番茄往事——基因组传学
番茄bZIP基因家族的系统进化分析

番茄bZIP基因家族的系统进化分析张珍珠;陈秀玲;王沛文;戚飞;谢莹;王傲雪【期刊名称】《东北农业大学学报》【年(卷),期】2014(000)009【摘要】bZIP基因家族是一类广泛存在于真核生物中的转录因子家族,参与多个植物生长发育及生物和非生物胁迫的响应过程。
目前,已对多个物种的bZIP基因家族进行信息学分析,而未见番茄中bZIP基因家族的分析报道。
通过番茄基因组数据库,鉴定和分析番茄bZIP转录因子家族,获得76个bZIP基因家族成员;根据系统进化、基因结构和保守序列的分析将这些基因分成16个亚类;染色体分布和遗传分析揭示,番茄bZIP基因家族存在于12条染色体上并主要以片段复制的方式进行扩增。
研究结果为揭示番茄和其他物种的bZIP基因家族成员的功能奠定理论基础。
【总页数】9页(P47-55)【作者】张珍珠;陈秀玲;王沛文;戚飞;谢莹;王傲雪【作者单位】东北农业大学生命科学学院,哈尔滨 150030; 齐齐哈尔大学化学与化学工程学院,黑龙江齐齐哈尔 161006; 黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室,东北农业大学,哈尔滨 150030;东北农业大学园艺学院,哈尔滨 150030;东北农业大学园艺学院,哈尔滨 150030;东北农业大学园艺学院,哈尔滨 150030;东北农业大学园艺学院,哈尔滨 150030;东北农业大学生命科学学院,哈尔滨150030; 黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室,东北农业大学,哈尔滨150030; 东北农业大学园艺学院,哈尔滨 150030【正文语种】中文【中图分类】S641.2;Q78【相关文献】1.烟草bZIP基因家族的生物信息学分析 [J], 项孙寰2.西洋梨全基因组bZIP基因家族生物信息学分析 [J], 孙耀国;蔡天润;姬行舟;张军3.黄花蒿bZIP转录因子基因家族及光调控表达模式分析 [J], 王星文;吴端;师玉华;张栋;丁丹丹;马婷玉;向丽4.西洋梨全基因组bZIP基因家族生物信息学分析 [J], 孙耀国;蔡天润;姬行舟;张军5.烟草bZIP基因家族的鉴定及其在不同成熟度烟叶中的表达分析 [J], 杨佳翰;张炳辉;顾钢;杨玄松;秦明月;谢小芳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
基于转录组学和代谢组学解析番茄果实品质形成过程

㊀山东农业科学㊀2023ꎬ55(2):9~19ShandongAgriculturalSciences㊀DOI:10.14083/j.issn.1001-4942.2023.02.002收稿日期:2022-04-08基金项目:山东省农业良种工程项目(2020LZGC005)ꎻ青岛市科技惠民示范引导专项科技特派员行动计划项目(21-1-4-ny-25-nsh)ꎻ山东省现代农业产业技术体系项目(SDAIT-05)ꎻ山东省重点研发计划(农业良种工程)项目(2021LZGC018)作者简介:苏璐璐(1995 )ꎬ女ꎬ山东青岛人ꎬ硕士ꎬ研究方向为蔬菜遗传育种与分子生物学ꎮE-mail:1343149784@qq.com通信作者:王富(1966 )ꎬ男ꎬ博士ꎬ教授ꎬ主要研究方向为蔬菜遗传育种与分子生物学ꎮE-mail:wangfuabcd@163.com基于转录组学和代谢组学解析番茄果实品质形成过程苏璐璐ꎬ朱文莹ꎬ陈旭ꎬ王辉ꎬ曹依林ꎬ王富(青岛农业大学园艺学院ꎬ山东青岛㊀266109)㊀㊀摘要:本试验以 Micro-Tom 番茄为试材ꎬ对其绿熟期(GR)㊁转色期(BR)及红熟期(RR)果实进行转录组学及代谢组学分析ꎮ转录组学分析结果表明ꎬGR至RR过程中果实内与可溶性糖相关的磷酸葡萄糖变位酶基因(PGM)㊁糖原磷酸化酶基因(GPH)等下调ꎬ1ꎬ4-α-葡聚糖分支酶基因(SBE)㊁蔗糖合酶基因(SuSy1)等上调ꎻ参与抗坏血酸合成途径的GDP-L-半乳糖磷酸化酶基因(GGP)㊁单脱氢抗坏血酸还原酶基因(MDHAR)一直呈现上调趋势ꎻ而参与叶绿素降解㊁类胡萝卜素合成的多数基因以及与细胞壁代谢相关的众多基因则呈现先上调后下调的趋势ꎻ番茄碱生物合成途径GAME家族基因呈先下调后上调的表达模式ꎮ代谢组学数据表明ꎬ与品质形成有关的D-果糖㊁古洛糖酸㊁异柠檬酸㊁L-谷氨酸和L-天门冬氨酸等在番茄成熟过程中含量呈现持续增加的趋势ꎬL-苹果酸呈下降趋势ꎬL-精氨酸㊁L-色氨酸㊁L-蛋氨酸在BR至RR过程中增加明显ꎻ槲皮素-3-O-葡萄糖苷㊁柚皮素在转色期明显增加ꎮ综合可见ꎬ Micro-Tom 番茄果实成熟过程中ꎬ可溶性糖㊁有机酸㊁氨基酸㊁黄酮类化合物等代谢物积累及关键基因表达均发生了规律性变化ꎬ可初步解析番茄果实品质形成过程ꎮ关键词:番茄ꎻ转录组学ꎻ代谢组学ꎻ果实品质中图分类号:S641.201:Q78㊀㊀文献标识号:A㊀㊀文章编号:1001-4942(2023)02-0009-11AnalysisofTomatoFruitQualityFormingBasedonTranscriptomicsandMetabolomicsSuLuluꎬZhuWenyingꎬChenXuꎬWangHuiꎬCaoYilinꎬWangFu(CollegeofHorticultureꎬQingdaoAgriculturalUniversityꎬQingdao266109ꎬChina)Abstract㊀Transcriptomicandmetabolomicanalyseswereconductedonthe Micro ̄Tom fruitsatgreenripening(GR)ꎬbreakripening(BR)andredripening(RR)stages.ThetranscriptomicanalysisresultsshowedthatintheprocessfromGRtoRRꎬthephosphoglucomutase(PGM)andglycogenphosphorylase(GPH)genesweredown ̄regulatedꎬandthe1ꎬ4 ̄α ̄glucanbranchingenzyme(SBE)andsucrosesynthase(SuSy1)geneswereup ̄regulatedꎬwhichwereallrelatedtosolublesugarmetabolism.TheGDP ̄L ̄galactosephosphorylasegene(GGP)andmonodehydroascorbatereductasegene(MDHAR)involvedinascorbicacidsynthesispathwaywereup ̄regulated.Manygenesrelatedtochlorophylldegradationꎬcarotenoidsynthesisandcellwallmetabolismwereup ̄regulatedfirstandthendown ̄regulated.TheGAMEfamilygenesrelatedtotoma ̄toalkaloidbiosynthesispathwaywerefirstdown ̄regulatedandthenup ̄regulated.Themetabonomicanalysisre ̄sultsshowedthatthecontentsofD ̄fructoseꎬgulonicacidꎬisocitricacidꎬL ̄glutamateandL ̄asparticacidre ̄latedtoqualityformationincreasedcontinuouslyduringtomatoripeningꎬbutthecontentofL ̄malicacidde ̄creasedꎻtheL ̄arginineꎬL ̄tryptophanandL ̄methionineincreasedsignificantlyfromBRtoRRꎬandthecon ̄tentsofquercetin ̄3 ̄O ̄glucosideandnaringinincreasedsignificantlyfromGRtoBR.Ingeneralꎬduringthefruitripeningprocessof Micro ̄Tom ꎬthemetabolitessuchassolublesugarꎬorganicacidsꎬaminoacidsandflavonoidsandtheexpressionofkeygeneschangedregularlyꎬwhichcouldpreliminarilyparsetheformingprocessoftomatofruitquality.Keywords㊀TomatoꎻTranscriptomicsꎻMetabolomicsꎻFruitquality㊀㊀番茄是一种重要的蔬菜作物ꎬ2018年我国番茄栽培面积110.9万公顷ꎬ其中设施番茄面积64.2万公顷[1]ꎮ随着人们生活水平的提高ꎬ番茄果实品质尤其是口感和风味品质受到更多关注ꎬ关于果实成熟过程中的品质形成机理已有较多报道[2]ꎬ利用多组学手段分析番茄果实品质的相关研究成为近年来的研究热点ꎮLu等研究发现ꎬ番茄果实成熟受MADS-type转录反馈回路的调控[3]ꎮ大规模番茄果实ChIP-chip和转录组数据的分析证实ꎬRIN通过直接结合和激活与成熟相关的关键结构和调控基因ACS2/4㊁SGR1㊁PSY㊁Cel2㊁EXP1㊁PAL1㊁C4H㊁LoxC㊁AAT1㊁CNR㊁NOR㊁AP2a及其自身ꎬ在番茄果实成熟过程中发挥着重要作用[4-6]ꎮ黄丽华等检测了樱桃番茄以及5份野生番茄的代谢物ꎬ并对其叶片和果实中有机酸㊁氨基酸及糖类含量进行了分析ꎬ结果显示樱桃番茄中含有丰富的营养成分ꎬ且除水分以外ꎬ各种营养成分均比大宗番茄高[7]ꎮFraser等研究表明ꎬ番茄果实中番茄红素脱氢酶基因的表达与β-胡萝卜素㊁叶黄素等的含量密切相关[8]ꎮMoco等比较了番茄果肉和果皮间代谢物的差异ꎬ并建立了包含上百种代谢物的番茄代谢组数据库[9]ꎮTie ̄man等研究显示ꎬ番茄成熟果实中28种代谢物与其品质风味和口感显著相关ꎬ其中3-甲基丁醇可显著提高果实的甜感[10]ꎮ上述研究多以成熟番茄果实为主ꎬ但对番茄果实品质形成过程的研究目前鲜有报道ꎬ且番茄果实成熟过程中物质代谢及基因表达的变化是高度复杂的ꎬ要明确番茄果实品质形成的机理仍需要大量研究ꎮ本研究以 Micro-Tom 番茄为试材ꎬ对绿熟期㊁转色期及红熟期的果实进行转录组学和代谢组学分析ꎬ以明确番茄果实成熟过程中品质形成的代谢物基础和转录水平的变化ꎬ探索番茄果实品质形成过程ꎬ为番茄优质栽培和育种提供理论依据ꎮ1㊀材料与方法1.1㊀试验材料供试番茄品种为 Micro-Tom ꎬ由青岛农业大学番茄育种课题组提供ꎮ于2021年3 7月开展试验ꎮ将番茄种子洗净后播种于72孔穴盘中ꎬ置于青岛农业大学人工气候室ꎬ待幼苗长至三叶一心时移栽至直径12cm的花盆继续培养ꎬ培养条件为光周期12h光/12h暗ꎬ光照强度8000lxꎬ温度25ħ/18ħꎬ空气湿度75%ꎻ分别在果实绿熟期㊁转色期和红熟期取样ꎬ将果实切碎ꎬ液氮冷冻ꎬ放于-80ħ冰箱保存ꎬ待用ꎮ绿熟期㊁转色期和红熟期样品分别标记为GR㊁BR和RRꎮ1.2㊀试验方法1.2.1㊀番茄果实转录组学测定及分析㊀取绿熟期㊁转色期㊁红熟期番茄果实混样进行转录组测序ꎬ每组处理设置3次生物学重复ꎬ提取RNA后进行纯化㊁建库ꎬ然后使用第二代高通量测序技术(NGS)ꎬ基于Illumina测序平台进行文库的双末端(PE)测序ꎬ该部分工作由上海派森诺生物科技有限公司进行ꎮ将测序得到的数据进行基因的差异表达㊁GO富集及KEGG富集分析ꎮ1.2.2㊀转录组数据的qRT-PCR验证㊀采用So ̄01㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀larbio试剂盒ꎬ提取不同时期的番茄果肉总RNAꎬ使用反转录试剂盒TaKaRa(北京宝日医生物技术有限公司)将总RNA反转录合成cDNAꎬ以cDNA为模板㊁Actin为内参进行qRT-PCRꎮ利用在线引物设计软件(https://quantprime.mpimp ̄golm.mpg.de/)对所筛选的差异基因设计定量引物(表1)ꎬ通过溶解曲线分析确认其特异性ꎮqRT-PCR采用TaKaRa试剂盒(北京宝日医生物技术有限公司)ꎬ在罗氏定量PCR仪上完成ꎬ程序设置为:95ħ10minꎬ95ħ15sꎬ60ħ60sꎬ40个循环ꎮ所有试验均设置3个生物学重复ꎬ相对表达水平的计算方法为2-әәCt法ꎮ1.2.3㊀番茄果实代谢组学测定及分析㊀取绿熟期㊁转色期和红熟期果实各6次重复共18个样本进行代谢组分析ꎮ该部分工作由上海派森诺生物科技有限公司进行ꎬ实验方法参照DeVos和San ̄gster[11ꎬ12]等的方法ꎮ将得到的数据进行代谢产物的差异分析及KEGG富集分析ꎮ㊀㊀表1㊀qRT-PCR引物序列序号基因正向引物(5ᶄ-3ᶄ)反向引物(5ᶄ-3ᶄ)1Solyc06g035940.3AAATTCCATTGGGCAAGAGCCACGGATGCGACAGGTTCTC2Solyc10g085540.1CCACTATCTGGTCCTTTATTTCCTATTGTCGTTCCATTCGGGTTA3Solyc09g008560.4CCTTCCTCCAACATCCACCATCTCCTATGCCTGTGAAAACTAT4Solyc04g012140.1GCAAGGAAGTCAAGGCCACTGCCCTAGCCATTCCGAGTAT5Solyc12g055730.3TCACCAACCTTCCATGCAATATGGAATGGAGTGGCTACTTCCTAG6Solyc11g069700.2TGGAAGACGCAAGGGTTTGTCCCATTTGTGCCGATTTCTG7Solyc12g006790.3TGAACTCGATGCAATTCGTAATCCCACTCCTGTCAGTGTGATTT8Solyc02g080670.3AGTGCTAACCACTACTGCCGTTTCCACTTGCAGTGAGATTCCAAC9Solyc06g069110.4ACACTACTCTGGCTCTTCAAATTGATGGGCAATCAGAGACTTTA10Solyc06g073080.4GATTTGCAAGTGGCTGGCCTTCACTCAACGCCTCCAATTGATCAC11Solyc10g007690.3ACTCCACCAGTCAAGCAAGGAAAACCAAAGTCACCGGGAAGAC12Solyc07g042440.3GCCTGTGGTGGTTTATTTCTACCTGAAGGCACATGCCTGTTTGG13ActinCAAACGAGAATTGCCTTGGTCTTAACATCCGCACCAACCT2㊀结果与分析2.1㊀不同时期番茄果实转录组学分析2.1.1㊀差异表达基因分析㊀3个时期两两之间共检测出18601个差异表达基因(DEGs)ꎬ其中GR与BR间(GRvsBR)存在6537个DEGsꎬ其中2057个上调ꎬ4480个下调ꎻBR与RR间(BRvsRR)出现4587个DEGsꎬ其中2042个上调ꎬ2545个下调ꎻGR与RR间(GRvsRR)检测到7477个DEGsꎬ其中2247个上调ꎬ5230个下调ꎮ而且GRvsBR与BRvsRR之间有2269个相同的DEGsꎬGRvsBR与GRvsRR之间有4537个相同的DEGsꎬBRvsRR与GRvsRR之间有2870个相同的DEGsꎬ而GRvsBR㊁BRvsRR与GRvsRR三者之间共有1240个相同的DEGs(图1A)ꎮ2.1.2㊀差异表达基因的GO富集分析㊀GRvsBR的GO富集结果显示ꎬ在细胞组分方面ꎬDEGs主要富集在细胞周边㊁细胞膜等条目上ꎻ在分子功能方面ꎬ主要富集在催化活性㊁单加氧酶活性等条目上ꎻ在生物过程方面ꎬ主要富集在碳水化合物代谢过程㊁单羧酸代谢过程等条目上(图1B)ꎮBRvsRR的GO富集结果显示ꎬ在细胞组分方面ꎬDEGs主要富集在光合系统㊁光合膜等条目上ꎻ在分子功能方面ꎬ主要富集在色素结合㊁叶绿素结合等条目上ꎻ生物过程方面主要富集在光合作用㊁蛋白质-发色团连接等条目上(图1C)ꎮGRvsRR的GO富集结果显示ꎬ在细胞组分方面ꎬDEGs主要富集在细胞外围㊁膜的固有成分等条目上ꎻ在分子功能方面ꎬ主要富集在色素结合㊁单加氧酶活性等条目上ꎻ在生物过程方面ꎬ主要富集在光合作用光系统Ⅰ中的光收集㊁光合作用光收集㊁次生代谢过程等条目上(图1D)ꎮ11㊀第2期㊀㊀㊀㊀㊀苏璐璐ꎬ等:基于转录组学和代谢组学解析番茄果实品质形成过程A㊁B㊁C㊁D分别为韦恩图及GRvsBR㊁BRvsRR㊁GRvsRR间的GO富集结果ꎮ柱状图中ꎬ标记CC指细胞组分ꎬMF指分子功能ꎬBP指生物过程ꎮ图1㊀不同成熟时期番茄果实DEG的韦恩图及GO富集结果2.1.3㊀差异表达基因的KEGG富集分析㊀KEGG富集分析结果显示ꎬGRvsBR共有1247个差异基因注释在119个通路上ꎬ富集较为显著且与番茄果实品质形成相关的通路主要有植物激素信号转导㊁淀粉和蔗糖代谢㊁半乳糖代谢㊁类黄酮生物合成等通路(图2A)ꎻBRvsRR共有848个差异基因注释在109个通路上ꎬ富集较为显著的有植物激素信号转导㊁淀粉和蔗糖代谢㊁丙氨酸和天冬氨酸及谷氨酸的代谢㊁光合作用㊁类黄酮生物合成㊁果糖和甘露糖代谢等通路(图2B)ꎻGRvsRR共有1440个差异基因注释在117个通路上ꎬ其中1111个差异基因被富集在87条代谢通路上ꎬ富集较为显著的有植物激素信号转导㊁淀粉和蔗糖代谢㊁半乳糖代谢㊁糖酵解/糖异生㊁类黄酮生物合成等通路(图2C)ꎮ番茄果实由绿熟向红熟转变的过程中ꎬ蔗糖21㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀和淀粉代谢通路中的蔗糖磷酸合酶基因随着果实的成熟一直呈现上调趋势ꎻ参与抗坏血酸合成途径的GDP-L-半乳糖磷酸化酶基因(GGP)㊁单脱氢抗坏血酸还原酶基因(MDHAR)一直呈现上调趋势ꎻ苯丙烷生物合成途径中合成木质素和柚皮素的反式肉桂酸4-单加氧酶表达呈现先上调后下调的趋势ꎻ类黄酮生物合成中5-O-(4-香豆酰)-D-奎宁酸3ᶄ-单加氧酶基因㊁查尔酮合酶基因表达先上调后下调ꎻ另外在糖降解及其他代谢途径中的一些与果实品质形成相关的基因如糖原磷酸化酶基因(GPH)㊁磷酸葡萄糖变位酶基因(PGM)㊁异柠檬酸脱氢酶基因㊁谷胱甘肽生物合成酶基因也有不同程度的表达差异ꎮ在果实由绿熟到转色再到红熟的过程中ꎬ与叶绿素降解关键基因SGR1㊁PPH均呈先上调后下调的趋势ꎻ由绿熟期向转色期转变的过程中ꎬ与类胡萝卜素生物合成相关的基因PSY1㊁PSY2㊁CRTISO㊁ZDS㊁PDS㊁BCH2㊁ZEP㊁NSY以及与细胞壁代谢相关的基因Exp1㊁PG㊁PL㊁TBG4㊁Cel1㊁Cel2㊁Xyl1等均呈现上调的趋势ꎻ与次级代谢产物形成相关的基因PAL㊁TomLoxC㊁PPEAT㊁AAT1㊁FLORAL4㊁LIP8等均表现为先上调后下调的趋势ꎻ多个参与花青素合成的基因如CHS1㊁CHI㊁F3H㊁F3 5 H㊁UGTs㊁F3HL等均表现为下调ꎻ参与生物碱合成的GORKY㊁SAMT以及GAME家族基因GAME1㊁GAME4㊁GAME5㊁GAME6㊁GAME11㊁GAME12㊁GAME17㊁GAME18均呈现先下调后上调的趋势ꎻ另外参与调控果实成熟与果实品质形成的相关转录因子在果实成熟过程中表达量也发生了较大的变化ꎬ如RIN表现为持续上调ꎬNAC4㊁NAP2表现为先上调后下调的趋势ꎮ31㊀第2期㊀㊀㊀㊀㊀苏璐璐ꎬ等:基于转录组学和代谢组学解析番茄果实品质形成过程A㊁B㊁C分别为GRvsBR㊁BRvsRR㊁GRvsRRꎮ图2㊀不同时期番茄果实差异基因的KEGG富集分析41㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀2.1.4㊀qRT-PCR验证结果㊀为了验证转录组数据的准确性ꎬ我们筛选了12个差异表达基因ꎬ利用qRT-PCR对其进行表达分析ꎬ结果表明ꎬ尽管转录组数据与qRT-PCR数据之间存在倍数上的差异ꎬ但是各个基因表达模式基本一致(图3)ꎬ这表明获得的转录组数据是可信的ꎬ可以用于后续分析ꎮ图3㊀RNA-seq数据的qRT-PCR验证2.2㊀不同时期番茄果实代谢组分析2.2.1㊀差异代谢物分析㊀结果发现ꎬGRvsBR㊁BRvsRR㊁GRvsRR共鉴定出154种主要差异代谢物ꎮ其中GRvsBR㊁BRvsRR㊁GRvsRR分别存在138㊁103㊁144种差异代谢物ꎬ上调的分别有95㊁76㊁105种ꎬ下调的分别有43㊁27㊁39种ꎮ差异代谢物中与番茄果实品质形成相关的重要糖类㊁有机酸㊁氨基酸㊁类黄酮等物质在番茄果实发育过程中的含量变化如表2所示ꎮ有机酸中反式肉桂酸在番茄果实成熟过程中呈现持续下降的趋势ꎬ异柠檬酸在果实发育过程中持续增加ꎬL-苹果酸在果实由BR至RR发育过程中明显下降ꎮ氨基酸类化合物中的L-谷氨酸和L-天门冬氨酸在发育过程中逐渐增加ꎬL-精氨酸㊁L-色氨酸㊁L-蛋氨酸在BR至RR转变过程中明显增加ꎻ槲皮素-3-O-葡萄糖苷㊁柚皮素在转色期明显增加ꎻ糖类物质D-果糖㊁D-麦芽糖在番茄果实从GR到BR的过程中含量增加ꎮ2.2.2㊀差异代谢产物的KEGG富集分析㊀利用KEGG数据库和MetPA数据库对果实不同时期差异代谢物参与的代谢通路进行富集ꎮGRvsBR㊁BRvsRR㊁GRvsRR的差异代谢物均富集到50多条代谢通路ꎬ并且共同富集到的与品质形成相㊀㊀表2㊀番茄果实不同成熟时期部分与果实品质形成相关代谢物的变化化合物种类化合物中文名称log2(FC_GR/BR)log2(FC_BR/RR)log2(FC_GR/RR)有机酸trans-Cinnamate反式肉桂酸-2.738-1.0951-3.8331Succinicacid琥珀酸-2.3612 -2.0656Gluconicacid葡萄糖酸-0.636841.0217Gulonicacid古洛糖酸2.51320.87183.3850L-MalicacidL-苹果酸 -1.4354-1.3963Fumaricacid延胡索酸 -1.0497-1.1982Isocitricacid异柠檬酸1.21561.24872.4643Pyruvicacid丙酮酸1.4170 1.3966氨基酸L-Phenylalanine苯丙氨酸-2.3511 -2.5310L-SerineL-丝氨酸-2.3382 -2.0627L-ValineL-缬氨酸-2.2548 -2.2276L-ThreonineL-苏氨酸-0.9832 -0.6244L-GlutamicacidL-谷氨酸1.22811.50152.7297L-ArginineL-精氨酸 0.90890.7598L-TryptophanL-色氨酸 1.03450.9943L-MethionineL-蛋氨酸 0.74430.6344beta-Alanineβ-丙氨酸-1.06350.9773D-ProlineD-脯氨酸3.5721-1.07732.4949L-AsparticacidL-天门冬氨酸3.02751.22434.2518醇类Galactitol半乳糖醇-1.65431.4924D-XylitolD-木糖醇2.4487 3.00272-Phenylethanol2-苯乙醇0.36490.79841.1632Tyrosol酪醇0.4521 0.7782酮类Coumarin香豆素-1.5981 -1.4297Pulegone胡薄荷酮0.5965 1.6460Quercetin-3-O-glucoside槲皮素-3-O-葡萄糖苷0.8447 0.7805Naringenin柚皮素7.4007-1.48925.9115Hesperetin橙皮素9.9088-0.87759.0313糖类D-FructoseD-果糖1.0537 0.9107D-MaltoseD-麦芽糖2.3365 1.5019Manninotriose甘露三糖 1.02810.7320Glucosamine氨基葡萄糖1.39441.19652.590951㊀第2期㊀㊀㊀㊀㊀苏璐璐ꎬ等:基于转录组学和代谢组学解析番茄果实品质形成过程关的代谢通路主要有类黄酮生物合成和柠檬酸盐循环途径(图4)ꎮGRvsBR和GRvsRR所富集的与品质形成相关的代谢通路还包含有谷氨酸㊁甘氨酸㊁丝氨酸和苏氨酸的代谢ꎬ以及淀粉和蔗糖代谢等途径ꎮ另外ꎬBRvsRR还富集到磷酸戊糖途径等ꎮ61㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀A㊁B㊁C分别为GRvsBR㊁BRvsRR㊁GRvsRR的富集结果ꎮ图4㊀不同成熟时期果实差异代谢物KEGG富集通路分析3㊀讨论与结论如何提高番茄果实品质以及探究提高番茄果实品质的分子机理已成为热门研究课题ꎮ番茄果实中可溶性糖及有机酸的种类㊁含量㊁比例以及次生代谢物(多酚㊁挥发性有机化合物和生物碱)的种类和含量在果实成熟过程中均会发生较大的变化ꎬ这也对番茄果实口感及风味品质的形成起着决定性作用ꎮ本研究采用转录组学与代谢组学相结合的方法ꎬ通过研究不同时期番茄果实中糖类㊁有机酸㊁氨基酸㊁维生素㊁色素等物质及相关代谢通路的变化ꎬ初步探索番茄成熟后果实品质形成的原因ꎮ前人研究表明ꎬ番茄果实可溶性糖含量随果实发育和成熟会发生明显变化ꎬ且含糖量在一定程度上会影响果实的硬度和挥发性香气物质ꎬ是影响果实品质的重要因素ꎮ果糖和葡萄糖是成熟番茄果实中的主要可溶性糖[12]ꎬ蔗糖合成酶㊁酸性转化酶和蔗糖磷酸合成酶是参与蔗糖代谢的重要酶ꎬ在果实中糖的积累中起重要作用[13]ꎮ本研究中ꎬ番茄果实中的氨基葡萄糖含量从绿熟期到转色期再到红熟期呈现不断升高的趋势ꎬ在红熟期达到最高ꎻ影响糖降解的磷酸葡萄糖变位酶基因㊁糖原磷酸化酶基因下调ꎬ控制合成糖原和海藻糖的1ꎬ4-α-葡聚糖分支酶基因(SBE)㊁介导蔗糖从韧皮部向果实输送的SUT1基因(蔗糖转运蛋白基因)以及控制蔗糖卸载的基因SuSy1(蔗糖合酶基因)在果实成熟过程中也呈现上升的趋势ꎻAGPL1在果实由转色期向红熟期转变过程中也显著上调ꎬ该基因调控果实成熟过程中的淀粉含量ꎬ促进可溶性固形物含量的增加ꎮ说明番茄果实由绿熟向红熟转变的过程中ꎬ己糖的合成㊁积累以及输送和卸载相关通路的关键基因表达量的变化ꎬ最终导致果实内糖分含量的增加ꎬ为番茄果实口感品质的形成奠定了物质基础ꎮ果实内有机酸的种类和含量对番茄果实口感也非常重要ꎬ在果实发育过程中ꎬ有机酸的总含量呈现降低趋势ꎮ抗坏血酸是番茄果实品质中重要的指标ꎮ目前已报道的抗坏血酸生物合成途径有4种:L-半乳糖途径㊁古洛糖途径㊁D-半乳糖醛酸71㊀第2期㊀㊀㊀㊀㊀苏璐璐ꎬ等:基于转录组学和代谢组学解析番茄果实品质形成过程途径以及肌醇途径[14]ꎮ古洛糖途径是在酶的作用下ꎬ将GDP-D-甘露糖经一系列反应催化生成古洛糖酸ꎬ最后生成抗坏血酸ꎻ岳东的研究证明了这条途径的准确性[15]ꎮ本研究中ꎬ作为中间产物的古洛糖酸在整个发育时期含量持续增加ꎬ为番茄果实中抗坏血酸的合成提供了充足的底物ꎻ参与抗坏血酸合成途径的GDP-L-半乳糖磷酸化酶基因(GGP)㊁单脱氢抗坏血酸还原酶基因(MDHAR)也一直呈现上调趋势ꎮ前人研究显示ꎬ番茄果实中抗坏血酸含量在绿熟期至转色期显著增多ꎬ转色期后上升速度逐渐下降ꎻ苹果酸含量在番茄果实的整个发育阶段都呈现逐渐降低的趋势[16]ꎮ本试验结果显示 Micro-Tom 番茄果实成熟过程中苹果酸含量一直呈现下降趋势ꎬ与前人研究结果基本一致ꎮ由上述结果我们推测ꎬ Micro-Tom 番茄果实发育的整个过程中糖类物质含量上升ꎬ酸类物质总量下降ꎬ果实糖酸比值增加ꎬ番茄口感逐渐提升ꎬ是番茄果实品质形成的重要原因ꎮ挥发性芳香物质的组分及含量是番茄果实的重要特征品质指标ꎬ主要由萜烯㊁醛㊁醇㊁酯㊁酮等复杂混合物组成ꎮ根据不同的前体ꎬ挥发性有机物可以分为四大类:脂肪酸挥发物㊁氨基酸衍生的挥发物㊁萜类挥发物以及类胡萝卜素衍生的挥发物[17ꎬ18]ꎮ本试验代谢组学分析结果显示ꎬ番茄果实由转色期到红熟期转变的过程中ꎬ大部分氨基酸的含量呈现先下降后上升的趋势ꎬ氨基酸为芳香化合物合成的主要前体物质ꎬ果实绿熟期到转色期过程中多数氨基酸含量下降ꎬ可能是因为绿熟期积累的氨基酸到了转色期后主要进入下游途径合成芳香化合物ꎮRNA-seq数据显示ꎬ与脂肪酸挥发物生物合成相关的基因LIP8㊁TomLoxC㊁Lecithin:cholesterol在果实成熟过程中表达量呈现上调趋势ꎬ这些基因均与短链脂肪酸衍生物的合成密切相关ꎻ与氨基酸衍生的挥发物生物合成相关的基因FLORAL4㊁AADC1也呈现不同程度的上调ꎮ该结果也进一步证实了 Micro-Tom 番茄果实成熟过程中ꎬ氨基酸㊁脂肪酸的降解与代谢通路中关键基因表达水平的变化有关ꎬ促使果实中的挥发性芳香物质逐渐积累并散发ꎬ最终决定番茄果实成熟后香味品质的形成ꎮ颜色作为番茄果实外观品质的最重要性状之一ꎬ在果实成熟过程中发生着显著变化ꎬ随着叶绿素的降解和类胡萝卜素/类黄酮的生物合成ꎬ最终形成番茄果实独特的颜色[18]ꎮ本研究发现ꎬ Mi ̄cro-Tom 番茄果实成熟过程中胡薄荷酮㊁槲皮素-3-O-葡萄糖苷㊁柚皮素㊁橙皮素等与果实颜色形成相关的代谢产物呈现上调趋势ꎬ参与叶绿素降解的基因SGR1㊁PPH以及参与类胡萝卜素合成的基因PSY1㊁PSY2㊁CRTISO㊁ZDS㊁PDS㊁BCH2㊁ZEP㊁NSY在果实成熟过程中均呈现先上调后下调的趋势ꎬ由此推测 Micro-Tom 番茄果实成熟过程中果实叶绿素的降解和番茄红素的合成主要发生在绿熟期向转色期转变的过程中ꎬ且随着果实的成熟ꎬ叶绿素降解和番茄红素合成的速度逐渐减弱ꎮ综上所述ꎬ通过对不同成熟时期番茄果实的代谢组学及转录组学分析ꎬ发现番茄果实从绿熟期向红熟期转变过程中ꎬ果实内可溶性糖㊁有机酸㊁氨基酸㊁黄酮类化合物㊁醇类㊁酚类等多种化合物含量和种类以及相关通路中关键基因表达水平发生明显变化ꎬ多种因素相互作用ꎬ形成了 Micro-Tom 成熟番茄果实的品质ꎮ本研究为番茄品质调控和优质番茄生产提供了理论依据ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[1]㊀李君明ꎬ项朝阳ꎬ王孝宣ꎬ等. 十三五 我国番茄产业现状及展望[J].中国蔬菜ꎬ2021(2):13-20. 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[6]㊀IrfanMꎬGhoshSꎬMeliVSꎬetal.Fruitripeningregulationofalpha ̄mannosidaseexpressionbytheMADSboxtranscriptionfactorRIPENINGINHIBITORandethylene[J].Front.PlantSci.ꎬ2016ꎬ7(10):10.[7]㊀黄丽华ꎬ李芸瑛.樱桃番茄果实营养成分分析[J].中国农学通报ꎬ2005ꎬ21(10):91-92.[8]㊀FraserPDꎬPintoMESꎬHollowayDEꎬetal.Applicationofhigh ̄performanceliquidchromatographywithphotodiodearraydetectiontothemetabolicprofilingofplantisoprenaids[J].PlantJ.ꎬ2000ꎬ24(4):551-558.[9]㊀MocoSꎬForshedJꎬVosRꎬetal.Intra ̄andinter ̄metabolitecorrelationspectroscopyoftomatometabolomicsdataobtainedbyliquidchromatography ̄massspectrometryandnuclearmag ̄neticresonance[J].Metabolomicsꎬ2008ꎬ4(3):202-215. 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[18]KleeHJꎬGiovannoniJJ.Geneticsandcontroloftomatofruitripeningandqualityattributes[J].Annu.Rev.Genet.ꎬ2011ꎬ45:41-59.91㊀第2期㊀㊀㊀㊀㊀苏璐璐ꎬ等:基于转录组学和代谢组学解析番茄果实品质形成过程Copyright©博看网. All Rights Reserved.。
拟南芥和番茄基因组的比较进化研究

拟南芥和番茄基因组的比较进化研究拟南芥和番茄是非常重要的模式植物,在生物学和遗传学研究中都扮演了重要的角色。
这两种植物的完整基因组序列已被测定,为研究它们的基因组和生态学进化提供了广泛的可能性。
本文就是要介绍这两种植物基因组的比较和它们的演化历史。
拟南芥(Arabidopsis thaliana)是一种广泛分布的小型草本植物,在世界范围内都可以找到。
拟南芥的大小和矮生态使它成为理想的模式植物。
因为它的遗传特性已被广泛研究过,所以现在已经具有了完整的基因组序列。
这些研究揭示了拟南芥分子生物学和生态学的深层次知识。
在拟南芥之外,番茄(Solanum lycopersicum)也成为了重要的模式植物之一。
番茄是第二大的蔬菜作物,与其他作物相比,番茄具有良好的遗传多样性和可塑性,这使得它成为了分子生物学和生物技术领域的热点研究对象。
正是因为这样的优势,番茄的基因组被广泛地研究,它的完整基因组序列也在2001年被测定出来。
比较拟南芥和番茄的基因组时,发现它们在进化上有很大的不同。
从染色体数量和大小开始,拟南芥总共有5条染色体,而番茄则有12条染色体。
而且在染色体的结构和形态上,拟南芥的染色体相对较小,也比番茄更均匀。
深入挖掘它们的演化历史,发现它们的共同祖先应该生活在3亿年前。
到了2.88亿年前,这个祖先植物开始经历一次基因组重组,使之分化成分别属于不同门的拟南芥和番茄。
在拟南芥和番茄的基因组中,还可以寻找到一些区别。
拟南芥的基因组中含有非常丰富的基因家族,包括代表性元件、反转录转座子、线性DNA和DNA元件。
同时,也发现拟南芥基因组中有大量的非编码RNA(non-coding RNA)。
此外,拟南芥基因组还有很多复杂的基因互作网络,这些网络控制着植物的生长和发育。
番茄的基因组则相对较为简单,除了MADS-box转录因子家族外,其它的基因家族相对较少,并且也没有大量的非编码RNA。
这表明,虽然这两种植物具有相似的生态特点,但它们具有不同的基因组特征。
转基因番茄的研究进展

1、抗病转基因番茄
• 烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、苜蓿 花叶病毒(AMV)和番茄黄花卷叶病毒(TYLCV)等是引起 番茄病毒病的主要病原。在番茄转基因抗病毒育种中, 主要利用病毒的外壳蛋白(Coat protein,CP)基因、 复制相关蛋白(Replication-associated protein, REP)基因、卫星RNA基因和病毒片段的反义RNA基因等。 外壳蛋白(CP)在转基因植物中的积累可以干扰病毒脱 衣壳,抑制病毒在植物体中的复制、转运和积累从而 使转基因植株获得了病毒抗性。
•
2003年陈溪利用转基因番茄作为生物反应器生产人 胰岛素,通过以口服方式摄入胰岛素来研究在抑制自身免 疫攻击以及预防I型糖尿病中所起到的作用,己经取得了 很大的进展。
•
2006年, Chen等人将肠道病毒EV71的外壳蛋白VP1基
因导入番茄,外壳蛋白VP1在转基因番茄中获得了表达.用 转基因番茄喂食小白鼠,小白鼠可以抗肿瘤细胞的感染。
2003年王仁厚利用转基因番茄表达人酸性成纤维细胞生长 因子(aFGF),通过构建的双元表达载体带有一个经过改构的 人酸性成纤维细胞生长因子基因(afgf),载体上的选择标记基 因为manA,它使得转化过程中可以使用PMI这种不含抗生素及 除草剂的选择系统。利用农杆菌介导的转化方法获得了afgf 转基因番茄植物,并且通过PCR-Southern、RT-PCR证明了afgf 在宿主基因组中的整合及表达。
•
葡激酶( Staphylokinase,SAK) 是由金黄色葡萄球菌 分泌的一种纤溶酶原激活剂,首次发现于 1948 年,它可以 激活人体中的血纤维蛋白溶酶原形成血纤维蛋白溶酶,从而 溶解血栓。同其他溶栓药物相比,葡激酶具有溶栓效果好, 纤维蛋白选择性强,无显著促凝血作用等优点。 2011杜景川等人利用农杆菌介导的方法,将葡激酶( Staphylokinase,SAK) 基因导入番茄中。经 PCR、 Southern 杂交和 Northern 杂交检测,葡激酶基因已整合 到再生番茄植株基因组中,共获得 8 个转基因株系。经 ELISA 检测,转基因番茄的果实和叶片均能表达 SAK 蛋白, SAK 蛋白在果实和叶片可溶性蛋白中的比例最高分别为 3.42%和2.47%。转基因番茄中的 SAK 蛋白具有一定的溶栓 活性,溶栓比活力为 3 866 AU·mg-1。
科学家破译番茄基因密码

科学家破译番茄基因密码(转自环球科学)番茄,是世界上仅次于土豆的,最具价值的蔬菜作物,目前科学家们已完全破译了番茄的遗传密码。
番茄原产于南美洲,如今已在全世界范围内广泛种植。
从意大利面酱到咖喱饭,番茄已成为人们必不可少的蔬菜之一。
最近,科学家们破译了番茄的基因密码,并将这一研究刊登在《自然》杂志上,番茄由此成为了当前最引人注目的蔬菜作物。
这一突破性进展让我们认识到,基因技术是如何造福人类,使我们能够品尝到喜爱的食物。
全世界的共同努力来自14个国家、超过300位科学家耗费了八年时间,对番茄这个风靡全球的蔬菜进行了基因组测序研究。
拥有番茄的基因图谱,将有益于我们开展培育番茄的工作,以便产出更健壮、更有营养且简单味美的番茄品种。
乔瓦尼·朱利亚诺(Giovanni Giuliano)是意大利国家能源署的研究员,也是番茄基因组协会的成员之一,他还参与了番茄的培育工作。
他说:“我们不仅已经知道番茄有哪些基因,而且清楚了番茄的基因序列,这将有助于番茄的培育。
”朱利亚诺说,被测序的番茄品种名为海因茨1706(Heinz 1706),虽然这是第一个DNA 序列被破译的番茄品种,但当时科学家对于品种的选择并没有什么特别的考虑。
“只是在载入DNA信息库之初,工作人员手中恰好有海因茨1706(Heinz 1706)的种子。
所以,基因研究也就从这个品种开始了。
事情就是这么简单。
”但培育这个番茄品种可不是这么简单,当然,培育其他新品种也一样。
番茄酱的故事亨氏食品公司(Heinz)是一家知名的美国食品公司,以生产番茄酱而闻名。
在美国对于像热狗和汉堡这样的食品来说,亨氏番茄酱是必不可少的调味品。
但并不是所有的番茄都能做成亨氏番茄酱。
直到20世纪60年代末,亨氏食品公司使用的番茄品种都有一个严重的缺点——还未采摘的番茄在大雨之后极易开裂。
而番茄一旦裂开,就会变质。
因此,“亨氏食品公司就开始尝试培育一个新品种来克服这一缺点” ,里奇·奥兹科夫斯基(Rich Ozminkowski)说,他是亨氏食品公司的研发经理。
病毒诱导的基因沉默在番茄功能基因组学研究中的应用进展_杨同文

http: // www. ahs. ac. cn E-mail: yuanyixuebao@
病毒诱导的基因沉默在番茄功能基因组学研究 中的应用进展
杨同文,武安泉,盛东峰,李成伟*
(河南周口师范学院,植物遗传与分子育种重点实验室,河南周口 466001)
文章编号:0513-353X(2014)03-0564-13
Applications of Virus-induced Gene Silencing in Studies on Tomato Functional Genomics
YANG Tong-wen,WU An-quan,SHENG Dong-feng,and LI Cheng-wei*
2.1 VIGS 在番茄果实成熟调控研究中的应用
利用 VIGS 技术,人们已经系统研究了番茄果实成熟过程中乙烯合成途径中一些关键调控因子 的功能。例如在番茄中沉默 HD-Zip 同源异形盒基因 LeHB-1,显著降低了其下游调控基因 1–氨基 环丙烷–1–羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase gene,ACC)氧化酶基因的表达。番 茄 ACC 氧化酶(LeACO1)是乙烯合成途径中的重要成员,其表达下调阻止了番茄果实的成熟(Lin et al.,2008)。番茄 F-box 基因 SlEBF 是乙烯信号途径中的负调控子,利用 VIGS 在番茄中同时沉默 基因 SlEBF 和 SlEBF2,沉默植株出现败育、生长迟缓、加快衰老和果实早熟等一系列表型(Yang et al.,2010)。番茄 LeEIN2 基因产物控制着果实成熟的过程,因此推测它在乙烯信号途径中起着关键 的作用。Fu 等(2005)用 VIGS 技术证实了该假设,发现 LeEIN2 基因的沉默影响果实的成熟,导 致在沉默番茄中大部分果肉呈现绿色。与对照红色果肉相比,绿色果肉中 LeEIN2 基因转录子显著 降低(Fu et al.,2005)。此前发现乙烯合成关键酶 ACC 合成酶和 ACC 氧化酶基因的表达由一种 MADS-box 转录因子所调控,该转录因子被称作成熟抑制子(Ripening inhibitor,RIN)。最近,通 过 VIGS 技术揭示了番茄果实成熟过程中 LeRIN 的功能,LeRIN 基因的沉默抑制了其下游靶基因 LeACS2、LeACS4 和 LeACO1 的表达,进而阻止了果实的成熟(Li et al.,2011a,2011b)。
番茄属基因组DNA遗传多样性RAPD分析

第 3 1卷 第 2期 20 0 2年பைடு நூலகம்6月
番 茄属基 因组 D A遗传 多样 性 R P N A D分析
赵 凌 侠 “ ,李 景 富 。 唐 克 轩 许 向 阳 , 国银 。 , , 开
(. 1 复旦 太学生命 科 学学 院遗传 工程 国 家重点 实验 室 , 海 2 0 3 ;、 上 0 4 3 2 东北农 业 大 学 目艺学 院 , 龙 江 哈 黑 尔滨 1 0 3  ̄ . 建农 林 大学 生物技 术 中 , 建 福 州 3 0 0 ) 500 3福 福 5 0 2
摘 要 : 番 茄 属 9个 种 的 4 对 3份 材 料 进 行 了 R D 分 析 , 2 AP 用 6条 随 机 引物 ( 0 基 ) 检 测 到 1 9 位 点 , 中多 态 位 点 1碱 共 9个 其 16个 , 总 扩 增 位 点 的 7 6 t 此 进 行 聚 类分 析 将 番 茄 属 分 为 4个 类 群、 传 丰 度 、 4 占 33 依 遗 遗传 离 散 度 、 因杂 台 度 和 S a — 基 h h n n表 型多 样 性 指 数 分 析 结 果 显 示 , o 遗传 多 样性 均 有 野 生 类 群大 于 普 通 番 茄类 群 的 趋 势 , 明野 生 类 群 中 存 在 着 更 为 丰 富 说 的 可用 于番 茄 遗 传 改 良遗 传 变 异 类 型、 美 键 词 番 茄 属 ; RAP 遗 传 多 样 性 D; 中圈 分 类 号 ¥ 4 、 6 12 文 就标 识 码 A 文 章编 号 :0 67 1 (0 2 0 —2 80 1 0—8 7 Z 0 ) 20 2.6
番茄和烟草基因组的比较研究

番茄和烟草基因组的比较研究番茄和烟草是经济价值很高的两个重要植物。
它们分别属于茄科和茄属,被广泛栽培用于食品和药品等方面。
在遗传学研究中,番茄和烟草作为模式植物一直都有着很高的关注度。
随着基因组学技术的迅速发展,对番茄和烟草基因组的详细比较研究也越来越受到重视。
此篇文章旨在探究番茄和烟草基因组的异同点以及对于研究和改良其作物性状的意义。
一、基因组大小和构成从基因组大小上来看,番茄的基因组大小是9.8亿个碱基对,而烟草的基因组大小是4.5亿个碱基对。
这也就意味着,番茄的基因组比烟草大一倍以上。
虽然两者属于同一科和属,但这种大小差异是比较常见的,不同植物的基因组大小可以差异很大。
在基因组构成方面,番茄和烟草的染色体数目分别为12和24。
烟草比番茄多12条染色体。
不过,两者的染色体在组成上比较相似。
二、基因序列比较基因序列是研究基因功能和演化的一个重要指标。
通过比较不同物种间基因序列的异同,我们可以揭示它们之间的遗传相关性。
基因组比较研究发现,番茄和烟草有很多共同的基因家族。
其中,一些关键基因家族对植物的生物学过程影响很大。
例如,研究表明,番茄和烟草都有着相似的R-gene家族。
这个基因家族对于植物的抗病性至关重要。
另外,两者也都有着相似的MADS-box基因家族,这个家族对于植物的开花和生殖有重要的影响。
此外,番茄和烟草不同的基因也影响了它们的生物学特性。
例如,番茄有着很高的糖度和耐储运性,而烟草则是一种模式植物,用于生物学研究。
通过比较不同基因序列的异同,可以揭示这些特性背后的遗传基础。
三、基因表达比较除了基因序列的比较之外,基因表达也是比较基因功能的重要手段。
基因表达指的是基因在不同组织和环境下的表达差异,是揭示基因功能和调控机制的关键途径。
研究表明,番茄和烟草在基因表达方面也有着一定的差异。
例如,番茄中的特定基因在果实成熟时表达量非常高,而烟草则没有类似的表达差异。
这些表达差异背后的机制非常复杂,可能与基因调控网络的改变有关。
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——基因组学
番茄起源于南美安第斯山脉智利、厄瓜多尔和秘鲁一带
的一种红色果肉的醋栗番茄(Solanum pimpinellifolium), 经历了两次驯化才变成类似我们现在所熟知的样子。
驯化
第一次驯化
自交不亲和性
第一次驯化
意外的SI的丢失 自交与杂交达到同一水平线
第二次驯化
早期的QTL分析将其定位到番茄第二号染色体上的一个具有多效性的 区间,直到2007年在这个基因才被克隆,发表在了Science,命名为 style2.1。现代番茄柱头无法伸出是因为Style2.1 基因的启动子上游的 调控区域发生了450kb的序列的丢失,导致这个基因无法表达,使得 花柱细胞平均长度变短,表现为柱头变短。
从醋栗番茄到樱桃番茄再到现代栽培番茄的两次驯化过程,在此过程 中分别有5 个和13 个影响果实重量的基因受到了人类的定向选择。
LC——多心室 FAS——心室进一步增加,形状变扁平,大小 OVATE——圆形变椭圆形或倒卵形 SUN——果实伸长
展望
番茄基因组测序工作已经完成,以番茄基因组为基础,目前主要应用在 鉴定和筛选与果实发育及成熟过程相关的数据库、候选基因和生物信息学的 研究,并且作为一个参照基因组指导其他茄科植物的研究。 番茄基因组作为近缘茄科植物的一个参照基因组,在番茄和更多其他植 物中推动了基因家族和同源基因、基因组进化、基因图谱的研究。但也应该 看到国内外的差距。国内对番茄基因组的利用还不够充分,如研究方法不够 灵活、在育种中应用欠缺等,应该借鉴国外先进的研究思路与方法,开发更 多实用的功能基因分子标记;开发利用野生资源,建立番茄的野生资源渐渗 系,加强番茄基因组学在分子育种中的研究与应用,扩大基因组学在分子育 种中的应用规模,提升品种培育的技术与方法,培育具有优质、高产、抗逆 和抗病虫害的番茄新品种,从而推动番茄生产,并进一步推动包括马铃薯、 辣椒和茄子等在内的其它茄科植物的功能基因组研究。
谢谢大家
Figure 1 | Tomato genome topography and synteny.(A,B,C) A, Multi-dimensional topography of tomato chromosome 1.
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
B, Syntenic relationships in the Solanaceae.COSII-based comparative maps of potato, eggplant, pepper and Nicotiana with respect to the tomato genome. C, Tomato–potato syntenic relationships dot plot of tomato(T) and potato(P) genomic sequences based on collinear blocks.(Sequence alignment of 71 Mb of euchromatic (常染色体) tomato genomic DNA to their potato8 counterparts revealed 8.7% nucleotide divergence. )
中国农业科学院蔬菜 花卉所研究员黄三文 领导的国际番茄变异 组研究团队对世界各 地的 360 份番茄种质 进行了重测序分析, 构建了完整的番茄遗 传变异组图谱,为揭 示番茄的进化历史、 基因挖掘和分子育种 奠定了基础。最新研 究成果以长篇幅论文 在线发表于 2014 年 10 月 1 3 日 的 《Nature· Genetics (自 然· 遗传学)》杂志。
自交比率占上风
由中国、美国、荷兰、 以色列、日本等 14 个国 家的 300 多位科学家组成 的 “番 茄 基 因组 研 究国 际协作组”,历经 8 年多 的 艰苦 努 力 ,完 成 了对 栽 培番 茄 全 基因 组 的精
细 序列 分 析 ,该 成 果于
2012年5月31日在 《Nature》上以封面文章
的 形 式 发 表 ( To m a t o
Genome Consortium , 2012)。
此次测序的番茄品种为Solanum lycopersicum ‘Heinz 1706’,解码的番茄基因组中大约鉴定34727个基因,其中 97.4%(33840个)的基因已经精确定位到染色体上。协作 组同时绘制了栽培番茄祖先种野生醋栗番茄( Solanum pimpinellifolium )基因组的框架图,通过比较分析发现了 番茄果实进化的基因组基础。 高质量番茄S.lycopersicum‘Heinz 1706’基因组测序 的完成极大地推动了很多领域番茄研究的发展。
作物驯化和育种的历史被记录在基因组。虽然番茄 是模式种植物生物学和育种,自然人的选择,改变其 基因组仍是未知。我们在这里报告一个基于360份番茄 基因组序列的进化分析。我们提供的证据表明,在两 个独立的数量性状位点集驯化改良集中( QTL ),导 致现代番茄果实比其祖先大100倍。此外,我们发现现 代加工番茄的主要基因签名,确定致病变种赋予粉红 果色和精确的可视化与野生基因渗入相关连锁累赘。 本文概述了取得的成就以及历史选择的成本,提供了 分子的见解对进一步改进。揭秘了番茄由小到大的秘 密。
Figure 2 | The Solanum whole genome triplication. a, Speciation and polyploidization in eudicot lineages. b, On the basis of alignments of multiple tomato genome segments to single grape genome segments, the tomato genome is partitioned into three nonoverlapping‘subgenomes’(T1, T2, T3), each represented by one axis in the three-dimensional plot.