离子对试剂
离子对色谱法的原理
离子对色谱法的原理
离子对色谱法是一种基于溶液中的阳离子和阴离子之间形成稳定络合物的原理进行分离及分析的方法。
其原理主要包括样品溶液中的离子和离子对试剂之间的化学反应和络合物的稳定性。
在离子对色谱法中，通常使用正离子对试剂与样品中的阴离子形成稳定的络合物。
正离子对试剂可以是有机胺、季铵盐或金属络合物等化合物。
当正离子对试剂与样品中的阴离子结合形成络合物后，这些带电的络合物会在色谱柱中进行分离。
分离过程中，离子对络合物的迁移速度受到许多因素的影响，包括络合物的结构、柱填料的性质以及运行条件等。
离子对色谱法最常用的方法是反相离子对色谱法。
在反相离子对色谱法中，色谱柱填料通常具有亲水性，即带有极性的官能团。
这种填料可以吸附和保持离子对络合物，从而实现它们的分离。
分离过程通常通过使用含有盐溶液的流动相来进行，盐的存在可以影响吸附和解吸过程，改变离子对络合物的保持时间和分离效果。
离子对色谱法具有广泛的应用领域，包括环境监测、药物分析、生物分析以及食品分析等。
该方法可以用于分离并测定许多阴离子，如无机阴离子、有机酸、氨基酸和药物等。
离子对色谱法具有高分辨率、准确性和灵敏度，适用于复杂混合物的分析，是一种常用的分离和定量分析方法。
离子对试剂使用注意事项
离子对试剂使用注意事项离子对试剂在许多化学和生物实验中具有重要作用，但如果不正确使用，可能会影响实验结果。
以下是一些关于离子对试剂使用的注意事项：1. 储存条件离子对试剂应存放在阴凉、干燥、避光的地方。
避免直接阳光照射，以免影响试剂的稳定性。
2. 稳定性离子对试剂的稳定性因种类而异，因此应确保在使用前了解每种试剂的稳定性。
一些离子对试剂可能需要在特定的pH值范围内才能保持稳定性，因此需要在使用前进行验证。
3. 配制溶液离子对试剂的配制通常需要精确的称重和测量。
应使用精确的称重仪器和量筒来确保准确的称重和测量。
在配制溶液时，应遵循试剂的溶解条件，例如温度、搅拌时间和速度等。
4. 操作温度离子对试剂的反应速度和稳定性可能会受到温度的影响。
因此，在操作过程中应保持恒定的温度，以避免不必要的影响。
5. 混合均匀在使用离子对试剂之前，应确保试剂已经完全混合均匀，以避免出现不均匀的浓度或沉淀物。
可以通过轻轻旋转或摇动容器来混合试剂。
6. 防止交叉污染在实验过程中，应避免离子对试剂之间的交叉污染。
例如，如果一种离子对试剂含有能够与另一种试剂反应的离子，则可能会产生沉淀物或影响实验结果。
因此，在使用不同的离子对试剂时，应使用不同的容器和工具，并确保它们不会相互接触。
7. 避免与强酸强碱接触离子对试剂可能与强酸或强碱发生反应，从而影响其稳定性和实验结果。
因此，在使用离子对试剂之前，应了解其与哪些物质会发生反应，并避免与其接触。
如果必须使用强酸或强碱，应确保离子对试剂已经完全反应或去除。
8. 安全注意事项离子对试剂可能具有一定的毒性或腐蚀性，因此在使用过程中应遵循安全操作规程。
应穿戴适当的防护服和手套，避免直接接触皮肤或吸入气体。
如果不慎接触到皮肤或眼睛，应立即用大量清水冲洗，并及时就医。
此外，应将废弃的离子对试剂按照相关规定进行处理，以避免对环境造成影响。
离子对试剂
离子对试剂是高效液相色谱专用试剂，一般是将离子性化合物添加到流动相中以促使离子与带电荷分析物形成配对离子，达到可靠的分析效果。
编辑摘要什么是离子对试剂一、什么是离子对试剂？离子对试剂是由强亲水离子形成，反作用于样品分子的中性离子对。
因此，可用于同时分离带电分子和非带电分子。
二、哪些色谱柱和流动相可选离子对试剂？一般可适用所有色谱固定相，流动相至少含用乙腈的情况下）。
当使用长链的离子对试剂时，如：十六烷基硫酸铵或十二烷基硫酸钠，色谱柱将选用反相色谱柱。
三、离子对试剂的适用浓度短链离子对试剂：5×10-3m0l/L 长链离子对试剂：5×10-4m0l/L离子对试剂的选择离子对试剂的种类和浓度对分离效果都有较大的影响.离子对试剂种类的选择依赖于被分离样品的性质.被分离溶质是强酸或强碱,离子对试剂可以是强酸或强碱,弱碱或强酸,弱酸,如被分离的溶质是弱酸或弱碱,则选用的离子对试剂必须是强碱或强酸.对于溶质结构性质相差较大的混合样品,离子对试剂种类的选择并没有特殊要求.离子对试剂疏水性的差别可以通过调节离子对试剂浓度和有机溶剂浓度获得满意的分离效果.离子对试剂用于高压液相离子对萃取的液相色谱法分离分析强极性有机酸和有机碱的好方法。
广泛应用于生物化学，药物学，和石油化工等领域。
一、用于酸性化合物 1、四丁基氢氧化铵（10%水溶液） 2、四丁基溴化铵 3、十二烷基三甲基氯化铵二、用于碱性化合物 1、戊烷磺酸钠 2、己烷磺酸钠 3、庚烷磺酸钠 4、辛烷磺酸钠 5、癸烷磺酸钠离子对试剂是高效液相色谱专用试剂，主要分析测试有机碱类离子化合物，代替离子交换法，具有可靠的分离效果。
也可用于分析多肽和蛋白质，是制备抗静电聚脂纤维的中间体.常用离子对试剂1-戊烷磺酸钠 CAS:22767-49-31-己烷磺酸钠 CAS:2832-45-31-庚烷磺酸钠 CAS:22767-50-61-辛烷磺酸钠 CAS:5324-84-51-癸烷磺酸钠 CAS:13419-61-9离子对试剂的优点：在过去，带电荷分析物的色谱分离通过离子抑制（小心调节流动相PH值以使分析物非离子化）来达到。
离子对试剂作用
离子对试剂作用
离子是化学反应中不可或缺的一部分，它们可以影响试剂的性质和
反应过程。
在化学实验中，离子对试剂的作用是非常重要的，下面将
按照离子的种类来介绍它们对试剂的作用。
1. 阴离子对试剂的作用
阴离子是带有负电荷的离子，它们可以影响试剂的酸碱性质和沉淀反应。
例如，氯离子可以与银离子反应生成白色的氯化银沉淀，这是一
种常见的化学实验。
另外，硫酸根离子可以与钡离子反应生成白色的
硫酸钡沉淀，这也是一种常见的沉淀反应。
2. 阳离子对试剂的作用
阳离子是带有正电荷的离子，它们可以影响试剂的溶解性和沉淀反应。
例如，钠离子可以与氯化银反应生成可溶性的氯化钠，这是一种常见
的化学实验。
另外，铵离子可以与氢氧化铜反应生成蓝色的铜铵离子，这也是一种常见的化学实验。
3. 阴阳离子对试剂的作用
阴阳离子是同时带有正负电荷的离子，它们可以影响试剂的酸碱性质
和沉淀反应。
例如，氢氧根离子可以与铁离子反应生成红棕色的氢氧
化铁沉淀，这是一种常见的化学实验。
另外，铁离子可以与硫酸根离
子反应生成红棕色的硫酸铁沉淀，这也是一种常见的沉淀反应。
总之，离子对试剂的作用是非常重要的，它们可以影响试剂的性质和反应过程。
在化学实验中，我们需要了解不同离子的作用，以便正确地进行实验。
离子对试剂对色谱柱影响
离子对试剂对色谱柱影响
离子对试剂对色谱柱的影响主要表现在以下几个方面：
1. 降低柱效：离子对试剂在色谱柱上的吸附会降低色谱柱的柱效。
离子对试剂的吸附不仅会降低色谱柱的柱效，而且会使色谱峰变形，影响峰形的对称性和分离效果。
2. 增加柱压：离子对试剂在色谱柱上的吸附会形成离子对，导致柱压升高。
这种增加的柱压会降低色谱柱的寿命，同时也会影响色谱柱的分离效果。
3. 损坏色谱柱：某些离子对试剂可能会损坏色谱柱，例如某些有机溶剂可能会溶解色谱柱中的填料，导致色谱柱损坏。
4. 影响分离效果：离子对试剂的种类和浓度会影响色谱峰的分离效果。
离子对试剂的种类和浓度不合适时，可能会导致色谱峰分离不彻底或出现拖尾峰等问题。
因此，在使用离子对试剂时，需要根据具体情况选择合适的离子对试剂种类和浓度，并注意控制进样量和使用频率等参数，以避免对色谱柱造成不良影响。
同时，也需要定期维护和清洗色谱柱，以保证其正常运转和延长使用寿命。
离子对试剂作为流动相注意事项
离子对试剂作为流动相注意事项1.引言1.1 概述离子对试剂作为流动相在化学分析中起着重要的作用。
离子对试剂是指能够与待测离子形成离子对并在流动相中溶解的化合物。
通过形成离子对，离子对试剂可以增强待测离子的信号，提高分析灵敏度。
此外，离子对试剂还可以使待测离子在流动相中更好地分离出来，提高分析的准确性和精确度。
在使用离子对试剂时，有一些注意事项需要牢记。
首先，选择合适的离子对试剂。
不同的离子对试剂对待测离子具有不同的选择性，因此需要根据实际需求选择适合的离子对试剂。
其次，正确配制离子对试剂的浓度。
离子对试剂的浓度过高会导致背景噪声增大，而浓度过低则会影响分析的灵敏度。
因此，在使用离子对试剂时，需要根据实验要求进行合理的浓度配制。
此外，离子对试剂的pH值也是需要考虑的因素之一。
一些离子对试剂在不同的pH值下对待测离子的选择性会发生变化。
因此，在使用离子对试剂时，需要控制好溶液的pH值，以确保实验结果的准确性。
最后，离子对试剂的选择和使用也需要考虑实验条件。
一些离子对试剂对温度和离子强度较为敏感，因此在实验过程中要注意控制好这些条件，以免影响分析结果。
综上所述，离子对试剂作为流动相在化学分析中具有重要的作用。
在使用离子对试剂时，需要注意选择合适的试剂、正确配制浓度、控制好溶液的pH值，并根据实验条件进行合理的调节。
只有在正确使用离子对试剂的前提下，才能充分发挥其在分析中的作用，获得准确可靠的实验结果。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以包括以下几个方面：1.2 文章结构本文按照以下结构展开：第1部分：引言1.1 概述1.2 文章结构1.3 目的第2部分：正文2.1 离子对试剂的定义和作用2.2 使用离子对试剂的注意事项第3部分：结论3.1 总结离子对试剂的重要性3.2 强调正确使用离子对试剂的必要性通过以上结构安排，本文将从引言、正文和结论三个部分进行论述。
引言部分旨在对离子对试剂作为流动相的概念进行概述，介绍文章的结构和目的。
离子对试剂
离子对试剂1概念一、离子对试剂的定义：离子对试剂是由强亲水离子形成，反作用于样品分子的中性离子对。
因此，可用于同时分离带电分子和非带电分子。
二、适用范围：一般可适用所有色谱固定相。
当使用长链的离子对试剂时，如：十六烷基硫酸铵或十二烷基硫酸钠，色谱柱将选用反相色谱柱。
三、使用浓度：离子对试剂的适用浓度短链离子对试剂：5×10-3mol/L 长链离子对试剂：5×10-4mol/L2作用编辑使用液相色谱法分析电离能力比较强的样品时，样品在反相色谱柱上的保留时间很短或者根本不保留，这时要加入相应的离子对试剂，将分析物上的离子进行结合，形成在柱子上有保留的分子。
就像是一个物质要穿色谱柱而过时，我们使用离子对试剂将它留住。
离子对试剂是在高效液相色谱法中引入了离子色谱方法的一种表现。
它主要是作用于样品和固定相之间的一种物质，所以在选择离子对试剂时，要考虑色谱柱的填料和样品的酸碱性。
3选择离子对试剂的种类和浓度对分离效果都有较大的影响.离子对试剂种类的选择依赖于被分离样品的性质.被分离溶质是强酸或强碱,离子对试剂可以是强酸或强碱,弱碱或强酸,弱酸,如被分离的溶质是弱酸或弱碱,则选用的离子对试剂必须是强碱或强酸.对于溶质结构性质相差较大的混合样品,离子对试剂种类的选择并没有特殊要求.离子对试剂疏水性的差别可以通过调节离子对试剂浓度和有机溶剂浓度获得满意的分离效果。
离子对试剂用于高压液相离子对萃取的液相色谱法分离分析强极性有机酸和有机碱的好方法。
广泛应用于生物化学，药物学，和石油化工等领域。
一、用于酸性化合物1、四丁基氢氧化铵（10%水溶液）2、四丁基溴化铵3、十二烷基三甲基氯化铵二、用于碱性化合物1、戊烷磺酸钠2、己烷磺酸钠3、庚烷磺酸钠4、辛烷磺酸钠5、癸烷磺酸钠离子对试剂是高效液相色谱专用试剂，主要分析测试有机碱类离子化合物，代替离子交换法，具有可靠的分离效果。
也可用于分析多肽和蛋白质，是制备抗静电聚脂纤维的中间体.常用离子对试剂1-戊烷磺酸钠CAS:22767-49-31-己烷磺酸钠CAS:2832-45-31-庚烷磺酸钠CAS:22767-50-61-辛烷磺酸钠CAS:5324-84-51-癸烷磺酸钠CAS:13419-61-94选用步骤1. 选择一根适合的色谱柱，常为C18柱；2.准备流动相时仅使用HPLC级别的水和色谱级试剂；3.选择能给出最佳分离度的流动相成分和浓度；4.如果样品中有非离子化物质，在尝试离子化分离之前首先优化分离情况；5.选择合适的离子对系列试剂以提供相应的离子配对：对于酸性分析物使用酸性离子对试剂；对于碱性分析物使用碱性离子对试剂；6.通过比较选择所得分离度最好的离子对试剂；7.一旦离子对试剂已经确定，调节流动相的pH值将分离度最大化；因为微小的pH值改变对保留性质和选择性都有较大的影响，所以仔细小心的小幅度调节pH值；8.理想状况下，流动相中的离子对试剂浓度应为0.005M，但是稍微增加离子对试剂可能会稍微增加保留性质并因此优化分离情况。
离子对试剂汇总
D105297十二烷基三甲基氯化铵Dodecyltrimethylammonium chloride 离子色谱级, ≥99.0%112-00-525g100gD105302十二烷基三甲基溴化铵Dodecyltrimethylammonium bromide离子色谱级, ≥99.0% (AT)1119-94-410gD120729十二烷基三甲基硫酸氢铵dodecyltrimethylammonium hydrogen sulfate离子对谱级,≥99.0%103999-25-310gH106256七氟丁酸Heptafluorobutyric acid 离子色谱级, ≥99.5%375-22-45ml25mlH108986十六烷基三甲基溴化铵Hexadecyl trimethyl ammonium Bromide 离子对谱级,≥99.0%57-09-0 10g50gH121244十六烷基三甲基硫酸氢铵Hexadecyltrimethylammonium bisulfate离子对谱级,≥99.0%68214-07-35gH108986十六烷基三甲基溴化铵Hexadecy ltrimethyl ammonium bromide 用于离子对色谱, ≥99.0%57-09-010g50gT105047四丁基氢氧化铵Tetrabutylammonium hydroxide solution 40%水溶液，离子色谱级2052-49-525ml100mlT101035四丁基氯化铵Tetrabutylammonium chloride 离子色谱级, ≥99.0%1112-67-05g25gT103374四丁基溴化铵Tetrabutylammonium bromide 离子色谱级, ≥99.0%1643-19-225g100gT102977四甲基硫酸氢铵Tetramethylammonium bisulfate hydrate 离子色谱级，≥99.0% (T)80526-82-510g50gT103715四丁基碘化铵Tetrabutylammonium iodide 离子对谱级,≥99.0%311-28-45g25gT105646四丁基硫酸氢铵Tetrabutylammonium hydrogen sulfate 离子对谱级,≥99.0%32503-27-85g25gT106815四丁基磷酸二氢铵Tetrabutylammonium phosphate monobasic 0.5mol/L 水溶液，离子对色谱级5574-97-010ml50mlT106820四己基硫酸氢铵Tetrahexylammonium hydrogensulfate 用于离子色谱, ≥99.0% (T)32503-34-71g5gT108082四正辛基溴化铵Tetraoctylammonium bromide 离子对色谱级，≥99.0% (T)14866-33-210g50gT118362四丙基硫酸氢铵Tetrapropylammonium bisulfate离子对谱级,≥99.0%56211-70-210gT118435四甲基溴化铵Tetramethylammonium bromide离子色谱级,98%64-20-010gT103854三辛胺Trioctylamine 离子对谱级,≥99.0%1116-76-3 5ml10mlT120735四己基溴化铵Tetrahexylammonium bromide离子对谱级,≥99.0%4328-13-610gT108124四庚基溴化铵Tetraheptylammonium bromide 离子对谱级,≥99.0%4368-51-85g25gT120741四癸基溴化铵Tetrakis(decyl)ammonium bromide 离子对谱级,≥99.0%14937-42-910g50gT121245四戊基溴化铵Tetrapentylammonium bromide离子对谱级,≥99.0%866-97-710gT120743四甲基硫酸铵Tetramethylammonium sulfate离子对谱级,≥99.0%14190-16-0 10gT120744十四烷基三甲基硫酸氢铵Trimethyltetradecylammonium hydrogen sulfate离子对谱级,≥99.0% 104903-23-3 10gH121244十六烷基三甲基硫酸氢铵Hexadecyltrimethylammonium bisulfate离子对谱级,≥99.0% 68214-07-35gM100353肉豆蔻基三甲基溴化铵Myristyltrimethylammonium bromide离子对谱级,≥99.0% 1119-97-710gM100353十四烷基三甲基溴化铵Myristyltrimethylammonium bromide离子对色谱级，≥99.0% (AT) 1119-97-710gS1049341-庚烷磺酸钠Sodium 1-heptanesulfonate 离子色谱级，98%22767-50-65g25gS1049481-己烷磺酸钠Sodium 1-hexanesulfonate离子色谱级，98%2832-45-35gS1089271-辛烷磺酸钠Sodium 1-octanesulfonate 离子对谱级,≥99.0%5324-84-55g25gS1186621-丁烷磺酸钠Sodium 1-butanesulfonate 离子对色谱级, ≥99.0% (T)2386-54-15g25gS1002841-癸烷磺酸钠Sodium 1-decanesulfonate 离子对谱级,≥98.0%13419-61-925g5gS105390十二烷基磺酸钠Sodium laurylsulfonate 离子对谱级,≥99.0%2386-53-05g25gS118592十二烷基硫酸钠Sodium dodecyl sulfate 离子对色谱级，≥99.0% (GC)151-21-310g50gS120540丙烷磺酸钠 一水合物Sodium 1-propanesulfonate monohydrate 离子对谱级,≥99.0% 304672-01-3 10g50gS1212472-丙烷磺酸钠 一水合物Sodium 2-propanesulfonate monohydrate离子对谱级,≥99.0% 304851-99-810gS1212491,2-乙烷基二磺酸钠Sodium 1,2-ethanedisulfonate离子对谱级,≥99.0% 5325-43-95gS1212511-戊烷磺酸钠 一水合物Sodium 1-pentanesulfonate monohydrate 离子对谱级,≥99.0% 207605-40-110g50gS121253癸烷基硫酸钠Sodium decyl sulfate离子对谱级,≥99.0% 142-87-010gs121254辛基硫酸钠odium octyl sulfate离子对谱级,≥99.0% 142-31-410gN1207472-萘磺酸钠Sodium 2-naphthalenesulfonate离子对谱级,≥99.0% 532-02-510g常用有机溶剂的沸点、溶解性及毒性。
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离子对试剂及离子对色谱
1、什么是离子对试剂
离子对试剂是由强亲水离子形成，反作用于样品分子的中性离子对。
因此，可用于同时分离带电分子和非带电分子。
2、哪些色谱柱和流动相可选离子对试剂？
一般可适用所有色谱固定相，流动相至少含用乙腈的情况下。
当使用长链的离子对试剂时，如：十六烷基硫酸铵或十二烷基硫酸钠，色谱柱将选用反相色谱柱。
3、离子对试剂的适用浓度
短链离子对试剂：5×10-3mol/L；长链离子对试剂：5×10-4mol/L。
4、离子对试剂的选择
离子对试剂的种类和浓度对分离效果都有较大和影响.离子对试剂种类的选择依赖于被分离样品的性质.被分离溶质是强酸或强碱,离子对试剂可以是强酸或强碱,弱碱或强酸,弱酸,如被分离的溶质是弱酸或弱碱,则选用的离子对试剂必须是强碱或强酸.对于溶质结构性质相差较大的混合样品,离子对试剂种类的选择并没有特殊要求.离子对试剂疏水性的差别可以通过调节离子对试剂浓度和有机溶剂浓度获得满意的分离效果.
离子对试剂用于高压液相离子对萃取的液相色谱法分离分析强极性有机酸和有机碱的好方法。
广泛应用于生物化学，药物学，和石油化工等领域。
4.1用于酸性化合物
四丁基氢氧化铵（10%水溶液）;四丁基溴化铵 ;十二烷基三甲基氯化铵
4.2用于碱性化合物
戊烷磺酸钠 ;己烷磺酸钠 ;庚烷磺酸钠 ;辛烷磺酸钠 ;癸烷磺酸钠
离子对试剂是高效液相色谱专用试剂，主要分析测试有机碱类离子化合物，代替离子交换法，具有可靠的分离效果。
也可用于分析多肽和蛋白质，是制备抗静电聚脂纤维的中间体.
常用离子对试剂:戊烷磺酸钠 CAS:22767-49-3 ;己烷磺酸钠 CAS:2832-45-3 ;庚烷磺酸钠 CAS:22767-50-6 ;辛烷磺酸钠 CAS:5324-84-5 ;癸烷磺酸钠 CAS:13419-61-9。
5、离子对试剂的优点：
在过去，带电荷分析物的色谱分离通过离子抑制（小心调节流动相pH值以使分析物非离子化）来达到。
然而，要确定离子抑制状态下的最佳流动相pH值，却往往需要额外的摸索过程。
含有一个以上的可离子化成分的样品，通常是不稳定的。
离子抑制的局限性导致了一种新的、更普遍适用的方法进行可离子化物质色谱分离的方法：离子对色谱。
离子对色谱由Gordon Schill博士于1973年建立，其方法是将离子性化合物添加到流动相中以促使离子与带电荷分析物形成配对离子。
这些试剂由带有可离子化终端的烷基链组成。
当在反相条件下用于常见的憎水性HPLC固定相时，离子对试剂可选择性的增加带电荷分析物的保留时间。
尽管离子交换色谱已经成为常见的分离模式，它并非在所有情况下都起作用。
较离子交换色谱，离子对色谱的优点在于：
→缓冲液制备简单；
→碳链长度选择众多，可用于增加保留时间、改善分离性质；
→显著缩短分离时间；
→同时分离离子化和非离子化分析物；
→分析结果重现性极好；
→改善峰形
6、关于流动相中加入离子对试剂的问题
问：在流动相中加入如庚烷基磺酸钠、十二烷基硫酸钠等离子对试剂，它是如何增加相关物质的保留性质的？还有，流动相中有这些物质是否对色谱柱有损害，且不易冲干净？盐浓度、pH值对离子对色谱分离情况的调节作用有何影响？
答：流动相中加入离子对试剂后，它可以与被分析物（多为在溶液中带与离子对试剂相反的电荷）结合成离子对而呈电中性，这样非极性就表现出来，从而增加了在反相色谱柱上的保留作用。
这种分离模式叫做反相离子对色谱。
常用离子对试剂有两大类：四丁基铵磷酸盐和烷基磺酸的盐类。
四丁基铵盐在pH值等于7.5的条件下与强酸和弱酸形成离子对并具有缓冲抑制弱碱的作用；多烷基磺酸盐在pH 值等于3.5的条件下与强碱和弱碱形成离子对并缓冲抑制弱酸离子。
在反相离子对色谱体系中影响流动相对溶质保留和分离作用的因素主要有三个方面，即流动相组成、对离子的浓度、有机改性剂。
反相离子对色谱常用的流动相是以水为主体的缓冲溶液，其pH值对分离的影响最大。
因为流动相的酸碱度决定了被分析物的解离状态。
从而影响其与对离子的结合程度。
因此，改变流动相的pH值是改善分离选择性的有效方法。
对离子的浓度是影响保留的主要因素，增加对离子的浓度可以增加保留作用。
以水为主体的流动相中通常添加极性有机溶剂，如甲醇、乙腈等作为改性剂。
其作用是改善缔合分子在两相中的分配，同时对某些化合物，如肽的离子化程度也有影响。
在流动相中添加无机盐，如硫酸钠，会改变其选择性和保留时间。
流动相中的盐及对离子的浓度对柱填料寿命有一定的影响，因此使用后应先用水冲洗较长时间。
离子交换色谱体系早先应用在离子样品的HPLC 分析中。
最近，使用离子对试剂的反相分离色谱得到了发展和应用。
离子样品在流动相中形成离子对，变成电中性。
离子对的疏水性越强，其在反相固定相上的保留越大，从而达到样品分离的目的。
酸性样品：
R-COO
_R'4N+R-COO _R'4N+
碱性样品： R-N +H 3+R '-SO 3R-+NH 3-O 3S-R '
紫外和荧光检测器被广泛应用于HPLC 。
因此离子对试剂本身必须有很低的紫外吸收和荧光发射，以获得对样品的高灵敏度检测。
烷基磺酸钠和季铵盐的紫外吸收最小，因此可以用于HPLC 分析。
反之，如果样品只有很低的紫外吸收或荧光发射，利用9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸钠作为荧光离子对试剂可以进行高灵敏度的检测。
最近，LC-MS 联用得到广泛应用，其中MS 用作HPLC 的检测器。
烷基磺酸钠，一种常见的离子对试剂，为非挥发性晶体，因此会产生界面污染的问题。
IPC-PFFA 系列由高挥发性离子对试剂组成，可以满足LS-MS 的连续分析而不污染界面。
注：IPC----Ion pair Chromatography(离子对色谱)
PFFA--
— pH 值调到7.5，流动相中加入季铵盐后进行分析。
— 酸性样品与季铵盐结合成电中性离子对，在反相体系中被保留。
— 用于LC-MS 分析酸性样品的离子对试剂为pH7.5的0.5M 水溶液。
该溶液用LC 溶剂（乙腈/水或甲醇/水）稀释到5mM 后可以被用作中性流动相。
酸性物质在中性条件下离子化，因此更容易形成离子对。
[样例]
1. 当使用0.5mol/L 四丁基磷酸铵
— 该试剂(10mL)用水溶液如甲醇-水稀释到1L 。
(因为该试剂是缓冲体系，所以无需调节pH 值。
2. 当使用四丁基氢氧化铵
— 该试剂12.5mL 用水溶液如甲醇-水稀释到1L 。
加入磷酸水溶液（10%）调节
HPLC 用离子对试剂。