中华鳖性别判断实验报告
中华鳖生物实验报告
一、实验目的1. 了解中华鳖的生物学特性。
2. 掌握中华鳖的饲养和管理方法。
3. 研究中华鳖的生长发育规律。
二、实验材料1. 实验动物：中华鳖（Pelodiscus sinensis）2. 实验设备：水族箱、过滤器、温度计、显微镜、解剖器具等3. 实验试剂：消毒剂、营养液、药物等三、实验方法1. 观察中华鳖的外部形态、生活习性及繁殖特点。
2. 研究中华鳖的生长发育规律，包括生长速度、体重变化等。
3. 探讨中华鳖的繁殖方式及繁殖周期。
4. 分析中华鳖的消化系统、呼吸系统、循环系统等器官的功能。
四、实验过程1. 实验准备（1）选择健康、无疾病的中华鳖作为实验动物。
（2）搭建实验环境，保持水温、水质适宜。
（3）准备营养液和消毒剂，用于饲养和管理。
2. 观察与记录（1）观察中华鳖的外部形态，包括甲壳、头部、四肢等。
（2）观察中华鳖的生活习性，如摄食、运动、繁殖等。
（3）定期测量中华鳖的体重和体长，记录生长发育过程。
3. 解剖与观察（1）解剖中华鳖，观察其消化系统、呼吸系统、循环系统等器官的结构和功能。
（2）观察中华鳖的繁殖器官，分析其繁殖方式及繁殖周期。
4. 数据分析（1）根据实验数据，分析中华鳖的生长发育规律。
（2）对比不同实验条件下的中华鳖生长发育情况，探讨影响其生长的因素。
五、实验结果与分析1. 中华鳖的外部形态和生活习性中华鳖具有椭圆形的甲壳，头部较大，四肢呈鳍状。
中华鳖以底栖动物为主，摄食范围较广，包括水生植物、动物尸体等。
繁殖方式为卵生，每年繁殖1-2次。
2. 中华鳖的生长发育规律实验结果显示，中华鳖的生长速度受水温、饲料等因素的影响。
在水温适宜、饲料充足的情况下，中华鳖的生长速度较快。
随着体重的增加，体长也随之增长。
3. 中华鳖的繁殖方式及繁殖周期中华鳖的繁殖方式为卵生，每年繁殖1-2次。
繁殖周期受水温、光照等因素的影响。
在适宜的繁殖条件下，中华鳖的繁殖成功率较高。
4. 中华鳖的器官功能中华鳖的消化系统包括口、食道、胃、肠等器官，具有较强的消化能力。
东山县中国鲎调查结题报告
结题报告《东山县中国鲎调查》组长：林海彬组员：林镇彬、林文、李枫、林宁、庄梦蕾、张艺君、陈艺丹、潘苏杭、林丽玲指导老师：林清耀班级：高二（14）班学校：东山县第一中学一、序言生态质量折射出一个地区的文明程度。
作为海内外闻名的旅游景区，为打造国际生态旅游海岛，东山重视海洋生态保护更具特殊意义。
而中国鲎作为我国南部沿海地区特有的古老珍稀水生野生动物，其生存状况和保护情况更是彰显了“生态”二字的分量。
另外，作为土生土长的东山人，同学们从小就对鲎有着一份特殊的情感。
因此，选择鲎作为我们研究调查的对象，可谓占尽天时地利人和。
我们也希望通过这两个多月的走访、调查、宣传，能切实推动东山及周边地区开展有效的海洋生物多样性保护和管理措施；加强省际合作；提高公众的生态保护意识和参与意识；深化对科学发展观中关于“生态文明建设”的理解；为东山创建国际生态旅游海岛打造一张崭新的名片。
二、正文1、调查过程渔村调查（1）地点：东山县冬古渔村•时间：6月25日上午•对象：林爷爷、林伯伯•成员：海彬、镇彬、林宁、丽玲、苏杭•调查方式：现场采访冬古渔村林爷爷•采访结论：十十几年前的冬古，曾是鲎群的聚集地，这里得天独厚的沙质浅海底吸引了大量鲎群前来繁殖产卵。
每年夏秋，村旁洼地、浅海滩涂到处是鲎，有“六月鲎、爬上灶”的说法。
由于鲎卵鲜美，鲎汤清凉，一时间鲎成了当地许多人家餐桌上的美味佳肴。
但近几年来。
由于近海养殖业的迅速发展，浅海水质大不如前，而大面积用于围垦的渔网铁网又致使鲎群在繁殖期不能正常洄游产卵，所以鲎的数量急剧锐减。
另外“里一层外一层”的过于密集的海上捕捞作业又破坏了鲎的正常生长周期，成为导致鲎数量锐减的另一元凶。
（2）地点：西埔湾•时间：7月15日下午•对象：渔排主人、前楼镇围垦管理处工作人员•成员：海彬、镇彬•调查方式：采访、摄像•调查结论：西埔湾位于西埔海堤内，围垦面积3.26万亩，海堤长4.35千米，堤内蓄水量最多可达7000万立方米。
孵化温度对中华鳖性别分化的影响
Ｌｕ Ｊ ｉ ，Ｃｈ ｎ Ｓ ｈ ｅ ｅａｕ ｅａ ｄ ｏｈ ｒｆｃｏ ｎ ｕ ｎ ｅ ｔ ｅ ｅ ．Ｔ ｅ ｔｍｐ ｒｔｒ ｎ ｔｅ ａ ｔｒｉｆ ｅ ｃ ｏｆ－ ｌ
２ ． 显著性 检验 ３
不同的孵化温度产生不同的子代性别 比，ｘ检 验结 果 显示 ，在 ２ 、３ 和 ３ 二 化 温度 下差 异 显 ５ ２ ５ｃ 孵 Ｉ 著 ，子代性别 比与 ６： １ １ 早＝ ： 的假设 出现偏差 ；而 ２ 和 ３ ＝ ８ ０【则差异不显著 ， ｏ 符合 １ｌ ： 假设 。 ３ 讨 论 刘筠等认为 ，中华鳖的胚胎发育适宜温度范围
不 同孵化温度产生 的子代性别 比
由图 １ 可见 ，通过用恒温孵化箱对 中华鳖卵进 ∞ ∞ 砷 ∞ ∞ ０ 行孵化 ，不同温度组所需的孵化时间及孵化积温各
不相 同。除 ２ ℃组未能进行正常孵化外 ，其他温 ２
度组均能正常孵化 。其 中，２ ５ｃ Ｃ组孵化所用时间 最 长 ，约 ８ ；３ 组孵 化 时 间最短 ，约 ４ 。 中 ７ ｄ ５ｃ Ｃ １ ｄ
孵 化温度 决定 的 ，至今 尚无 有力 的证据 。 因此 ， 本 试 验研 究 了孵 化 温度 对 中华 鳖 性别 决 定 的影 响 ，以此 来探 明中华鳖 的性别决定 机制 ，为我 国
２ 结 果 与分析
２１ 孵化 结 果 ．
不同温度组孵化积温变化和孵化率的结果见图
１ ２。 、 ’
业， ９ ８ １ ： － ． ｌ９ （ ） ６ ７
聂刘 旺， 郭超 文， 鸣， 中华鳖 的性 别决定机制【． 用 与 汪 等． Ｊ应 １
环境生物学报， ０ １ ７ ３ ：２ ８ ２ １ ２０ 。 （） ５— ６． 朱 道玉 ． 鳖 的性别 鉴 定 【． 北大 学学 报 （ 稚 Ｊ河 Ｊ 自然科 学 版 ） ，
中华鳖的性别决定机制
应用与环境生物学报 2001 ,7 (3) :258～261 Chin J Appl Envi ron Biol = ISSN 1006 - 687X
2001206225
பைடு நூலகம்
中华鳖的性别决定机制 3
聂刘旺 3 3 郭超文 汪 鸣 王 千
(安徽师范大学生命科学学院 芜湖 241000)
CLC Q959. 630. 8
SEX DETERMINATION MECHANISM OF TRION YX SIN ENSIS 3
N IE Liuwang 3 3 , GUO Chaowen , WAN G Ming & WAN G Qian
( L if e Science College of A nhui Norm al university , Wuhu 241000 ,China)
水 ,维持沙中含水量. 孵化的温度设置为 35 ℃±0. 5 ℃,
33 ℃±0. 5 ℃,31 ℃±0. 5 ℃,29 ℃±0. 5 ℃,27 ℃±0. 5 ℃ 2 结 果
和 24 ℃±0. 5 ℃等 6 个条件 ,恒温孵化至仔鳖出壳.
2. 1 中华鳖卵不同温度孵化结果
仔鳖出生后 ,立即转移至 25 ℃恒温生化培养箱 中饲养 ,3～4 个月后 ,仔鳖体重达 20～40 g ,此时进 行性别观察. 性别判断依据第二性征和解剖学特征确 定[8 ] . 1. 3 中华鳖染色体 G2带研究
温度对中华鳖发育及性别分化的影响
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6、进度安排
查阅资料，制定实验方案， 准备实验材料，完成开题 报告。
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7、可行性分析
实验相关的仪器设备及试剂药品已具 备；
本人基本上熟悉了实验流程与实验相 关仪器的操作；
通过各位老师以及师兄师姐的指导和 自己的努力，能完成整个实验。
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8、参考文献
n 贺斌，龟鳖类温度依赖型性别决定机制的研究进展，动物学杂志2009 ，44（5）：147~152
2、待性腺分化结束后，用组织切片的方法观 察孵化后的性腺，鉴定性别，统计雌雄数目 。
预期低温处理下雌性所占比例较高，高温孵 化后雄性所占比例高于雌性，且高温孵化时 其性腺分化所需时间较短。
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4、实验材料、仪器和试剂
材料 中华鳖受精卵40枚，直径范围在1.5~2.0cm，卵重
范围在3~5g。
仪器与试剂 Bouin氏固定液，带式苏木精，0.5％伊红，二甲
聂刘旺的研究结果却与朱道玉等人的研究所得出的规 律相反，发现中华鳖的性比受孵化温度影响为MF型 ，即高孵化温度产雌性，低孵化温度产雄性。
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3、研究目标、内容及预期结果
分别用高温和Βιβλιοθήκη 温处理正在进行性腺分化的 中华鳖受精卵，探究孵化温度对性别决定及 性腺分化速度之间的关系。
1、将鳖卵分别放置于27℃和32℃的恒温箱中 孵化，并保持一定的湿度；
）：258~261 n 朱道玉，中华鳖性别决定敏感期的研究，菏泽学院学报，2006,28（2
）：82~84 n 朱道玉，中华鳖性腺的发生与发育研究，水生生物学报，2009，33（5
）：924~928 n 傅丽容，中华条颈龟胚胎期性腺分化的组织学观察，湖北农业科学，
池塘养殖中华鳖雌雄个体生长差异试验
中华鳖养殖是怀远县渔业支柱产业，近年来发展速度较快，形成温室大棚恒温养殖、池塘露天养殖、稻鳖生态养殖、鱼鳖混养等多种生产模式。
生产实践证明，不论采取哪种方式养殖，中华鳖幼鳖以及成鳖雌雄个体的生长速度都存在明显差异。
2019年笔者在白莲坡镇姚山村商品鳖养殖基地开展池塘养殖黄河品系中华鳖雌雄生长差异试验，研究实际生产中雌雄幼鳖的总体差异情况，旨在提升本地区池塘养殖中华鳖技术水平和经济效益，为农业增收、农民致富提供技术支持。
一、材料与方法1.池塘条件与消毒处理试验使用室外养殖池塘，共5口，池壁为水泥砖混结构，池底是黄黏土。
池塘长方形，东西走向，长×宽为25米×34米，深度1.2米，单口面积850米2，试验池塘编号分别为：1排1号、1排2号、1排3号、2排1号、2排2号。
进排水管道独立，分别设在池塘两端，材料为PVC。
进水管道直径4英寸，进水口安装阀门控制水流；排水管道直径6英寸，使用管道弯头和过滤网直接排放控制水位。
水源为无污染的地下水，该养殖基地地处淮河岸边，地势较为平坦，地下水资源丰富，周边环境安静，无工业污染。
每口池塘的背风向阳岸边处设置晒台，晒台10个，规格为2.5米×0.8米。
晒台用钢筋做骨架，骨架上缝9目的聚氯乙烯网片，靠池壁用钢丝吊起，斜放在水面上，入水10～15厘米，并与水面呈15°。
晒台兼做食台使用。
6月1日，所有池塘加水30厘米左右，使用生石灰消毒，每口池塘使用130千克化水趁热全池泼洒。
消毒要求：使用块状生石灰，加水溶化后趁热泼洒，池底、池壁全覆盖，不留死角，彻底杀灭病原体。
6月7日加注新水深度至0.8米。
2.幼鳖规格选用安徽荆涂山农业科技有限公司温室培育的黄河品系中华鳖幼鳖。
该苗种为2018年7月进入温室培育的鳖苗，恒温养殖、规格整齐、健康无病害。
放养时随机抽取20只称重得出：雄鳖规格400～500克/只、平均480克/只，雌鳖规格350～420克/只、平均400克/只。
土鳖虫，雌雄鉴别
土鳖虫，雌雄鉴别写在前面我们前面介绍过土鳖虫的用途，上次遇见的土鳖虫大小较为均匀，这次遇见的土鳖虫大小不一。
按照网上雌雄鉴别法，发现该批土鳖虫中掺有部分雄虫，古人一直都用雌虫入药，暂未找到对雌雄药用做区分的文献。
猜测一：雄虫小，跑的快，长大了还有翅膀会飞，古人捉不到，所以入药选的是雌虫。
联想其功效破血逐瘀，续筋接骨。
若古人用他，是考虑到虫子善于走窜的性子，那雄虫这方面应该是更佳的。
猜测二：因其用于产后瘀阻腹痛，可能雌虫体内具有类似促进宫缩之类的雌性需要的激素，可作用于妇女。
从这个角度说，必须得严格控制药品中雄虫的占比。
从古代到现在的药典，均收录雌虫，我们从养殖上先看看雌雄的差异。
药典上的土鳖虫（䗪虫）【基源】本品为鳖蠊科昆虫地鳖（Eupoly phagasinensis）或冀地鳖（Steleo phagaplancyi）的雌虫干燥体。
捕捉后，置沸水中烫死，晒干或烘干。
【检查】杂质不得过5%（通则2301）。
【性味与归经】咸，寒；有小毒。
归肝经。
【功能与主治】破血逐瘀，续筋接骨。
用于跌打损伤，筋伤骨折，血瘀经闭，产后瘀阻腹痛，癥瘕痞块。
【用法与用量】3～10g。
【注意】孕妇禁用。
【贮藏】置通风干燥处，防蛀。
土鳖虫形态特征雄虫身体较小，有一对翅膀，喜爬行能飞动，触角比雌虫长约一倍，雌虫身体较肥大，没有翅膀。
土鳖虫一生要经过卵、若虫、成虫三个发育阶段，中间没有蛹的发育阶段。
若虫和成虫的形态、生活习性基本相同，喜欢生活在墙角、柴堆、杂物等阴暗潮湿、松软的土壤中。
白天土鳖虫不活动，日落后出来觅食寻偶，增加光线亮度和光照时间，可以促进土鳖虫生长发育速度。
饲养方法精饲料：通常用麦麸、米糠、豆粨、包谷粉等。
青饲料：没喷过农药的新鲜蔬菜叶，瓜果皮瓤等。
动物性饲料：捣碎的畜禽新鲜内脏或煮熟的蚯蚓。
初春气温上升，冬眠后的土鳖虫营养消耗过多，先喂精料一段时间再搭配粗料。
初龄若虫以精料为主，促进发育增强抗病力；一月龄后搭配粗料；若虫六月龄后，以粗料为主，精料为辅；产卵雌虫增喂高蛋白动物性饲料。
中华鳖胚胎的发育及稚鳖雌雄分化的观察
安徽农学通报，Anhui Agri.Sci.Bull.2018，24（12）中华鳖胚胎的发育及稚鳖雌雄分化的观察王佳佳1，2蒋业林1，2*王芬1，2程云生1，2侯冠军1，2季索菲1，2郑露1，2李翔2，3张晔4吴育春5苏友风6（1安徽省农业科学院水产研究所，安徽合肥230031；2安徽省鳖类养殖工程技术研究中心，安徽蚌埠233000；3安徽省喜佳农业发展有限公司，安徽蚌埠233000；4马鞍山春盛生态农业有限公司，安徽马鞍山243000；5安徽黑神生态农业有限公司，安徽芜湖241000；6桐城市苏氏农业发展有限公司，安徽桐城231400）摘要：为了解中华鳖胚胎的发育及稚鳖雌雄分化的性状特征，通过监测胚胎重随着孵化时间、质量和稚鳖外形形态的变化，采用相关分析和通径分析法，分析了胚胎性状与质量的关系，建立回归方程。
在胚胎生长发育过程中对稚鳖的背甲长、宽和头长等部位生长数据进行了测量统计，结果表明，背甲长、宽和头长与胚胎重呈显著正相关关系；从外观观察稚鳖性别差异明显，根据外观性状参数进行验证分析，正确率达89.5%。
关键词：中华鳖；胚胎发育；稚鳖；雌雄分化中图分类号Q954.4文献标识码A文章编号1007-7731（2018）12-0100-3Development of Embryos in Juvenile Soft-shelled Turtles and Observation of Their Male and Fe⁃male DifferentiationWang Jiajia1，2et al.（1Fishery institute，Anhui Academy of Agricultural Sciences，Hefei230031，China；2Anhui Engineering Research Center for turtle Farming Technology，Bengbu233000，China）Abstract：In order to know racteristics of the embryo development and the male and female differentiation of the juve⁃nile soft shelled turtle，the relationship between the embryo character and the quality of the juvenile soft shelled tur⁃tle was analyzed by monitoring the changes of the quality of the embryo weight and the shape of the juvenile soft shelled turtle，and the regression equation was established by the correlation analysis and the path analysis.The growth data of the back length and head length of the juvenile soft shelled turtle were measured and analyzed.The re⁃sults showed that the length and width of the back length，and the head length had a significant positive correlation with the weight of the embryo.From the appearance，the sex differences of juvenile soft shelled turtle were obvious，and the accuracy rate was89.5%according to the appearance parameters.Key words：Embryo；Embryonic development；Juvenile soft shelled turtle；Male and female differentiation中华鳖（Embryo），又名甲鱼、团鱼等，卵生两栖爬行动物，具有重要的研究价值，广泛分布于东南亚各国。
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中华鳖性别判断实验报告
性别是生命具有初步细胞形态后起源和演化所遇到第一个重大方向问题,从整个生物的系统发育,以遗传方式成为性进化的主线,然而,在少数生物,却选择以环境条件作为性别决定的导因,在其决定机制中,遗传因素发挥多少作用,这是极具吸引生物学家的问题。
性别在基因水平、生理水平和表观水平都表现出特定特征,在大多数情况下,它们具有一致,但在一定条件下会出现分离。
中华鳖是温度依赖型性别决定机制,本实验研究中华鳖表观水平的性别特征,观察其形成和发育过程,同时以外源激素对中华鳖胚胎期和仔稚鳖期进行干扰,研究性别特征和性选择的方向性,并探讨发育阶段、激素与温度和对性别的决定作用,为进一步研究中华鳖性别决定机制奠定生物学基础。
孵化温度为32℃,在孵化第15天性别分化的关键期分别使用17a-甲基睾酮(17-Methyltestosterone)和雌二醇(Estradiol, E2)对胚胎动物极注射处理,结果表明,雌二醇组孵化时间为38 d,17α-甲基睾酮组43.5 d,对照组44 d,雌二醇组平均提前6d孵出缩短了孵化时间,17α-甲基睾酮组对孵化时间无明显影响；外源激素处理后的孵化率略降低,雌二醇组66.7%,17α-甲基睾酮组53.3%,对照组86.7%；激素处理后孵化出卵的仔鳖雌雄比例出现明显差异,对照组雌雄性别比为3：11,17α-甲基睾酮组为0：4,E2组为8：0。
说明外源激素对性别特征有干扰作用。
浓度梯度分别为25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg 的17a-甲基睾酮和雌二醇拌合饲料喂养孵化出卵的仔稚鳖,观察其性别特征及生长形态的变化情况,结果表明,17α-甲基睾酮3个组均表
现为雄性性别特征,0d时(实际出卵后驯养20 d),仔稚鳖性别特征趋向雌性,雄性特征不明显；10 d时,部分个体尾巴变长接近裙边,出现较为明显的雄性性别特征；20 d时,尾巴超出裙边,雄性性别特征基本可以确定；30 d时,雄性性别特征确定。
雌二醇组中3个组亦表现为雄性性别特征,0d到10d组中仔稚鳖性别特征趋向雄性；20 d时,尾巴超出裙边,性别特征基本确定为雄性；30 d时性别特征确定为雄性。