免疫胶体金层析法精品PPT课件
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《免疫胶体金技术》课件
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实验仪器：离心机、电泳仪、显微 镜、移液器等
实验注意事项：避免污染、控制温 度、保持湿度等
实验步骤
准备实验材料： 制备胶体金溶 制备抗体溶液： 制备抗原溶液：
包括胶体金、 液：将胶体金 将抗体与缓冲 将抗原与缓冲
抗体、抗原、 与缓冲液混合， 液混合，搅拌 液混合，搅拌
缓冲液等
搅拌均匀
提高稳定性：通过优化实验条件、选择稳定的检测试剂等方法，提高检测结果的稳定性
提高自动化程度：通过开发自动化检测设备，提高检测效率和准确性
免疫胶体金技术的实验操作
实验准备
实验材料：胶体金、抗体、抗原、 缓冲液、洗涤液、显色剂等
实验步骤：样本处理、抗体孵育、 胶体金标记、洗涤、显色等
添加标题
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云计算和大数据技术：实现 检测数据的实时分析和共享
检测灵敏度提升
技术进步：通过改进胶体金颗粒的制备工艺，提高检测灵敏度
应用领域：在生物医学、食品安全、环境监测等领域具有广泛应用前景
技术融合：与其他检测技术相结合，提高检测灵敏度和准确性
发展趋势：随着科技的发展，免疫胶体金技术的检测灵敏度将不断提高，应用范围也将不 断扩大。
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汇报人：
免疫胶体金技术
汇报人：
单击输入目录标题 免疫胶体金技术概述 免疫胶体金技术的分类 免疫胶体金技术的优缺点 免疫胶体金技术的实验操作 免疫胶体金技术的应用实例
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免疫胶体金技术概述
定义和原理
免疫胶体金技术是一种基于免疫反应的检测技术 原理：利用抗原-抗体特异性结合，通过胶体金标记抗体，实现对目标抗原 的检测 特点：灵敏度高、特异性强、操作简便、快速
课件：实验七-胶体金免疫层析技术
胶体金免疫层析技术
（colloidal gold immunochromatography assay, GICA）
胶体金免疫层析技术
20世纪80-90年代在酶联免疫吸附试验、 乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、胶体金 免疫技术和新材料技术基础上发展了新型 体外诊断技术 ——胶体金免疫层析技术 （colloidal gold immunochromatography assay, GICA）。
缺点 定量问题
简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专 灵敏度问题 业人员，携带方便，可随时随地进行。
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液， 因而适合各种检查
10%NaCl 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
• 结果判断: 对照管或加入蛋白量不足，胶体金出现由红变蓝的凝聚现
象；加入蛋白质量达到或超过稳定量，则胶体金保持红色不变
• 不稳定的金溶胶将发生聚沉，对照管（未加蛋白质）和加入蛋白质的 量不足以稳定胶体金的各管，均呈现出由红变蓝的聚沉现象；而加入 蛋白量达到或超过最低稳定量的各管仍保持红色不变。以稳定1ml胶 体金溶液红色不变的最低蛋白质用量，即为该标记蛋白质的最低用量， 在实际工作中，可适当增加10％，在此情况下蛋白质分子在金颗粒表 面的吸附量最大。
• 金标记蛋白的特异性与敏感性测定：采用微孔滤膜免疫金银染色法。 将可溶性抗原（或抗体）吸附于载体上（滤纸、硝酸纤维膜、微孔滤 膜），用胶体金标记的抗体（或抗原）以直接或间接染色法并经银显 影来检测相应的抗原或抗体，对金标记蛋白的特异性和敏感性进行鉴 定。
（colloidal gold immunochromatography assay, GICA）
胶体金免疫层析技术
20世纪80-90年代在酶联免疫吸附试验、 乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、胶体金 免疫技术和新材料技术基础上发展了新型 体外诊断技术 ——胶体金免疫层析技术 （colloidal gold immunochromatography assay, GICA）。
缺点 定量问题
简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专 灵敏度问题 业人员，携带方便，可随时随地进行。
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。
稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。
检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾液， 因而适合各种检查
10%NaCl 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
• 结果判断: 对照管或加入蛋白量不足，胶体金出现由红变蓝的凝聚现
象；加入蛋白质量达到或超过稳定量，则胶体金保持红色不变
• 不稳定的金溶胶将发生聚沉，对照管（未加蛋白质）和加入蛋白质的 量不足以稳定胶体金的各管，均呈现出由红变蓝的聚沉现象；而加入 蛋白量达到或超过最低稳定量的各管仍保持红色不变。以稳定1ml胶 体金溶液红色不变的最低蛋白质用量，即为该标记蛋白质的最低用量， 在实际工作中，可适当增加10％，在此情况下蛋白质分子在金颗粒表 面的吸附量最大。
• 金标记蛋白的特异性与敏感性测定：采用微孔滤膜免疫金银染色法。 将可溶性抗原（或抗体）吸附于载体上（滤纸、硝酸纤维膜、微孔滤 膜），用胶体金标记的抗体（或抗原）以直接或间接染色法并经银显 影来检测相应的抗原或抗体，对金标记蛋白的特异性和敏感性进行鉴 定。
《胶体金检测技术》ppt幻灯片
培训资料
12
培训资料四、B-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍以盐酸克伦特罗胶体金快速检测卡为例一 .适用范围：主要用于定性检测，测定动物尿液，如猪尿、牛尿、羊尿等样品中盐酸克伦特罗的残留。整个检测过程只需要5~10分钟左右，灵敏度为3 ng/ml(3ppb) 。 也就是说当尿液中盐酸克伦特罗的残留大于或等于3 ng/ml 时，检测卡才 能检测到。
培训资料
23
培训资料六、发展方向(Developing)1.标记技术的探索顺磁粒子标记、量子点标记
免疫反应信号转化为电子信号模式
mndad/-CenjuyateSwhatratePeristaltiepurmP
2.生物传感器
wit.(b)(o)
oistansNc sbnste
培训资料
Sample Well
培训资料
20
培训资料五、常见问题及注意事项1.使用前将检测卡和待检样本恢复至室温2.保持干燥，避免受潮，打开包装请尽快使用试纸条中的NC膜受潮后，尿样在上面无法正常泳动，无法到达吸水纸的位置；胶金垫上的金标抗体受潮后会变性，从而失去原有的生理性功能，影响抗原抗体的选择性反应。因此，试纸条必须保持干燥，从包装袋中取出后要尽快使用。3.检测时，避免阳光直射和电风扇、空调的风直吹
免疫胶体金快速检测技术
农业部饲料质量监督检验测试中心(西安)
主要内容一、免疫胶体金技术的发展历史二、 胶体金检测卡的基本原理及构造三、 免疫胶体金层析法检测原理及应用四、S-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍五、 常见问题分析与注意事项六、 免疫胶体金技术的发展的方向
培训资料
2
培训资料一 、免疫胶体金技术的发展史1. 1939年(英，植物) Kausche 和Ruska 把烟草叶病毒吸附在金颗粒上，在电子显微镜下观察呈现高电子密度的细状颗粒，开启了免疫胶体金技术的研究。2. 1971年(美，微生物) Faulk 和Taylor 首先将兔抗沙门菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直于检测沙门菌的表面抗原。3 . 1974年(奥) Romano 等将胶体金标记在马抗人IgG 上，实现了间接免疫金染色法。同年Bauer 等报道将胶体金标记在凝集素上的应用。
12
培训资料四、B-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍以盐酸克伦特罗胶体金快速检测卡为例一 .适用范围：主要用于定性检测，测定动物尿液，如猪尿、牛尿、羊尿等样品中盐酸克伦特罗的残留。整个检测过程只需要5~10分钟左右，灵敏度为3 ng/ml(3ppb) 。 也就是说当尿液中盐酸克伦特罗的残留大于或等于3 ng/ml 时，检测卡才 能检测到。
培训资料
23
培训资料六、发展方向(Developing)1.标记技术的探索顺磁粒子标记、量子点标记
免疫反应信号转化为电子信号模式
mndad/-CenjuyateSwhatratePeristaltiepurmP
2.生物传感器
wit.(b)(o)
oistansNc sbnste
培训资料
Sample Well
培训资料
20
培训资料五、常见问题及注意事项1.使用前将检测卡和待检样本恢复至室温2.保持干燥，避免受潮，打开包装请尽快使用试纸条中的NC膜受潮后，尿样在上面无法正常泳动，无法到达吸水纸的位置；胶金垫上的金标抗体受潮后会变性，从而失去原有的生理性功能，影响抗原抗体的选择性反应。因此，试纸条必须保持干燥，从包装袋中取出后要尽快使用。3.检测时，避免阳光直射和电风扇、空调的风直吹
免疫胶体金快速检测技术
农业部饲料质量监督检验测试中心(西安)
主要内容一、免疫胶体金技术的发展历史二、 胶体金检测卡的基本原理及构造三、 免疫胶体金层析法检测原理及应用四、S-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍五、 常见问题分析与注意事项六、 免疫胶体金技术的发展的方向
培训资料
2
培训资料一 、免疫胶体金技术的发展史1. 1939年(英，植物) Kausche 和Ruska 把烟草叶病毒吸附在金颗粒上，在电子显微镜下观察呈现高电子密度的细状颗粒，开启了免疫胶体金技术的研究。2. 1971年(美，微生物) Faulk 和Taylor 首先将兔抗沙门菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直于检测沙门菌的表面抗原。3 . 1974年(奥) Romano 等将胶体金标记在马抗人IgG 上，实现了间接免疫金染色法。同年Bauer 等报道将胶体金标记在凝集素上的应用。
免疫胶体金技术ppt课件
λmax
橙色
518nm
橙色
522nm
红色
525nm
紫红ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
535nm
TEM Images of Colloidal Au
Average particle size ~ 17nm
Good gold colloids and bad (unstable) gold colloids
. 劣质金外形不均一，且 非球形，有凝集景象， 颗粒间变异系数较大
➢Final conjugation (IgG)
Take 100ml of gold sol and adjust to Ph9 Adjust the dialyzed and centrifuged antibody solution
(0.1ug/ul) to pH9.2 Add the determined amount of antibody solution dropwise
胶体金与蛋白质的结合胜利与否，取决于pH值，普 通只需在蛋白质等电点(PI)略偏碱的条件下二者才干结 实地结合，因此，标志之前须将胶体金溶液的pH值调至 待标志蛋白质的等电点略偏碱。
需求提高胶体金的pH值时可用0.1molK2CO3，需求 降低胶体金的pH值时可用0.1N HCl。测定金溶液的pH能 够损害pH测定计的探头，因此，普通用精细的pH试纸测 定其pH即可.
2. Adjust the antibody (0.1ug/ul) to the proper pH with 100nM K2CO3 or 100mM HC1.
3. Add the antibody to each tube in a series from 0150ul (ie 0-15ug in steps of 0, 1, 2, 3 ....15ug).
最新免疫检测技术精品课件第5章 胶体金课件
原因有：
①少量电解质对溶胶的作用； ②温度对溶胶稳定性的影响：当温度升高
时，吸附能力减少，溶剂化程度降低，溶
剂化层变薄，胶粒聚结，不稳定性增加； ③浓度对溶胶的稳定性的影响 浓度增大
时，粒子间距离缩小，引力增加，容易聚
结而发生聚沉。
胶体金颗粒由一个基础金核（原子金Au）及包围在外的双离 子层构成，紧连在金核表面的是内层负离子（AuC12－）， 外层离子层H+则分散在胶体间溶液中，以维持胶体金游离于 溶胶间的悬液状态。
夹心法
练习：夹心法还是竞争法？
思考题：
• 竞争法中，测试线（test line）上除了 固定抗原外，是否可以固定抗体？如果可 以，请描述检测原理。
• 夹心法中，除了双抗体夹心法，是否可用 双抗原夹心法？如果可以，请描述检测原 理。
一、免疫胶体金技术发展史
1971年Faulk和Taylor首先将兔抗沙门
指分散相颗粒在1～
100nm之间，外观透明不浑浊，在普通
显微镜下看不见。
(3)粗分散体系 指颗粒大于100nm，不稳
定，显微镜下可见。
2.胶体金的一般性状
(1)胶体金的颜色 颗粒在5～20nm之间，吸收波长520nm，呈红葡 萄酒色； 20～40nm之间吸收波长530nm，呈深红色；
60nm的金溶液主要吸收波长600nm为橙黄色光，
3
4 5
7.9
9.8 12
0.9
1.3 1.0
(2)柠檬酸三钠还原法(Frens 1973) 取0.01%氯化金溶液100ml加热至沸腾， 迅速中入4ml 1％柠檬酸三钠水溶液，可 见溶液很快变蓝至橙红色。
柠檬酸三钠与胶体金颗粒直径的关系 0.01%HAucl4 1％柠檬酸三钠(ml) 直径(nm) 100 5.0 10.0 100 4.0 15.0 100 1.5 25.0 100 1.0 50.0 100 0.75 60.0 100 0.60 70.0 100 0.42 98.0 100 0.32 147.0 100 0.25 160
免疫层析快速诊断技术简介课件
目前涉足该领域的科研机构很多，从中科院 到CDC，细数来也有三五十家。
8
检测原理
免疫检测的原理就是使用一种分析物— 要么是抗原要么是抗体—探测和捕获与其 对应的另外一半。
9
免疫层析法检测原理分类介绍 （双抗体夹心）
（以HCG检测为例）
10
免疫层析法检测原理分类介绍 （竞争反应）
（以吗啡检测为例）
13
胶体金结果判读方法：
1.色卡法 将反应好的试纸条T线颜色与制作的色卡比较，看颜色属于那一
个档次，则在数据记录时候填写该档次标识。最后做灵敏度比较。 2.图形扫描法
将反应好的试纸条放在扫描仪器内，选择灰度扫描，获得灰度线 条图象。然后打开分析软件，将该灰度图象导入，自动分析出灵敏 度，本底情况。 3.读条仪法
检测的物质
人类 医学
各级医院,血站,CDC,防 疫站,诊断中心；家庭自 检；商检系统；边检口 岸；公安系统.
传染病（乙肝五项,HIV, SARS等） 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等） 女性妊娠（hCG(早孕),LH,FSH)
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒）
农 牧 畜牧兽医站, 商检系统, 传染病（禽流感,兽瘟疫等）
11
相关仪器设备
BIODOT XYZ3050 点膜喷金机
仪器参数 仪器尺寸为： 430mmx410mmX360mm 平台大小: 450mmX70mm 平台移动速度: 0-330mm/sec X、Y、Z轴移动误差: <50um 定位精度: ±10um in 1 axis;±25um in 2 axis 喷点方式 BJQ3000: 非接触喷点 AJQ3000: 非接触喷点 划线宽度 BJQ3000:0.50mm/line （喷点0.20mm/drop）
8
检测原理
免疫检测的原理就是使用一种分析物— 要么是抗原要么是抗体—探测和捕获与其 对应的另外一半。
9
免疫层析法检测原理分类介绍 （双抗体夹心）
（以HCG检测为例）
10
免疫层析法检测原理分类介绍 （竞争反应）
（以吗啡检测为例）
13
胶体金结果判读方法：
1.色卡法 将反应好的试纸条T线颜色与制作的色卡比较，看颜色属于那一
个档次，则在数据记录时候填写该档次标识。最后做灵敏度比较。 2.图形扫描法
将反应好的试纸条放在扫描仪器内，选择灰度扫描，获得灰度线 条图象。然后打开分析软件，将该灰度图象导入，自动分析出灵敏 度，本底情况。 3.读条仪法
检测的物质
人类 医学
各级医院,血站,CDC,防 疫站,诊断中心；家庭自 检；商检系统；边检口 岸；公安系统.
传染病（乙肝五项,HIV, SARS等） 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等） 女性妊娠（hCG(早孕),LH,FSH)
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒）
农 牧 畜牧兽医站, 商检系统, 传染病（禽流感,兽瘟疫等）
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相关仪器设备
BIODOT XYZ3050 点膜喷金机
仪器参数 仪器尺寸为： 430mmx410mmX360mm 平台大小: 450mmX70mm 平台移动速度: 0-330mm/sec X、Y、Z轴移动误差: <50um 定位精度: ±10um in 1 axis;±25um in 2 axis 喷点方式 BJQ3000: 非接触喷点 AJQ3000: 非接触喷点 划线宽度 BJQ3000:0.50mm/line （喷点0.20mm/drop）
胶体金免疫层析技术实验培训课件
粒为球形，大小均一，无棱角。 ✓质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，
形状各异。
胶体金免疫层析技术实验
5
简介
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用 于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
实验目的
掌握胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方 法及结果的判定
胶体金免疫层析技术实验
2
简介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性 腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表 面抗原（HBsAg）等检测。
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、 新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫 病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
胶体金免疫层析技术实验
14
胶体金免疫层析技术实验
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
15
课后思考
1. 瘦肉精试纸条检测的原理？ 2. 早孕试纸条检测的原理？
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
胶体金免疫层析技术实验
8
测定
测定时将试纸条下端浸入液体标 本中，下端吸水材料即吸取液体 向上端移动，流经C处时使干片 上的免疫金复合物复溶，并带动 其向膜条渗移。
胶体金免疫层析技术实验
9
测定
若标本中有待测特异抗原，即可 与免疫金复合物中的抗体结合， 此抗原抗体复合物流至测试区即 被固相抗体捕获，在膜上显出红 色反应线条（T）。
形状各异。
胶体金免疫层析技术实验
5
简介
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带 负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用 于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
实验目的
掌握胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方 法及结果的判定
胶体金免疫层析技术实验
2
简介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性 腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表 面抗原（HBsAg）等检测。
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、 新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫 病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
胶体金免疫层析技术实验
14
胶体金免疫层析技术实验
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
15
课后思考
1. 瘦肉精试纸条检测的原理？ 2. 早孕试纸条检测的原理？
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
胶体金免疫层析技术实验
8
测定
测定时将试纸条下端浸入液体标 本中，下端吸水材料即吸取液体 向上端移动，流经C处时使干片 上的免疫金复合物复溶，并带动 其向膜条渗移。
胶体金免疫层析技术实验
9
测定
若标本中有待测特异抗原，即可 与免疫金复合物中的抗体结合， 此抗原抗体复合物流至测试区即 被固相抗体捕获，在膜上显出红 色反应线条（T）。
免疫胶体金技术(转)PPT课件
前景展望
1 2 3
不断改进技术
随着科学技术的不断发展，免疫胶体金技术将不 断改进和完善，提高检测的灵敏度和特异性。
拓展应用领域
免疫胶体金技术的应用领域将不断拓展，不仅限 于医学诊断，还可应用于食品安全、环境监测等 领域。
实现自动化和智能化
未来免疫胶体金技术将与自动化、智能化技术相 结合，提高检测的效率和准确性，为临床诊断和 科学研究提供更好的服务。
用。
04
免疫胶体金技术具有操作简便、特异性高、稳定性好 等优点，但也存在一些限制，如检测灵敏度相对较低， 对某些低浓度目标物质检测效果不佳。
对未来研究的建议
01
深入研究免疫胶体金技 术的反应机制和影响因 素，为优化技术提供理 论支持。
02
探索新型的标记物和信 号放大策略，提高检测 灵敏度和特异性。
成熟发展
90年代至今，免疫胶体金 技术不断优化，应用范围 逐渐扩大。
02
免疫胶体金技术的制备方法
胶体金的制备
制备原理
利用氯金酸的水溶液在碱性条件下加热产生聚合物颗粒，通过控制反应条件如 温度、pH值和反应时间，可控制胶体金的粒径大小。
制备步骤
将氯金酸水溶液加热至沸腾，加入氢氧化钠调节pH值至碱性，继续加热至溶液 变为橙红色，冷却后即可获得胶体金溶液。
免疫抗原的制备
抗原选择
选择具有特异性识别能力的抗原，如抗体、多肽等，确保与 目标分子有高亲和性。
抗原制备
将抗原与载体蛋白结合，形成抗原-载体蛋白复合
结合原理
利用抗原-抗体之间的特异性结合反应，将免疫抗原与胶体金结合，形成胶体金 标记的免疫复合物。
结合方法
免疫胶体金技术(转)ppt课 件
• 免疫胶体金技术概述 • 免疫胶体金技术的制备方法 • 免疫胶体金技术的应用实例 • 免疫胶体金技术的优缺点及前景展望 • 结论
免疫胶体金PPT课件
免疫胶体金技术的应用领域
医学诊断
食品安全
用于检测各种疾病相关 的抗原、抗体，如HIV、
肝炎、癌症等。
用于检测食品中的有害 物质和添加剂，保障食
品安全。
环境监测
用于检测水体、土壤等 环境中的有害物质，保
护环境健康。
生物科学研究
用于研究生物分子相互 作用、细胞信号转导等
生物学过程。
02
免疫胶体金技术的原理
结果判断主观
02
该技术结果判断需要人工进行，不同操作者判断标准可能存在
差异，导致结果不一致。
适用范围有限
03
免疫胶体金技术主要适用于定性检测，对于定量检测和结构分
析等方面存在局限性。
改进方向
提高特异性
通过改进抗体和抗原的纯化技术、优化标记物和检测条件等手段， 提高免疫胶体金技术的特异性。
实现自动化
特点
高灵敏度、高特异性、操作简便 、结果直观等。
免疫胶体金技术的发展历程
01
02
03
起源
20世纪70年代，英国科学 家利用胶体金标记技术制 备出了第一个单克隆抗体。
发展
随着技术的不断完善，免 疫胶体金技术在医学、生 物学等领域得到了广泛应 用。
最新进展
近年来，纳米胶体金标记 技术的研究取得了重要突 破，提高了检测的灵敏度 和特异性。
抗体与抗原的结合
将抗体与抗原混合，使其在一定 条件下结合。
洗涤
去除未结合的抗原和抗体，提高 实验的特异性。
胶体金的标记
胶体金的制备
通过还原剂的作用将金离子还原成胶体金颗粒。
胶体金的标记
将已制备好的胶体金与已结合的抗体结合，形成 金标抗体复合物。
胶体金免疫层析技术演示课件
15
临床上将缺铁性贫血分为以下三个阶段：
铁缺乏阶段 潜在性缺铁期
血清铁蛋 白含量
转铁蛋白 红细胞游离 饱和度 原卟啉（FEP）
血红蛋白
<12ng/ml
缺铁性红细胞生成 <12ng/ml <15%
缺铁性贫血
<12ng/ml <15%
>4.5μg/L >4.5μg/L
4/36
北京易斯威特生物医学科技有限公司
5
什么是缺铁性贫血
当机体对铁的需求与供给失衡，导致体内贮存铁耗尽 （ID），继之红细胞内铁缺乏（IDE），最终引起缺 铁性贫血（IDA）。IDA是铁缺乏症（包括ID，IDE 和IDA）的最终阶段，表现为缺铁引起的小细胞低色 素性贫血及其他异常。
2/36
胶体金免疫层析法检测试剂盒的特点
操作方便，读取结果的时间短：一般只需要一个加样步骤，得 到结果时间最短的只需要3~5分钟，最长的也不会超过30分钟 。
灵敏度和特异性好，受外界影响少：高度特异的抗原抗体反应 保证该检测结果保持很高的特异性和灵敏度。
成本低廉，所需样本很少：一般只需要不到100μl样本即可得到 检测结果。
情商受损：情感淡漠，不开心、紧张、易疲劳；兴趣少， 不容易逗乐，不合群，注意力难集中。
身体发育受影响：听视觉神经反应迟缓；细胞、体液免 疫功能降低，易感染；延缓运动神经的发育，运动功能 受损。小儿长期贫血不仅会影响生长发育，还可诱发一些感
染性疾病。
更重要的一点是：胎儿及婴幼儿时期铁缺乏，甚至无法
被日后的补铁所逆转。
北京易斯威特生物医学科技有限公司
10
什么是铁蛋白（Ferritin）
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免疫胶体金层析法
——金标记免疫法测HCG
1
原理
• 采用胶体金标记抗体，以硝酸纤维 素膜为载体，使抗原抗体反应和洗 涤在同一渗滤膜上，反应后根据在 膜上的颜色判断结果。
• 以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔 膜毛细管作用，使膜一端的液体慢 慢向另一端渗移，犹如层析
2
← HCG分子 ← 鼠抗人HCG单抗 ← 胶体金颗粒
4
negative
HCG 阴性标本
MAX
尿中无HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物
随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体不结合而不显色
在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控 线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。
5
试பைடு நூலகம்条失效
失效
MAX
←胶体金标记鼠抗人HCG单抗
←羊抗鼠IgG
3
positive
HCG 阳性标本
MAX
尿中HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物 随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体结合而聚集显色
在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控
线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。
金标鼠抗人IgG单抗随层析作用向上移动，到达质控线，无羊抗鼠 IgG(二抗)或破坏失效，不结合而 不显色，作为质控对照。
6
大便隐血
MAX
7
注意事项
• 1. 将试条有标志线的下端浸入尿液标本中， 深度不可超过标志线（若超过，可能会出 现假阳性）
• 2. 约3秒后取出，平放，5分钟内观察结果 (时间不能小于5分钟)：两条红线为(+)，提 示尿中含HCG。一条红线为(一)，表示不含 HCG。（时间过短，可能有假阴性）
8
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的 ，所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
感谢聆听
不足之处请大家批评指导
Please Criticize And Guide The Shortcomings
演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
——金标记免疫法测HCG
1
原理
• 采用胶体金标记抗体，以硝酸纤维 素膜为载体，使抗原抗体反应和洗 涤在同一渗滤膜上，反应后根据在 膜上的颜色判断结果。
• 以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔 膜毛细管作用，使膜一端的液体慢 慢向另一端渗移，犹如层析
2
← HCG分子 ← 鼠抗人HCG单抗 ← 胶体金颗粒
4
negative
HCG 阴性标本
MAX
尿中无HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物
随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体不结合而不显色
在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控 线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。
5
试பைடு நூலகம்条失效
失效
MAX
←胶体金标记鼠抗人HCG单抗
←羊抗鼠IgG
3
positive
HCG 阳性标本
MAX
尿中HCG与金标记的鼠抗人HCG单抗结合形成免疫复合物 随层析作用向上移动,至检测线与鼠抗人HCG抗体结合而聚集显色
在检测线未结合的金标记鼠抗人HCG单抗(IgG)随着尿液上行,到达质控
线与羊抗鼠IgG(二抗)结合而显色，作为质控对照。
金标鼠抗人IgG单抗随层析作用向上移动，到达质控线，无羊抗鼠 IgG(二抗)或破坏失效，不结合而 不显色，作为质控对照。
6
大便隐血
MAX
7
注意事项
• 1. 将试条有标志线的下端浸入尿液标本中， 深度不可超过标志线（若超过，可能会出 现假阳性）
• 2. 约3秒后取出，平放，5分钟内观察结果 (时间不能小于5分钟)：两条红线为(+)，提 示尿中含HCG。一条红线为(一)，表示不含 HCG。（时间过短，可能有假阴性）
8
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的 ，所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
感谢聆听
不足之处请大家批评指导
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演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日