品中转基因成分的检测与评估仍然是确保食品安全的必要步骤。
通过检测食品中的转基因成分，可以及时发现违规产品，并采取相应的措施来保护消费者的权益。
同时，通过评估转基因食品的安全性，可以为公众提供可靠的食品选择信息，促进消费者对食品安全的信心和保护人们的健康。
转基因食品检测技术
随着转基因技术的快速发展，转基因作物种类的不断增加，社会要求转基因食品的检测技术也要不断的发展，对转基因食品的定性、定量检测方法也在逐步完善。
目前采用的转基因成分检测主要包括核酸水平的检测和蛋白质水平的检测。
1.核酸水平检测转基因食品的核酸水平检测主要是指检测遗传物质中是否含有插入的外源基因(即新引入的外源DNA片段)。
当今核酸水平检测的主要方法有定性PCR、定量PCR、印迹法和基因芯片技术等。
(1)PCR法PCR方法是针对外源基因的启动子、终止子等来设计引物，经PCR反应对待测食品DNA样本进行扩增，经凝胶电泳分析靶标PCR产物的有无，来对食品进行定性判断，改良的PCR方法可以进行定量分析。
PCR方法具有很高的灵敏度，并且与蛋白质具有组织特异性相比，PCR技术不受到材料的限制，又由于核酸的性质比蛋白质稳定，变性之后复性也更为容易，所以通过PCR技术可以检测初加工和深加工的食品，因此在转基因领域PCR技术使用最为广泛。
(2)定量PCR法PCR方法虽然灵敏度高，但是操作繁琐，在操作过程中样本容易受到污染或因样品本身感染相关病毒而呈现假阳性，有的时候还会呈现假阴性。
由于PCR本身的局限性，又为了满足定量分析的需求，为此，研究者们在定性筛选PCR方法的基础上，又发展了不同的定量PCR检测方法。
目前，国外较为成熟的方法主要有定量竞争PCR(Quantitativecompetitive，QC—PCR)和Real—timePCR法。
(3)基因芯片法基因芯片方法又称为DNA微探针阵列法，其实质就是高度集成化的反向斑点杂交技术，是将目前通用的报告基因、抗性基因、启动子和终止子的靶片段固定在载体上，将待测基因扩增、标记后与固定的探针进行杂交，杂交信号由扫描仪扫描后，由计算机对杂交信号进行处理，分析判断得到杂交谱。
基因芯片方法与PCR方法具有相同的优点，但PCR方法检测范围窄、检测效率低，而基因芯片方法能够一次性单独分析样品中大量的、不同种类的GMO，进行筛查、定性、定量。
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食品中转基因成分检测第4章DNA提取和纯化M.Somma目录第４章DNA提取和纯化引言 3提取方法 4 纯化方法 4 CTAB提取和纯化方法 6 分光光度计测定DNA含量9 分光光度计测定DNA的原理9 核酸浓度测定10实验12 参考文献16引言在所有重组DNA技术和大多数分子生物学研究中，核酸的提取和纯化是实验的第一步。
核酸提取方法研究的目的，是为了从不同来源的材料中获得高纯度的核酸，以便于利用聚合酶链式反应 (Polymerase Chian Reaction, PCR) 进行转基因品系的特异性分析。
核酸的质量和纯度是PCR分析的关键因素之一。
获取高纯度的核酸，避免抑制污染物，需要选择合适的DNA提取方法。
表1列出了在PCR检测中可能抑制反应效率的污染物。
为了防止由于样品中PCR抑制物的存在导致出现假阴性结果，强烈推荐设置一个对照实验以测试PCR抑制作用。
基于此目的，一般采用植物特异性(真核或叶绿体) 或种属特异性的PCR检测。
表1. PCR反应过程中的一些抑制物抑制物抑制浓度SDS >0.005%苯酚> 0.2%乙醇> 1%异丙醇> 1%乙酸钠> 5 mM氯化钠> 25 mMEDTA > 0.5 mM血色素> 1 mg/ml肝磷脂> 0.15 i.m/ml尿素> 20 mM反应混合物> 15%目前有许多种核酸提取和纯化技术，一般基于以下准则来选择最适宜的提取纯化技术：z目标核酸z来源生物z起始材料(组织、叶片、种子、加工过的材料等)z对结果的要求(产量、纯度、纯化所需时间等等)z下游应用 (PCR、克隆、标记、印迹、RT-PCR、cDNA合成等等)目前最常用的核酸提取和纯化方法的原理将在以下部分进行阐述。
提取方法从生物材料中提取核酸需要裂解细胞，使细胞中的核酸酶失活并从细胞碎片中分离目标核酸。
通常，理想的裂解方法是一项折中的技术，即必须使复杂的起始材料充分裂解(如：组织),但也要注意充分温和以保护目标核酸。
常用的裂解方法分为几类：z机械破坏(如：碾磨、低渗裂解)z化学处理(如：去污剂裂解、离液剂处理、硫醇还原)z酶消化(如：蛋白酶K)细胞膜的裂解和胞内核酸酶的失活可能是同时发生的。
例如，一种溶液可能同时含有溶解细胞膜的去污剂，和使细胞内的酶失活的离液序列高的盐。
细胞裂解和细胞内核酸酶失活后，可以很容易地通过过滤或沉淀法去除细胞碎片。
纯化方法从细胞提取液中纯化核酸的方法通常是以下技术中两项或更多项技术的结合：z提取/沉淀z色谱分析z离心z亲和分离以下内容是对上述这些技术的简要介绍 (Zimmermann et al., 1998)。
提取/沉淀提取溶液通常用来除去核酸中的污染物，例如：苯酚和氯仿的混合物常用来除去蛋白质。
用异丙醇或乙醇沉淀以浓缩核酸。
如果目的核酸的浓度很低，可以在混合物中加入一种惰性载体(如：糖原) 以增加沉淀的效率。
其它的核酸沉淀技术还包括使用高浓度盐溶液进行选择性沉淀(“盐析”) 或者是利用pH变化沉淀蛋白质。
色谱分析法色谱分析方法可以使用各种不同的分离技术，例如：凝胶过滤、离子交换、选择性吸附或亲和吸附。
凝胶过滤是利用多孔凝胶颗粒的分子筛分能力，具有特定孔径大小的基质可使小分子通过扩散进入凝胶孔隙，较大的分子则被排除在凝胶孔隙之外，首先被洗脱。
因此，分子是根据分子大小的递减规律被洗脱的。
离子交换色谱是另一种利用目标分子与色谱柱基质中功能团之间的静电相互作用分离目标分子的技术，核酸(带有高的负电荷，为线性聚阴离子体) 可以用简单盐缓冲液从离子交换柱上洗脱。
在吸附色谱中，核酸选择性地吸附在特定盐溶液(如：离液盐) 中的硅胶或玻璃基质上,而其它的生物分子则不会被吸附。
低浓度的盐缓冲液或水可以洗脱核酸，所得的样品可以直接用于下游操作。
离心选择性离心是一种强有力的纯化方法。
例如，质粒纯化就是通过在超重的作用下，形成氯化铯 (CsCl) 浓度梯度进行超离心实现的。
通常，离心分离是与其它技术相结合的。
例如，旋转柱色谱法结合了凝胶过滤和离心分离技术，通过缓冲液的改变或分子大小的选择可从有小分子的杂质(盐、核苷等) 中纯化DNA或RNA，还有一些方法在色谱基质的选择性吸附基础上结合离心洗脱可以选择性地纯化一类核酸。
亲和分离近年，越来越多的纯化技术把核酸的亲和固定技术同磁性分离技术接合在一起。
例如：ploy(A)+mRNA可以通过生物素标记的寡聚胞嘧啶 (Oligo dT) 连接到抗生物素包被的磁性粒子上，而这些粒子复合物可以用磁石从溶液(和未结合的杂质) 中收集。
这种固相技术使核酸的纯化简单化，因为它可以由简单、快速的磁性分离步骤取代离心分离、有机抽提和相分离等多步骤操作。
CTAB提取和纯化技术十六烷基三甲基溴化铵(Cetyltrimethylammonium Bromide, CTAB) 技术最先由Murray 和Thompson于1980年发明 (Murray and Thompson, 1980)，随后由Wagner及其同事于1987年公开发表 (Wagner et al., 1987)。
该方法适用于植物及植物类食品中DNA的提取和纯化，并特别适合去除影响 DNA 纯度和质量的多聚糖及多酚类化合物。
这一方法已经被广泛地应用于植物分子遗传学研究并在认证实验中得到验证，可用以检测转基因生物(Lipp et al., 1999; 2001)。
目前也出现了一些对CTAB方法的改进，使这一方法适用于更大范围的各类未加工或加工过的食品样品 (Hupfer et al., 1998; Hotzel et al., 1999; Meyer et al., 1997; Poms et al., 2001)。
CTAB技术的原理：裂解、抽提和沉淀离子型去污剂 CTAB 可以裂解植物细胞，在低盐环境下，CTAB能和核酸形成不溶复合物；这时，多聚糖、酚化合物和其它杂质保留在上清液中，并可以被洗除；DNA复合物随着盐浓度的提高而溶解，之后用乙醇或异丙醇沉淀。
这一部分将对 CTAB 技术的３个主要步骤——细胞膜的裂解、基因组DNA的抽提及沉淀的原理进行详细描述。
细胞膜裂解. 如前所述，DNA提取的第一步是裂解细胞膜和核膜。
基于此目的，均质的样品首先由含EDTA、Tris/HCl和CTAB的抽提缓冲液处理。
所有的生物膜都有一个共同的结构，即都由脂质和蛋白质分子经非共价的相互作用结合在一起。
图1.细胞膜的简易图示如图1所示，脂质分子排列成连续的双层，其间“溶解”了各种蛋白质分子。
脂类分子由亲水的“头”末端和疏水的“尾”末端组成。
在CTAB方法中，由含有去污剂(CTAB) 的抽提缓冲液裂解细胞膜。
由于脂类和去污剂有相似的结构组成，因此抽提缓冲液中的CTAB成分具有捕获组成细胞膜及核膜的脂质分子的功能。
下图2显示了使用去污剂使脂质溶解的机制。
图2. 脂质溶解示意图图3举例说明了当细胞膜暴露于CTAB抽提缓冲液中时，去污剂捕获脂质和蛋白质以使基因组DNA释放的过程。
在特定浓度的盐溶液 (NaCl) 中，去污剂可以和核酸形成不可溶性的复合物。
EDTA是一种螯合剂，它可在其它金属离子存在时特异结合镁离子，镁离子是脱氧核糖核酸酶的辅助因子。
由于EDTA结合了镁离子，脱氧核糖核酸酶的活性则降低。
Tris/HCl使溶液有一定的pH缓冲能力(过高或过低的pH会破坏DNA)。
值得注意的是，由于核酸在纯化过程中很容易被降解，所以要尽量减少样品均质化与加入CTAB缓冲液之间的时间。
在细胞膜和其它细胞器膜(例如线粒体和叶绿体膜) 被裂解后，就要马上进行DNA的纯化。
图3：细胞膜的裂解及基因组DNA的抽提抽提. 在这一步中，溶解于水相中的多聚糖、酚复合物、蛋白质和其它细胞溶解物从CTAB核酸复合物中分离出来。
其中除去多聚糖和酚复合物尤为重要，因为它们会抑制许多酶的反应。
在低盐浓度条件下 (<0.5 M NaCl)，核酸复合物中的杂质不会沉淀,可以用氯仿从水相中抽提去除。
氯仿可使蛋白质变性，并加速水相和有机相的分离。
通常，水相形成上层部分。
然而如果水相由于高盐浓度 (>0.5 M) 而过于稠密，也会形成于下层部分。
此外，如果水相的pH没有充分地平衡于7.8-8.0之间，核酸将部分进入有机相。
如果需要，氯仿的抽提要进行2-3次以使杂质能完全地从水相中除去。
为了能最大限度地回收核酸，有机相可用水溶液回提，也即加入先前的提取液中。
当核酸复合物纯化后，就可以进行方法的最后一步——沉淀。
沉淀. 在最后一步中，核酸要从去污剂中释放出来。
为了实现这个目的，水相首先要用含有CTAB和高浓度的氯化钠 (>0.8 M) 混合液的沉淀溶液处理。
其中需要盐来形成核酸沉淀，在缓冲能力上，乙酸钠可能比NaCl更好。
在这些条件下，去污剂由于在乙醇中比在水中更容易溶解而被洗去，核酸则沉淀下来。
继而用70%的乙醇溶液处理进一步纯化核酸，或者冲洗核酸沉淀除去残留的盐。
分光光度计测定DNA的含量DNA、RNA、寡核苷酸甚至于单核苷酸的含量都可以以稀释或未稀释的形式，在水溶液中通过测量紫外光(也在可见光范围) 下的吸光度 A (又称为光密度，OD) 直接进行测定。
如果样品是纯的(即：没有大量的的杂质如蛋白质、苯酚或糖)，根据紫外照射吸收量进行的分光光度测量既简单又精确。
对这项技术来说，低离子浓度的缓冲液(例如TE缓冲液) 是理想的。
核酸浓度常由260 nm处相对于空白对照的光吸收来确定。
杂质的干扰可以通过计算的“比率”来验证，由于蛋白质在280 nm处有吸收，因此A260/A280的比率被用于评估核酸的纯度，纯的DNA此比率大约为1.8，而纯的RNA此比率大约为2.0。
230 nm处的吸收反应了样品中的杂质，如：碳水化合物、肽、苯酚或芳香族化合物，纯的样品A260/A230的比率大约为2.2。
只有少量的核酸时，可选择溴化乙锭琼脂糖凝胶检测方法；通过与一定范围的浓度标准进行对比，便可从紫外光照射下溴化乙锭的荧光强度来评估核酸的量。
分光光度计测定DNA含量的原理分光光度计利用透过溶液的发射光来检测溶液中溶质的浓度，仪器根据一个简单的原理进行检测，即已知波长的光束通过一个样品时，透射光的能量可通过样品另一边的一个光电元件来测量。
如图4所示，单一光束分光光度计的设计包括一个光源、棱镜、样品固定槽和光电元件。
它们彼此之间用电子或机械系统连接起来控制照射的强度、波长，并将光电元件收到的能量转化为电压波动。
然后电压的波动显示在仪表盘上，或通过与电脑连接记录下来以用于以后的研究。
图4.光路示意图在一定波长下所有的分子都有能量吸收，以此可以推断溶液中溶质的浓度。