小鼠脾脏指数计算公式
脾多肽注射液对化疗后KM小鼠骨髓抑制和免疫力低下的治疗作用
◇基础研究◇摘要目的：评估脾多肽注射液（LPI ）对卡铂（CBP ）化疗后昆明（Kunming mice ，KM ）小鼠骨髓抑制和免疫力低下的治疗作用及其可能的作用机制。
方法：：KM 雌鼠随机分为对照组、模型组、脾多肽低剂量和高剂量治疗组。
第1天，治疗组及模型组腹腔单次注射卡铂（70mg/kg ）构建化疗所致骨髓抑制小鼠模型，对照组注射生理盐水。
第2至16天，治疗组每天（60mg ·kg -1·d -1）腹腔注射脾多肽1次，对照组和模型组注射生理盐水。
给药结束后，检测小鼠外周血中血小板、白细胞和红细胞数量、体质量、胸腺和脾脏的器官指数；流式细胞术检测小鼠胸腺和脾的CD4+T 细胞亚群、CD8+T 细胞亚群和CD4+CD25+Foxp3+调节性T 细胞（Treg ）亚群的变化。
结果：：与对照组比较，模型组小鼠第16天白细胞和血小板数量显著减少，胸腺和脾脏的器官指数减少，胸腺和脾脏Treg 淋巴细胞亚群比例降低；高剂量脾多肽干预后，白细胞和血小板计数显著恢复，胸腺和脾脏Treg 淋巴细胞亚群比例恢复（P <0.05）。
结论：：脾多肽注射液对化疗后KM 小鼠的骨髓抑制和免疫力低下，具有一定的治疗作用。
关键词脾多肽注射液；化疗；T 淋巴细胞中图分类号：R329.1；R965.2文献标志码：A文章编号：1009-2501(2023)09-1000-08doi ：10.12092/j.issn.1009-2501.2023.09.005细胞毒性是化疗药物抑制恶性肿瘤快速生长的主要途径之一［1］。
同时，化疗药物抑制了骨髓细胞的正常生长引起骨髓抑制［2］。
骨髓抑制主要表现有白细胞减少、贫血和血小板减少［3］。
因此，化疗后血细胞数量的变化能反映骨髓抑制程度。
其中，白细胞减少能导致化疗后并发感染和败血症的风险增高，是化疗所致免疫力低下的重要表征之一［4］。
T 淋巴细胞是机体免疫系统中的重要组成部分，其参与肿瘤免疫监视、细胞杀伤和免疫调节等重要过程［5］。
小鼠脾脏细胞原代培养及观察计数
小鼠脾脏细胞原代培养及观察计数【实验目的】1.学习掌握细胞培养的基本原理以及具体方法，并对小鼠脾细胞进行原代培养；2.掌握无菌操作的具体过程及无菌操作台的使用；3.学习掌握染色法鉴别细胞的生死状态的原理及方法；4.学习使用血球计数板对细胞总数及活细胞数进行计数；【实验原理】A.细胞培养细胞培养指的是在无菌条件下，把动、植物细胞从组织中取出，在体外模拟体内的生理环境，使离体的细胞在体外生长和繁殖，并且维持其结构和功能的一种培养技术。
动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。
从供体获得组织细胞，在无菌条件下，用胰蛋白酶消化或机械分散等方法，将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法称为细胞的原代培养。
当培养的动物细胞生长增殖达到一定密度，形成致密的单层细胞时，用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞，从一个容器中以1：2或其他比例转移到另一个容器中扩大培养的方法，称为细胞的传代培养。
传代培养的累计次数就是细胞的培养代数。
高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的。
但如果把活细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究，则要方便和简单得多。
被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料，对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类揭开生、老、病、死的规律，探索优生、抗衰老和防治各种疾病的途径和机制，也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性，使其向有利于人类健康长寿的方向发展。
因此动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段，被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。
细胞培养的意义:具有其他生物技术无可比拟的优点；培养条件易改变和控制，便于单因子分析；便于人们直接对细胞内结构、细胞生长及发育等过程的观察；在生物学的各个领域（如分子生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学及病毒学等）已被广泛应用。
细胞培养的局限性：在脱离机体复杂环境下，细胞培养条件与躯体环境有一定距离；观察到的结果有时难以正确反映机体内的状况；细胞培养得到的产物少。
扁担杆提取物体内抗肿瘤作用研究
扁担杆提取物体内抗肿瘤作用研究摘要：目的：研究药用植物扁担杆提取物体内抗肿瘤作用。
方法：采用小鼠宫颈癌（U14）移植性肿瘤模型，观察扁担杆根皮乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取物对肿瘤生长的抑制作用。
结果：小鼠灌服扁担杆提取物10d后，总提取物及其水部位的中、高剂量组可明显抑制U14移植性肿瘤的生长，与阴性对照组相比，有显著性差异（P＜0.01）。
结论：扁担杆提取物具有抗小鼠宫颈癌（U14）移植性肿瘤生长作用。
关键词：扁担杆提取物；抗肿瘤；小鼠宫颈癌U14扁担杆(Grewiabiloba G.Don) 为椴树科(Tiliaceae) 扁担杆属(Grewia)植物，主要分布于江西、湖南、浙江和广东等省［1］。
在非洲和亚洲一些国家地区，部分扁担杆属植物被作为民间草药使用，多具有抗菌消炎作用。
如南非的Grewia occidentalis和巴基斯坦的Grewia erythraea在民间作为传统草药治疗伤口细菌感染［2，3］；Grewia bicolor在苏丹作为传统草药治疗皮肤脓胞疮，还有镇静作用［4］；《新修本草》记载扁担杆的变种小花扁担杆枝叶煮汁可治小儿蛔虫病；《开宝本草》称其可“主三虫，下气消谷”［5］；《中药大辞典》记载其全株和枝叶能祛风除湿、理气消痞，可治小儿因虫疳积、大人气痞、脾虚食少、妇女崩带、风湿［6］。
扁担杆的根皮在江西部分地区，民间用来治疗皮肤脓胞疮等细菌感染。
但关于扁担杆的抗肿瘤作用研究还未见报道，本文首次报道了扁担杆根皮乙醇提取物对小鼠宫颈癌（U14）移植性肿瘤生长的抑制活性。
1 实验材料1.1 实验药品和试剂扁担杆根皮药材于2006年8月采自江西省萍乡市，原植物由安徽中医学院药学院刘守金副教授鉴定为扁担杆(Grewia biloba G.Don)，凭证标本（No.060801）保存于江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室；环磷酰胺(CTX)（江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号：07102521）。
三七有效成分对免疫性肝损伤的保护作用
三七有效成分对免疫性肝损伤的保护作用韦维;黄永秩;梁柳丹;农凤映;农超鹏;李韬【摘要】目的：研究三七有效成分三七总皂苷、总黄酮及多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。
方法昆明种小鼠60只随机分为正常组（A组）、模型组（B组）、三七总皂苷组（C组）、三七总黄酮组（D组）、三七多糖组（E组）。
C、D、E 组分别给予三七总皂苷、三七总黄酮、三七多糖灌胃，1次/d，14 d后B、C、D 和E组于尾静脉注射卡介苗，26 d于尾静脉注射脂多糖，禁食12 h后于眼球静脉丛采血，检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、白细胞介素-4（IL-4）的含量；取肝、脾、胸腺计算脏器指数；另取肝脏做病理学检查。
结果与B组比较， C、D、E组小鼠肝、脾、胸腺指数、血清ALT水平明显降低（P<0.01），IL-4、T-SOD显著升高（P<0.01）；病理学示C、D、E组肝脏炎症细胞浸润、水肿和点状、片状坏死程度均比B组明显减轻。
结论三七总皂苷、总黄酮及多糖对免疫性肝损伤均有明显的保护作用。
%Objective To investigate the protective effects of active components of notoginseng on immunological liver injury in mice. Methods Sixty Kunming mice were randomly divided into normal group (group A), model group (Group B), PNS group (Group C), total flavonoids group (Group D),and polysaccharide group (group E). C,D and E groups were given PNS, total flavonoids and polysaccharide orally, 1/day for 14 days. Then BCG was intravenous injected in B, C, D and E groups, and after 26 days lipopolysaccharide (LPS) was intravenous injected. Samples of eye venous plexus blood were collected, and serum levels of alanine aminotransferase (ALT), total superoxide dismutase (T-SOD) and Interleukin-4 (IL-4) were detected.Organs index was calculated by checking pathological results of liver, spleen and thymus. Results Com-pared with group B, the thymus indexand serum ALT levels were significantly decreased in C, D and E groups(P<0.01), but the levels of IL-4 and T-SOD increased significantly (P<0.01). Pathological results showed that there were more serious inflammatorycell infiltration in liver, edema and necrosis of dot in C, D and E groupsthan those in group B. Conclusion The active components of notoginseng showed a significant protective effect on immunological liver injury.【期刊名称】《天津医药》【年(卷),期】2014(000)009【总页数】3页(P893-895)【关键词】三七皂甙;卡介苗;脂多糖类;三七总黄酮;三七多糖;免疫性肝损伤【作者】韦维;黄永秩;梁柳丹;农凤映;农超鹏;李韬【作者单位】右江民族医学院临床学院 533000;右江民族医学院附属医院;右江民族医学院临床学院 533000;右江民族医学院临床学院 533000;右江民族医学院临床学院 533000;右江民族医学院临床学院 533000【正文语种】中文【中图分类】R285.5三七为五加科植物参三七的根，含皂苷类、黄酮类、多糖类、醇类及三七素等有效成分。
睡眠剥夺对小鼠免疫的影响
谢
谢 ！
对照组
实验组
用特定病毒抗 原对两组小鼠 进行免疫，一 定的时间后抽 取小鼠血液制 成血清滴在反 应板上，用特 定病毒进行滴 加，观察血液 凝剂情况并记 录
对已经免疫的A 组小鼠进行不同 程度的睡眠剥夺， B组不做睡眠剥 夺，然后对实验 小鼠进行上述血 凝操作，观察血 凝情况
96孔微量反应板的清洗
睡眠剥夺对小鼠 免疫能力的影响
主讲人：辛凯悦 指导老师：朱艳媚
组员：杜晨阳、辛凯悦、 李毅、朱灵凤、舒文静
动物模型的建立
统计 正文 参考文献
研究对象
睡眠剥夺对小鼠 免疫能力的影响
免疫功能测定
讨论
实验预期
研究目的
睡眠是一种生理现象，睡眠 充足与否与人体健康有着密 切联系。长期睡眠剥夺可引 起人或动物产生不良情绪反 应、免疫功能下降等等。随 着生活节奏的加快，越来越 多的儿童与成年面临睡眠不 足的危害，这已足够引起人 们的注意。本小组通过一种 慢性不完全剥夺小鼠睡眠实 验来观察睡眠不足对小鼠免 疫功能的影响。
3.红血球凝集实验 在反应板上可以直观地观察到：对照组红细 胞不凝集，在反应板的微孔中红细胞沉底呈 点状，经过免疫的小鼠体内产生较多的抗体， 可以与加入的流感病毒反应而抑制鸡血红细 胞的凝集作用；实验组的红细胞凝集，在反 应板的微孔中平铺呈网状，即经过睡眠剥夺 的小鼠免疫能力会下降，产生的流感病毒抗 体减少，流感病毒与鸡血红细胞产生凝集作 用要强于对照组。
睡眠剥夺是指由于某种原因导致的睡眠数量被迫减 少，它对机体的影响是十分明显的。它可以造成机 体疲劳、作业能力降低、免疫力下降、警觉水平降 低，并引起情绪改变、精神不振、粗心、注意力不 集中、食欲下降、记忆力下降、工作效率低等不良 反应。 不完全睡眠剥夺可导致免疫功能的下降. 机体内过 量的自由基可对机体产生伤害,其重要原因是产生脂 质过氧化物,造成对细胞结构和功能的破坏,从而导 致衰老和各种疾病,机体内超氧化物歧化酶(SOD) 的 功能是清除体内的氧自由基,从而对机体起到保护作 用 ,增强免疫力. 有研究表明,长期睡眠较差的人的 血清过氧化脂质明显偏高,红细胞SOD 活性明显偏低, 从而导致机体免疫力下降.。本实验的预期结果是慢 性不完全睡眠剥夺会对小鼠的免疫器官产生伤害,其 机制可能与上述因素有关。
结核分枝杆菌感染对小鼠脾脏IL-12表达的影响及其与小鼠体重比和脏器指数的相关性研究
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－４６９５．２０２１．１１．００４ 文章编号：１６７１－４６９５（２０２１）１１－１１３２－０４
结核分枝杆菌感染对小鼠脾脏 ＩＬ－１２表达的影响
及其与小鼠体重比和脏器指数的相关性研究
王馨１ 李君２ 王玲２ （青海省第四人民医院 １检验科；２呼吸科 青海 西宁 ８１００００）
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１２（ＩＬ－１２）ｉｎ
基金项目：青海省科学技术项目（编号：９６３１３２５０）
临床和实验医学杂志 ２０２１年 ６月 第 ２０卷 第 １１期
【摘要】 目的 研究结核分枝杆菌感染对小鼠脾脏白细胞介素 －１２（ＩＬ－１２）表达的影响，并探讨 ＩＬ－１２表达与 小鼠体重比和脏器指数的相关性。方法 ４５只 ６～８周龄雄性 Ｃ５７ＢＬ６小鼠按照随机数字表法分为 ３组，对照组、感染 １ 个月组和感染 ２个月组，每组各 １５只。对照组小鼠正常喂养，感染 １个月组和感染 ２个月组分别被 １０５ＣＦＵ／ｍ１Ｌ结合 分枝杆菌感染 １个月和感染 ２个月。比较 ３组小鼠体重比和脾脏脏器指数。采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中 ＩＬ －１２、ＩＬ－１０和肿瘤坏死因子 －α（ＴＮＦ－α）含量，以及小鼠脾脏 ＩＬ－１２蛋白含量；通过定量聚合酶链式反应法检测小 鼠脾脏 ＩＬ－１２ｍＲＮＡ表达水平。结果 与对照组相比，感染 １个月组和感染 ２个月组小鼠体重比、血清 ＩＬ－１２和 ＩＬ－ １０含量、脾脏 ＩＬ－１２ｍＲＮＡ和蛋白表达水平均显著降低，而脾脏脏器指数和血清 ＴＮＦ－α水平显著升高，差异均有统计 学意义（Ｐ＜０．０５）。与感染 １个月组相比，感染 ２个月组小鼠血清 ＩＬ－１２和 ＩＬ－１０含量、脾脏 ＩＬ－１２ｍＲＮＡ和蛋白表 达水平均显著降低，脾脏脏器指数和血清 ＴＮＦ－α水平显著升高，差异均有统计学意义（Ｐ ＜０．０５）。Ｐｅａｒｓｏｎ相关性分 析显示：血清血清 ＩＬ－１２水平与血清 ＴＮＦ－α水平呈高度负相关（ｒ＝－０．８２９，Ｐ ＜０．００１），而与血清 ＩＬ－１０水平呈高 度正相关（ｒ＝０．７２４，Ｐ ＜０．００１）；小鼠脾脏 ＩＬ－１２ｍＲＮＡ和蛋白与小鼠体重比呈高度正相关（ｍＲＮＡ：ｒ＝０．５３８，Ｐ ＝ ０．０２９；蛋白：ｒ＝０．７２１，Ｐ ＜０．００１），与小鼠脾脏脏器指数呈高度负相关（ｍＲＮＡ：ｒ＝－０．６１９，Ｐ ＝０．０３１；ｒ＝－０．７０２， Ｐ ＜０．００１）。结论 结核分枝杆菌感染引起小鼠脾脏 ＩＬ－１２表达减少，并且其表达减少可能通过上调炎症而影响小鼠 体重比和脾脏脏器指数。
中药成分对口蹄疫灭活苗免疫小鼠的脾脏指数淋巴细胞增殖及血清抗体水平的影响
中药成分对口蹄疫灭活苗免疫小鼠的脾脏指数淋巴细胞增殖及血清抗体水平的影响王明周;王陈超;付婉;涂君平;贺庭祯;彭远义;王自力【摘要】为探讨中药成分人参皂苷、灵芝多糖、枸杞多糖对牛O型-Asia Ⅰ型FMD灭活苗的免疫效果的影响,按照0.2mL/只的剂量在第1、15天分别给小鼠接种含0.1 mg/mL各中药成分的牛O型-Asia Ⅰ型FMD灭活苗,分别于第15、30、45天测定小鼠脾脏指数及血清O型FMD抗体水平,并于第45天用MTT法检测小鼠脾脏淋巴细胞增殖.结果表明,在第30、45天时,人参皂苷组小鼠脾脏指数、脾脏T、B淋巴细胞增殖及血清抗体水平均显著高于对照组和疫苗组(P＜0.05);在第45天时,灵芝多糖组小鼠脾脏指数和血清抗体水平均显著高于对照组和疫苗组(P＜0.05);枸杞多糖组的脾脏指数、血清抗体水平与对照组或疫苗组的相比,在整个试验期间呈增高趋势.说明中药成分人参皂苷和灵芝多糖对牛O型-Asia Ⅰ型FMD灭活苗免疫小鼠具有免疫增强功效,枸杞多糖的免疫增强效果不明显.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2015(051)008【总页数】3页(P51-53)【关键词】人参皂苷;灵芝多糖;枸杞多糖;牛口蹄疫灭活苗;脾淋巴细胞;脾脏指数;小鼠【作者】王明周;王陈超;付婉;涂君平;贺庭祯;彭远义;王自力【作者单位】西南大学动物科技学院,重庆北碚400715;贵州省三都水族自治县农村工作局,贵州三都558100;西南大学动物科技学院,重庆北碚400715;四川省绵阳市涪城区畜牧兽医局,四川绵阳621000;西南大学动物科技学院,重庆北碚400715;西南大学动物科技学院,重庆北碚400715;西南大学动物科技学院,重庆北碚400715;西南大学动物科技学院,重庆北碚400715【正文语种】中文【中图分类】S853.72口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触传染性和可快速远距离传播的主要侵染偶蹄动物的疫病，易感动物达70多种。
山药多糖的体外抗氧化活性及对正常小鼠的免疫增强作用
山药多糖的体外抗氧化活性及对正常小鼠的免疫增强作用许效群;刘志芳;霍乃蕊;赵媛;田夏;雷婷婷【摘要】In vitro anti - oxidation capacity and immunomodulatory function in normal mice of yam polysaccha-ride were investigated in this study. The results demonstrate that the reducing power was enhanced with the increase ofrnthe concentration. The scavenging rate for DPPH · , · OH and O2- were up to 92. 73% ,84. 72% and 89. 14% respectively and exhibited a linear relationship. Compared with normal mice group, both the medium and high dose group significantly increased the spleen index, the phagocytic index and serum hemolytic IgM level, and high dose groups were especially higher (P < 0. 01). the thickness of foot pad of high dose group were also significantly increased ( P < 0.01) during the induced delayed type hypersensitivity. Therefore yam polysaccharides showed good anti - oxidation and immuno - enhancing capacity, this provides a new source of safe and natural antioxidant and immunomodulatory agents for future food production and also facilitates further comprehensive exploitation and application of Chinese Yam.%从提取淀粉后的山药汁液干粉中提取多糖,探讨其体外抗氧化活性和对正常小鼠的免疫调节活性.结果表明山药多糖的还原力随着浓度的提高显著增强,对DPPH·、·OH及O2具有较强的清除能力,并呈一定的剂量关系,清除率分别可达到92.73％、84.72％、89.14％;与正常对照组小鼠相比,中、高剂量组的免疫脏器指数和吞噬细胞的吞噬指数、血清溶血素水平均显著提高,其中高剂量组均达到极显著水平,高剂量组还极显著增加迟发型变态反应引起的小鼠足跖厚度.因此山药多糖具有较好的抗氧化性和免疫增强活性,为安全天然食品抗氧化剂、免疫增强剂的开发提供了新来源,并为山药的综合开发利用奠定了基础.【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2012(027)007【总页数】6页(P42-46,51)【关键词】山药多糖;抗氧化;免疫增强【作者】许效群;刘志芳;霍乃蕊;赵媛;田夏;雷婷婷【作者单位】山西农业大学食品科学与工程学院,太谷 030801;山西农业大学附属医院,太谷030801;山西农业大学食品科学与工程学院,太谷 030801;山西农业大学食品科学与工程学院,太谷 030801;山西农业大学食品科学与工程学院,太谷030801;山西农业大学食品科学与工程学院,太谷 030801【正文语种】中文【中图分类】R151.1山药(Dioscorea opposite Thunb)为薯蓣科多年生宿根蔓生植物薯蓣的块茎，是我国传统的药食同源食物之一［1］。
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小鼠脾脏指数计算公式
SI=(脾脏重量/小鼠体重)×100
其中，SI为脾脏指数，脾脏重量为小鼠脾脏的重量，小鼠体重为小
鼠的体重。
脾脏指数常用于研究小鼠脾脏的发育情况、疾病模型和药物治疗效果
等方面。
通过比较不同组别小鼠的脾脏指数，可以评估疾病或药物对小鼠
脾脏的影响程度，判断其具体效果。
脾脏指数的测量方法如下：
1.实验前准备：
(1)准备大量的小龄小鼠；
(2)称量小龄小鼠的体重；
(3)准备天平并将天平调零。
2.操作步骤：
(1)麻醉小鼠：使用适当的麻醉方法使小鼠处于无痛苦状态，如全身
麻醉。
(2)杀死小鼠：将小鼠安置在无菌条件下，将其颈部脊柱迅速击断，
杀死小鼠。
(3)分离脾脏：将小鼠的脾脏小心地取出，并除去周围的组织和血液。
(4)称量脾脏：将取出的脾脏放在称量盘上，使用天平准确地称量其
质量。
(5)记录结果：将脾脏的质量记录下来，并将其与小鼠的体重进行比较。
(6)计算脾脏指数：按照上述的计算公式，将脾脏质量与小鼠体重相除，再乘以100，得到脾脏指数的值。
需要注意的是，脾脏指数的计算结果是一个相对指标，不同实验室或研究者之间的脾脏指数结果可能会有差异。
因此，在进行比较分析时，建议使用相同的测量方法和统计分析方法，以确保结果的准确性和可靠性。
此外，脾脏指数的计算公式也可以根据研究需要进行修订，如考虑修正因子等，以适应特定实验要求。