14.家兔急性肾功能不全
家兔急性肾功能不全PPT
汇报人：可编辑 2024-01-11
目录
• 引言 • 病因和发病机制 • 病理变化 • 诊断和鉴别诊断 • 治疗和预防 • 家兔急性肾功能不全的实验研究 • 结论
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引言
目的和背景
研究目的
探讨家兔急性肾功能不全的发病机制、病理变化及治疗方法 。
背景介绍
急性肾功能不全是一种常见的肾脏疾病，其发生和发展与多 种因素有关，如缺血、中毒等。家兔作为实验动物，在研究 急性肾功能不全方面具有诸多优点，如易于饲养、操作方便 等。
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进一步深入研究急性肾功能不 全的发病机制，探索更多有效
的药物和治疗方法。
针对不同病因引起的急性肾功 能不全，开展更为细致的研究 ，以提高治疗的针对性和效果
。
加强临床与实验研究的结合， 将研究成果转化为实际的临床 应用，为患者提供更好的治疗
服务。
开展国际合作与交流，共同推 进急性肾功能不全的研究进展 ，提高全球范围内的疾病防治
定义和分类
定义
家兔急性肾功能不全是指家兔肾脏在 短时间内受到严重损伤，导致肾功能 急剧下降，出现氮质血症、水电解质 紊乱等症状的疾病。
分类
根据病因和发病机制，急性肾功能不 全可分为缺血性急性肾功能不全、中 毒性急性肾功能不全等类型。
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病因和发病机制
病因
病因分类
家兔急性肾功能不全的 病因可以分为肾前性、
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实验组家兔采用缺血再灌注损伤 法建立急性肾功能不全模型，观 察家兔的一般情况，记录相关指 标。
实验方法
对照组家兔给予常规饲料饲养 ，实验组家兔给予高盐饲料饲 养，连续4周。
实验前后测定家兔血清肌酐、 尿素氮水平，计算肾小球滤过 率。
急性肾功能不全
氯化汞与家兔急性肾功能不全【摘要】目的学习用氯化汞复制急性肾功能不全的动物模型；观察急性肾功能不全时蛋白尿、血肌酐、肾酚红排泄率的变化，并根据实验结果分析和讨论致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。
方法本次实验共分为两大组，肾衰组和对照组。
用分光光度计测量吸光度的方法算出血肌酐、尿肌酐和酚红排出量，然后再通过计算公式计算出肌酐清除率和酚红排泄率。
结果肾衰模型组家兔肾脏体积变大，颜色较浅，外表出现颗粒，体重比正常组重得多，血清肌酐41.7mg%，尿肌酐12.25mg%；对照组血清肌酐7.97mg%，尿肌酐2.25mg%，酚红排泄率50%。
结论急性肾功能不全会引肾小管上皮细胞受损，从而导致起肾小管的重吸收功能障碍和分泌功能障碍。
【实验原理】肾脏是一个多功能的器官，具有排泄、调节、内分泌等功能。
引起急性肾功能不全主要原因有肾前性、肾性、肾后性三种。
氯化汞是重金属盐，家兔皮下或肌肉注射10g/L氯化汞，可引起以肾小管坏死为主的急性肾功能不全。
急性肾功能不全临床分为少尿型和非少尿型两种，前者多见。
少尿型一般出现少尿甚至无尿，等渗尿，尿钠浓度高，尿常规可发现血尿，镜检有多种细胞并有管型〔颗粒管型和细胞管型等〕。
血液尿素氮〔BUN〕和血浆肌酐进行性升高，肌酐从尿中排出障碍，尿肌酐/血肌酐<20，与功能性肾衰时>40有明显的区别。
急性肾功能不全评价的病理生理学指标有内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值、肾脏酚红排泄率、钠排泄分数等，本实验主要测定酚红排泄率、内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值及肾形态学的改变。
【关键词】急性肾功能不全酚红排泄率血清肌酐尿肌酐【材料和方法】1、材料：家兔；分光光度计，离心机，恒温水浴箱；氯化汞，氨基甲酸乙酯，酚红，NaOH，醋酸，碱性苦味酸，肌酐标准应用液，生理盐水，葡萄糖。
2、方法2.1本组作为对照组兔则皮下或肌肉注射等量的生理盐水。
麻醉固定将氨基甲酸乙酯以5ml/kg 的体重剂量由兔耳缘静脉内缓慢注入。
肾功能不全试验的实验报告
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实验步骤
复制肾功能衰竭模型：于实验前一天， 取两只家兔，称重，一只皮下或肌肉注 射1％HgCl2(o．8～1．0ml／kg)造成急 性肾功能衰竭，为实验组兔；另一只皮 下或肌肉注射等量的生理盐水(1．0ml／ kg)作为对照组兔。
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实验步骤
观察：24h后，比较两组动物的一般状态 、活动情况与尿量。
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ARF发病机制的中心环节是GFR的降低。 肾血流量减少，肾小管阻塞、肾小管原尿回 漏或肾细胞损伤等均可导致GFR的降低。
本实验通过皮下注射1％HgCl2造成家兔 急性肾小管性坏死。
通过本实验学习复制急性中毒性肾衰动
物模型；观察肾衰家兔的一般状态、酚红排
泄率、肌酐清除率等变化；观察急性肾衰时
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实验步骤
肾脏酚红排泄率：是反映肾血流量与肾 小管排泌功能的指标。正常情况下从静 脉注入酚红后15min或30min，肾脏酚红 排泄率分别＞30%与＞45%。
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实验步骤
血清和尿液肌酐含量测定——苦味酸沉定 蛋白法
原理：在碱性条件下，苦味酸与（血、尿 中）肌酐作用，生成黄红色苦味酸肌酐， 使溶液呈色后进行比色测定；然后加醋酸 ，在酸性环境中，黄红色的苦味酸肌酐被 清除，非肌酐物质（假肌酐）呈色，两者 比色之差为血及尿中肌酐。按表1、表2的 操作步骤测定血清及尿液肌酐。
下腹部正中剪毛，在耻骨联合上约1． 5cm处做切口，长约4cm，暴露膀胱，用 注射器收集2ml尿液于试管中，做尿肌酐 检查。
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实验步骤
在膀胱底部，找出两侧输尿管，并分离 之。在近膀胱端结扎输尿管，稍等片 刻 ，待其略充盈后，用眼科剪剪一小口， 向肾脏方向插入一细塑料管(塑料管事先 用肝素冲洗或充满肝素)，结扎并固定， 用于收集尿液。
急性中毒性肾功能不全
急性肾小管坏死
约占肾性急性肾衰竭的80% 原因：
1.肾脏缺血与再灌注损伤 （由肾前性急性肾衰竭转化而来）
2.肾中毒 (1)外源性毒物：重金属、抗生素、肿瘤化疗药 物、细菌毒素，蛇毒等； (2)内源性毒物：肌红蛋白、血红蛋白、尿酸等。
（2）氮质血症
原因：少尿使非蛋白氮排出减少；体内蛋白质分解增 多（如感染、中毒、组织严重创伤等）使非蛋白氮生 成增多。
检测：血浆尿素氮＞20mg/dl 血浆肌酐 ＞ 2mg/dl 或 ＞ 178µmol/L
氮质血症进行性加重，严重者可出现尿毒症
（3）高钾血症
少尿期最危险的并发症
原因： ①少尿，肾排钾减少； ②钾分布异常：组织损伤及分解代谢增
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观 察 指 标】
➢ 动物一般状况 ➢ 尿量 ➢ 尿蛋白 ➢ 血清尿素氮 ➢ 肾脏形态
【实 验 方 法 与 步 骤】
复制急性中毒性肾功能不全模型
麻醉，背位固定
颈部手术 膀胱插管
气管插管
颈总动脉插管 取血5毫升 血清尿素氮测定
收集尿液
尿蛋白定性测定 尿沉渣检测
耳缘静脉快速注射37℃生理盐水(10ml/kg) 静脉注射速尿(5mg/kg)
急性肾衰竭少尿期尿液性质改变
功能性肾衰竭 器质性肾衰竭
尿相对密度
>1.020
<1.015
尿渗透压
>500mmol/L
<350mmol/L
尿钠
<20mmol/L
>40mmol/L
尿/血肌酐
>40
<20
尿沉渣镜检
急性中毒性肾功能不全
2. 急性肾功能损害时尿常规和尿沉渣成分 的变化；
3. 少尿和无尿的概念。
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难点
1. 血清尿素氮测定方法 2. 尿沉渣成分变化的分析
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观察指标
➢动物一般状况 ➢尿量 ➢尿蛋白 ➢血清尿素氮 ➢肾脏形态
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复制急性中毒性肾功能不全模型
麻醉，背位固定
颈部手术 膀胱插管
气管插管 颈总动脉插管 取血5毫升 血清尿素氮测定
收集尿液
尿蛋白定性测定 尿沉渣检测
耳缘静脉快速注射37℃生理盐水(10ml/kg) 静脉注射速尿(5mg/kg)
分别记录注射后5min、10min、20min、30min尿量
打开腹腔，取出肾脏，观察肾脏外观及切面形态学改变
原因： ① 肾小管泌NH3、泌H+障碍,NaHCO3重吸收 减少； ② GFR↓，固定酸排出减少； ③分解代谢增强，固定酸生成↑。
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思考题
（1）血清尿素氮在正常值范围，是否说明肾 功能正常？
（2）简述急性中毒性肾病的机能代谢变化及 其机制。
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急性中毒性肾功能不全
教学对象：高等医学院校医学专业学生 实验课时：4学时 课程类型：医学基础课 课程要求：必修 每组人数：4人
南华大学医学机能学实验中心
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目的要求
1. 复制中毒性肾功能不全的动物模型
2. 观察汞中毒家兔的一般状况，肾功能
的变化以及肾脏的形态改变。
家兔急性肾功能不全
家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测【实验目的】1、用氯化汞中毒方法复制家兔急性肾功能不全模型。
2、观察急性肾功能不全时肾功能评价指标变化。
肾功能评价指标：（1）测定血肌酐、尿肌酐，计算内生肌酐清除率（2）测定酚红排泄率（3）观察肾脏形态学改变。
【实验材料】器械家兔手术台、常用手术器械一套、止血钳、眼科剪、支架、照明灯、纱布、丝线、1ml、10ml、50ml注射器药品生理盐水、20% 氨基甲酸乙酯、0.6%酚红溶液、20%葡萄糖溶液对象家兔分组：1-4组——模型组(头部黄色标志 5-8组——对照组【实验方法】一、复制急性肾功能不全模型（已完成）：实验前24小时，取家兔两组，称重。
模型组——皮下注射1%氯化汞溶液 0.8-1ml/Kg体重；对照组——皮下注射等计量生理盐水二、急性肾功能不全指标检测1、家兔称重、麻醉和固定：取家兔一只，称重：2.16kg；20%氨基甲酸乙酯：5ml/kg体重，耳缘静脉缓慢注射，共注射10.8ml至呼吸深而慢、反射迟钝（角膜反射、夹肢反射）为止。
背位固定。
2、心脏采血—测血肌酐（颈动脉）左侧第3-4肋间，靠近胸骨，心跳最明显处垂直进针穿刺，取血3 ml，推入干燥试管，静置，——备用测血肌酐。
3、膀胱插管术—测尿肌酐、收集尿液1）如何进行膀胱插管，请按实际操作详细描述。
2）先用注射器取尿液2 ml于试管中，——备用测尿肌酐。
3）然后在输尿管下方穿线结扎尿道，再行膀胱切口，插管固定，排空膀胱。
4）准备小烧杯，收集尿液。
4、酚红排泄率测定1）0.6%酚红溶液1 ml/Kg体重，耳缘静脉头皮针注射，总共注射2.16ml。
计时—开始收集尿液。
2）然后20%葡萄糖溶液30 ml/Kg体重，耳缘静脉缓慢推注。
3）从注射酚红溶液起收集15分钟（对照组）、30分钟（模型组）尿液。
5、生化检测——血肌酐、尿肌酐、酚红排泄率1）测酚红排泄率收集注射酚红后的全部尿液-→250 ml量筒内-→然后加入10% NaOH 5 ml-→再加自来水至250 ml混匀-→取适量混合液-→小试管中与标准比色管进行比较即为15分钟、30分钟酚红排泄率。
3 急性中毒性肾功能不全
3 急性中毒性肾功能不全3急性中毒性肾功能不全三、急性中毒性肾功能不全【实验目的】1．复制急性中毒性肾功能不全的动物模型。
2．观测急性肾功能不SIDI动物血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化，分析其出现机制。
【实验原理】使用肾毒物重金属hgcl2溶液导致家兔急性肾小管发炎，激活急性肾功能不全系列的动物模型，通过观察动物的血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化，自学急性肾衰时内环境的变化。
【实验动物】家兔，体重1.5～2.5kg。
【实验药品与器材】1%hgcl2溶液，3%戊巴比妥钠溶液或20%氨基甲酸乙酯溶液，1%普鲁卡因溶液，生理盐水，1%肝素生理盐水溶液；兔台，手术器械，1ml和5ml注射器，试管，滴管，圆柱形，液体，试管夹，酒精灯，试管架，颈动脉插管，血气分析仪，生化分析仪，离心机，光电比色计，水浴锅。
【观察指标】全血：血气分析仪测量ph值、paco2、[hco3]、[k]、[na]和[cl]；血清：生化分析仪测量bun；尿：尿量、尿蛋白定性和镜检；肾：大体、剖面。
-++-【实验方法与步骤】1．取家兔两只，一只为正常对照，一只为中毒实验兔。
于实验前一天称重后，实验兔皮下或肌肉注射1%hgcl2（按1.5～1.7ml/kg，一次注射），造成急性中毒性肾功能不全模型，对照兔则在相同部位注射同量的生理盐水，作为对照。
将两只兔笼均置于大漏斗上，收集尿液,测量24h尿量。
2．实验已经开始，家兔称量后，20%氨基甲酸乙酯溶液(0.5～1g/kg体重)或3%戊巴比妥钠（30mg/kg体重）耳缘静脉转化成麻醉后，站立紧固于兔台。
下腹部剪毛，在耻骨联手上1.5cm处作长约4cm的正中切口，分离皮下组织，沿腹白线切开腹膜，暴露膀胱，穿刺取出全部尿液，供尿蛋白定性和尿液镜检。
3．颈部正中切口，拆分一侧颈总动脉，颈动脉插管内转化成肝素生理盐水溶液，展开颈动脉插管。
4．抽取0.5ml动脉血作血气分析，取3ml动脉血（滴入肝素数滴后）离心（1500转/分，5～10分钟），取血清供尿素氮测定用。
卡托普利对家兔急性肾功能衰竭的影响
静脉夹、导尿管50mL烧杯*3、1mL、5mL注
射器、10mL量筒*3、7号头皮针*3、0.6% 酚红、2.5%戊巴比妥钠溶液、生理盐水 蒸馏水、卡托普利片。 实验对象：家兔3只
一、家兔急性肾功能不全模型的建立 1、操作路线
夹闭肾动脉 → 肾血流量减少→肾小球毛细血管压降低 →肾小球有效滤过压降低 → 肾小球滤过压↓→缺血时 间过长 → 急性肾功能衰竭
2、鉴定的标准
兔子血压升高，呼吸加深加快，心率加快，血钾和血钠含量升 高，尿少且比重降低，肌酐的浓度低。肾的体积增大，苍白， 切面肾皮质苍白缺血，髓质色深淤血,有时有出血点。
家兔称体重仰位固定，设一组为正常兔A，一组为实验兔B，一 组为治疗兔C，分别进行如下实验： 1、先用生理盐水作静脉点滴输液； 2、2.5%戊巴比妥钠溶液麻醉； 3、在麻醉状态下，自耻骨联合上方腹部正中线切开皮肤，切口 长4~6厘米， 4、夹闭肾动脉；沿腹白线打开腹腔，将内脏推向左侧，打开后 腹膜，暴露肾蒂，分离肾动脉，实验兔B和治疗兔C夹闭肾动脉40分 钟，正常兔A不夹闭。 5、3组家兔分别进行输尿管插管。 剑突 6、40分钟后取下动脉夹。 7、检查急性摄功能不全模型的建立 耻骨联合
二、卡托普利给药阶段
1、用新型牲畜用灌药器A型对治疗兔C进行胃肠道给药， 12.5mg/片卡托普利2片。 2、然后每隔10分钟，取一次尿液，ABC每只取三次，做尿 常规检查，测定尿量。 3、于兔耳缘静脉注射酚红0.5ml，换个烧杯接尿液，1小时 后做兔酚红排泄实验。 4、颈总动脉插管，取血。做血清尿素氮检查。 5、最后将家兔一并处死，取出肾脏，观察并比较家兔的肾 脏。
（2）酚红排泄实验（PSP实验）
实验指标 时间（分） 10 20 30
每次排除尿量（ml）
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尿液检查 尿沉渣镜检 尿蛋白定性检查 血尿素氮检查
血液检查
表1 加热醋酸法检查尿蛋白时的结果判定标准
结果 无混浊 微混浊 混浊（轻度白色） 混浊（轻度白色） 颗粒状混浊 絮状混浊 凝聚成块 符号 － + + ++ +++ ++++ 蛋白质的大约含量 无 0.01以下 0.01以下 0.01～ 0.01～0.05 0.05～ 0.05～0.20 0.20～ 0.20～0.50 0.50以上 0.50以上
实验前对离心管做好抗凝处理 颈总动脉放血 尿液加热时应缓慢移动试管, 尿液加热时应缓慢移动试管,避免加热不均匀 导致试管破裂,试管口不能对着人 导致试管破裂, 输尿管如能收集到足够的尿液, 输尿管如能收集到足够的尿液,用该尿液做尿 常规检查,如收集不到, 常规检查,如收集不到,则用膀胱中抽取的尿液 先用低标定标,如浓度超过40mg/ml, 40mg/ml,则改用高 先用低标定标,如浓度超过40mg/ml,则改用高 标定标
肾前性(肾灌流不足) 低血容量、 肾前性(肾灌流不足)：低血容量、低血压 肾性(肾实质损坏) 肾小球、 肾性(肾实质损坏)：肾小球、肾小管病变 肾后性（原尿排除障碍) 输尿管、膀胱、 肾后性（原尿排除障碍)：输尿管、膀胱、 尿道受阻
尿的变化: 少尿或无尿、蛋白尿、 尿的变化 少尿或无尿、蛋白尿、血 低比重尿、 尿、低比重尿、高钠尿 内环境变化: 水中毒、高钾血症、 内环境变化 水中毒、高钾血症、 酸中毒、 酸中毒、氮质血症
家兔急性肾功能不全
(acute renal falure)
学习制备中毒肾功能不全动物模型 观察氯化高汞对家兔肾功能的影响 掌握尿常规检查法、 掌握尿常规检查法、血浆尿素氮的 测定方法
概念 临床表现 分类 实验室检查
定义： 定义：各种原因在短期内引起肾脏秘尿功能
急剧障碍， 急剧障碍，以致机体内环境出现严重 紊乱的病理过程
中的汞离子可使蛋白质变性，沉淀， Hgcl2中的汞离子可使蛋白质变性，沉淀， 使肾小球滤过率降低和肾小管结构受损， 使肾小球滤过率降低和肾小管结构受损，主要 损伤部位在近端肾小管。 损伤部位在近端肾小管。
表3 家兔急性肾功能不全实验结果
动物 对照兔 实验兔 血浆尿素氮（m Nhomakorabea/ml)
尿蛋白(%)
尿沉渣
表2 血浆尿素氮测定加样步骤
试管 空白管 标准管 测定管 血浆（ml） 标准管（ml） 蒸馏水（ml） 显色剂（ml） ml） ml） ml） ml） 0.1 0.1 0.1 10 10 10
实验前1天肌肉注射1%的氯化高汞1.5ml/kg 实验前1天肌肉注射1%的氯化高汞1.5ml/kg 1% 实验时，固定家兔，局麻下颈动脉插管, 实验时，固定家兔，局麻下颈动脉插管,暴 露膀胱，用注射器抽取尿液5ml 5ml备用 露膀胱，用注射器抽取尿液5ml备用 输尿管插管（耳缘静脉输注10%葡萄糖50ml/k 10%葡萄糖 输尿管插管（耳缘静脉输注10%葡萄糖50ml/k g），收集尿液，做尿常规检查 收集尿液， 颈总动脉插管， 颈总动脉插管，做血浆尿素氮检查