不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研究

时间 ( h) T ime ( h)
1
0. 5
24
6
表 1 不同提取方法的比较结果 Compareofdifferentextractfonmethod
溶剂 Solven t
温度 (e) T emper atu re (e)
浸膏含量
同法纯化后
皂苷含量( % )
皂苷颜色
(%)
S apon inscon tent
称 取 人 参 须 根 粗 粉 5. 00g, 放 入 150mL 三 角 瓶 中, 分 别 用 50% 的 乙 醇 60mL 、50mL、40mL 于微波炉中低火提取 8 分( 中火, 中高火, 高火易沸腾溢出三角 瓶) , 用抽滤漏斗过滤, 合并滤液, 回收乙醇 蒸干, 用水溶 解, 将 水溶液分 成 3 份, 1/ 3 用正丁醇萃取法纯化后进行含量测定, 1/ 3 用大孔树脂纯化后进 行含量测定, 另 1/ 3 进行浸膏量测定。 1. 2. 5 超声波提取法
Ext ract ion
S ap oni ns
(%)
color
content 萃取法 大孔树脂法 (%)
水
20
淡黄色粉末
37
8. 68
8. 23
H2O
L ightyellow
pow d er
50% 乙醇
70
棕红色块状
25
7. 40
7. 30
50% Ethanol
Palm red
pi eces hap e
提取液纯 化后, 残渣用甲 醇定容, 用 722 分光光度计, 依照标准 曲线项下方法 测定, 测定吸光度, 并用回归方程计算得出 皂苷含量。 1. 4 各种提取方法中人参皂苷薄层比较
取各种方法提取的人参皂苷 5mg , 溶 于 1m L 甲醇中, 制成点样液, 进行薄层层 析。
展开剂: 正丁醇B乙醇B水= 4B1B5 显色剂: 10% H 2S04 水溶剂。 2 结果 2. 1 不同提取方法的比较结果见表 1。 2. 2 不同提取方法所得人参皂苷薄层层 析比较, 斑点基本一致, 煎煮法及微波法二 醇型皂苷斑点颜色较浅, 成分是否破坏, 有 待近一步研究。
人参研究 RENSHEN YAN JI U 2003 年第 4 期
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不同方法提取人参总皂苷 工艺的优化研究
张崇禧 郑友兰 张春红 罗维莹 鲍建材 刘 刚 ( 吉林农业大学中药材学院#长春#130118)
摘 要 比较人参皂苷多种提取方法, 如传统 水煎法、温浸法、乙醇 回流法、微波 提取法 和超 声波 法, 对其皂苷含量进行考察, 优选人参皂苷提取工艺。结果表明: 最佳提 取工艺为超声波 法, 快速、安全、简便、成本低, 得到的人参皂苷纯度高, 而成分又不被破坏。 关键词 人参 人参皂苷 提取工艺
人参研究 RENSHEN YAN JI U 2003 年第 4 期
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方法 M eth od
超声法 S up ers oni c
m et hod 微波法 M icrowave m et hod 回流法 Reflux ing m et hod 温浸法 Warm ly ex tractio n m et hod 煎煮法 T raditional decoct in g m et hod
70% 乙醇
90
棕红色块状
46
8. 57
8. 43
70% Ethanol
Palm red
pi eces hap e
水
60
淡黄色粉末
53
8. 45
8. 30
H2O
L ightyellow
pow d er
5
水
100 棕红色块状
50
4. 13
4. 20
H2O
Palm red
pi eces hap e
3 结果分析 3. 1 从时间上分析, 微波法和超声波法分 别为 8 分和 20 分, 快速节省时间。 3. 2 从溶剂选用上, 煎煮法、超声法、温浸 法溶 剂为水, 降 低了成本, 又提高了安 全 性。但煎煮法由于温度高, 时间长, 对成分 有破坏。 3. 3 从提取温度上看, 超声法和温浸法温
精密称取人参皂苷 Re 30mg , 用甲醇 定 容 于 100mL 容 量 瓶 中, 使 浓 度 为 0130mg/ mL , 精密吸取此液 0. . 5m L 分别置于 10mL 刻度试管中, 将试管置于冰水浴中, 分别加入 0. 4、0. 3、 0. 2、0. 1、0mL 甲醇后, 再加入 0. 5mL 香 草醛( 8% 乙醇液) 和 5mL 77% 硫酸, 摇匀, 混合物置 60 e 恒温 水浴中加热 10 分后, 立即在冰水浴中冷却 15 分, 并在另一试管 中加 甲醇 0. 5mL , 其他条件同上, 作为空 白对照, 在 544nm 波长处测量 吸光度值, 绘制标准曲线, 得人参皂 苷 Re 对照品浓 度( mg/ mL ) 与吸光度 Y 之间的回归直线 方程 Y= 2. 298X- 0. 0013 ( r= 0. 9994) 。 1. 3. 2 供试品含量测定
人参须 根 取 自抚 松 一 参 场, 粉 碎 成 01850mm( 40 目) 粗粉; 人参皂苷 Re 由吉 林省药品检验所提供; 试剂均为分析纯。
1. 2 人参皂苷的提取方法 1. 2. 1 水煎法
称取人参须 根粗粉 5. 00g, 8 倍量水 ( 通过正交试验而设定) 浸泡 12h, 100 e 煎 煮 3 次( 保持水量超过药材 1cm ~ 2cm ) , 3 次时间分别为 2h、2h、1h。合并提取液浓 缩至一定 体积。将 浓缩 液分成 3 份, 1/ 3 用正丁醇萃取法纯化后进行含量测定, 1/ 3 用大孔树脂纯化后进行含量 测定, 另 1/ 3 进行浸膏量测定。 1. 2. 2 温浸法
Abstract Several ex traction processes were used respectively , such as the tr aditional decocting method; w armly extr action method reflux ing method, microwave method supersonic method and so on, ginsenoside content determined by color imetric analysis method to optimize the extr action process of ginsenosides Results indicate: T he optimum ex traction processes is superso nic method. T his optimized process is simple, stable and efficient. Key words Panax ginseng ginsenoside ex tract ion process.
称取人参须根粗粉 5. 00g, 用 70% 的 乙醇 200mL 在索 氏 提 取器 上 回 流 提取 24h, 将提取液减压回收至干, 用水溶解。
作者简介: 张崇禧, 男, 副教授, 吉林农业大学中药材学院。
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张崇禧等: 不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研究
将水溶液分成 3 份, 1/ 3 用正 丁醇萃取法 纯化后进行含量测定, 1/ 3 用大孔树 脂纯 化后进行含量测定, 另 1/ 3 进行浸膏量测 定。 1. 2. 4 微波提取法
参考文献
1 陈英杰, 窦德强, 赵春杰, 等 1 人参的新成分、新活性和质量规范化研究 1 人参研究, 2002, 14( 1) : 3. 2 徐莲英, 陶建生, 冯怡, 等 1 中药制剂发展的回顾 1 中成药, 2000, 22( 1) : 6. 3 黄维安, 蒙毅, 黄品莲, 等 1 正交法试验比较甘草浸膏的提取工艺 1 中国中药杂志, 1994, 19( 5) : 28. 4 张建军, 曹广智, 董秀琴, 等 1 正交设计法对复方中钩藤碱水煮工艺的研究 1 中成药, 1999, 21( 9) : 443.
度较低 20 e 和 60 e , 避免了皂苷的破坏。 3. 4 从最终得到皂苷来看, 超声法和温浸 法均为淡黄色粉末, 说明这两种方法得到 的人参皂苷纯度高、杂质少。
3. 5 从浸膏量上分析, 温浸法和煎煮法对 各种成分溶出效果好。
3. 6 从皂苷含量上分析, 乙醇回流法、超 声波法、温浸法都 较好, 在 8% 以上, 而其
按正交试验所得的最佳提取条件进行 提取。称取人参须根粗粉 5. 00g, 8 倍量水 浸泡 12h, 60 e 水浴温浸 3 次, 3 次时间分 别为 2h、2h、1h。提取后, 减压抽滤。将滤 液分成 3 份, 1/ 3 用正丁醇萃取法纯化后 进行含量测定, 1/ 3 用大孔 树脂纯化后进 行含量测定, 另 1/ 3 进行浸膏量测定。 1. 2. 3 乙醇回流提取法
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人参研究 RENSHEN YAN JI U 2003 年第 4 期
中超声波法最佳达到了 8. 68% , 而用正丁 醇萃取法纯化和大孔树脂纯化皂苷含量相 似。大孔树脂法简便, 且适合工业化生产。 4 结论
超声波法一大孔树脂纯化法最佳, 快 速、安全、简便、成本低且又不破坏成分, 适 合于工业化生产。
人参为五加科人参属植物人参( Panax g inseng C. A. Mey. ) 的干燥根。具有主补 五脏, 安精神, 定魂魄、止惊悸、除邪气、安 神益智、益寿延年之功效。人参为百草之 王, 功效卓著。实验研究证明, 人参皂苷是 人参的标志成分。近年来, 人们围绕着人 参皂苷的提取、分离、结构鉴定、药理等方 面展开了深入细致的研究。而人参皂苷的 提取方法是首要问题, 一种快速、安全、简 便、成本低、纯度高, 而又不破坏成分的提 取纯化方法是我们一直探索和研究的。鉴 于此我们以人参皂苷为指标, 对不同提取 人参皂苷的方法( 水煎法、温浸法、乙醇回 流法、微波法、超声法) 进行了比较研究和 优选。旨在确定人参皂苷的最佳提取方法 和工艺, 为工业化生产人参皂苷提供科学 依据。 1 材料与方法 1. 1 材料